Научная статья на тему 'Влияние интравитреального введения хитозановой плёнки, насыщенной 5-фторурацилом, на активность ангиогенеза в условиях экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии'

Влияние интравитреального введения хитозановой плёнки, насыщенной 5-фторурацилом, на активность ангиогенеза в условиях экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
108
21
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
пролиферативная витреоретинопатия / ангиогенез / хитозан / 5-флуороурацил. / proliferative vitreoretinopathy / angiogenesis / chitosan / 5-fluorouracil / пролиферативті витреоретинопатия / ангиогенез / хитозан / 5-фторурацил

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Енин Е. А., Байырханова А. О., Адильгиреева Л. Х., Семенова Ю. М.

Цель. Оценить влияние хитозановой пленки, насыщенной 5-фторурацилом на активность ангиогенеза в условиях экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии. Материалы и методы: Исследование было проведено на десяти взрослых кроликах (20 глаз), породы «шиншилла» весом 2,5 4,0 кг. С целью формирования экспериментальной ПВР использовалась аутогема (0,4 мл). Глаза животных были разделены на 4 группы: I и II основные 10 правых глаз (5 глаз имплантация ХП насыщенной 5-фторурацилом (5-ФУ) и 5 глаз ХП без 5-ФУ), I и II контрольные -10 левых глаз (без имплантации пленки). На 31-е сутки после операции глазные яблоки кроликов энуклеировали и подвергали морфофункциональному анализу. Результаты: Методом микроскопии определено количество иммунопозитивных клеток на 100 исследуемых клеток: в 1 основной группе 24 активные клетки; во 2 основной 17; в 1 и 2 контрольных 5 и 4 соответственно. В полутонких препаратах 1 основной группы отмечаются участки сосудов, эндотелиальные клетки набухшие, ядра их гиперхромные, с большим коли¬чеством нежнодисперсного хроматина, расположенного циркулярно по внутренней оболочке ядра. В некоторых полях зрения видны спавшиеся сосуды, просветы с начальными явлениями облитерации. Во 2 основной группе количество сосудистого компонента по сравнению с 1 основной группой уменьшено примерно на 15-20%. В контрольных группах отмечается разрастание грубоволокнистой соединительной ткани. Эндотелиальные клетки сосудов уплощенные, ядра содержат небольшое количество мелкогранулярного хроматина, расположенного диффузно. Заключение. Таким образом, на основании данных морфофункционального исследования, а именно определения индекса пролиферативной активности эндотелиальных клеток в сочетании с анализом полутонких срезов, доказано, что эндотелиальная пролиферация выше в 1 основной группе, менее выражена во 2 основной группе и низкая в контрольных группах.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Енин Е. А., Байырханова А. О., Адильгиреева Л. Х., Семенова Ю. М.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Influence of intravitreal introduction of chitosan film, saturated with 5-fluorouracil, on activity of angiogenesis in the conditions of experimental proliferative vitreoretinopathy

Purpose. To estimate the influence of chitosan film saturated with 5-fluorouracil on activity of angiogenesis in conditions of an experimental proliferative vitreoretinopathy. Materials and methods. Research has been conducted on ten adult rabbits (20 eyes), breeds “chinchilla” weighing 2,5 4,0 kg. For the purpose of formation of experimental PVR has been used an autogema (0,4 ml). The eyes of an animals have been divided into 4 groups: I and II main 10 right eyes (5 eyes implantation of ChF saturated with 5-fluorouracil (5-FU) and 5 eyes ChF without 5-FU), I and II control 10 left eyes (without implantation of a film). At 31st day after operation the eyeballs of rabbits were enukliated and subjected to the morfofunktional analysis. Results: By the method of microscopy was determined the quantity of immunopositive cells on 100 studied cells: in 1 main group 24 active cells; in 2 main – 17; in 1 and 2 control – 5 and 4 respectively. In semi-thin preparations of the 1 main group there was noted a sites of vessels, endotelial cells was swollen, their nuclear was hyperchromic, with a large amount of gentlydipersed chromatin located circularly on internal cover of a nuclear. In some fields of vision the collapsed blood vessels, gleams with the initial phenomena of an obliteration are visible. In the 2nd main group the quantity of a vascular component in comparison with 1 main group is reduced approximately at 15-20%. In control groups growth of coarse-fibered connective tissue is noted. The endotelial cells of vessels are flattened, the nuclears contain a small amount of smallgranuler chromatin located diffuse. Conclusion. Thus, on the basis of data of morfofunktional research, it is proved that the endotelial proliferation is higher in 1 main group, is less expressed in the 2nd main group and low in control groups.

