CC BY
43УДК 619:616.9-085:636.2.053
ВЛИЯНИЕ ИММУНОСТИМУЛЯТОРОВ НА НАКОПЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В КРОВИ ТЕЛЯТ
О.М.Алтынбеков - ассистент; А.В.Андреева - доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой.
ФГБОУ ВО«Башкирский государственный аграрный университет», г.Уфа (тел.: +7(347)-228-06-59, e-mail: [email protected]).
Ранний постнатальный период является наиболее критическим и характеризуется состоянием иммунодефицита, что обусловливает возникновение ассоциативных желудочно-кишечных инфекций у молодняка, при которых регистрируется высокая летальность. Для получения полноценного иммунитета и повышения эффективности вакцинации широко используют препараты, целенаправленно воздействующие на иммунитет- иммуностимуляторы. Исследования проведены на телятах черно-пестрой породы, полученных от коров-матерей, стимулированных препаратами «Интерферон бычий рекомбинантный» (ИБР) и «Иммунат». Перед вакцинацией новорожденным телятам опытных групп также вводили иммуностимулирующие препараты ИБР и Иммунат. До приема молозива антитела в крови телят к ротавирусу, коронавирусу и к вирусу диареи (болезни слизистых) отсутствовали. После приема молозива уровень антител возрос и достиг максимума на седьмой день жизни телят. Максимальные значения данного показателя регистрировали у телят опытных групп, которым вводили иммуностимулирующие препараты. У телят, полученных от иммуностимулированных коров, и, которым вводили иммуностимуляторы, в трех случаях было отмечено клиническое проявление диареи. Болезнь у таких телят протекала в лёгкой форме, длилась не более двух суток и заканчивалась полным выздоровлением, в отличие от телят контрольной группы. Телята, полученные от коров, которым вводили иммуностимулирующие препараты, а также сами новорожденные животные, иммуностимулированные теми же препаратами, имели существенные различия по основным показателям развития (абсолютный среднесуточный прирост живой массы) по сравнению с животными, не получавшими препараты.
КЛюЧЕВЫЕ СЛОВА: телята, интерферон бычий рекомбинантный, иммунат, вакцинация, титр антител.
DOI: 10.33632/1998-698X^019-2-3-8
В современном животноводстве важной проблемой для всех видов сельскохозяйственных животных является обеспечение высокой сохранности молодняка, особенно это касается телят в ранний постнатальный период. Так, у молодняка до 10-сут возраста 60-90% случаев падежа обусловлены желудочно-кишечными, а в более поздние сроки - респираторными болезнями. В зимний стойловый период заболевания органов пищеварения и дыхания наблюдаются у 60-70% телят [7].
Вирусные инфекции телят продолжают оставаться одной из наиболее актуальных проблем ветеринарной медицины. По распространению, смертности, вынужденному убою и снижению прироста массы тела они превалируют над другими инфекциями [5]. Многочисленными исследованиями, проведенными за последние годы, было доказано, что важную роль в возникновении желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота играют рота-, корона-, парво-и аденовирусы и др. [4].
В последнее время накапливается все больше сведений о снижении естественной резистентности и неспецифического иммунитета у молодняка сельскохозяйственных животных [3]. Основными профилактическими средствами против вирусных и бактериальных инфекций являются соответствующие вакцины. Однако, известно много случаев возникновения инфекционных заболеваний у вакцинирован-
ных животных, что указывает на малую эффективность проводимой вакцинации [2].
Для получения полноценного иммунитета и повышения эффективности вакцинации широко используют препараты, целенаправленно воздействующие на иммунитет - иммуностимуляторы. Иммуностимуляторы при вакцинации вызывают изменения в активности гуморальных и клеточных факторов иммунитета, что способствует усилению иммунного ответа организма и сопровождается увеличением титра специфических антител, Т- и В-лимфоцитов, количества общего белка, гамма-глобулинов, усилением лейкопоэза и биосинтеза иммуноглобулинов [3]. В этом плане перспективными считаются препараты на основе интерферонов.
Интерфероны - это белковые молекулы, которые синтезируются клетками всех видов животных - от рыб до человека. С точки зрения ветеринарии интерферо-ны интересны своими антивирусными и иммуномоду-лирующими свойствами. При этом стоит отметить, что интерфероны не относятся к чужеродным соединениям, а являются атрибутом самого организма с определенной долей видоспецифичности [1,6].
