CC BY
18
точно назвать лекарственные препараты, применявшиеся ими для лечения ХОБЛ в последние 6 месяцев 58% пациентов, не были уверены в точности своих знаний 18%, а 24% вообще не могли назвать лекарства. На вопрос о применении в повседневной жизни рекомендаций по немедикаментозному воздействию на ХОБЛ 67% опрошенных назвали отказ от курения табака (в том числе пассивного), 28% - лечебное питание, 23% - ежегодную прививку против гриппа и снижение влияния загрязнения воздуха, в том числе на работе, 14% - физиотерапевтическое и санаторно-курортное лечение.
Назначенное им лечение ХОБЛ считают эффективным 40% пациентов, а 28% больных считают, что эффективность терапии должен оценивать врач. Каждый пятый пациент считает свое лечение недостаточно эффективным (12%) или неэффективным (8%). Затруднились с ответом 12% больных.
На вопрос «Проходили ли Вы обучение в «Школе больного ХОБЛ»?»: «Нет» ответили 38% пациентов, «Нет, но хотел(а) бы, если такое возможно» - 46%, «Да» - 16%. ВЫВОДЫ:
1. Преобладающие варианты ответов больных на вопросы о месте проведения лечения могут свидетельствовать не только об отсутствии у них периодов обострения, но и о недостаточном внимании к своей болезни.
2. Большая доля респондентов при выборе фармакотерапии предпочла советам сторонних лиц рекомендации специалистов, с применением комплексного лечения (как для базисной терапии, так для купирования удушья) с эффективным способом доставки препаратов.
3. Большинство опрошенных пациентов с ХОБЛ хорошо осведомлены о применяемых лекарственных средствах, необходимости отказа от курения табака, желают узнать о нем больше в «Школе больного ХОБЛ».
ЛИТЕРАТУРА
3. Малыхин Ф.Т., Батурин В.А., Байда А.П. Оценка знания врачами общей практики и участковыми терапевтами федеральных стандартов диагностики и лечения пациентов с хронической обструктивной болезнью легких. Врач. 2017. 1: 79-80.
4. Малыхин Ф.Т., Батурин В.А. Оценка назначения потенциально нерекомендуемых лекарственных препаратов пульмонологическим пациентам пожилого и старческого возраста. Медицина. 2017. 1: 19-24. [Электронный ресурс]. Доступно по: www.fsmj.ru. Ссылка активна на 05.07.2017.
5. Малыхин Ф.Т. Показатели коморбидности при хронической бронхообструктивной патологии. Успехи геронтологии. 2017; 30: 1: 143-148.
REFERENCES
6. Malykhin F.T., Baturin V.A., Baida A.P. to assess the knowledge of General practitioners and district therapists Federal standards for the diagnosis and treatment of patients with chronic obstructive pulmonary disease. Doctor. 2017. 1: 79-80.
7. Malykhin F.T., Baturin V.A. Evaluation purpose potentially deprecated medicines pulmonary patients of elderly and senile age. Medicine. 2017. 1: 19-24. [Electronic resource]. Available at: www.fsmj.ru. The link is active on 05.07.2017.
8. Malykhin F.T. Indicators of comorbidity in chronic broncho-obstructive pathology. Advances in gerontology. 2017; 30: 1: 143-148.
Сведения об авторах:
Малыхин Федор Тимофеевич - к.м.н., доцент кафедры пропедевтики внутренних болезней Ставропольского государственного медицинского университета. 355017, г. Ставрополь, ул. Мира, 310. Тел.: +79624023417. E-mail: fmalykhin@yandex.ru
Батурин Владимир Александрович - д.м.н., профессор, зав. кафедрой клинической фармакологии Ставропольского государственного медицинского университета. 355017, г. Ставрополь, ул. Мира, 310.