Текст научной работы на тему «Влияние интравитреального введения хитозановой плёнки, насыщенной 5-фторурацилом, на активность ангиогенеза в условиях экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии»

II. ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ

УДК 617.735 - 616 - 092.9

ВЛИЯНИЕ ИНТРАВИТРЕАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ХИТОЗАНОВОЙ ПЛЁНКИ, НАСЫЩЕННОЙ 5-ФТОРУРАЦИЛОМ, НА АКТИВНОСТЬ АНГИОГЕНЕЗА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ ВИТРЕОРЕТИНОПАТИИ

ОБ АВТОРАХ

Енин Е.А.' -зав. лабораторией патоморфологии с прозектурой, цитологией и группой электронной микроскопии e-mail:enin66@mail.ru Байырханова А.О.2 -докторант PhD Адильгиреева Л.Х.' -к.м.н., с.н.с., врач патологоанатом Семенова Ю.М.2 -к.м.н., завуч кафедры офтальмология, доцент кафедры Общая хирургия

Ключевые слова

пролиферативная витрео-ретинопатия, ангиогенез, хитозан, 5-флуороурацил.

Енин Е.А., Байырханова А.О., Адильгиреева Л.Х., Семенова Ю.М.

'Национальный научный центр хирургии им. А.Н. Сызганова, г. Алматы Тосударственный Медицинский Университет г. Семей

Аннотация

Цель. Оценить влияние хитозановой пленки, насыщенной 5-фторурацилом на активность ангиогенеза в условиях экспериментальной пролиферативной витреоретинопатии.

Материалы и методы: Исследование было проведено на десяти взрослых кроликах (20 глаз), породы «шиншилла» весом 2,5 - 4,0 кг. С целью формирования экспериментальной ПВР использовалась аутогема (0,4 мл). Глаза животных были разделены на 4 группы: I и II основные - 10 правых глаз (5 глаз - имплантация ХП насыщенной 5-фторурацилом (5-ФУ) и 5 глаз - ХП без 5-ФУ), I и II контрольные -10 левых глаз (без имплантации пленки). На 31-е сутки после операции глазные яблоки кроликов энуклеировали и подвергали морфофункциональному анализу.

Результаты: Методом микроскопии определено количество иммунопозитивных клеток на 100 исследуемых клеток: в 1 основной группе 24 активные клетки; во 2 основной - 17; в 1 и 2 контрольных - 5 и 4 соответственно. В полутонких препаратах 1 основной группы отмечаются участки сосудов, эндотелиальные клетки набухшие, ядра их гиперхромные, с большим количеством нежнодисперсного хроматина, расположенного циркулярно по внутренней оболочке ядра. В некоторых полях зрения видны спавшиеся сосуды, просветы с начальными явлениями облитерации. Во 2 основной группе количество сосудистого компонента по сравнению с 1 основной группой уменьшено примерно на 15-20%. В контрольных группах отмечается разрастание грубоволокнистой соединительной ткани. Эндотелиальные клетки сосудов уплощенные, ядра содержат небольшое количество мелкогранулярного хроматина, расположенного диффузно.

Заключение. Таким образом, на основании данных морфофункционального исследования, а именно определения индекса пролиферативной активности эндотелиальных клеток в сочетании с анализом полутонких срезов, доказано, что эндо-телиальная пролиферация выше в 1 основной группе, менее выражена во 2 основной группе и низкая в контрольных группах.

Тэж1рибелк пролиферативт витреоретинопатия жавдайында 5-фторурацилмен байы-тылган хитозан кабыкшасын интровитреальды енпзудщ ангиогенез белсендштне эсер1

АВТОРЛАР ТУРАЛЫ

Енин Е.А.' -Прозектура, цитология жене электронды микроскоп тобымен патоморфологиялык зертхана менгеруша e-mail:enin66@mail.ru Байырханова А.О.2 -докторант PhD Адильгиреева Л.Х.1 -Медицинагылымдарынын кандидаты, патологоанатом дерi^i Семёнова Ю.М.2 -Медицинагылымдарынын кандидаты, Офтальмология кафедрасы оку снщ менгерушю, Жалпы хирургия кафедрасынын доцент

Туйш сездер

пролиферативт витрео-ретинопатия, ангиогенез, хитозан, 5-фторурацил.