В связи с вышеизложенным, целью исследований явилось изучение влияния «Интерферон бычий рекомбинантный» и «Иммунат» на фоне иммунизации вакциной «Комбовак» коров-матерей на накопление специфических антител к возбудителям вирусных инфекций в крови телят.
Материалы и методы. Объектом исследований служили стельные коровы черно-пестрой породы, а также телята с рождения до 2-месячного возраста.
Животные для исследований были подобраны по принципу аналогов и находились в одинаковых условиях кормления и содержания.
В работе использованы:
1. Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рота-и коронавирусной болезней телят «Комбовак».
2. «Интерферон бычий рекомбинантный» (ИБР)— препарат белорусского производства. Интерферон бычий рекомбинантный является видоспецифическим препаратом, проявляет антивирусную и иммуностимулирующую активность у телят и взрослых особей крупного рогатого скота. Эффект препарата определяется суммарным действием интерферона непосредственно на пораженные вирусом клетки, быстрой индукцией системы эндогенного интерферона, клеточного и гуморального иммунитета. Повышает резистентность организма животных к воздействию ДНК- и РНК-со-держащих вирусов и патогенных микроорганизмов.
3. «Иммунат» - препарат белорусского производства. Иммунат является иммуномодулирующим средством для лечения и профилактики инфекционных заболеваний сельскохозяйственных и домашних животных.
Исследования проведены на 45 стельных коровах, разделенных на 3 группы по принципу аналогов. С этой целью животным второй (опытной) группы за 48 ч до вакцинации однократно в дозе 1 мл/кг массы тела вводили иммуностимулятор ИБР. Вакцинацию проводили двукратно согласно инструкции: вводили в область шеи подкожно в дозе 2 мл первый раз - за 40 сут до отела, второй раз - за 20 сут до отела.
Животным третьей (опытной) группы вакцину вводили по такой же схеме. За 48 ч до вакцинации вводили иммуностимулятор Иммунат в дозе 5 мл на животное.
Первая группа (стельные вакцинированные коровы, которым иммуностимуляторы не вводили) служила контрольной.
Определение накопления специфических антител к рота-, коронавирусам и вирусу диареи - болезни слизистых в крови новорожденных телят при применении иммуностимуляторов, а также выявление заболеваемости телят, полученных от стимулированных и не стимулированных коров изучали на 45 новорожденных телятах. Новорожденные телята были разделены на девять групп в соответствии с разделением коров-матерей в первом этапе научных опытов, по пять в каждой.
Телята от каждой группы коров были разделены на три группы. В первой группе телят, полученных от коров первой (контрольной) группы препараты не применяли, что являлось контролем. Также не применяли иммуностимулирующие препараты в четвертой и седьмой (опытных) группах телят, полученных от коров-матерей второй и третьей (опытных) групп.
Телятам второй, пятой и восьмой (опытных) групп применяли иммуностимулятор ИБР в дозе 1 мл на 10 кг массы тела с первого дня после рождения двукратно с интервалом в 48 часов.
Телятам третьей, шестой и девятой (опытных) групп вводили препарат Иммунат в дозе 2 мл на животное.
Для оценки колострального иммунитета у телят, полученных от вакцинированных коров, проводили серологические исследования проб сывороток крови, взятой от них до приёма молозива, через сутки после его первого приёма, а также на 7, 14, 21 дни жизни телёнка и в возрасте 30 и 60 дней.
Пробы сывороток крови от контрольной и опытных животных исследовали на наличие антител к ротавиру-су и ВД-БС - в реакции иммуноферментного анализа (ИФА), к коронавирусу - в реакции торможения гемаг-глютинации (РТГА).
Перед исследованием сыворотки крови для освобождения от термолабильных ингибиторов прогревали в водяной бане при температуре 560С в течение 30 минут.
Результаты исследований. У всех телят до приёма молозива антитела на ротавирус в сыворотке крови отсутствовали. Через сутки после первого приёма молозива уровень антител у телят находился в диапазоне от 4,3±0,25 до 8,1±0,33 1од2 (табл. 1). Максимальное отклонение от показателя к2онтрольной группы зарегистрировано у животных шестой и девятой групп. В девятой группе уровень антител к ротавирусу составил 7,2±0,22 1од2, что на 2,9 1од2 выше аналогичных показателей контрольной группы. В шестой группе данный показатель составил 8,1±0,33 1од2, что на 3,8 1од2 больше, по сравнению с контрольной группой.
