CC BY
12УДК: 547.1:615.2 DOI: 10.37279/2224-6444-2021-11-3-12-17
ВЛИЯНИЕ ГИБРИДНЫХ ОЛОВООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ В МАКСИМАЛЬНО ЭФФЕКТИВНОЙ ДОЗЕ НА РОСТ И АКТИВНОСТЬ МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ МЕЛАНОМЫ В16 У МЫШЕЙ ЛИНИИ C57BL/6
Додохова М. А.1, Котиева И. М.2, Сафроненко А. В.3, Алхусейн-Кулягинова М. С.4, Милаева Е. Р.5, Шпаковский Д. Б.5, Терехов А. Ю.6, Сергеева Е. О.6
'Кафедра биомедицины и психофизиологии, 2кафедра патологической физиологии, 3кафедра фармакологии и клинической фармакологии, 4кафедра химии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России, 344022, Нахичеванский пер., 29, Ростов-на-Дону, Россия
5Кафедра медицинской химии и тонкого органического синтеза, ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова», Химический факультет, 119991, Ленинские горы, 1, стр. 3, г. Москва, Россия
6Кафедра патологии, Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, 357501, ул. Калинина, 11, Пятигорск, Россия
Для корреспонденции: Додохова Маргарита Авдеевна, кандидат медицинских наук, доцент, доцент кафедры биомедицины и психофизиологии, ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России, е-mail: dodohova@mail.ru.
For correspondence: Dodokhova Margarita Avdeevna, сandidate of Medical Sciences, Associate Professor of the Department of Biomedicine and Psychophysiology, Rostov State Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation, e-mail: dodohova@mail.ru.
Information about authors:
Dodokhova M. A., https://orcid.org/0000-0003-3104-827X Kotieva I. M., https://orcid.org/0000-0002-2796-9466 Safronenko A. V., https://orcid.org/0000-0003-4625-6186 Alkhuseyn-Kulyaginova M. S., https://orcid.org/0000-0001-5123-5289 Milaeva E. R., https://orcid.org/0000-0002-5489-3866 Shpakovsky D. B., https://orcid.org/0000-0002-7824-3382 Terekhov A. Yu., https://orcid.org/0000-0002-7781-362X Sergeeva E. O., https://orcid.org/0000-0001-7496-3967
РЕЗЮМЕ
Метастазирование - сложный многокомпонентный процесс, во многом определяющий влияние опухолевого процесса на организм. Изучение показателей изменения активности метастазирования под действием новых противоопухолевых агентов - одна из важнейших задач экспериментальной фармакологии и онкологии. Влияние оловоорганических соединений (ООС) бис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) диметилолова (Ме3) и (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) трифенилолова (Ме5) исследовано в максимально эффективных суммарных дозах 375 мг/кг и 250 мг/кг соответственно. Исследование проведено на модели спонтанно метастазирующей перевиваемой опухоли меланомы В16. Оба соединения проявили высокий антиметастатический эффект, более выраженный для диалкилорганического соединения.
Ключевые слова: оловоорганические соединения, метастазирование, противоопухолевые средства, меланома В16, исследования in vivo.
EFFECT OF HYBRID ORGANOTIN COMPOUNDS AT THE MAXIMUM EFFECTIVE DOSE ON THE GROWTH AND METASTASIS ACTIVITY OF B16 MELANOMA IN C57BL/6 MICE
Dodokhova M. A.1, Kotieva I. M.1, Safronenko A. V.1, Alkhuseyn-Kulyaginova M. S.1, Milaeva E. R.2, Shpakovsky D. B.2, Terekhov A. Yu.3, Sergeeva E. O.3
•Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russia
2Lomonosov Moscow State University, Faculty of Chemistry, Moscow, Russia
3Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute-branch of Volgograd State Medical University, Рyatigorsk, Russia
SUMMARY
Metastasis is a complex multicomponent process that largely determines the effect of the tumor process on the body. The study of indicators of changes in the activity of metastasis under the influence of new antitumor agents is one of the most important tasks of experimental pharmacology and oncology. The effect of the organotin compounds (OOS) bis (3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthiolate) dimethylolol (Me3) and (3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthiolate) triphenylolol (Me5) was studied at the maximum effective total doses of 375 mg/kg and 250 mg/kg, respectively, on a
model of a spontaneously metastasizing transferable tumor melanoma B16. Both compounds showed a high antimeta-static effect, more pronounced for the dialkyl organic compound.
