CC BY
5УДК 36:611.36:636:612.11/.12
Т. С. Денисенко Denisenko T. S.
ВЛИЯНИЕ ДИМИКАРА НА ДИНАМИКУ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИХ ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ
DIMIKAR INFLUENCE ON THE DYNAMICS OF BLOOD PARAMETERS CHARACTERIZING THE FUNCTIONAL STATE OF LIVER
Представлены результаты исследования влияния нового препарата «Димикар» на лабораторные показатели крови кроликов, имеющие значение в функциональной диагностике состояния печени. Установлено, что однократное внутримышечное применение препарата в терапевтической дозе положительно отражается на динамике основных параметров печеночного метаболизма, а применение антиокси-дантных препаратов с профилактической целью животным может послужить одним из компонентов в комплексе ветеринарных мероприятий, направленных на борьбу с гепато-патиями.
Ключевые слова: кролики, печень, антиоксидантный препарат, обменные процессы, профилактический эффект.
The article presents the results of a study of the impact of the new drug «Dimikar» for laboratory parameters of rabbits' blood, which is important in the diagnosis of the functional state of the liver. We found that a single intramuscular application of the drug in therapeutic dose has a positive effect on the dynamics of the main parameters of hepatic metabolism and the preventive use of antioxidant drugs to animals can serve as one component in a complex of veterinary actions aimed at the fight against hepatopathies.
Key words: rabbits, liver, antioxidant product, metabolic processes, preventive effect.
Денисенко Татьяна Сергеевна -
аспирант кафедры терапии и фармакологии
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный
аграрный университет»
г. Ставрополь
Тел.: 8-963-381-31-83
E-mail: chernova_ts@mail.ru
В настоящее время считается, что клиническому или субклиническому течению печеночных заболеваний подвержены более 30 % животных, а их прогрессирование приводит к развитию тяжелых патологических процессов в организме. Большинство гепатопатологий протекает длительное время скрыто, так как симптомы печеночной недостаточности проявляются только при поражении около 70 % ткани органа. В результате нарушения деятельности печени в организме наступает энергетический дисбаланс, развивается интоксикация, снижается иммунологическая резистентность и нарушается обмен веществ [1, 2, 3].
Развитие и течение заболеваний печени тесно связано с функционированием системы антиоксидантной защиты гепатоцитов. Начальные этапы запуска реакции генерации активных форм кислорода при различных патологических состояниях могут отличаться, но уже на следующих этапах направленность и интенсивность свободнорадикальных процессов теряют свою специфичность и зависят от состояния и степени мобилизации антиоксидантной защиты [4].
На сегодняшний день доказано, что свобод-норадикальная патология выступает в качестве одного из этиопатогенетических факторов развития гепатопатий и целесообразным может
Denisenko Tatiana Sergeevna -
Postgraduate student at the Department of Therapy and Pharmacology
FSBEI HE «Stavropol State Agrarian University» Stavropol
Tel.: 8-963-381-31-83 E-mail: chernova_ts@mail.ru
оказаться профилактическое применение ан-тиоксидантных препаратов с целью предупреждения болезней печени [2, 5]. Исходя из этого разработка современных антиоксидантных средств для животных и регламента их применения с лечебно-профилактической целью при различных заболеваниях внутренних органов является актуальной задачей ветеринарной науки и практики.
Целью данного исследования было изучение влияние нового антиоксидантного препарата «Димикар» на лабораторные показатели крови кроликов, которые характеризуют функциональное состояние и метаболические процессы в печени.
Препарат «Димикар» [5] разработан в Ставропольском государственном аграрном университете на кафедре терапии и фармакологии. Препарат представляет собой водный раствор светло-коричневого цвета, без запаха, обладает выраженным антиоксидантным действием. Для изучения его влияния на показатели крови сформировали две группы кроликов в возрасте 4-5 месяцев по 20 в каждой. Животные содержались в условиях вивария с естественным световым режимом, осуществлялось полнорационное кормления в соответствии с действующим ГОСТом [6]. Кроликам первой группы вводили димикар внутримышечно однократно в дозе 3,4 мг/кг. Животные второй
в
Ветеринария
35
группы препаратов не получали и служили контролем. Контрольное взвешивание и получение крови для исследования проводили до введения препарата, через 5, 10, 20 и 30 суток после введения димикара. Взятие крови осуществляли при помощи вакуумных систем из ушной вены. В крови и сыворотке кроликов исследовали гематологические (гемоглобин, эритроциты и лейкоциты) и биохимические показатели: общий белок и соотношение его фракций, аспартаминотрансфераза (АсАТ), аланинами-нотрансфераза (АлАТ), щелочная фосфата-за, гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ), общий билирубин, глюкоза, холестерин, креатинин и мочевина. Статистический анализ цифрового материала проводили с помощью пакета статистических и прикладных программ «STATISTICA 6.0» (Stat-Soft Inc., США).