На седьмой день титры антител у телят контрольной и опытных групп достигли максимальных отметок и были на уровне от 6,3±0,28 до 8,9±0,31 1од2. У животных девятой группы уровень антител был2 равен 8,6±0,31од2 , шестой - 8,9±0,31 1од2 , что на 2,3 1од2 и на 2,6 1од2, соответственно превышало показатели контрольной группы животных.
Начиная с 14-го дня, у телят всех опытных групп наблюдали постепенное снижение титров сывороточных антител, и в трёхнедельном возрасте этот показатель находился на уровне от 5,6±0,42 1од2 до 8,01±0,23 1од2, оставаясь приблизительно на том же уровне до конца срока наблюдения. Максимальная разница с показателем контрольной группы наблюдали, по-прежнему, у животных шестой и девятой групп и к 21-му дню жизни она составляла 3,4 и 3,7 1од2 , соответственно.
Установлено, что у всех телят опытных и контрольной групп до приёма молозива антитела к ротавирусам в крови отсутствовали. К концу первой недели жизни животных они достигли максимальных значений, а через месяц наблюдали незначительное снижение титров антител во всех группах телят. Затем, к двухмесячному возрасту титр гуморальных антител повысился в опытной и понизился в контрольной группе животных. Закономерным было и то, что во всех случаях показатели
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ
№ 2/2019
Таблица 1
Динамика содержания гуморальных антител у телят к ротавирусу
Группа животных Титры антител в сыворотке крови, tog2±m (сут)
До приема молозива 1 7 14 21 30 60
Первая (контрольная) - 4,3±0,25 6,3±0,28 4,8±0,17 4,2±0,33 4,13±0,19 3,9±0,22
Вторая(опытная) - 5,1±0,28 6,4±0,39 5,8±0,21 5,2±0,38 4,8±0,27 4,6±0,29
Третья(опытная) - 5,03+0,31 6,4±0,25 5,6±0,42 5,05±0,16 4,7±0,31 4,4±0,33
Четвертая(опытная) - 6,0±0,29* 7,1±0,22* 6,6±0,31* 5,7±0,29* 5,5±0,19* 5,1±0,18*
Пятая(опытная) - 6,7±0,21* 7,8±0,33* 7,5±0,36* 6,8±0,28* 6,4±0,21* 6,0±0,24*
Шестая (опытная) - 8,1±0,33** 8,9±0,31** 8,01±0,23** 7,9±0,21** 7,8±0,27** 7,6±0,3**
Седьмая (опытная) - 5,8±0,41* 6,83±0,39* 6,6±0,28* 5,3±0,28* 5,1±0,29* 4,9±0,24*
Восьмая(опытная) - 7,01±0,25** 8,2±0,27** 7,6±0,24** 7,45±0,26** 7,2±0,33** 7,1±0,35**
Девятая (опытная) - 7,2±0,22** 8,6±0,3** 7,83±0,29** 7,6±0,34** 7,54±0,41** 7,35±0,21**
Примечание: уровень достоверности * Р<0,05; ** Р<0,01. титров антител против ротавируса в опытных группах достоверно превышали контрольные. Максимальная разница по отношению к контрольной зарегистрирована у телят шестой и девятой опытных групп.
После выпойки молозива титр антител к ко-ронавирусу у телят контрольной группы составил 4,6±0,12 log2 (табл. 2).
Во второй и третьей группах после выпойки молозива от вакцинированных коров на первый день
жизни титры антител у телят к коронавирусу составили 5,1 ±0,33 log2 и 5,3±0,27 log2, что было выше аналогичных показателей контрольной группы на 0,5 и 0,7 log2, соответственно. Титры антител к коронавирусу в крови телят, полученных от коров, стимулированных ИБР, превышали контрольные значения в среднем на 1,5-1,8 log2, и составили в четвертой группе - 6,1±0,24 log2, в пятой - 6,3±0,18 log2, в шестой - 6,4±0,31 log2.