Key words: organotin compounds, metastasis, antitumor agents, B16 melanoma, in vivo studies.
Большие успехи в диагностике и лечения злокачественных новообразований в России приводят к увеличению продолжительности жизни пациентов, а также росту индексов накопления контингента больных со злокачественными новообразованиями различной локализации. Ме-ланома является очень агрессивным видом опухолей [1; 2]. Метастазы, очаги малигнизации, развивающиеся на расстоянии от первичной опухоли, являются причиной смерти 90% пациентов, умерших от меланомы кожи [3]. В связи с этим активность процесса метастазирования является одним из основных критериев выживаемости пациентов всех групп диспансерного наблюдения.
Метастазирование - это сложный многостадийный процесс, который характеризуется миграцией злокачественных клеток из области первичного очага в отдаленные органы и ткани. На каждом этапе метастазирования происходит трансформация злокачественных клеток и их адаптация к новой среде. Межклеточное пространство и его морфофункциональное состояние играет в этой связи немаловажную роль.
В качестве противоопухолевых и антиметастатических агентов нами предложены гибридные оловоорганические соединения (ООС), которые имеют два компонента в составе молекулы: цитотоксический, содержащий олово ^п IV) и протекторный, сложный радикал 2,6-ди-третбутилфенил. Уникальность этой структуры заключается в сочетании двойственных свойств в пределах одной молекулы. Протекторный эффект доказан нами в предыдущих исследованиях и заключается в снижении показателей общей токсичности по сравнению с соединениями-аналогами более простой структуры, достаточно низкой кардио- и гепатотоксичности [4; 5].
Фрагмент 2,6-дитретбутилфенола, безусловно, обладает антиоксидантными свойствами [6; 7], что может внести дополнительный механизм реализации цитотоксического эффекта на уровне как первичного очага, так и процесса мета-стазирования. Данные литературы о влиянии антиоксидантов различной химической структуры на процесс роста злокачественных новообразований и активность метастатического поражения очень противоречивы: от полного или частичного ингибирования до активации роста и развития опухолей на всех стадиях, включая и процесс диссеминации злокачественных клеток [8, 9].
На модели перевиваемой опухоли со спонтанным метастазированием меланоме В16 был произведено скрининговое исследование, когда гибридные ООС были введены животным в широком диапазоне доз. Результатом проведенной работы стало нахождение максимально эффективных доз гибридных ООС для подавления опухолевого процесса. Углубленное изучение показателей роста меланомы В16 и активности метастазирования при введении данных доз ООС представлено в данной статье.
Целью нашего исследования явилось изучение влияния максимально эффективных суммарных доз гибридных ООС: бис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) диметилолова (Ме3) в дозе 375 мг/кг и 3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) трифенилолова (Ме5) в дозе 250 мг/кг на рост первичного очага и активность процесса метастазирования меланомы В16 у мышей линии С57В1/6.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование было выполнено на 36 мышах - самках линии С57В1/6 8 недельного возраста массой 21-22 гр. Животные получены из питомника НИЦ «Курчатовский институт» -«ПЛЖ «Рапполово», после истечения карантинного наблюдения (14 суток), животные были стандартизированы по возрасту, полу и весу. Поддержание штамма и перевивка меланомы В16 подкожно в правую подмышечную область были выполнены по общепринятыми методикам [10, 11]. Штамм получен из банка опухолевых материалов Научно-исследовательского института экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Через 48 часов после перевивки меланомы В16 мышам-самкам линии С57В1/6 животные были рандомизированы с помощью таблицы случайных чисел. Соединения Ме3 и Ме5 вводили 1 раз в сутки в течение 5 дней, внутрибрюшинно [12].
