CC BY
116
УДК 616-092.9:615.322:582.711
ВЛИЯНИЕ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ЛАБАЗНИКА ШЕСТИЛЕПЕСТНОГО НА БАРОРЕФЛЕКТОРНУЮ РЕГУЛЯЦИЮ АРТЕРИАЛЬНОГО ДАВЛЕНИЯ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА
© Сухомлинов Ю.А., Покровский М.В., Конопля А.И., Бачинский О.Н.
НИИ экологической медицины, кафедра фармакологии, кафедра фармакогнозии и ботаники,
Курского государственного медицинского университета, Курск
E-mail: main@kgmu.kursknet.ru
Известно, что стресс играет значительную роль в происхождении и развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Выраженность нарушений, развивающихся после стрессорного воздействия, а также частота связанных с этим патологических процессов определяют актуальность поиска средств эффективной коррекции данных расстройств. В результате проведенного исследования экспериментально обоснована возможность коррекции постстрессорных нарушений регуляции кардиореспираторной гемодинамики и функционирования сердечно-сосудистой системы путем применения дигидрокверцетина и настоя цветков лабазника шестилепестного. Полученные экспериментальные данные о стресспротективном действии дигид-рокверцетина и биологически активных соединений лабазника шестилепестного служат основанием для дальнейшего исследования кардиопротекторных средств растительного происхождения, содержащих анти-оксидантные флавоноиды.
Ключевые слова: дигидрокверцетин, лабазник шестилепестный, барорефлекторная регуляция, стрес-спротективное действие.
THE EFFECT OF DEHYDROQUERCETINE AND BIOLOGICALLY ACTIVE COMPOUNDS OF FILIPENDULA HEXAPETALA GILIB. ON THE BAROREFLEX REGULATION OF BLOOD
PRESSURE IN STRESS CONDITIONS Sukhomlinov Yu.A., Pokrovsky M.V., Konoplya A.I., Bachinsky O.N.
SRI of Ecological Medicine, Pharmacology Department, Pharmacognosy & Botany Department
of the Kursk State Medical University, Kursk
Stress is known to play an important part in the origin and development of cardiovascular diseases. The expressiveness of disturbances following stress exposure as well as the incidence of the associated pathological processes determine the topicality of the quest for means of effective correction of the given disorders. As a result of the conducted research we have experimentally grounded the possibility of the correction of post-stress disorders in the regulation of the cardio-respiratory hemodynamics and the functioning of the cardiovascular system through administering Dihydroquercetine and the infusion of Filipendula hexapetala Gilib. flowers. The experimental findings concerning the stress-protective action of Dihydroquercetine and biologically active compounds of Filipendula hexapetala Gilib. may be used as a basis for further investigation of cardioprotective agents of vegetable origin containing antioxidant flavanoids.
Key words: Dihydroquercetine, Filipendula hexapetala Gilib., baroreflex regulation, stress-protective action.
Природные лекарственные средства, в том числе и фитопрепараты, используются достаточно широко в современной медицине. Большинство из них рассматриваются как биорегуляторы в широком понимании, регулирующие функцию иммунной, сердечнососудистой, дыхательной и других систем организма [5]. Однако в современных условиях, характеризующихся значительным действием на организм разнообразных стрессов и патогенов, необходимы средства сильного и
целенаправленного действия. Для наиболее эффективного использования лекарственных растений и препаратов на их основе необходимо проведение комплексных клиникоэкспериментальных научно-исследовательских работ с целью обоснования роли и практической значимости фитопрепаратов, а также расширения показаний для их клинического применения.
Одним из актуальных направлений современной фармакологии является поиск ци-
топротекторов из малотоксичных продуктов растительного происхождения, содержащих активные фитофлавоноидные комплексы, обладающих стресспротективными свойствами и способных корригировать постстрессорные дезадаптивные гемодинамические реакции -факторы риска сиартериальной гипертензии, острого коронарного синдрома и т.д.
Цель исследования - определение влияния дигидрокверцетина и биологически активных соединений лабазника шестилепестного на барорефлекторную регуляцию артериального давления в условиях стресса.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В качестве объектов изучения были выбраны дигидрокверцетин - официнальный препарат на основе комплекса фитофлавоно-идов, выделенных из измельченной древесины лиственницы даурской и лиственницы сибирской, а также лабазник шестилепестный (Filipendula hexapetala G.), содержащий высокое количество флавоноидов и имеющий значительную сырьевую базу в ЦентральноЧерноземном регионе России.