Енин Е.А., Байырханова А.О., Адильгиреева Л.Х., Семенова Ю.М.

1А.Н.Сызганов атындаш хирургия улттык, шлыми орталыш, Алматы к,. 2Мемлекеттк Медициналык, университет, Семей к.

Ацдатпа

Мацсаты. Тэж1рибел1к пролиферативт! витреоретинопатия жагдайында 5-фторурацилмен байытылган хитозан кабыкшасын интровитреальды енпзудщ ангиогенез белсендшпне эсерн багалау.

Материалдар мен эд!стер: Зерттеу он улкен, салмагы 2,5 - 4,0 кг к±райтын«шиншилла»тукышыныц кояндарына (20 кез) журпзшд!. Тэж!рибел!к ПВР алу уш!н аутогема (0,4 мл) колданылды. Жануарлардыц кездер! 4 топка бел'шдг. I жэне II непзп -

10 ощ кез (5 кез - 5-фторурацилмен(5-ФУ) байытылган ХК, имплантацияланган жэне 5-ФУ-аз ХК, имплантацияланган, I жэне

11 бакылау топтары - 10 сол кез (кдбыкша имплантациясынсыз). Операциядан кейшп 31-тэул!кте кояндардыщ кез алмаларын энуклеация жасап, морфофункционалдык талдау журпздк.

Нэтижелерй Микроскопия эдюмен 100 талдауга алынган жасушалар шнен иммунопозитивт! жасушалар аныкталды: 1-непзп топта 24 белсенд! жасуша; 2-непзп топта - 17; 1 жэне 2 бакылау топтарында - 5 жэне 4 сэйкестше. 1-непзп топтыщ жартылай жщшке препараттарында эндотелиальды жасушалар юнген, ядролары гиперхромды, ядроныщ шк! кабыщасы бой-ымен айнала орнаскан кеп мелшердег.!ж±мсакдисперстхроматин! бар тамырлы аймактар байкалады. Кейб!р керу аймагында сащылаулары бастапкы облитерация белплер 'мен бос кан тамырлар байкалады. 2-непзп топта 1-непзп топпен салыстырганда тамырлык компонент шамамен 15-20%-га азайган. Бакылау топтарында каткылталшыкты дэнекер тнщ есу! байкалады. Тамырлардыщ эндотелиальды жасушалары тыгыздалган, ядроларында диффузды орналаскдн аздаган майдагранулярлы хроматин! бар.

Цорыгты1нды1. Сонымен, морфофункциональдык зерттеулер нэтижесше карап, дэл!рек айтканда, эндотелиальды жасушалардыц пролиферативт! активтшк индекс! мен жартылай жщшке кесшдлердщ талдауын коса алганда эндотелиальды пролиферация 1-непзп топта жогары, ал 2-непзп топта аса жогары емес жэне бакылау топтарында темен екен! дэлелденд!.

Influence of intravitreal introduction of chitosan film, saturated with 5-fluorouracil, on activity of angiogenesis in the conditions of experimental proliferative vitreoretinopathy

Enin E.A., Baiyrkhanova A.O., Adilgireeva L.X., Semenova Y.M.

JSC National scientific center of surgery of A.N. Syzganov, Almaty 2Semey State Medical University, MHSD KR

Abstract

Purpose. To estimate the influence of chitosan film saturated with 5-fluorouracil on activity of angiogenesis in conditions of an experimental proliferative vitreoretinopathy.

Materials and methods. Research has been conducted on ten adult rabbits (20 eyes), breeds "chinchilla" weighing 2,5 - 4,0 kg. For the purpose of formation of experimental PVR has been used an autogema (0,4 ml). The eyes of an animals have been divided into 4 groups: I and II main -10 right eyes (5 eyes - implantation of ChF saturated with 5-fluorouracil (5-FU) and 5 eyes - ChF without 5-FU), I and II control -10 left eyes (without implantation of a film). At 31st day after operation the eyeballs of rabbits were enukliated and subjected to the morfofunktional analysis.