About the authors:
Malykhin Fyodor Timofeevich - candidate of medical Sciences, associate Professor of the Department of propedeutics of internal diseases, Stavropol state medical University. 355017, Stavropol, Mira str., 310. Tel: +79624023417. E-mail: fmalykhin@yandex.ru
Baturin Vladimir - MD, Professor, head. Department of clinical pharmacology, Stavropol state medical University. 355017, Stavropol, Mira str., 310.
ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОГО 8-ОКСО-2'-ДЕЗОКСИГУАНОЗИНА НА «СТАЦИОНАРНО СТАРЕЮЩИЕ» КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ КЛЕТКИ -
ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ В ГЕРИАТРИИ Н.В. Мармий, Г.В. Моргунова, Д.С. Есипов, А.А. Клебанов, А.Н. Хохлов
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва
8-Оксо-2'-дезоксигуанозин (8-oxo-dG) - известный биомаркер старения и окислительного стресса. По данным последних лет, он может иметь выраженную биологическую активность, в том числе - регулировать репарацию ДНК и участвовать во внутриклеточной сигнализации. Мы исследовали влияние экзогенного 8-oxo-dG на «стационарно стареющие» культивируемые клетки китайского хомячка. Были показаны отсутствие цитотоксичности соединения и сокращение его концентрации в среде при инкубации с клетками. Экзогенный 8-oxo-dG вызывал снижение содержания 8-oxo-dG в составе ДНК «старых» клеток до уровня, характерного для «молодых». При этом эффект соединения оказался зависящим от пролиферативного статуса культуры и специфическим по отношению к «старым» клеткам. Вещества с подобным избирательным эффектом могут найти применение в гериатрии для лечения и профилактики возрастных заболеваний и улучшения состояния пожилых больных.
Ключевые слова: 8-оксо-2'-дезоксигуанозин, «стационарное старение», геропротекторы, биомаркеры старения, репарация ДНК, возрастные болезни
STUDIES OF THE EFFECT OF EXOGENOUS 8-OXO-2'-DEOXYGUANOSINE ON THE STATIONARY PHASE AGING CULTURED CELLS N.V. Marmiy, G.V. Morgunova, D.S. Esipov, A.A. Klebanov, A.N. Khokhlov
Lomonosov Moscow State University, Moscow
8-Oxo-2'-deoxyguanosine (8-oxo-dG) is a well-known biomarker of aging and oxidative stress. According to recent data, it can have a pronounced biological activity, including regulation of DNA repair and participating in intracellular signaling. We studied the effect of exogenous 8-oxo-dG on the stationary phase aging cultured Chinese hamster cells. Absence of cytotoxicity of the compound and a reduction in its concentration in the medium when incubated with the cells were shown. Exogenous 8-oxo-dG caused a decrease in the content of 8-oxo-dG in the DNA of «old» cells to the level typical for «young» cells. The effect of the compound was dependent on the proliferative status of the culture and specific to the «old» cells. Agents with the similar selective effect can be used in geriatrics to treat and prevent age-related diseases and improve the well-being of elderly patients.
Key words: 8-oxo-2'-deoxyguanosine, stationary phase aging, geroprotectors, biomarkers of aging, DNA repair, age-related diseases
8-Оксо-2'-дезоксигуанозин (8-oxo-dG) - распространенный маркер окислительного стресса и старения, в том числе и старения человека [1]. При стрессах и заболеваниях содержание 8-oxo-dG возрастает многократно, но быстро возвращается к нормальным значениям при устранении причины окислительного стресса. Это связано с существованием в клетке системы репарации 8-oxo-dG, в результате деятельности которой модифицированное основание удаляется из ДНК, а на его место встраивается неокисленный дезоксигуано-
КЛИНИЧЕСКАЯ ГЕРОНТОЛОГИЯ, 9-10, 2017
зин. Вместе с тем, «базовый уровень» содержания 8-oxo-dG в ДНК нарастает с возрастом. Неоднократно было показано, что в среднем у старых организмов уровень 8-oxo-dG в ДНК выше, чем у молодых. Ранее мы выявили такую же закономерность для «стационарно стареющих» клеточных культур [2]. С «возрастом» содержание 8-oxo-dG в их ДНК увеличивалось в 5-7 раз.