Исследования проведены на крысах Ви-стар массой 160-220 г. В опытах использовались животные, прошедшие карантинный режим вивария Курского государственного медицинского университета и не имевшие внешних признаков каких-либо заболеваний. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Экспериментальные группы формировали из 10 крыс и рандомизировали по весу. В исследуемые группы животных: контрольная
группа, экспериментальная группа с моделированием стресса и две группы, получавших исследуемые средства и подвергшихся стрес-сорному воздействию, входили крысы-самцы одного возраста, полученные из питомника одновременно. Все исследования проводили в одно и то же время суток.
Для исследования фармакологических эффектов дигидрокверцетина были использованы таблетки "Капилар" (Сертификат МЗ РФ РУ №001848. Р.634.; ТУ 9354-00117664661-10) с содержанием дигидрокверце-тина, основного действующего вещества данного препарата - 10 мг. Введение водной
взвеси таблеток "Капилар" производили внутрижелудочно в течение 14 дней в дозах 20 и 40 мг (в расчете на дигидрокверцетин) на 1 кг массы тела животного.
Для исследования фармакологического действия цветков лабазника шестилепестного (ЛШ) из растительного сырья готовили водный настой по методу Государственной фармакопеи XI издания [1]. Доза лекарственного растительного сырья, вводимого крысам, рассчитывалась согласно "Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" [6]. Согласно дизайну исследования использовались две дозировки настоя в пересчете на сухое вещество - 2,4 г и 4,8 г на 1 кг веса экспериментальных животных. Указанные дозы настоя вводили внутрижелудочно в объеме 1 мл на 100 г массы тела животного в течение 14 дней.
Острый эмоционально-иммобилизацион-ный стресс воспроизводили по методике Г.В. Ковалева, путем подвешивания крыс за дорсальную складку кожи на 24 часа напротив друг друга (14 день получения препаратов) [2]. О повреждающем действии судили по результатам исследования функционального состояния миокарда и барорецепторной системы, подтверждая стрессорное воздействие морфологическими критериями при исследовании слизистой оболочки желудка, надпочечников и кардиомиоцитов.
Исследование чувствительности барорефлекса в контроле и после моделирования патологии проводили у наркотизированных крыс. Артериальное давление (АД) измеряли прямым методом путем катетеризации аорты посредством датчика P23ID "Gould" США, АЦП L-154 и компьютерной программы "Bioshell", регистрировались показатели гемодинамики - систолическое АД (САД), диастолическое АД (ДАД), частота сердечных сокращений (ЧСС), общепринятым методом вычислялось среднее артериальное давление (СрАД) - СрАД=ДАД+ 1/3(САД-ДАД) [3].
Исследование сосудистого компонента барорефлекса основывалось на анализе изменения АД ответ на проводимые в определенной последовательности пробы:
• Проба с одновременным растяжением и пережатием сонных артерий путем поднятия лигатуры.
• Ортостатическая проба (перемещение крысы из горизонтального положения в вертикальное - угол наклона не менее 450) [4].
Исследование кардиохронотропного компонента барорефлекса (КХТКБР) - количественной характеристики, отражающей состояние регуляции системной и внутрисер-дечной гемодинамики, основывалось на анализе рефлекторного изменения ЧСС при кратковременном повышении АД в момент внутривенного введения мезатона в дозе
0,003 мг/кг. Величина КХТКБР рассчитывалась как отношение амплитуды динамики ЧСС к величине среднего АД при их непрерывной регистрации с учетом времени реактивности показателей в мс [4].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Моделирование эмоционально-иммобили-зационного стресса у экспериментальных животных вызвало развитие гемодинамических нарушений, вследствие постстрессорного истощения симпато-адреналовой системы и развития повреждения миокарда, а также выраженные морфологические изменения в слизистой оболочке желудка, ткани надпочечников, миокарде (многочисленные линейные эрозии в слизистой оболочке желудка, венозное полнокровие мозгового вещества и расширение капилляров коркового вещества надпочечников, признаки контрактурых повреждений кардиомиоцитов в виде их поли-хромазии и т.д. ).