Results: By the method of microscopy was determined the quantity of immunopositive cells on 100 studied cells: in 1 main group 24 active cells; in 2 main - 17; in 1 and 2 control - 5 and 4 respectively. In semi-thin preparations of the 1 main group there was noted a sites of vessels, endotelial cells was swollen, their nuclear was hyperchromic, with a large amount of gentlydipersed chromatin located circularly on internal cover of a nuclear. In some fields of vision the collapsed blood vessels, gleams with the initial phenomena of an obliteration are visible. In the 2nd main group the quantity of a vascular component in comparison with 1 main group is reduced approximately at 15-20%. In control groups growth of coarse-fibered connective tissue is noted. The endotelial cells of vessels are flattened, the nuclears contain a small amount of smallgranuler chromatin located diffuse.

Conclusion. Thus, on the basis of data of morfofunktional research, it is proved that the endotelial proliferation is higher in 1 main group, is less expressed in the 2nd main group and low in control groups.

ABOUT THE AUTHORS

Enin E.A.1 -

Laboratory chef of a patomorfology

with prozekture, cytology

and group of electronic microscopy

e-mail:enin66@mail.ru

Baiyrkhanova A.O.2 -

PhD candidate

Adilgireeva L.X.1 -

candidate of medical science,

doctor pathologist

Semenova Y.M.2 -

candidate of medical science,

director of studies of department

ophthalmology, associate professor of

General surgery chair

Keywords

proliferative vitreoretinopathy, angiogenesis, chitosan, 5-fluorouracil.

Введение

ПВР рассматривают как типовой патологический процесс внутри глаза, характеризующийся местным рубцеванием, как средством ликвидации альтерации тканей, протекающий при таких заболеваниях, как отслойка сетчатки, гемоф-тальм, травма, диабет [1].

Среди инвалидности по зрению ПВР составляет 2-9%, причем 84-89% страдающих этим заболеванием - лица трудоспособного возраста, что обуславливает её социальную значимость [2].

Хирургическое вмешательство является единственным радикальным методом лечения ПВР, и осуществляется как правило в несколько этапов [3]. При отсутствие лечения слепота наступает в 100% случаев [4]. Одной из основных причин неудачного хирургического лечения отслоек сетчатки является прогрессирование ПВР в послеоперационном периоде и наблюдается в 2,2-29,4% случаев [5,6,7,8]. Рецидивы отслойки сетчатки по причине прогрессирования ПВР составляют от 2,2 до 20,0% [6,7,9,10,11].

На современном этапе лечения ПВР, наметились новые тенденции применения анти-пролиферативных агентов на различных но-сителях-имплантатах, используемых во время интравитреальных вмешательств. Широкое применение получили препараты, действие которых направлено на ингибицию формирования рубцовой ткани. В частности: цитостатики. Известным представителем данной группы препаратов является 5-фторурацил (5-ФУ) [12].

В последние годы возрастает интерес специалистов к препаратам на основе хитина и хитозана, который полностью разрушается и усваивается организмом, обладает противовоспалительным действием, улучшает процессы регенерации клеток и тканей [13-15].

Имплантаты на основе хитина и хитозана обладают биосовместимостью, гипоаллергенно-стью, являются нетоксичными и биодеградиру-емыми продуктами, существенно увеличивают восстанавливающие свойства раневого микроокружения, полностью восстанавливают микрососуды тканей в области дефекта, блокируют процессы дезорганизации и гиперпродукции коллагеновых волокон, способствуют формированию функциональной сосудистой системы [13, 14].

Неоваскуляризация является неотъемлемой частью процесса пролиферации и играет важную роль в механизмах заживления раны. Также важное значение имеет последующая редукция новообразованных сосудов. В нашем исследовании мы сравнивали выраженность ангиогенеза в предлежащих тканях после интравитреальной имплантации хитозановой плёнки с 5-фторура-цилом и без него.

Определение Ю-67 является высокоинформативным способом определения индекса пролиферативной активности вследствие экспрессии протеина Ю-67, так как последний выявляется только в пролиферативной фазе клеточного цикла (Э1).

Таблица 1.

Распределение глаз по группам

Цель

Сравнить в эксперименте наблюдаемые группы по индексу пролиферативной активности эндотелиальных клеток.

Материалы и методы

Исследование было проведено на десяти взрослых кроликах (20 глаз), породы «шиншилла» весом 2,5 - 4,0 кг. С целью формирования экспериментальной ПВР использовалась аутоге-ма (0,4 мл) [16]. Глаза животных были разделены на четыре группы (таблица1).