В результате проведения гематологических исследований установлено, что через 10 суток после введения препарата количество гемоглобина в первой группе увеличилось на 6,81 %, затем содержание данного показателя крови стало снижаться до 1,62 % (табл. 1). Если рассматривать динамику гемоглобина за весь период эксперимента, то можно отметить, что положительной она была в опытной группе, где общее увеличение составило 5,08 %, а в контрольной группе уровень гемоглобина практически не изменился.
На 5-й день исследований после введения димикара в пробах крови животных из первой группы регистрировали увеличение количества эритроцитов на 8,23 %, а во второй - всего на 0,39 %. При анализе результатов исследований на 30-е сутки после введения препарата в первой группе количество эритроцитов увеличилось на 6,63 %, а в контрольной - на 0,59 % относительно значений, полученных в начале эксперимента.
Количество лейкоцитов в первой группе после введения димикара постепенно уменьшалось, к концу опыта общее снижение составило 3,26 %, в контрольной группе, наоборот, - данный показатель увеличился на 1,01 % соответственно.
Динамика уровня общего белка характеризовалась снижением данного показателя в контрольной группе (табл. 2). Через 5 суток после введения препарата в опытной группе данный показатель увеличился на 8,39 %, на 20-е сутки - снизился на 1,72 %, на 30-е сутки - еще на 1,31 % соответственно. За весь период эксперимента уровень общего белка в первой группе увеличился на 5,12 %, а во второй группе - снизился на 1,73 %.
Для определения состояния и функционирования печени провели биохимическое исследование крови (табл. 3). На 10-й день наблюдения после введения препарата активность аспар-татаминотрансферазы в первой группе уменьшилась на 19,98 %, а во второй группе, наоборот, - увеличилась на 6,46 %. На 30-е сутки было зафиксировано уменьшение АсАТ еще на 18,73 %, в то время как в контрольной группе произошло дальнейшее увеличение фермента еще на10,09 %.
Активность аланинаминотрансферазы на 10-е сутки после введения димикара в опытной группе уменьшилась на 13,76 %, а в контрольной - возросла на 5,01 %. За весь период эксперимента активность АлАТ в первой группе снизилась на 22,71 %, а во второй группе - увеличилась на 18,11 % соответственно. Основным расчетным индикатором, характеризующим обмен аминотрансфераз, является коэффициент де Ритиса. Действие препарата положительно отразилось на его динамике у животных, которая была направлена на стабилизацию и нормализацию показателей трансаминирования.
