CC BY
11
DOI 10.31588/2413-4201-1883-243-3-171-176
УДК 636.5.034:615.33:591.111.1
ВЛИЯНИЕ ЭНРОФЛОКСАЦИНА НА ПОКАЗАТЕЛИ КРАСНОЙ КРОВИ ЦЫПЛЯТ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЕ
Моисеева А.А. - м.н.с., Присный А.А. - д.б.н., вед. н.с.
ФГБНУ «Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и ЯР. Коваленко
Российской академии наук»
Ключевые слова: цыплята, сальмонеллез, кровь, эритроциты, гемоглобин, фторхино-лоны, энрофлоксацин
Keywords: chickens, salmonellosis, blood, erythrocytes, hemoglobin, fluoroquinolones, En-rofloxacin
Нарушения в технологии содержания, ветеринарно-санитарном контроле, а также стрессы, являются непосредственными причинами подавления резистентности организма кур, что, как следствие, приводит к вспышкам бактериальных инфекций [3]. Одним из наиболее часто возникающих заболеваний в условиях птицеводческих фабрик является сальмонеллез, который вызывает значительные экономические потери в связи с большим падежом птиц, в том числе и в раннем возрасте, снижением продуктивности, а также затратами на диагностические, лечебные и профилактические мероприятия [12]. Болезнь вызывают различные сероварианты микроорганизмов рода Salmonella, среди которых наиболее часто обнаруживаемыми у птиц являются Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis [9]. Зачастую своевременное выявление больной птицы затруднено, это обуславливается тем, что инфицирование некоторыми серотипами, например, S. enteritidis, может не вызывать проявления каких-либо клинических симптомов [7]. Среди птиц могут быть скрытые носители бактерии, но выделяемый ими помет является фактором быстрого распространения болезни, а полученная продукция от таких кур является контамини-рованной [5, 9]. Изучая статистические данные эпидемического процесса, Мезенцев С.В. (2010) отмечает, что сальмонелле-зы, вызванные серовариантом S. enteritidis больше поражают именно людей, нежели птиц. Основным звеном во вспышках за-
болевания, вызванных этой бактерией, является непосредственно человек [6].
Для борьбы с данным патогенным микроорганизмом в лечебных и профилактических целях применяют большой арсенал противомикробных средств. Одними из используемых современных препаратов являются фторхинолоны (ФХ), проявляющие выраженную активность против гра-мотрицательных и грамположительных бактерий, а также отличающиеся хорошей эффективностью в терапии экспериментальных инфекций [11, 13]. ФХ характеризуются общим уникальным механизмом воздействия на бактерий, при этом имеют оптимальные фармакокинетические свойства и высокую степень биодоступности. Необходимо также отметить их эффект в монотерапии, что обуславливает отсутствие потребности в комбинированных схемах лечения [10]. Энрофлоксацин -препарат группы ФХ, который был создан для лечения болезней микробной этиологии у птиц. Средство широко применяется в птицеводческих хозяйствах, что определяется его хорошим антибактериальным действием. Тем не менее, несмотря на частое использование и отличные фармакологические свойства, информация о его влиянии на физиологический статус птиц при лечении инфекционных заболеваний недостаточна и часто противоречива. В связи с этим, целью нашей работы является исследование влияния энрофлоксацина на показатели красной крови цыплят в условиях экспериментального сальмонел-
леза.
Материал и методы исследований. Проведены два опыта («a» и «b») на суточных петушках кросса Хайсекс Браун. Группы Ia и Ib (контрольные) в ходе эксперимента получали рацион, сбалансированный по основным питательным и биологически активным веществам, и чистую воду. Группы IIa и IIb за сутки до экспериментального заражения и в течение четырех суток после получали с водой энро-флоксацин в дозе 200 мг/л. На вторые сутки опыта внутрибрюшинно осуществлено инфицирование цыплят групп IIa и IIIa культурой Salmonella typhimurium, а групп IIb и IIIb - культурой Salmonella enteritidis,
в концентрациии 30 млн. КОЕ/0,5 мл. Отбор крови у всех подопытных петушков осуществляли в первые, третьи, пятые, седьмые и девятые сутки после заражения. Полученную кровь стабилизировали 3,8 % цитратом натрия.