Операция «Частичная витрэктомия. Интрави-треальное введение аутогемы и ХП с 5-ФУ и без» производилась на базе отдела моделирования и экспериментальной терапии и вивария ЦНИЛ КазНМУ им. С.Д. Асфендиярова. Анальгетиче-ский и спазмолитический эффекты достигались путем внутримышечной инъекции 0,1-0,4 мл ветеринарного препарата Ксилавет, 3-хкратной инстилляции инокаина.

Методика интравитреального введения полимерного имплантата в эксперименте: после наложения векорасширителя производилась от-сепаровка конъюнктивы в 5 мм от лимба. Склеротомия длиной 1,0 мм в проекции плоской части цилиарного тела на 1 ч. копьем 19Э. После частичной передней витрэктомии выполнялась имплантация ХП, размером 1 х 8 мм, насыщенной 5-ФУ в заданной дозировке (0,1мл), в стекловидное тело при помощи пинцета. Из ушной вены животного при помощи инъекционной иглы и 2 мл шприца набиралась кровь в объёме 0,4 мл и вводилась интравитреально через склеротому. На склеру и конъюнктиву накладывался узловой шов (10,0). В конъюнктивальную полость инсталлировали антибиотик.

На 31 сутки после операции всем кроликами была проведена эвтаназия в соответствии с «Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей», принятой Советом Европы «Страсбург, Франция, 1986 г.) и Директивой Со-

вета 86/609 EEC от 24.11.1986 г. «По согласованию законов, правил и административных распоряжений стран-участниц в отношении защиты животных, используемых в экспериментальных и научных целях». Глазные яблоки всех кроликов были энуклеированы и подвергнуты морфофунк-циональному исследованию с изготовлением гистологических препаратов на базе АО национальный научный центр хирургии им. А.Н. Сыз-ганова, г. Алматы.

Энуклеированные глазные яблоки фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина, промывали проточной водой, вырезали, производя маркировку анатомических структур. Проводили в аппарате с закрытым контуром Excelsior ES Thermo Scientific, заливали парафин. Выполняли серии гистологических срезов 4 - 5 микрон на ротационном микротоме Sakura Accu-Cut SRM с последующей их окраской в аппарате Gemini AS Thermo Scientific гематоксилином и эозином. Параллельно брались кусочки для полутонких срезов с последующей фиксацией в 2,5% растворе глютаральдегида с постфиксацией в 1,0% растворе четырехокиси осмия, с заключением в эпоксидную смолу эпон. Окраска Азур II, основной фуксин, метиленовый синий. Иммуногисто-химическое исследование, определение индекса пролиферации Ki 67 производили на аппарате Bench Mark Ultra, Ventana. При выборе антигенов для иммуногистохимического исследования руководствовались тем, что пролиферативная активность является одним из ведущих факторов пролиферативно-регенераторного процесса. Использовали моноклональные антитела к протеину Ki-67 (Ventana). Система визуализации Ventana. Препараты изучали под микроскопом фирмы Leica DM4000, с последующим фотографированием камерой Leica DFC320. Определяли количество иммунопозитивных клеток в 10 РПЗх400.

Исследование было одобрено этическим комитетом Государственного Медицинского Университета г. Семей.

Вид операции Группа Количество глаз Сроки энуклеации

ОО - Частичная витрэктомия. Интравитреальное введение 0,4 мл аутогемы, ХП с 0,1 мл 5-ФУ. I Основная 5 глаз 31 сутки

OS - Частичная витрэктомия. Интравитреальное введение 0,4 мл аутогемы. I Контрольная 5 глаз 31 сутки

ОД - Частичная витрэктомия. Интравитреальное введение 0,4 мл аутогемы, ХП II Основная 5 глаз 31 сутки

ОS - Частичная витрэктомия. Интравитреальное введение 0,4 мл аутогемы. II Контрольная 5 глаз 31 сутки

Группа наблюдения Количество акт 10 РПЗ ивных клеток в X 400

N %

1 основная 24 24

1 контрольная 11 11

2 основная 22 22

2 контрольная 10 10

Примечание: *различия между группами были статистически значимы (р<0,05)

Таблица 2.

Сравнение групп по индексу пролифератив-ной активности эндоте-лиальных клеток (Ki 67)

Статистическая обработка результатов проводилась с помощью статистического пакета программы SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) версия 20.0 для Windows (лицензия ГМУ г. Семей). Для проверки гипотезы о связи двух количественных признаков использовался критерий Хи квадрат по Пирсону. Статистически высоко значимыми считали различия при р<0,01, значимыми при р<0,05. Результаты

Полуколичественный анализ по определению числа иммунопозитивных клеток на 10 РПЗх400 показал преобладание активных клеток в 1 основной группе, меньшее количество - во 2 основной группе, в 1 и 2 контрольных группах количество активных клеток составило 11 и 10 соответственно (таблица 2). При исследовании контрольных групп в некоторых полях зрения пролиферативная активность эндотелиальных клеток отсутствует.