Животные были разделены на 3 группы: I -пятикратное внутрибрюшинное введение Ме3 в разовой дозе (РД) 75 мг/кг (п=12); II - пятикратное внутрибрюшинное введение Ме5 в РД 50 мг/ кг (п=12); III - контрольная группа - 1% раствор желатина вводился в эквивалентных режимах и объемах (п=12). Все исследования выполнялись в соответствии с Международными и Российскими требованиями проведения научных исследований на лабораторных животных.
Через 18 суток после введения субстанций была произведена эвтаназия путем декапитации на гильотине, патологоанатомическое вскрытие производилось по известной методике [13].
В качестве критериев оценки эффективности противоопухолевой и антиметастатической терапии использовали следующие показатели:
1. среднее время выхода первых опухолевых узелков, СВ, дни;
2. процент торможения роста опухоли по массе
ТРО, % = (Мк - Мо) х100%/Мк, где Мк и Мо - средняя масса опухоли в контрольной и опытной группе;
3. частота метастазирования опухоли
ЧМ, % = КЖметастх100%/КЖобщ, где КЖ
метаст - количество животных в группе с выявленным метастазированием в легкие, КЖ всего - количество животных в группе;
4. индекс ингибирования метастазирования
ИИМ, % = ((ЧМкхКМк) - (ЧМохКМо)) х
100%/(ЧМкхКМк), где ЧМк и ЧМо - частота метастазирования в легкие у животных контрольной и опытных групп, КМк и КМо среднее число метастазов в легких у животных контрольной и опытной групп;
5. степень поражения легких по методике D. Tarin и J.E. Price. Критериями активности метастатического поражения являются количество метастазов и их диаметр: 0 степень - отсутствие метастазов, 1 степень - меньше 10 шт, диаметр
не превышает 1 мм, 2 степень - от 10 до 30 шт, диаметр больше 1 мм, 3 степень - больше 30 шт, без слияния, 4 степень - до 100шт.
Результаты исследования выражались в виде средней величины показателя ± ошибка средней величины. Совокупность показателей в группе проверялась на нормальность распределения посредством теста Андерсона-Дарлинга. Распределение показателей подчиняется нормальному закону распределения. Оценку различий показателей в опытной группе по отношению к контрольной оценивали с помощью ^критерия Стьюдента в программе Statistica 10 и считали статистически значимыми при вероятности выше 95%.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В предварительном скрининговом исследовании в широком диапазоне доз Ме3 и Ме5 были выявлены максимально эффективные суммарные дозы исследуемых субстанций 375 мг/кг и 250 мг/кг соответственно, которые отображены в таблице 1.
При развернутой оценке опухолевого роста и активности метастазирования установлено, что при введении Ме3 и Ме5 достоверно увеличивается среднее время выхода первых опухолевых узелков на первом этапе развития процесса. При подкожной перевивке меланомы В16 опухоль имеет солидный рост и при каждодневной пальпации обнаружена значительная задержка ее роста.