2 Таблица 2
Динамика содержания гуморальных антител у телят к коронавирусу
Группа животных Титры антител в сыворотке крови, tog^m (сут)
До приема молозива 1 7 14 21 30 60
Первая (контрольная) - 4,6±0,12 6,04±0,38 6,0±0,19 5,9±0,3 4,75±0,26 3,4±0,41
Вторая(опытная) - 5,1±0,33 8,0±0,19* 7,9±0,23 7,85±0,31 6,6±0,29 5,3±0,28
Третья(опытная) - 5,3±0,27 8,35±0,26* 8,2±0,39 8,1±0,19 7,5±0,35 5,4±0,31
Четвертая(опытная) 6,1±0,24 9,1±0,19* 9,0±0,26* 8,95±0,21* 7,7±0,23* 5,0±0,24*
Пятая(опытная) - 6,3±0,18 9,3±0,31* 9,2±0,29* 9,15±0,28* 7,9±0,13* 5,6±0,27*
Шестая (опытная) - 6,4±0,31 9,8±0,27** 9,7±0,21** 9,5±0,38** 8,1±0,32** 5,8±0,34**
Седьмая(опытная) - 6,2±0,28 9,1±0,27* 8,9±0,24* 8,9±0,33* 7,6±0,18* 5,1±0,23*
Восьмая(опытная) - 6,3±0,36 9,4±0,35** 9,3±0,24** 9,2±0,31** 7,8±0,39** 5,7±0,31**
Девятая (опытная) - 6,5±0,32 9,7±0,26** 9,7±0,3** 9,5±0,28** 8,1±0,32** 5,75±0,28**
Примечание: уровень достоверности * Р<0,05; ** Р<0,01.
Данный показатель у телят, полученных от третьей группы коров первой серии опытов, превышал контрольные значения в среднем на 1,6-1,9 1од2 и составил в седьмой группе 6,2±0,28 1од2, в восьмой -6,3±0,36 1од2, в девятой - 6,5±0,32 1од2.
На седьмой день титры гуморальных антител в контрольной и опытных группах телят имели тенденцию к
повышению. Так, у телят второй и третьей групп превысили фоновый уровень в среднем на 3 1од2,составив 8,0±0,19 1од2 и 8,35±0,26 1од2, что на 1 и 1,3 1од2 выше показателя контрольных животных. У телят, полученных от коров-матерей, стимулированных препаратами ИБР и «Иммунат», данный показатель был заметно выше контрольных значений и находился на уровне от
VETERINARY MICROBIOLOGY, VIROLOGY AND EPIZOOTOLOGY
9,1±0,19 до 9,8±0,27 1од2, достигнув максимума у телят шестой, восьмой и девятой групп (9,8±0,27, 9,4±0,35 и 9,7±0,26 1од2, соответственно).
На 14 и 21-й дни титры антител у телят контрольной и опытных групп находились на том же уровне, к 30-му дню в опытных группах составили 7,8±0,31 -8,6±0,29 1од2, превышая контрольные значения в среднем на 3,5 1од2.
Установлено, что у телят контрольной и опытных групп до приёма молозива антитела к ВД-БС отсутствовали. Через сутки после приёма молозива у опытных животных уровень антител несколько превысил показатели контроля и составил 4,2±0,19 1од2 -4,4±0,261од2 (табл. 3).
На седь2мой день исследований титр гуморальных антител в крови телят опытных групп достиг максимальных значений. Во второй и третьей группах составил 5,41±0,19 и 5,38±0,22 1од2, что на 1,36 и 1,33 ^превысил контрольные значения. Данный показатель у животных четвертой и седьмой групп находился примерно на одном уровне, составив 5,18±0,21 и 5,2±0,31 1од2, соответственно. Наивысшие отклонения от значени2й контрольной группы были зарегистрированы у телят, полученных от коров-матерей, иммуностимулирован-ных перед вакцинацией в период стельности, и которым также вводили иммуностимуляторы после рождения. Так, в пятой и шестой группах животных титр антител находился на уровне 6,1±0,32 1од2 - 6,2±0,28 1од2. В вось-
мой и девятой группах показатель имел максимальную отметку и составил 6,3±0,18 1од2 и 6,4±0,29 1од2, превышая контроль на 2,25 и 2,35 1од2, соответственно.
В последующем титры антител у животных всех групп постепенно понижались, но при этом показатели опытных групп стабильно превышали значения контроля на 1,4-2,6 1од2.