Из таблицы видно, что разница между 1 и 2 основными группами по ко-личеству активных клеток статистически не значима, уровень значимости р>0.05. При сравнении основных и контрольных групп различия статистически значимы, р<0,05.

В исследуемых полутонких препаратах 1 основной группы в предлежащих к участку введения аутогемы и имплантата тканях отмечались участки сосудов капиллярного и синусоидного типа, расположенные компактно в соединительнотканной строме. Просветы большинства сосудов несколько расширены, эндотелиальные клетки набухшие, вдаются в просвет сосудов, ядра их гиперхромные, с большим количеством нежнодисперсного хроматина, расположенного циркулярно по внутренней оболочке ядра. При иммуногистохимической реакции к белку KI-67 отмечается выраженная ядерная экспрессия в части эндотелиальных клеток сосудов преимущественно капиллярного типа (Фото 1). В некоторых полях зрения видны спавшиеся сосуды, просветы с начальными явлениями облитерации, в которых определяются единичные, прерывисто расположенные местами пролиферирующие эндотелиальные клетки (фото 2).

Во 2 основной группе количество сосудистого компонента в области вве-дения аутогемы

и имплантата по сравнению с первой группой уменьшено примерно на 7-10%. Просветы отдельных сосудов расширены, эндотелиаль-ные клетки четко расположены на базальной мембране, умеренно вдаются в просвет, ядра ги-перхромные, хроматин мелкозернистый, расположен по внутренней поверхности ядерной оболочки (фото 3). В некоторых полях видны сосуды со спавшимися просветами, где отмеча-

Фото 1.

Ядерная экспрессия протеина К1-67 в эндотелии вновь образованных сосудов. ИГХ К1-67 УвХ400

Фото 2.

Полутонкий срез -пролиферациия эндотелиальных клеток в отдельных сосудах капиллярного типа, с фокусами начальной облитерации. Окраска Азур II, основной фуксин, метиленовый синий. Увх1000.

Фото 3.

Просвет капилляра выстлан эндотелиальными клетками с гиперхром-ными ядрами в которых виден нежно дисперсный хроматин. Полутонкий срез Окраска Азур II, основной фуксин, метиленовый синий. Увх1000.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Фото 4.

Ядерная экспрессия протеина К1-67 в эндотелии вновь образованных сосудах. ИГХ К1-67 УвХ400

Фото 5.

Между соединительнотканных волокон виден полнокровный сосуд с уплощенным эндотелием. Окраска Г и Э. Ув Х 200.

Фото 6.

Эндотелиальные клетки уплощены, ядра содержат не большое количество мелкогранулярного хроматина расположенного диффузно. Полутонкий срез Окраска Азур II, основной фуксин, метиленовый синий. Ув Х 1000.

ются единичные эндотелиальные клетки с признаками гиперхромии. При ИГХ реакции к белку К1-67 выявлеятся умеренная ядерная реакция в части эндотелиальных клеток вновь образованных сосудов (фото 4).

В контрольных группах отмечается разрастание грубоволокнистой соединительной ткани, между которой видны небольшие скопления сосудов преимущественно капиллярного типа, с расширенными просветами, полнокров-ные (фото 5). Эндотелиальные клетки уплощенные, ядра содержат небольшое количество мелкогранулярного хроматина, расположенного диффузно (фото 6). При ИГХ исследовании на К1-67 доля иммуноположительных клеток невелика, экс-прессируются отдельные эндотелиальные клетки и то не во всех полях зрения.

Выводы

Таким образом, на основании данных комплексного морфофункционального исследования, активность эндотелиальных клеток при ин-тровитреальном ведении хитозановой пленки, насыщенной 5-фторурацилом, в условиях экспериментальной витреоретинопатии на 31 сутки после операции в 1 основной группе расценивается как умеренная, с участками редукции сосудов и небольшим количеством волокон рыхлой соединительной ткани. Во 2 основной группе с применением только хитозановой пленки активность эндотелиальных клеток умеренной степени выраженности, количественное различие с 1 основной группой несущественное. В контрольных группах пролиферативная активность эндотелиальных клеток низкой степени выраженности, в некоторых РПЗ отсутствует.