В последнее десятилетие в литературе появились данные о биологической роли 8-oxo-dG [3]. Это соединение оказывало противовоспалительное, иммунорегулирующее и протекторное действие при ряде заболеваний. Чой с соавт. частично описали механизм наблюдаемого эффекта. Выяснилось, что 8-oxo-dG связывается с малой ГТФ-азой Rac-1, ингибируя ее активность, а также предотвращает фосфорилирование киназы STAT-1 и снижает экспрессию ряда участвующих в иммунном ответе белков. Это было показано для NADPH-оксидазы нейтрофилов, факторов адгезии, NO-синтазы, а также липоксигеназ и циклооксигеназ [4]. Однако такой механизм совсем не исключает возможности воздействия 8-oxo-dG и на клеточном уровне. Показано связывание окисленного гуанина (8-oxo-Guo) в аллостерическом центре оксигуанингликозилазы-1 (OGG-1), которое не только модулирует ее репаративную активность, но и позволяет ферменту взаимодействовать с малой ГТФ-азой Ras-1 [5]. Однако даже само по себе увеличение числа оборотов OGG-1 уже может оказать существенное влияние на уровень окислительных повреждений ДНК в клетке.
Окислительное повреждение ДНК может являться не только «маркером старения», но и причиной синтеза дефектной РНК, а впоследствии - и белков. 8-Dxo-dG способен образовывать неканоническую пару с аденозином как при трансляции, так и при репликации [6]. Таким образом, 8-oxo-dG в ДНК может быть элементом «порочного круга» приводящего к накоплению все большего и большего количества дефектных белков с последующим нарушением функций клетки при старении.
Вещество, активирующее репарацию ДНК, по нашему мнению, может проявлять геропротекторные свойства, или, по крайней мере, быть средством, улучшающим качество жизни пожилых пациентов. Однако влияние 8-oxo-dG на активность OGG-1 in vitro еще не доказывает его способность активировать репарацию ДНК в живой клетке. Вместе с тем, выполняя исследования на организменном уровне, также нельзя однозначно определить, вызвано уменьшение содержания 8-oxo-dG в ДНК прямым влиянием на репарацию или причиной его является, например, системное подавление окислительного стресса, связанное с уменьшением воспалительной активности иммунных клеток. Наиболее показательно в такой ситуации тестирование соединения на клеточной культуре. Оно и было нами проведено.
При исследовании влияния экзогенного 8-oxo-dG в различных концентрациях на пролиферацию клеток не было обнаружено никакого цитотоксического либо митогенного эффекта. Это касалось как «молодых» (5-суточных), так и «старых» (17-19-суточных) культур. При этом хроматографическое измерение динамики концентрации 8-oxo-dG в среде показало, что при инкубации с клетками содержание вещества уменьшается в два раза за первые 8 ч с момента его внесения. Таким образом, клетки взаимодействуют с экзогенным 8-oxo-dG, либо поглощая, либо разрушая его. Однако убывание концентрации наблюдается только в первые сутки инкубации, после чего она стабилизуется на постоянном уровне на длительный срок. Здесь нужно отметить, что эксперименты проводились на достигшей стационарной фазы культуре и нельзя связать подобную динамику с тем, что 8-oxo-dG поглощается делящимися клетками, в которых идет синтез ДНК, и не поглощается покоящимися. Природа «привыкания» к внесенному в среду 8-oxo-dG пока не ясна. Стоит еще раз указать, что при этом 8-oxo-dG не вызывает никаких изменений в пролиферативной активности и морфологии клеток, а также не влияет на выживаемость «старых» клеток.