Наблюдением за состоянием животных установлено три случая (7,5%) клинического проявления диареи у телят опытных групп, которая протекала в лёгкой форме, длилась не более двух суток и заканчивалась полным выздоровлением. В контрольной группе животных у трех телят регистрировали общее угнетение, снижение аппетита, повышение температуры, понос с выделением зловонных фекалий с большим количеством слизи, иногда крови и фибрина. Из числа заболевших два теленка погибли, что составило 40%. В патматериале, взятом от трупов телят, лабораторными исследованиями (ИФА) были выявлены рота- и коронавирусные антигены, что подтверждает участие этих возбудителей в этиологии заболевания.
Установлено, что телята всех опытных групп в 30-дневном возрасте превосходили по живой массе своих сверстников из контрольной группы. Так, живая масса телят пятой, шестой, восьмой и девятой групп была больше массы телят контрольной группы на 4,3 кг (9,7%), на 5,6 кг (12,3%), на 4,2 кг (9,5%) и на 5,3 кг (11,7%), соответственно.
Таблица 3
Динамика содержания гуморальных антител у телят к ВД-БС
Группа животных Титры антител в сыворотке крови, 1од2±т (сут)
До приема молозива 1 7 14 21 30 60
Первая (контрольная) - 3,5±0,21 4,05±0,26 3,6±0,27 3,4±0,4 2,8±0,34 1,9±0,22
Вторая (опытная) - 4,2±0,26 5,41±0,19 5,3±0,38 4,9±0,29 4,6±0,35 3,6±0,29
Третья(опытная) - 4,3±0,38 5,38±0,22 5,2±0,39 5,1±0,26 4,5±0,41 3,7±0,38
Четвертая(опытная) - 4,2±0,19 5,18±0,21 5,0±0,33 4,8±0,18 4,4±0,21 3,5±0,27
Пятая(опытная) - 4,3±0,16 6,1±0,32* 5,5±0,4 5,2±0,36 4,7±0,31 3,8±0,26
Шестая (опытная) - 4,4±0,33 6,2±0,28* 6,1±0,29* 5,95±0,4* 5,4±0,33* 4,4±0,18*
Седьмая(опытная) - 4,2±0,27 5,2±0,31 5,1±0,24 4,8±0,32 4,3±0,16 3,6±0,21
Восьмая(опытная) - 4,3±0,31 6,3±0,18* 6,1±0,29* 5,9±0,17* 5,3±0,28* 4,2±0,34*
Девятая (опытная) - 4,4±0,26 6,4±0,29* 6,2±0,28** 5,9±0,39* 5,3±0,33* 4,3±0,27*
Примечание: уровень достоверности * Р<0,05; ** Р<0,01.
Различия между группами по показателю среднесуточного прироста составили: между первой (контрольной) и пятой, шестой, восьмой, девятой группами - 129,5 г, 175,0 г, 134,6 г, 163,4 г, соответственно; между второй и пятой, шестой, восьмой, девятой группами - 125,2 г, 170,7 г, 130,3 г, 159,1 г, соответственно; между третьей и пятой, шестой, восьмой, девятой группами - 57,5 г, 133 г, 95,6 г, 121,4 г, соответственно.
Следует отметить также, что к 30-дневному возрасту в пятой, шестой, восьмой и девятой группах абсолютный прирост массы телят превосходил показатели контроля в 1,28; 1,38; 1,29 и 1,34 раза, соответственно.
Заключение. Применение иммуностимуляторов «Интерферон бычий рекомбинантный» в дозе 1 мл на 10 кг массы тела с первого дня после рождения двукратно с интервалом в 48 ч и «Иммунат»
в дозе 2 мл на животное и выпаивание новорожденным телятам молозива коров-матерей, содержащего специфические антитела к рота-, коронавирусам и ВД-БС, способствует нарастанию титра антител
Литература
к ротавирусу, корона вирусу и вирусу диареи - болезни слизистых; профилактике заболеваемости, падежа и повышению основных показателей роста и развития телят.
1. Метод лечения острых желудочно-кишечных болезней телят [Текст] / С.Ш.Абдулмагомедов, Р.А.Нурати-нов, Р.М.Бакриева, А.Ю.Алиев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им.Н.Э.Баумана. - 2014. - Том 217. - С. 3-7.
2. Алтынбеков, О.М. Коррекция сывороточных иммуноглобулинов новорожденных телят [Текст] / О.М.Алтын-беков, А.В.Андреева // Приоритетные векторы развития промышленности и сельского хозяйства: материалы I Междунар. науч.-практ. конф. - Воронеж: Изд-во Воронежского государственного аграрного университета им. Императора Петра I, 2018. - С. 11-14.