Проведены исследования показателей красной крови: скорость оседания эритроцитов (СОЭ) методом Панченкова, количество эритроцитов методом прямого подсчета в камере Горяева, содержание гемоглобина колориметрически гематино-вым методом Сали, гематокрит расчетным способом по С.А. Акулову с соавт. [1]. Расчет цветного показателя производен по формуле [2]:
ЦП =
Hb (*-) • 6 Уд Л/
RBC -2/100000'
где ЦП - цветной показатель, № - содержание гемоглобина, RBC - количество эритроцитов (1012л-1)
Статистическая обработка цифрового материала осуществлена с использованием программы SPSS Statistic 17.0, достоверность полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.
Результаты исследований. Исследования по применению фторхинолонов демонстрируют, что препараты этой фармакологической группы оказывают мало-выраженное негативное влияние на систему крови, которое чаще всего проявляется в виде анемических явлений, однако эти данные касаются только млекопитающих, так как у птиц этот вопрос мало изучен [8]. В представленных исследованиях у цыплят кросса Хайсекс Браун на протяжении всего опыта регистрировали достоверные изменения гематологических показателей, косвенно указывающие на развитие анемического процесса, который, вероятно, вызван воздействием экспериментальной инфекции. Так, в опыте «a», в крови цыплят зараженных групп произошел сдвиг показателя количества эритроцитов. В первые сутки исследования, отмечается достоверное увеличение содержания этих клеток на 20 % относительно контроля в группе Ша,
а уже на третьи сутки повышение на 33 % происходит в группе IIa. Затем количество эритроцитов в крови цыплят этих групп достоверно снижается: в группе IIa изменение в сравнении с контрольными данными составило 10 %, а в группе Ша - 24 %, но уже в последний день исследований достоверных различий не выявлено (Таблица 1).
Подобное смещение показателя в сторону увеличения, возможно, находится в связи с воздействием бактерий S. typhi-murium, так как известно, что повышение количества эритроцитов может происходить в начальной стадии формирования ряда заболеваний микробной этиологии [4]. Кроме того, предполагается, что птичьи эритроцитарные клетки способны осуществлять иммунноподобную функцию [14]. Изменение количества эритроцитов в крови цыплят опыта «b» проявилось достоверным снижением показателей на третьи, пятые и седьмые сутки в группе IIIb в среднем на 20 %, а также уменьшением на 16 % и 23 % в группе IIb на пятые и седьмые сутки соответственно. В связи с тем, что в группах, получавших энрофлоксацин в обоих опытах, в целом, изменения отно-
сительно контрольных результатов менее чиной проявившегося эритроцитоза явля-
выражены, можно предположить, что при- ется экспериментальное заражение.
Таблица 1 - Динамика показателей красной крови цыплят при заражении культурой
Salmonella typhimurium
Сутки Группа СОЭ, -i ммч Гемоглобин, -i г^л Эритроциты, in12 -1 10 л Цветной показатель, у.е. Гематокрит, %
Ia 2,83±0,31 107,0±6,46 1,44±0,08 2,31±0,27 32,2±1,95
1 IIa 3,0±0,36 82,7±2,76* 1,52±0,09 1,65±0,08* 24,9±0,83*
IIIa 3,33±0,61 85,3±2,67* 1,73±0,04** 1,48±0,07** 25,7±0,81*
Ia 2,67±0,21 99,0±2,91 1,59±0,11 1,89±0,09 29,8±0,88
3 IIa 2,33±0,33 98,0±4,71 2,12±0,12* 1,41±0,09** 29,5±1,42
IIIa 3,17±0,79 80,3±3,16** 1,78±0,09 1,37±0,05** 24,2±0,95**
Ia 3,00±0,26 97,3±3,29 1,79±0,04 1,64±0,07 29,3±0,99
5 IIa 3,00±0,45 79,0±3,57* 1,49±0,06** 1,61±0,11 23,8±1,07**
IIIa 3,00±0,36 80,3±2,27** 1,74±0,07 1,39±0,03** 24,2±0,68**
Ia 2,50±0,34 110,0±2,68 1,83±0,02 1,81±0,04 33,1±0,81
7 IIa 2,50±0,22 100,3±3,56 1,66±0,02** 1,82±0,06 30,2±1,07
IIIa 2,50±0,34 89,3±6,19* 1,47±0,03** 1,82±0,09 26,9±1,86*