При исследовании изменений уровней окисления гуанина в ДНК, РНК и свободных нуклеотидах на «молодых» (5-суточных) клетках никакого влияния экзогенного 8-oxo-dG на содержание окисленного гуанина в ДНК и РНК не было выявлено. Однако в «старых» (19-су-точных) клетках под действием экзогенного нуклеозида наблюдалось трехкратное снижение содержания окисленного 8-oxo-Guo в высокомолекулярной РНК и восьмикратное - в ДНК клеток. При этом у контрольных исследованных нами «старых» клеток содержание 8-oxo-dG превышало таковое для «молодых» (5-суточных) в 5-7 раз. Фактически, «старые» клетки, подвергнутые воздействию 8-oxo-dG, по уровню маркера окислительного повреждения ДНК соответствовали «молодым».
Из этого можно сделать вывод о том, что эффект 8-oxo-dG сильно зависит от пролиферативного статуса культуры. 8-Oxo-dG проявляет избирательность в отношении «старых» клеток, не действуя на «молодые». Эксперименты на «старой» клеточной культуре позволили выявить сокращение содержания 8-oxo-dG в ДНК под действием экзогенного 8-oxo-dG. Этот нуклеозид может обладать прямым антиоксидантным действием, претерпевая дальнейшее окисление. Однако зависимость эффекта от пролиферативного статуса культуры свидетельствует в пользу биохимического, а не химического механизма уменьшения содержания 8-oxo-dG в ДНК. Вероятнее всего, речь идет об активации OGG-1, и, возможно, иных ферментов репарации ДНК. Также нельзя исключить активацию ферментов антиок-сидантной защиты. Наблюдаемые эффекты открывают перспективы использования 8-oxo-dG в качестве лекарственного препарата, в том числе, в гериатрии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Невредимова Т.С., Мармий Н.В., Есипов Д.С. и др. 8-Оксо-2'-дезоксигуанозин - биомаркер окислительного стресса. Вестн. МИТХТ. 2014; 9 (5): 3-10.
2. Esipov D.S., Gorbacheva T.A., Khairullina G.A. et al. 8-C>xo-2'-deoxyguanosine accumulation in DNA from «stationary phase aging» cultured cells. Adv. Gerontol. 2008; 21 (3): 485-487.
3. Marmiy N.V., Esipov, D.S. Biological role of 8-oxo-2'-deoxyguanosine. Moscow Univ. Biol. Sci. Bull. 2015; 70 (4): 168-172.
4. Choi S., Choi H.H., Lee S.H. et al. Anti-inflammatory effects of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine on lipopolysaccharide-induced inflammation via Rac suppression in Balb/c mice. Free Radic. Biol. Med. 2007; 43 (12): 1594-1603.
5. Hajas G., Bacsi A., Aguilera-Aguirre L. et al. 8-Oxoguanine DNA glycosylase-1 links DNA repair to cellular signaling via the activation of the small GTPase Rac1. Free Rad. Biol. Med. 2013; 61: 384-394.
6. Kuchino Y., Mori F., Kasai H. et al. Misreading of DNA templates containing 8-hydroxydeoxyguanosine at the modified base and at adjacent residues. Nature. 1987. 327 (6117): 77-79.
REFERENCES
1. Nevredimova T.S., Marmiy N.V., Esipov D.S. et al. 8-Oxo-2'-deoxyguanosine as a biomarker of oxidative stress. Vestn. MITHT. 2014; 9 (5): 3-10.
2. Esipov D.S., Gorbacheva T.A., Khairullina G.A. et al. 8-dxo-2'-deoxyguanosine accumulation in DNA from «stationary phase aging» cultured cells. Adv. Gerontol. 2008; 21 (3): 485-487.
3. Marmiy N.V., Esipov, D.S. Biological role of 8-oxo-2'-deoxyguanosine. Moscow Univ. Biol. Sci. Bull. 2015; 70 (4): 168-172.
4. Choi S., Choi H.H., Lee S.H. et al. Anti-inflammatory effects of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine on lipopolysaccharide-induced inflammation via Rac suppression in Balb/c mice. Free Radic. Biol. Med. 2007; 43 (12): 1594-1603.