Таблица 1 - Гематологические показатели крови кроликов (n=20)
Группа Гемоглобин, г/л Эритроциты, 1012/л Лейкоциты, 109/л
До введения димикара
Опыт 104,3±5,6 4,98±0,25 7,05±0,34
Контроль 103,8±5,1 5,05±0,27 6,96±0,29
Через 5 суток после введения димикара
Опыт 110,8±6,0 5,39±0,28 6,78±0,27
Контроль 104,2±5,3 5,14±0,31 6,94±0,30
Через 10 суток после введения димикара
Опыт 111,4±5,8 5,50±0,34 6,81±0,24
Контроль 104,0±5,1 5,18±0,27 6,97±0,28
Через 20 сутки после введения димикара
Опыт 110,7±5,3 5,43±0,28 6,85±0,32
Контроль 105,1±4,9 5,12±0,25 7,01±0,27
Через 30 суток после введения димикара
Опыт 109,6±5,1 5,31±0,29 6,82±0,34
Контроль 104,3±4,8 5,08±0,26 7,03±0,29
Таблица 2 - Показатели белкового обмена у кроликов (п=20)
Группа Общий белок, г/л Белковые фракции, %
Альбумины Глобулины
а в У
До введения димикара
Опыт 64,4±3,82 57,5±2,98 11,2±0,57 11,5±0,59 17,8±1,02
Контроль 63,6±3,26 58,0±2,76 11,6±0,60 12,3±0,64 18,4±1,05
Через 5 суток после введения димикара
Опыт 69,8±3,84 59,2±3,21 11,6±0,59 11,8±0,62 18,0±0,98
Контроль 63,3±2,83 57,5±2,89 11,3±0,56 12,1±0,66 19,8±1,07
Через 10 суток после введения димикара
Опыт 69,3±4,16 60,3±3,35 11,4±0,56 11,6±0,60 18,2±1,01
Контроль 63,8±3,27 57,9±2,96 11,5±0,60 12,4±0,65 19,2±1,04
Через 20 сутки после введения димикара
Опыт 68,6±4,02 61,0±3,14 11,8±0,62 11,9±0,61 17,7±0,92
Контроль 63,2±2,95 58,1±2,88 11,2±0,58 12,2±0,64 19,6±1,06
Через 30 суток после введения димикара
Опыт 67,7±4,13 60,4±3,26 12,1±0,64 12,0±0,62 18,3±0,97
Контроль 62,5±3,08 57,6±2,93 10,8±0,56 11,7±0,59 20,4±1,10
Таблица 3 - Активность ферментов в крови кроликов (п=20)
Группа АсАТ, ед/л АлАТ, ед/л Коэффициент де Ритиса Щелочная фосфатаза, ед/л ГГТ, ед/л
До введения димикара
202,2±10,1 110,5±5,5 1,83±0,09 58,23±2,93 5,41±0,17
Контроль 196,5±9,8 103,8±5,2 1,89±0,10 58,89±2,96 5,34±0,18
Через 5 суток после введения димикара
Опыт 187,6±9,4 105,4±5,1 1,78±0,09 57,54±2,90 5,34±0,20
Контроль 213,1±10,7 114,2±5,7 1,87±0,10 62,06±3,09 5,52±0,22
Через 10 суток после введения димикара
Опыт 161,8±8,1* 95,3±4,8 1,70±0,09 58,10±3,12 5,46±0,19
Контроль 209,2±10,5 109,0±5,5 1,92±0,11 65,43±3,29 5,67±0,25
Через 20 сутки после введения димикара
Опыт 144,3±7,2* 89,1±4,5* 1,62±0,08* 58,46±2,94 5,55±0,21
Контроль 228,5±11,4 120,2±6,0 1,90±0,11 66,24±3,33 6,12±0,27
Через 30 суток после введения димикара
Опыт 131,5±6,6* 85,4±4,3* 1,54±0,08* 58,94±2,96 5,52±0,21
Контроль 230,3±11,5 122,6±6,1 1,88±0,10 67,98±3,41 6,43±0,22
*р<0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с данными контрольной группы.
Динамика содержания щелочной фосфата-зы в крови кроликов из первой группы практически не изменялась, а в контрольной группе в конце опыта произошло увеличение на 15,44 %. Возрастание ее активности на фоне незначительного повышения активности аспартатами-нотрансферазы и аланинаминотрансферазы может свидетельствовать о функциональных осложнениях в печени [7].
После применения димикара активность глу-тамилтрансферазы в первой группе оставалась практически на первоначальном уровне, а во второй группе происходило ее постепенное увеличение, которое за период исследования составило 20,41 %.
Изменение уровня глюкозы в опытной и контрольной группах является подтверждени-
ем того, что введение димикара положительно действует на обмен веществ (табл. 4). Через 5 суток после введения препарата в первой группе уровень глюкозы увеличился на 2,71 %, а во второй группе - снизился на 2,62 %. Далее динамика содержания данного показателя углеводного обмена продолжала оставаться аналогичной. Если рассматривать изменение уровня глюкозы за весь период эксперимента, то в первой группе он возрос на 9,05 %, а во второй, наоборот, - уменьшился на 8,95 %.
Уровень общего билирубина и холестерина в опытной группе уменьшался, в то время как в контрольной группе происходило увеличение данных показателей. Концентрация общего билирубина в первой группе через 5 и 20 суток после введения димикара уменьшилась на 0,93 и
в
Ветеринария
37
1,18 % соответственно. Количество холестерина на 5-е и 20-е сутки после введения препарата в опытной группе снизилось на 4,76 и 3,75 %. Если рассматривать изменения данных показателей крови на 30-й день наблюдений, то можно отметить, что уровень общего билирубина и холестерина в первой группе был ниже на 7,38 и 15,38 %, чем в контроле, соответственно.