Ia 2,83±0,31 122,3±4,24 1,75±0,03 2,09±0,08 36,8±1,28
9 IIa 2,83±0,31 108,3±2,71** 1,79±0,06 1,82±0,06* 32,6±0,81**
IIIa 2,0±0,00 105,7±2,98** 1,77±0,08 1,80±0,08* 31,8±0,89**
** - статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по и-критерию Манна-Уитни при р<0,01; * - статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по И-критерию Манна-Уитни при р<0,05
Таблица 2 - Динамика показателей красной крови цыплят при заражении культурой Salmonella enteritidis
Сутки Группа СОЭ, -1 ммч Гемоглобин, -1 г^л Эритроциты, 1n12 -1 10 л Цветной показатель, у.е. Гематокрит, %
Ib 2,50±0,34 96,7±4,05 1,72±0,09 1,72±0,14 29,1±1,22
1 IIb 4,83±2,06 102,3±6,54* 1,81±0,16 1,77±0,19 30,8±1,97
IIIb 3,00±0,26 88,7±4,15 1,68±0,05 1,59±0,12 26,7±1,25
Ib 1,83±0,31 106,3±6,56 1,72±0,07 1,86±0,11 32,1±1,98
3 IIb 2,50±0,43 88,3±2,61* 1,64±0,04 1,62±0,06 26,6±0,78*
IIIb 2,67±0,21 81,3±2,29** 1,49±0,03* 1,63±0,06 24,5±0,69**
Ib 2,33±0,21 124,0±4,53 1,76±0,04 2,12±0,08 37,3±1,36
5 IIb 2,50±0,22 90,7±3,68** 1,51±0,11* 1,85±0,15 27,3±1,11**
IIIb 1,83±0,31 81,0±2,91** 1,55±0,08* 1,59±0,11** 24,4±0,88**
Ib 2,67±0,49 104,0±1,26 1,88±0,07 1,67±0,06 31,3±0,38
7 IIb 2,33±0,21 94,0±2,31* 1,52±0,02** 1,85±0,05* 28,3±0,69*
IIIb 1,67±0,21 88,7±3,68* 1,54±0,04** 1,74±0,11* 26,7±1,11*
Ib 2,50±0,34 124,3±3,56 1,66±0,03 2,25±0,05 37,4±1,07
9 IIb 2,83±0,17 101,7±2,75** 1,75±0,05 1,75±0,08** 30,6±0,83**
IIIb 2,33±0,33 108,7±1,43* 1,82±0,09 1,82±0,11** 32,7±0,43**
** - статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по И-критерию Манна-Уитни при р<0,01; * - статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по И-критерию Манна-Уитни при р<0,05
Показатели СОЭ в данном исследовании не были информативными, так как достоверные изменения в эксперименте не зафиксированы.
На развитие анемических явлений указывает снижение содержания гемоглобина, происходившее в обоих опытах. В опыте «b» достоверные изменения не выявлены только в первые сутки после заражения (Таблица 2).
Показатели группы IIb были меньше контрольных значений на 20 %, 36 %, 10 % и 22 % на третьи, пятые, седьмые и девятые сутки соответственно. Снижение содержания гемоглобина в группе IIIb на 30 %, 53 %, 17 % и 14 % произошло в аналогичные периоды исследования.
Похожие результаты получены и в опыте «a», но достоверные изменения здесь регистрируются сразу после заражения, что, вероятно, вызвано особенностями серотипа S. typhimurium, который оказывает более негативное воздействие на организм. Это подтверждается тем, что в группе Ша достоверное снижение концентрации гемоглобина на 25 %, 23 %, 21 %, 23 % и 15 % фиксировали на протяжении всего опыта. Регистрируемые в этой группе изменения происходили чаще, чем в группе IIa.
О наличии эритроцитов со сниженной концентрацией гемоглобина также свидетельствует уменьшение цветного показателя в обоих исследованиях. Тем не менее, изменения в группе IIb установлены только на седьмые и девятые сутки, а также на первые, третьи и девятые сутки в группе На, что является менее выраженным достоверным сдвигом, в сравнении с данными полученными в группах IIIa и IIIb.
На протяжении всего исследования во всех исследуемых опытных группах зафиксировано уменьшение показателя ге-матокрита, что является признаком нарушения дыхательной функции крови. Так, в группе IIb и IIIb достоверные отличия отсутствуют только сразу после заражения. Наиболее выражено изменение в группе IIIa, где снижение гематокрита регистрировали на протяжении всего исследования. В группе IIa достоверные отличия на 29 %,
23 % и 12 % относительно контрольных результатов выявлены при анализе крови в первые, пятые и девятые сутки соответственно.