Таблица 1
Влияние Ме3 и Ме5 на рост первичного очага Меланомы В16 и активность метастазирования
(M±m, p)
" Группы Показатели I n=12 (опытная - Ме3) II n=12 (опытная - Ме5) III n=12 (контрольная -1% раствор желатина)
СВ, дни 6,25±0,6 р<0,05 8,2±0,9 р<0,05 5,6 ±0,6
ТРО, % 27 р<0,05 22,9 р<0,05 -
ЧМ, % 100 100 100
ИИМ, % 54 р<0,05 36 р<0,05 -
Степень метастазирования по D. Tarin и J.E. Price 100% 1 степень 100% 1 степень 16,7% 1 степень, 83,3% 2 степень
Через 18 суток после перевивки у всех животных наблюдалось метастазирование в легкие, степень данного процесса была различной, ме-таллоорганические соединения олова Ме3 и Ме5 снижали метастазирование, уменьшая количество вторичных очагов и их диаметр. 2 степень, диагностированная по методике D. Tarin и J.E. Price, превалирующая у животных контрольной группы (среднее количество метастатических очагов 10,8±1,3шт на 1 мышь), снизилась. У
животных, получивших ООС, метастатическое поражение легких 1 степени (среднее количество метастатических очагов при введении Ме3 и Ме5 5,0±0,7шт и 6,9 ±0,9шт на 1 мышь соответственно).
Влияние испытуемых соединений на массу первичного очага показало, что снижение достаточно выражено (27% и 22,9%) по отношению к значениям в контрольной группе, но между опытными группами нет достоверных отличий.
ОБСУЖДЕНИЕ
Реализация противоопухолевого и антиметастатического эффектов гибридных ООС была доказана на модели перевиваемой опухоли мышей со спонтанным метастазированием. Нужно отметить, что введение Ме3 и Ме5 началось через 48 часов после перевивки опухолевой массы, что дает возможность говорить о профилактике метастазирования, и в меньшей степени, о лечении вторичных очагов при диссеминировании процесса. Время выхода узелков первичного очага достоверно увеличивается, степень метастатической диссеминации снижается. На наш взгляд, это связано с изменением функционального состояния окружающих тканей. Оба исследуемых соединения имеют в составе молекулы антиоксидантный фрагмент, который может играть существенную роль в изменении проок-сидантно - антиоксидантного и кислотно-основного статуса клетки. Влияние антиоксидантов на рост и развитие опухолевого процесса является предметом дискуссий в различных исследованиях. Антиоксиданты способны защищать не только нормальные клетки от альтерирующего воздействия свободных радикалов, но и опухолевые клетки, тем самым поддерживая их выживаемость и рост [14]. То есть с одной стороны, за счет снижения активных форм кислорода, избыточно образующихся в опухолевой клетке при гипоксии, антиоксиданты могут улучшать метаболические характеристики тканей, в которые возможно метастазирование, а также сами являться повреждающими агентами для злокачественных клеток [15; 16]. С другой стороны, возможна активация процесса опухолевого роста и трансформации. Реализация про- и /или антиоксидантного потенциала Ме3 и Ме5, на наш взгляд, является основой противоопухолевого и антиметастатического действия гибридных ООС.
Раскрытие механизма гибридных ООС является предметом наших дальнейших исследований.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате проведенного исследования установлено, что ООС Ме3 и Ме5, содержащие фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола, вызывали умеренный противоопухолевый и выраженный антиметастатический эффект при введении в суммарной дозе 375 мг/кг и 250 мг/кг соответственно.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА
1. Каприн А. Д., Мацкеплишвили С. Т., Потиевская В. И., Поповкина О. Е., Болотина Л. В., Шкляева А. В., Полуэктова М.В. Сердечно-сосудистые заболевания у онкологических больных. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена. 2019;8(2):139-147. doi: /10.17116/ onkolog20198021139
2. Состояние онкологической помощи населению России в 2019 году. Под ред. Каприна А. Д., Старин-ского В. В., Шахзадовой А. О. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена-филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России; 2020.