5. Hajas G., Bacsi A., Aguilera-Aguirre L. et al. 8-Oxoguanine DNA glycosylase-1 links DNA repair to cellular signaling via the activation of the small GTPase Rac1. Free Rad. Biol. Med. 2013; 61: 384-394.
6. Kuchino Y., Mori F., Kasai H. et al. Misreading of DNA templates containing 8-hydroxydeoxyguanosine at the modified base and at adjacent residues. Nature. 1987. 327 (6117): 77-79.
Сведения об авторах:
Мармий Наталья Владимировна - аспирант кафедры биоорганической химии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова. 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, биологический факультет МГУ. Телефон: 8 (963) 695-43-35. E-mail: marmiynv@gmail.com
Моргунова Галина Васильевна - научный сотрудник сектора эволюционной цитогеронтологии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова. 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, биологический факультет МГУ. Тел.: 8 (495) 939-15-90. E-mail: morgunova@mail.bio.msu.ru
Хохлов Александр Николаевич - заведующий сектором эволюционной цитогеронтологии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова. 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, биологический факультет МГУ. Тел.: 8 (495) 939-15-90. E-mail: khokhlov@mail.bio.msu.ru
About the authors:
Marmiy Natalia Vladimirovna - PhD student, Department of Bioorganic Chemistry, School of Biology, Lomonosov Moscow State University, Moscow. School of Biology, Lomonosov Moscow State University, 1-12 Leninskiye Gory, Moscow, 119234. Phone: 8 (963) 695-43-35. E-mail: marmiynv@gmail.com
Morgunova Galina Vasil'evna - Associate Researcher, Evolutionary Cytogerontology Sector, School of Biology, Lomonosov Moscow State University, Moscow. Address: School of Biology, Lomonosov Moscow State University, 1-12 Leninskiye Gory, Moscow, 119234. Phone: 8 (495) 939-15-90. E-mail: morgunova@mail.bio.msu.ru
Khokhlov Alexander Nikolaevich - Head of Evolutionary Cytogerontology Sector, School of Biology, Lomonosov Moscow State University, Moscow. School of Biology, Lomonosov Moscow State University, 1-12 Leninskiye Gory, Moscow, 119234. Phone: 8 (495) 939-15-90. E-mail: khokhlov@mail.bio.msu.ru
СООТНОШЕНИЕ ВАРИАНТОВ РЕМОДЕЛИРОВАНИЯ МИОКАРДА ЛЕВОГО ЖЕЛУДОЧКА И ЕГО ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОГО ФИБРОЗИРОВАНИЯ В ОЦЕНКЕ ПРОГНОЗА БОЛЬНЫХ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА
Н.В. Медведев, Н.К. Горшунова
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Для оценки выраженности ремоделирования левого желудочка, его интерстициальной перестройки установлены преобладающие типы геометрии миокарда, рассчитана объемная фракция интерстициального коллагена (ОФИК) в миокарде, исследованы маркеры фиброзирования у больных артериальной гипертонией и практически здоровых лиц пожилого возраста. Установлено, что АГ приводила к преимущественно прогностически неблагоприятным типам концентрического ремоделирования и концентрической гипертрофии левого желудочка, повышению активности маркеров фиброзирования и увеличению ОФИК, свидетельствующих о прогрессировании заболевания.
Ключевые слова: пожилой возраст, ремоделирование левого желудочка, маркеры фиброзирования
CORRELATION OF THE LEFT VENTRICULAR MYOCARDIAL REMODELING AND ITS INTERSTITIAL FIBROSIS IN THE EVALUATION PROGNOSIS OF ELDERLY PATIENTS WITH ARTERIAL HYPERTENSION N.V. Medvedev, N.K. Gorshunova
Kursk State Medical University, Kursk, Russia
For assessment the severity of the left ventricle remodeling and its interstitial reconstruction, the prevailing types of myocardial geometry were established, the volume fraction of interstitial collagen was calculated in the myocardium, the markers of fibrosis in 172 patients with arterial hypertension and 52 practically healthy elderly persons were studied. It was established that AH led to predominantly prognostically unfavorable types of concentric remodeling and concentric hypertrophy of the left ventricle, an increase in the activity of fibrosing markers indicating on the progression of the disease.