Изменения концентрации креатинина в крови животных характеризовались уменьшением его содержания в крови кроликов из опытной группы на 1,76 % и увеличением в контрольной - на 0,77 %. За весь период эксперимента концентрация мочевины в первой группе снизилась на 21,04 %, а во второй группе возросла на 5,05 % соответственно. Проявление печеночной недостаточности вполне может иметь место как симптом почечной недостаточности [8], поэтому мы считаем важным проведение наблюдений относительно динамики креатинина и мочевины.
Результаты контрольного взвешивания животных свидетельствуют о положительной динамике прироста массы тела (табл. 5). Через 5 суток после введения димикара масса кроликов из первой группы была выше на 1,89 %, чем во второй группе. Аналогичная динамика была при последующих взвешиваниях животных: че-
рез 10 дней после введения препарата в опытной группе масса тела увеличилась на 2,42 % в сравнении с контрольной группой, а через 20 дней - на 3,97 % соответственно. В завершение эксперимента масса тела кроликов из первой группы была больше, чем у животных из второй группы, на 5,58 %.
Таким образом, можно сделать вывод, что однократное внутримышечное применение нового антиоксидантного препарата «Димикар» кроликам в терапевтической дозе 3,4 мг/кг положительно отражается на динамике показателей крови, характеризующих функциональное состояние печени. Его введение способствовало нормализации стабилизации гематологических показателей и оптимизации процессов транса-минирования у животных, а также приводило к нормализации уровня белков и глюкозы и некоторых продуктов обмена. В опыте установлено, что использование димикара позволило добиться увеличения прироста живой массы у опытных животных в сравнении с контрольными. На основании анализа результатов проведенного эксперимента можно судить о том, что использование антиоксидантных препаратов целесообразно применять для нормализации печеночного метаболизма с профилактической целью.
Таблица 4 - Биохимические показатели крови у кроликов (п=20)
Группа Общий билирубин, мкмоль/л Глюкоза, ммоль/л Холестерин, моль/л Креатинин, ммоль/л Мочевина, ммоль/л
Норма 3,4-8,5 4,16-5,27 0,3-2,1 44,2-141,4 2,3-6,6
До введения димикара
Опыт 4,28±0,22 4,42±0,22 1,68±0,09 55,80±2,81 4,42±0,33
Контроль 4,17±0,21 4,58±0,23 1,55±0,07 56,14±2,85 4,16±0,30
Через 5 суток после введения димикара
Опыт 4,24±0,21 4,54±0,23 1,60±0,08 55,13±4,34 3,79±0,36
Контроль 4,25±0,22 4,46±0,22 1,62±0,09 56,36±3,80 4,38±0,31
Через 10 суток после введения димикара
Опыт 4,21±0,21 4,69±0,23 1,57±0,08 54,75±4,68 3,57±0,34
Контроль 4,36±0,23 4,38±0,22 1,69±0,09 56,64±4,19 4,51±0,40
Через 20 сутки после введения димикара
Опыт 4,19±0,21 4,73±0,24 1,54±0,07 54,48±4,82 3,36±0,39
Контроль 4,48±0,24 4,27±0,22 1,75±0,10 56,50±4,35 4,43±0,36
Через 30 суток после введения димикара
Опыт 4,20±0,21 4,82±0,24* 1,56±0,08 54,82±5,80 3,49±0,37
Контроль 4,51±0,25 4,17±0,21 1,80±0,10 56,57±5,15 4,37±0,42
*р<0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с данными контрольной группы.
Таблица 5 - Динамика массы тела кроликов (п=20)
Группа Масса тела, г
До введения димикара После введения димикара
Через 5 суток Через 10 суток Через 20 суток Через 30 суток
Опыт 1462,3±73,1 1576,2±78,8 1700,9±85,0 1933,1±96,7 2209,6±110,5
Контроль 1438,9±71,9 1546,4±77,3 1659,8±83,1 1856,3±92,8 2086,3±104,3
Литература
1. Авдеенко В. С., Молчанов А. В., Булатов Р. Г. Применение антиоксидантных препаратов для профилактики гестоза суяглых овец // Овцы, козы, шерстяное дело. 2016. № 1. С. 54-56.