3. Deniffel D., Sauter A., Dangelmaier J., Fingerle A., Rummeny E. J., Pfeiffer D. Differentiating intrapulmonary metastases from different primary tumors via quantitative dual-energy CT based iodine concentration and conventional CT attenuation. Eur. J. Radiol. 2019; 111:613. doi: 10.1016/j.ejrad.2018.12.015
4. Додохова М. А., Сафроненко А. В., Котиева И. М., Комарова Е. Ф., Милаева Е. Р., Шпаковский Д. Б., Алхусейн-Кулягинова М. С. Оценка безопасности применения оловоорганических соединений как перспективных кандидатов в противоопухолевые лекарственные средства. Евразийский онкологический журнал. 2021;9(S1):525-526.
5. Додохова М. А., Котиева И. М., Сафроненко А. В., Алхусейн-Кулягинова М. С., Милаева Е. Р., Шпаков-ский Д. Б., Макаренко Ю. М., Терехов А. Ю., Сергеева Е. О. Оценка кардиотоксических побочных явлений при введении оловоорганических соединений на доклиническом этапе исследования. Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2021;11(2):11-18. D0I:10.37279/2224-6444-2021-11-2-11-18.
6. Milaeva E.R., Tyurin V.Yu., Gracheva Y.A., Dodochova M.A., Pustovalova L.M., Chernyshev V.N. Protective effect of meso-tetrakis-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl) porphyrin on the in vivo impact of trimethyltin chloride on the antioxidative defense system. Bioinorg Chem Appl. 2006;2006:64927. doi: 10.1155/ BCA/2006/64927.
7. Грачева Ю. А., Додохова М. А., Милаева Е. Р. Изучение in vivo активности порфиринаc 2,6-ди-трет-бутилфенольными группами в снижении токсического действия хлорида триметилолова XIX Менделеевский съезд по общей и прикладной химии. Тезисы докладов. 25-30 сентября, 2011; Волгоград:495. Доступно по: https://www.studmed.ru/xix-mendeleevskiy-sezd-po-obschey-i-prikladnoy-himii-volgograd-25-30-sentyabrya-2011-tezisy-dokladov_a0f90de0fe1.html. Ссылка активна на 25.02.2020.
8. Вострикова С. М., Гринев А. Б., Гогвадзе В. Г. Активные формы кислорода и антиоксиданты в канцерогенезе и терапии опухолей. Биохимия. 2020;85(10):1474-1488. doi: 10.31857/S0320972520100139.
9. Зенков Н. К., Кожин П. М., Вчерашняя А. В., Мартинович Г. Г., Кандалинцева Н. В., Меньщикова
Е. Б. Особенности редокс-регуляции в опухолевых клетках. Сибирский научный медицинский журнал. 2019;39(2):11-26. doi: 10.15372^1^20190202.
10. Кит О. И., Котиева И. М., Франциянц Е. М., Ка-плиева И. В., Трепитаки Л. К., Бандовкина В. А., Не-скубина И. В., Сурикова Е. И., Черярина Н. Д., Погоре-лова Ю. А., Немашкалова Л. А. Влияние хронической нейропатической боли на течение злокачественного процесса меланомы В16^10 у самцов мышей. Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. 2019; 1(201): 106111. doi: 10.23683/0321-3005-2019-1-106-111.
11. Котиева И. М., Кит О. И., Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Каплиева И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Погорелова Ю. А., Бликян М. В. Влияние хронической боли на уровень половых гормонов, про-лактина и гонадотропных гормонов в сыворотке крови и патологически измененной коже у самок мышей в динамике роста злокачественной меланомы Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. 2018;2(198):106-116. doi: 10.23683/0321-3005-2018-2-106-116.
12. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. Под ред. З. П. Со-фьиной, А. Б. Сыркина (СССР), А. Голдина, А. Кляйна (США). М.: Медицина; 1980.
13. Коптяева К. Е., Мужикян А. А., Гущин Я. А., Беляева Е. В., Макарова М. Н., Макаров В. Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 2: мышь. Лабораторные животные для научных исследований. 2018; 4. doi: 10.29296/2618723Х-2018-04-05
14. Пузаков К. К., Дурнова Н. А., Рыженкова И. Г. Современные представления о влиянии экзогенных ан-тиоксидантов на рост злокачественных опухолей. Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. 2019;17(2);29-33. doi: 10.7816/RCF17229-33.