Key words: elderly age, remodeling of the left ventricle, markers of fibrosis
Ремоделирование миокарда левого желудочка (ЛЖ) на фоне широко распространенной в популяции пожилого возраста артериальной гипертонии представляет собой значимый прогностический фактор сердечно-сосудистого континуума [1]. Определение характера ремоделирования миокарда ЛЖ и его сопоставления с выраженностью изменений в интерстициальном пространстве играет важную роль в оценке тяжести поражения сердца как органа-мишени на фоне артериальной гипертонии и в определении прогноза заболевания [2,3].
Цель исследования - определить сопряженность интерстициального фиброза миокарда с разными типами геометрического ремо-делирования левого желудочка у практически здоровых людей и больных артериальной гипертонией пожилого возраста.
Материалы и методы исследования. В группу обследования были включены 172 больных артериальной гипертонией II-III стадии пожилого возраста (средний возраст - 68,3 ± 1,8 года), вошедших в основную группу, и 52 человека аналогичного возраста, не имеющих верифицированных сердечно-сосудистых заболеваний и составивших группу сравнения. Оценка типа ремоделирования ЛЖ проводилась по классификации A. Ganau et al., в модификации R.B. Devereux et al. [1992]. Диагностировали нормальную геометрию (НГ) и дополнительные геометрические модели сердца - изолированную гипертрофию МЖП (ИГ МЖП), изолированную гипертрофию ЗСЛЖ (ИГЗСЛЖ), а также концентрическое ремоделирование (КРЛЖ) и концентрическую гипертрофию (КГЛЖ), признаваемые прогностически наиболее неблагоприятными (Verdecchia P., 1997). Объемную фракцию интерстициального коллагена (ОФИК) в миокарде рассчитывали по формуле, предложенной J. Shirani et. al. (1992) [4]. Определение сывороточного уровня маркеров фиброзирования: трансформирующего фактора роста фибробластов р-1 (TGF-p1), проматриксной металлопротеиназы - 1 типа (PRO-MMP1) и ее тканевого ингибитора (TIMP1) выполнено с помощью иммуноферментного анализа. Статистический анализ полученных результатов проведен с помощью параметрических методов описательной статистики в программах MS Excel (2007) и Statistica 6.0. Достоверность различий между сравниваемыми группами оценена по критерию Стьюдента при p < 0,05. Статистическую сопряженность исследуемых показателей оценивали по критерию х2.
Результаты и их обсуждение. Для оценки выраженности возраст-ассоциированных особенностей ремоделирования миокарда и его интерстициального фиброзирования определены их маркеры у пожилых людей без подтвержденной сердечно-сосудистой патологии (табл. 1).
Таблица1
Маркеры интерстициального фиброзирования миокарда и системного коллагеногенеза практически здоровых лиц пожилого возраста с разными типами геометрии миокарда левого желудочка
Показатель Тип геометрии левого желудочка
НГЛЖ (n = 28) ИГ МЖП (n = 11) КРЛЖ (n = 13)
1 2 3
ОФИК, % 2,2 ± 0,3 2,9 ± 0,45 3,8 ± 0,5
p1-3 < 0,01
TGF-P 1, пг/мл 158,5 ± 12,1 176,8 ± 13,3 203,5 ± 18,4
p1-3 < 0,05
PRO-MMP1, нг/мл 10,7 ± 1,1 12,8 ± 1,5 16,9 ± 1,7
p1-3 < 0,05
TIMP1, пг/мл 216,6 ± 27,3 265,8 ± 30,5 326 ± 38,9