2. Антиоксидантная профилактика синдрома «кетоз-гестоз» у беременных коров / В. С. Авдеенко, С. Н. Бабухин, И. И. Калюжный [и др.] // Инфекционные болезни животных и антимикробные средства : сб. науч. тр. 2016. С. 3-7.
3. Диагностическое значение биохимических показателей крови при гепатопатологи-ях / Е. В. Кузьминова, М. П. Семененко, Е. А. Старикова, Т. В. Михалева // Ветеринария Кубани. 2013. № 5. С. 11-13.
4. Карпова Е. А., Ильина О. П. Коэффициент окислительного стресса при патологии печени и применении нового нанокомпозит-ного препарата селена // Вестник ИргСХА. 2014. № 61. С. 88-94.
5. Пат. 2619342 Российская Федерация, МПК А 61 К31/03, А 61 К 31/095, А 61 Р 37/04, А 61 Р 39/06. Препарат для профилактики и лечения свободнорадикальной патологии у животных / Т. С. Денисенко, И. В. Киреев, В. А. Оробец, В. А. Беляев ; заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО Ставропольский государственный аграрный университет. № 2016106564; заявл. 24.02.2016; опубл. 15.05.2017, Бюл. № 14. 24 с.
6. ГОСТ Р 50258-92. Комбикорма полнорационные для лабораторных животных. Технические условия / Введ. 1994.01.01. М. : Изд-во стандартов, 1992. 8 с.
7. Щекотова А. П., Булатова И. А., Ройт-ман А. П. Чувствительность и специфичность определения гиалуроновой кислоты, коэффициента де Ритиса и ва-скулоэндотелиального фактора роста для диагностики хронического гепатита и цирроза печени // Пермский медицинский журнал. 2013. Т. 30, № 4. С. 84-90.
8. Различные формы большой печеночной недостаточности: клинические особенности и исходы / А. И. Казаков, С. В. Плюс-нин, А. П. Васильев [и др.]// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2008. Т. 18, № 2. С. 1827.
References
1. Avdeenko V. S., Molchanov V. A., Bulatov R. G. Application of antioxidant drugs for prevention of preeclampsia in-lamb sheep // Sheep, goats, wool business. 2016. № 1. P. 54-56.
2. Antioxidant prevention of the syndrome of «ketosis-gestosis» in pregnant cows / V. S. Avdeenko, S. N. Baburin, I. I. Kalyuzhny [et al.] // Infectious diseases of animals and antimicrobials: collection of scientific papers. 2016. P. 3-7.
3. Diagnostic value of biochemical parameters of blood in hepatopathology / E. V. Kuzminova, M. P. Semenenko, E. A. Starikova, T. V. Mikhaleva // Veterinary of Kuban. 2013. № 5. P. 11-13.
4. Karpova E. A., Ilyina O. P. Coefficient of oxidative stress in liver pathology and application of new nano-composite preparation of selenium // Bulletin of Irkutsk State Agricultural Academy. 2014. № 61. P. 88-94.
5. Pat. 2619342 the Russian Federation, IPC A 61 K 31/03, A 61 K 31/095, A 61 P 37/04, 61 P 39/06. Drug for the prevention and treatment of free radical pathology in animals / Denisenko T. S., I. V. Kireyev, V. A. Orobets, V. A. Belyaev ; applicant and patent holder Stavropol State Agrarian University. № 2016106564 ; declared 24.02.2016 ; published 15.05.2017, Bulletin № 14. 24 p.
6. GOST (All Union Standard) R 50258-92. Compound feeds for laboratory animals. Specifications / 1994.01.01. M. : publishing house of standards, 1992. 8 p.
7. Shchekotova A. P., Bulatova I. A., Roitman A. P. Sensitivity and specificity of hyaluronic acid, the AST/ALT ratio and vascular endothelial growth factor for the diagnosis of chronic hepatitis and liver cirrhosis // Perm Medical Journal. 2013. Vol. 30. № 4. P. 84-90.
8. Various forms of large liver failure: clinical features and outcomes / A. I. Kazakov, S. V. Plyusnin, A. P. Vasilev [et al.] // Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology. 2008. V. 18. № 2. P. 18-27.