15. Гайнутдинов П. И., Кожин П. М., Чечушков А. В., Мартинович Г. Г., Хольшин С. В., Кандалинцева Н. В., Зенков Н. К., Меньщикова Е. Б. Обратная зависимость между антиоксидантной активностью синтетических монофенолов структурно взаимосвязанного ряда и их токсичностью в отношении опухолевых клеток. Сибирский научный медицинский журнал. 2018;38(1):22-31. doi: 10.15372^1Ш20180104.
16. Меньщикова Е. Б., Чечушков А. В., Кожин П. М., Хольшин С. В., Кандалинцева Н. В., Мартинович Г. Г., Зенков Н. К. Синтетические монофенольные антиок-сиданты активируют аутофагию в опухолевых клетках: зависимость от структуры и концентрации. Вестник Волгоградского государственного университета. Серия 11: Естественные науки. 2018;8(1):53-57. doi: 10.15688/ jvolsu11.2018.H0.
REFERENSES
1. Карпп А. D., М^кер^ЬмН S. Т., Potievskaya V. I., Popovkina О. Е., Во1ойпа L. V., Shklyaeva А. V., РоЮеккма
M. V. Cardiovascular diseases in cancer patients. Onkologiya. Zhurnal im. P.A. Gertsena. 2019;8(2):139-147. (In Russ.). doi:10.17116/onkolog20198021139.
2. Sostoyanie onkologicheskoi pomoshchi naseleniyu Rossii v 2019 godu. Pod red. Kaprina A. D., Starinskogo V. V., Shakhzadovoi A. O. M.: MNIOI im. P.A. Gertsena-filial FGBU «NMITs radiologii» Minzdrava Rossii; 2020. (In Russ.).
3. Deniffel D., Sauter A., Dangelmaier J., Fingerle A., Rummeny E.J., Pfeiffer D. Differentiating intrapulmonary metastases from different primary tumors via quantitative dual-energy CT based iodine concentration and conventional CT attenuation. Eur. J. Radiol. 2019;111:6-13. doi: 10.1016/j.ejrad.2018.12.015.
4. Dodokhova M. A., Safronenko A.V., Kotieva I. M., Komarova E. F., Milaeva E. R., Shpakovskii D. B., Alkhusein-Kulyaginova M.S. Assessment of the safety of the use of organotin compounds as promising candidates for antitumor drugs. Evraziiskii onkologicheskii zhurnal. 2021;9(S1):525-526. (In Russ.).
5. Dodokhova M. A., Kotieva I. M., Safronenko A. V., Alkhuseyn-Kulyaginova M. S., Milaeva E. R., Shpakovsky
D. B., Makarenko Yu. M., Terekhov A. Yu., Sergeeva
E. O. Assessment of cardiotoxic side effects in the administration of organotin compounds at the preclinical stage of the study. Krymskii zhurnal eksperimental'noi i klinicheskoi meditsiny. 2021;11(2):11-18. (In Russ.). DOI:10.37279/2224-6444-2021-11-2-11-18.
6. Milaeva E. R., Tyurin V. Yu., Gracheva Y. A., Dodochova M. A., Pustovalova L. M., Chernyshev V. N. Protective effect of meso-tetrakis-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl) porphyrin on the in vivo impact of trimethyltin chloride on the antioxidative defense system. Bioinorganic Chemistry and Applications. 2006;2006:64927. doi:10.1155/BCA/2006/64927.