Несмотря на то, что в крови цыплят, получавших энрофлоксацин, установлены менее выраженные изменения, что связано с воздействием препарата на развитие инфекционного процесса, необходимо отметить достоверные отличия изучаемых показателей по сравнению с контролем до последних суток эксперимента включительно.
Заключение. В результате проведенных исследований было выявлено, что наиболее достоверные изменения в группе, получавшей энрофлоксацин, были зафиксированы при экспериментальном заражении культурой S. typhimurium, оказавшей более существенное воздействие на показатели красной крови по сравнению с S. enteritidis. Сдвиги изученных показателей были достоверными и более выраженными в группах, не получавших энрофлоксацин. Тем не менее, стабилизацию количества эритроцитов в последние сутки исследований в двух опытах нельзя связать с воздействием фторхинолона, так как аналогичную картину наблюдали в группах IIIa и IIIb, в крови цыплят которых также отсутствовали достоверные отличия в сравнении с контрольными данными. Сравнивая результаты, полученные в группах IIa, IIb и IIIa, IIIb, можно предположить, что применение энрофлоксацина не вызывает серьезного негативного влияния на показатели красной крови подопытных цыплят, а происходящие достоверные изменения являются следствием развития экспериментальной инфекции.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Акулов, С.А. Методы измерения уровня гематокрита крови / С.А. Акулов, И.Б. Чистякова, А.А. Федотов // Приволжский научный вестник. - 2014. - № 11-1 (39). - С. 29-32.
2. Болотников, И.А. Гематология птиц / И.А. Болотников, Ю.В. Соловьев. -Л.: Наука, 1980. - С. 33-34.
3. Камалиева, М.Г. Влияние условий содержания ремонтного молодняка кур на формирование иммунитета и каче-
ства мяса / М.Г. Камалиева, Р.А. Асрутди-нова, С.М. Гарипов // Вестник КрасГАУ. -2017. - № 5. - С. 35-39.
4. Кудрявцев, А.А. Исследование крови в ветеринарной диагностике / А.А. Кудрявцев. - М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1952. - 376 с.
5. Куриленко, А. Профилактика сальмонеллеза кур / А. Куриленко, Н. Пименов // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 11. - С. 28-31.
6. Мезенцев, С.В. Распространение сальмонелл в продукции животноводства / С В. Мезенцев // Практик. - 2010. - № 12. - С. 6-11.
7. Нуралиев, Е.Р. Пуллороз-сальмонеллез птиц в приусадебных хозяйствах как природный резервуар возбудителя болезни для промышленного птицеводства / Е.Р. Нуралиев, И.И. Кочиш // Аграрный научный журнал. - 2017. - № 11. - С. 24-29.
8. Падейская, Е.Н. Фтохинолоны / Е.Н. Падейская, В.П. Яковлев. - М.: «Био-информ», 1995. - 208 с.
9. Плитов, И.С. Индикация патогенных бактерий, циркулирующих в птицеводческих хозяйствах / И.С. Плитов // Проблемы ветеринарной санитарии, гиги-
ены и экологии. - 2010. - № 1 (5). - С. 6365.
10. Присный, А.А. Влияние ципро-флоксацина на лейкограмму крови цыплят при экспериментальном колибактериозе /
A.А. Присный, А.А. Моисеева, В.Н. Скворцов // Международный вестник ветеринарии. - 2019. - № 3. - С. 28-32.
11. Скворцов, В.Н. Антимикробная активность и лечебная эффективность норфлоксацина при экспериментальном колибактериозе цыплят / В.Н. Скворцов,
B.В. Маханев, Д.В. Юрин // Ветеринарная патология. - 2012. - № 3 (41). - С. 68-72.
12. Шуляк, Б.Ф. Традиционные и новые подходы к лабораторной диагностике сальмонеллеза / Б.Ф. Шуляк // Справочник заведующего КДЛ. - 2009. - № 12. - С. 21-26.
13. Юрин, Д.В. Острая токсичность норфлоксацина для цыплят / Д.В. Юрин, В.Н. Скворцов, А.А. Присный, А.А. Моисеева // Международный вестник ветеринарии. - 2019. - № 2. - С. 46-49.