Сопоставляя данные исследования следует отметить, что применение хитозановой пленки, насыщенной 5-фторурацилом повышает проли-феративную активность эндотелиальных клеток.

Литература

1. Сосновский С.В., Бойко Э.В., Харитонова H.H. Обоснование и разработка системы количественной оценки тяжести пролиферативной витреоретинопатии. Офтальмохирургия. 2009. -№4. - С. 25.

2. Кочмала О.Б., Запускалов И.В., Кривошеина О.И., Дашко И.А. Хирургия отслойки сетчатки: современное состояние проблемы. Вестн. офтальмол. 2010. - №6. - С. 46-49.

3. Захаров В.Д. Витреоретинальная хирургия. Москва : Медицина, 2003. - 180 с.

4. Захаров В.Д., Шарипова Д.Н., Шацких А.В. Возможности лечения пролиферативной витреоретинопатии в свете современных аспектов ее этиологии и патогенеза. Офтальмохирургия. 2006. - №2. - С. 59-65.

5. Afrashi F., Erakgun T., Akkin C. et al. Conventional buckling surgery or primary vitrectomy with silicone oil tamponade in rhegmatogenous retinal detachment with multiple breaks. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2004. - Vol. 242, №4. - P. 295-300.

6. Goezinne F., La Heij E.C., Berendschot T.T. et al. Incidence of redetachment 6 months after scleral buckling surgery. Acta Ophthalmol. 2010. - Vol. 88, №2. - P. 199-206.

7. Salicone A., Smiddy W.E., Venkatraman A., Feuer W. Management of retinal detachment when no break is found. Ophthalmology. 2006. - Vol. 113, №3. - P. 398-403.

8. Kon C.H., Asaria R.H., Occleston N.L. et al. Risk factors for proliferative vitreoretinopathy after primary

vitrectomy: a prospective study. Br. J. Ophthalmol. 2000. - Vol. 84, №5. - P. 506-11.

9. Foster R.E., Meyers S.M. Recurrent retinal detachment more than 1 year after reattachment. Ophthalmology. 2002. - Vol. 109, №10. - P. 1821-27.

10. Miki D., Hida T., Hotta K. et al. Comparison of scleral buckling and vitrectomy for retinal detachment resulting from flap tears in superior quadrants. Jpn. J. Ophthalmol. 2001. - Vol. 45, №2. - P. 187-191.

11. Sharma Y.R., Karunanithi S., Azad R.V. et al. Functional and anatomic outcome of scleral buckling versus primary vitrectomy in pseudophakic retinal detachment. Acta Ophthalmol. Scand. 2005. - Vol. 83, №3. - P. 293-97.

12. Asaria R.H.Y., Kon C.H., Bunce, C. et al. Adjuvant 5-fluorouracil and heparin prevents proliferative vit-reoretinopathy: Results from a randomized, doubleblind, controlled clinical trial. Ophthalmology. V. 108, Issue 7, 2001, P. 1179-1183.

References

1. Sosnovskii S.V., Boiko E.V., Kharitonova N.N. Obosnovanie i razrabotka sistemy kolichestvennoi otsenki tyazhesti proliferativnoi vitreoretinopatii. [Justification and development of quantitative assessment system of proliferative vitreoretinopathy severity]. Oftal'mokhirurgiya [Ophthalmosurgery]. 2009, 4, pp. 25.

2. Kochmala O.B., Zapuskalov I.V., Krivosheina O.I., Dashko I.A. Khirurgiya otsloiki setchatki: sovre-mennoe sostoyanie problemy. [Surgery of retinal detachment: current state of a problem] Vestn. oftal'mol. [Messenger of ophthalmology]. 2010, iss. 6, pp. 46-49.

3. Zakharov V.D. Vitreoretinal'naya khirurgiya. [Vit-reoretinal surgary]. Meditsina. [Medicin]. Moscow, 2003, 180 p.

4. Zakharov V.D., Sharipova D.N., Shatskikh A.V. Voz-mozhnosti lecheniya proliferativnoi vitreoretinopatii v svete sovremennykh aspektov ee etiologii i pato-geneza. [Possibilities of treatment of a proliferative vitreoretinopathy according to its modern aspects of etiology and pathogenesis]. Oftal'mokhirurgiya. [Ophthalmosurgery]. 2006. Iss. 2. pp. 59-65.