7. Gracheva Yu. A., Dodokhova M. A., Milaeva E. R. Izuchenie in vivo aktivnosti porfirinac 2,6-di-tret-butilfenol'nymi gruppami v snizhenii toksicheskogo deistviya khlorida trimetilolova. XIX Mendeleevskii s»ezd po obshchei i prikladnoi khimii. Tezisy dokladov; 25-30 Sentyabrya, 2011; Volgograd: 495. (In Russ.). Available at: https://www.studmed.ru/xix-mendeleevskiy-sezd-po-obschey-i-prikladnoy-himii-volgograd-25-30-sentyabrya-2011-tezisy-dokladov_a0f90de0fe1.html. Accessed February 25, 2020.
8. Vostrikova S. M., Gogvadze V. G., Grinev
A. B. Reactive oxygen species and antioxidants in carcinogenesis and tumor therapy. Biochemistry (Moscow). 2020;85(10):1254-1266. (In Russ.). doi: 10.31857/ S0320972520100139.
9. Zenkov N. K., Kozhin P. M., Vcherashnyaya A. V., Martinovich G. G., Kandalintseva N. V., Menshchikova E.
B. Features of redox regulation in tumor cells. Sibirskii nauchnyi meditsinskii zhurnal. 2019;39(2):11-26. (In Russ.). doi: 10.15372/SSMJ20190202.
10. Kit O. I., Kotieva I. M., Frantsiyants E. M., Kaplieva I.V., Trepitaki L. K., Bandovkina V. A., Neskubina
I. V., Surikova E. I., Cheryarina N. D., Pogorelova J. A., Nemashkalova L. A. Influence of chronic neuropathic pain on the course of malignant B16/F10 melanoma in male mice. Izvestiya vysshikh uchebnykh zavedenii. Severo-Kavkazskii region. Seriya: Estestvennye nauki. 2019; 1(201): 106-111. (In Russ.). doi: 10.23683/03213005-2019-1-106-111.
11. Kotieva I. M., Kit O. I., Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Kaplieva I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Pogorelova Y. A., Blikjan M. V. Effect of chronic pain on the level of sex hormones, prolactin and gonadotropins in serum and pathologically changed skin of female mice in dynamics of malignant melanoma growth. Izvestiya vysshikh uchebnykh zavedenii. Severo-Kavkazskii region. Seriya: Estestvennye nauki. 2018. № 2 (198). C. 106-116. (In Russ.). doi:10.23683/0321-3005-2018-2-106-116.
12. Experimental evaluation ofantitumor drugsin the USSR and the USA. Ed. Z. P. Sofina, A. B. Syrkin (USSR), A. Goldin, A. Klein (USA), M.: Medicine, 1980. (In Russ.).
13. Koptyaeva K. E., Muzhikyan A. A., Gushchin Ya. A., Belyaeva E. V., Makarova M. N., Makarov V. G. Technique Of Dissection And Extracting Organs Of
Laboratory Animals. Message 2: Mouse. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii 2018;4. (In Russ.). doi: 10.29296/2618723X-2018-04-05.
14. Puzakov K. K., Durnova N. A., Ryzhenkova I. G. Modern ideas about the effect of exogenous antioxidants on the growth of malignant tumors. Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. 2019;17(2):29-33. (In Russ.). doi: 10.17816/RCF17229-33.
15. Gaynutdinov P. I., Kozhin P. M., Chechushkov A. V., Martinovich G. G., Kholshin S. V. Kandalintseva N. V., Zenkov N. K., Menshchikova E. B. Inverse relationship between the antioxidant activity of structurally related synthetic monophenols and their toxicity in tumor cells. Sibirskii nauchnyi meditsinskii zhurnal. 2018;38(1):22-31. (In Russ.). doi:10.15372/SSMJ20180104.
16. Menshchikova E. B., Chechushkov A. V., Kozhin P. M., Kholshin S. V. Activation of auutophagy in tumor cells by synthetic monophenol antioxidants: dependence on structure and concentration. Vestnik Volgogradskogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya 11: Estestvennye nauki. 2018;8(1 ):53-57. (In Russ.). doi: 10.15688/ jvolsu11.2018.1.10.