14. Morera, D. RNA-Seq Reveals an Integrated Immune Response in Nucleated Erythrocytes / D. Morera, N. Roher, L. Ribas, J.C. Balash, C. Donate, A. Callol, S. Boltana, S. Roberts, G. Goetz, F.W. Goetz, S.A. MacKenzie // PLoS One - 2011. - Vol. 6 (10). -e26998.
ВЛИЯНИЕ ЭНРОФЛОКСАЦИНА НА ПОКАЗАТЕЛИ КРАСНОЙ КРОВИ ЦЫПЛЯТ ПРИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЕ
Моисеева А.А., Присный А.А.
Резюме
В представленной работе изучены изменения показателей системы красной крови цыплят в результате применения химиотерапевтического препарата энрофлоксацин при экспериментальном сальмонеллезе. В ходе исследований осуществляли экспериментальное заражение цыплят культурами Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis. Цыплята одной из инфицированных групп в каждом опыте за сутки до и в течение четырех суток после заражения получали с водой энрофлоксацин в дозе 200 мг/л. В результате проведенных исследований выявлены достоверные изменения в группе, получавшей энрофлоксацин, при экспериментальном заражении культурой S. typhimurium, оказавшей более существенное воздействие на показатели красной крови по сравнению с S. enteritidis.
EFFECT OF ENROFLOXACIN ON CHICK RED BLOOD IN EXPERIMENTAL
SALMONELLOSIS
Moiseeva A.A., Prisnyi A.A.
Summary
In the presented work changes in the red blood system of chickens are studied as a result of application of the chemotherapeutic preparation of Enrofloxacin in conditions of experimental salmonellosis. In the course of research carried out experimental infestation of chickens cultures Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis. The chicks of one of the infected groups in each experiment received Enrofloxacin in a dose of 200 mg/l with water 24 hours before and four days after infection. As a result of the conducted studies, reliable changes were revealed in the group receiving Enrofloxacin during the experimental infection with S. typhimurium culture, which had a more significant impact on red blood parameters than S. enteritidis.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-243-3-176-181 УДК 03.03.01
ВЛИЯНИЕ БЛОКАТОРА ТРИПТОФАНГИДРОКСИЛАЗЫ В
ЭМБРИОНАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ НА НАСОСНУЮ ФУНКЦИЮ СЕРДЦА КРЫС В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
1 2 Недорезова Р.С. - д.б.н., профессор, Каримова Р.Г. - д.б.н., профессор,
Нигматуллина Р.Р.1 - д.б.н., профессор
1ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет» 2ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: эмбриональный онтогенез, триптофангидроксилаза, пара-хлор-фенил-аланин, серотонин, частота сердечных сокращений, ударный объем крови, крыса
Keywords: embryonic ontogenesis, tryptophan hydroxylase, para-chloro-phenyl-alanine, serotonin, heart rate, stroke volume of blood, rat
Нейромедиатор серотонин (5-НТ) оказывает морфофункциональное воздействие на клетки и органы-мишени и его роль существенно меняется в онтогенезе. В постнатальном периоде крыс 5 -НТ увеличивает силу сокращения миокарда предсердий и желудочков [12]. Доказано, что в местах повреждения сосудов накопление серотонина ведет именно к пролиферации эндотелия, гладкомышечных клеток, что и является важным звеном в патогенезе легочной гипертензии и атеросклероза [1, 4, 7, 8]. По мере прогрессирования заболевания у пациентов с ишемической болезнью сердца повышается концентрация серото-нина в плазме крови, а в тромбоцитах происходит ее снижение, что связано с нарушением захвата серотонина мембранными переносчиками [13].
В эмбриональном периоде серото-нин выступает в качестве фактора роста и играет важную регулирующую роль в решающий период развития эмбриона, в частности развития сердечно-сосудистой системы. Сердечный морфогенез зависит от миграции, выживаемости и быстрого увеличения клеток нервного гребня, которые регулируются 5-НТ, в основном, через 5-НТ2В рецепторы [10, 11]. 5-НТ оказывает сильное сосудосуживающее действие и поддерживает оптимальный маточно-плацентарный кровоток [6, 10]. Хроническое введение нейротоксина пара-хлор-фенил-аланина блокирует фермент трип-тофангидроксилазу и приводит к снижению синтеза серотонина [9, 14, 15]. У мышей, у которых отсутствуют 5-НТ2В рецепторы, фиксируется хаотичное располо-