5. Afrashi F., Erakgun T., Akkin C. et al. Conventional buckling surgery or primary vitrectomy with silicone oil tamponade in rhegmatogenous retinal detachment with multiple breaks. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2004. - Vol. 242, №4. - P. 295-300.

6. Goezinne F., La Heij E.C., Berendschot T.T. et al. Incidence of redetachment 6 months after scleral buckling surgery. Acta Ophthalmol. 2010. - Vol. 88, №2. - P. 199-206.

7. Salicone A., Smiddy W.E., Venkatraman A., Feuer W. Management of retinal detachment when no break is found. Ophthalmology. 2006. - Vol. 113, №3. - P. 398-403.

8. Kon C.H., Asaria R.H., Occleston N.L. et al. Risk factors for proliferative vitreoretinopathy after primary vitrectomy: a prospective study. Br. J. Ophthalmol. 2000. - Vol. 84, №5. - P. 506-11.

13. Кузовников B.B., Гарькавенко B.B., Чанчиков Д.Г. и др. Использование изделий медицинского назначения на основе хитозана в офтальмологии. Материалы межд. конф. Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Ставрополь,

2008. С. 181-183.

14. Лазаренко В.И., Большаков И.Н., Ильенков С.С. и др. Опыт применения изделий медицинского назначения «Бол-хит» и «Коллахит-бол» в офтальмологии. Российский офтальмологический журнал.

2009. - №4. - С. 21-24.

15. Yang H. et al., Feasibility study of chitosan asintravit-reous tamponade material. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2008. - Vol. 246. Р. 1095-97.

16. Nassar K, Luke J, Luke M, Kamal M, Soliman MM, Grisanti S, Grisanti S. Effect of different fixative solutions on eyes with experimental proliferative vitreo-retinopathy. Int J Exp Pathol. 2015. - Vol. 96, №2. - Р. 103-10.

9. Foster R.E., Meyers S.M. Recurrent retinal detachment more than 1 year after reattachment. Ophthalmology. 2002. - Vol. 109, №10. - P. 1821-27.

10. Miki D., Hida T., Hotta K. et al. Comparison of scleral buckling and vitrectomy for retinal detachment resulting from flap tears in superior quadrants. Jpn. J. Ophthalmol. 2001. - Vol. 45, №2. - P. 187-191.

11. Sharma Y.R., Karunanithi S., Azad R.V. et al. Functional and anatomic outcome of scleral buckling versus primary vitrectomy in pseudophakic retinal detachment. Acta Ophthalmol. Scand. 2005. - Vol. 83, №3. - P. 293-97.

12. Asaria R.H.Y., Kon C.H., Bunce, C. et al. Adjuvant 5-fluorouracil and heparin prevents proliferative vit-reoretinopathy: Results from a randomized, doubleblind, controlled clinical trial. Ophthalmology. V. 108, Issue 7, 2001, P. 1179-1183.

13. Kuzovnikov V.V., Gar'kavenko V.V., Chanchikov D.G. i dr. Ispol'zovanie izdelii meditsinskogo naznacheniya na osnove khitozana v oftal'mologii. [Use of products of medical appointment on the basis of chitosan in ophthalmology] Materialy mezhd. konf. Sovremen-nye perspektivy v issledovanii khitina i khitozana. [Materials of international conference. Modern prospects in research of chitin and chitosan]. Stavropol', 2008, pp. 181-183.

14. Lazarenko V.I., Bol'shakov I.N., Il'enkov S.S. i dr. Opyt primeneniya izdelii meditsinskogo naznacheni-ya «Bol-khit» i «Kollakhit-bol» v oftal'mologii. [Experience of application of products of medical purpose "Bol hit" and "Kollakhit-bol" in ophthalmology] Ros-siiskii oftal'mologicheskii zhurnal. [Russian Ophthalmology Journal] 2009. T.2. iss. 4. pp.21-24.

15. Yang H. et al., Feasibility study of chitosan asintravit-reous tamponade material. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2008. - Vol. 246. P. 1095-97.

16. Nassar K, Luke J, Luke M, Kamal M, Soliman MM, Gri-santi S, Grisanti S. Effect of different fixative solutions on eyes with experimental proliferative vitreoretinopa-thy. Int J Exp Pathol. 2015. - Vol. 96, №2. - P. 103-10.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.