3. Андреева, А.В.Динамика морфологических показателей крови при коррекции специфического иммунитета [Текст] / А.В.Андреева, О.Н.Николаева // Морфология. - 2018. - Том 153, № 3. - С. 20.
4. Профилактика рота- и коронавирусных энтеритов новорожденных телят [Текст] / А.Е.Зеленов [и др.] // Ветеринария. - 2004. - № 4. - С. 8-9.
5. Плешакова, В.И. Применение иммуномодуляторов Вестин и Провест для профилактики вирусных респираторных инфекций телят [Текст] / В.И.Плешакова, В.С.Власенко, И.А.Лукьянова // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 4. - С. 7-9.
6. Сидоров, М.А. Основы профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных животных [Текст] / М.А.Сидоров, В.В.Субботин // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 3. - С. 8-12.
7. Спиридонов, Г.Н. Желудочно-кишечные заболевания новорожденных телят в условиях промышленных комплексов и разработка лечебно-профилактических мероприятий (Смешанная инфекция) [Текст] / Г.Н.Спиридонов // Ветеринарный врач. - 2007. - Спецвыпуск. - С. 26-29.
THE EFFECT OF IMMUNOSTIMULANTS ON THE ACCUMULATION OF SPECIFIC ANTIBODIES TO VIRAL INFECTION AGENTS IN THE BLOOD OF CALVES
Altynbekov O.M. - assistant; Andreeva A.V. - Doctor of Biological Sciences, professor.
Bashkir State Agrarian University, Ufa (e-mail: [email protected]).
The early postnatal period is the most crucial and characterized by the state of immunodeficiency, which causes the occurrence of associative gastrointestinal infections in young cattle, in case of which high mortality is recorded. To achieve the immune health and increase the effectiveness of vaccination, the preparations that have a targeted effect on the immune system - immunostimulants, are widely used. The studies were conducted on calves of black-and-white breed from mother cows, which were stimulated with preparations "Recombinant Bovine Interferon" (RBI) and "Immunate." Before vaccination immunostimulating preparations RBI and "Immunate" were also administered to the newborn calves of the experimental groups. Before colostrum administration, antibodies in the blood of calves to rotavirus, coronavirus and diarrhea virus - mucosal diseases - had not been found. After colostrum administration, the level of antibodies increased and reached a maximum on the 7-th day of calves' life. The maximum values of this index were recorded in calves of the experimental groups, which were injected with immunostimulatory preparations. In calves obtained from immunostimulated cows, which were injected with immunostimulants, clinical manifestations of diarrhea were noted in three cases. The disease in such calves flowed in light form, lasted no more than 2 days and ended in complete recovery, unlike the calves of the control group. Calves born from cows injected with immunostimulatory preparations, as well as newborn animals immunostimulated with the same preparations, had significant differences in the main development indicators (absolute daily live weight gain) compared with animals that did not receive preparations.
KEY WORDS: calves, recombinant bovine interferon, immunat, vaccination, antibody titer.
References
1. Metod lecheniya ostrykh zheludochno-kishechnykh bolezney telyat [Method for the treatment of acute gastrointestinal diseases of calves] / S.Sh.Abdulmagomedov, R.A.Nuratinov, R.M.Bakrieva. A.Yu.Aliev // Uchenye zapiski Kazanskoy gosudarstvennoy akademii veterinarnoy mediciny im. N.E. Baumana [Scientific notes of Kazan State Academy of Veterinary Medicine]. - 2014. - Vol. 217. - P. 3-7.
VETERINARY MICROBIOLOGY, VIROLOGY AND EPIZOOTOLOGY
2. Altynbekov, O.M. Korrekciya syvorotochnykh immunoglobulinov novorozhdennykh telyat [Correction of serum immunoglobulins in newborn calves] / O.M.Altynbekov, A.V.Andreeva // Prioritetnye vektory razvitiya promyshlennosti I selskogo khozyaistva: materialy I Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. [Priority vectors of industrial and farm development: proceedings from the 1-st International scientific and practical conference]. - Voronezh: Izd-vo Voronezhskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta im. Imperatora Petra I, 2018. - P. 11-14.
3. Andreeva, A.V. Dinamika morfologicheskikh pokazateley krovi pri korrekcii specificheskogo immuniteta [Dynamics of morphological parameters of blood at correction of specific immunity] / A.V.Andreeva, O.N.Nikolaeva // Morfologiya. - 2018. - Vol. 153, № 3. - P. 20.
4. Profilaktika rota- I koronavirusnykh enteritov novorozhdennykh telyat [Prevention of rota-and coronavirus enteritis of newborn calves] / A.E.Zelenov [et al.] // Veterinariya. - 2004. - № 4. - P. 8-9.
5. Pleshakova, V.I. Primenenie immunomodulyatorov Vestin I Provest dlya profilaktiki virusnykh respiratornykh infekciy telyat [The use of immunomodulators Vestin and Provest for the prevention of viral respiratory infections of calves] / V.I.Pleshakova, V.S.Vlasenko, I.A.Lukyanova // Veterinariya Kubani. - 2012. - № 4. - P. 7-9.
6. Sidorov, M.A. Osnovy profilaktiki zheludochno-kishechnykh zabolevaniy novorozhdennykh zhivotnykh [Basics of prevention of gastrointestinal diseases in newborn animals] / M.A.Sidorov, V.V.Subbotin // Veterinariya selskokhozyaystvennykh zhivotnykh. - 2008. - №. 3. - P. 8-12.
7. Spiridonov, G.N. Zheludochno-kishechnye zabolevaniya novorozhdennykh telyat v usloviyakh promyshlennykh kompleksov I razrabotka lechebno-profilakticheskikh meropriyatiy (Smeshannaya infekciya) [Gastrointestinal diseases of newborn calves in industrial complexes and development of therapeutic and preventive measures (Mixed infection)] / G.N.Spiridonov // Veterinarny vrach. - 2007. - Spetsvypusk. - P. 26-29.
УДК: 577.2:619:616.98:578.828.11
ПОВЫШЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ И СПЕЦИФИЧНОСТИ ПЦР С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ, КОДИРУюЩИХ БЕЛКИ P24 И GP51, В ПЦР-РВ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ВЛКРС
Р.Ф.Сафина - аспирант; Г.Р.Лукманова - аспирант; К.В.Усольцев - кандидат ветеринарных наук, вед.н.с.; Н.И.Хаммадов - кандидат биологических наук, вед.н.с.;
Т.Х.Фаизов - доктор ветеринарных наук, профессор, зав. лабораторией.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»,
г. Казань (420075, Казань, Научный городок-2, e-mail: [email protected].
Лейкоз крупного рогатого скота - это хроническая инфекционная, медленно протекающая болезнь опухолевой природы. Установлено, что геном ВЛКРС (вирус лейкоза крупного рогатого скота) представлен 8,7 тыс. нуклеотидами. Вирусный геном состоит из двух идентичных одноцепочечных позитивных молекул РНК. Так же геном вируса может существовать в виде ДНК, которая синтезируется на вирусной РНК и затем интегрируется в хромосому клетки-хозяина в виде провируса. Цель работы - повышение чувствительности и специфичности метода ПЦР для диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота. Для осуществления вышеуказанной цели, был проведен анализ эффективности прохождения ПЦР при использовании различных групп комбинаций олигонуклеотидных затравок для ПЦР-РВ (полимеразная цепная реакция в реальном времени). Были разработаны комбинации праймеров и зондов, комплементарные генам ВЛКРС кодирующих капсидный белок p24 и гликопротеин gp51, по 3 комбинации на каждый ДНК-маркер. В результате исследования установлено, что все вышеперечисленные праймеры и зонды были работоспособны, а наиболее эффективными олигонуклеотидными затравками оказались праймеры и зонд «комбинация 2.2» к гену env. Олигонуклеотиды «комбинация 2.2» инициировали синтез ампликонов на более ранних циклах ПЦР, что позволяет выявить более низкие концентрации провирусной ДНК ВЛКРС. Этот факт говорит о том, что за счёт использования данной комбинации праймеров ПЦР имеет более высокую чувствительность при индикации провирусной ДНК ВЛКРС. Таким образом, повышена чувствительность и специфичность ПЦР с использованием ДНК-маркеров, кодирующих белки p24 и gp51, в ПЦР-РВ для индикации ВЛКРС.
КЛюЧЕВЫЕ СЛОВА: полимеразная цепная реакция (ПЦР), энзоотический лейкоз, p24 и gp51, вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).
DOI: 10.33632/1998-698X.2019-2-8-14