Значения САД, ДАД и среднего артериального давления в экспериментальной группе составили 113,1±5,8 мм рт.ст., 92,1±3,9 мм рт.ст. и 99,2±4,4 мм рт.ст. и были достоверно ниже, чем показатели у интактных животных: 139,2±5,9, 106,8±5,1 мм рт.ст. и 117,8± 5,7 мм рт.ст. для САД, ДАД и СрАД соответственно. ЧСС в результате моделирования стресса также достоверно снижалась -281,2±9 уд./мин, по сравнению с контрольными животными - 322,5±10 уд./мин. Проведение ортостатического теста и пробы с растяжением и пережатием сонных артерий выявило значительное снижение амплитуды колебаний основных гемодинамических показателей на фоне стресса, как маркера дисфунк-
ции адаптационных возможностей регуляции сердечно-сосудистой системы.
Применение дигидрокверцетина в дозах 20 и 40 мг/кг и настоя цветков ЛШ в дозах 2,4 и 4,8 г/кг позволило выявить стресспротек-тивное действие изучаемых препаратов, проявляющееся в достоверных изменениях ряда гемодинамических показателей (табл. ). Установлено, что введение дигидрокверцетина в дозе 40 мг/кг, оказало защитный эффект в отношении барорефлекторной регуляции гемодинамики в условиях моделирования стресса. Введение препарата восстанавливало все изучаемые параметры, сниженные стрессорным воздействием, до уровня контрольной группы.
Настой ЛШ в дозе 4,8 г/кг также оказывал протективный эффект в отношении функциональной активности барорецепторов в условиях моделирования стресса, доводя до уровня контрольных значений САД, СрАД и ЧСС, не изменяя уровень ДАД. Введение дигидро-кверцетина и настоя цветков ЛШ в меньших дозах достоверно не влияло на измененные стрессорным воздействием гемодинамиче-ские показатели. Полученные данные, свидетельствуют о необходимости применения ди-гидрокверцетина и ЛШ в больших дозах для достижения стресспротективного эффекта в отношении функционального состояние барорецепторов.
Проведение пробы с пережатием и растяжением сонных артерий позволило выявить положительное влияние только дигидроквер-цетина в дозе 40 мг/кг на сохранность барорефлекторной регуляции сосудистого тонуса. При введении препарата в данной дозе амплитуда колебаний СрАД была достоверно выше, чем у стрессированных и не получавших лечения крыс, и сопоставима с аналогичными значениями у интактных животных. Настой цветков ЛШ в обеих дозах также стимулировал увеличение амплитуды колебаний СрАД, по сравнению с экспериментальной когортой, но не доводил исследуемую динамику до уровня контроля. При применении дигидрокверцетина в дозе 20 мг/кг амплитуда колебаний СрАД достоверно не отличалась от соответствующих значений у стрессиро-ванных животных (рис. 1).
При проведении ортостатической пробы положительное влияние на состояние баро-
Таблица
Влияние дигидрокверцетина и лабазника шестилепестного на гемодинамические показатели у интактных животных и животных с моделированием стресса
№ Серия САД ДАД СрАД ЧСС
і Интактные нелеченные животные (контрольная группа) 139,2+5,9 107,7+5,2 118,1+5,9 322+10
2 Стресс (экспериментальная группа) 113,1+5,9** 90,6+4,О*1 98,0+4,О*1 281+10*1
3 Стресс + дигидрокверцетин 20 мг/кг 117,1+5,5** 94,1+4,8*1 101,7+4, З*1 299+11
4 Стресс + дигидрокверцетин 40 мг/кг 139,2+6,7*2-3 107,2+5,О*2 117,2+5,6*2'3 319+11*2
5 Стресс + ЛШ 2,4 г/кг 115,2+4, І*1'4 94,1+4,6*1 101,2+4,6*1'4 299+12
б Стресс + ЛШ 4,8 г/кг 129,6±4,8*2'5 101,1+4,7 110,9+4,6*2 320+11*2
Примечание: * - p<0,05 по отношению к группам животных.
Рис. 1. Амплитуда колебаний СрАД при пережатии сонных артерий у крыс, получавших ди-гидрокверцетин и ЛШ на фоне стресса.
Обозначения: і - контрольная группа; 2 - стрессированные животные; 3 - стресс+ЛШ (2,4 г/кг); 4 - стресс+ЛШ (4,S г/кг); 5 - стресс+ дигидрокверцетин (20 мг/кг); б - стресс+ дигидрокверцетин (40 мг/кг); * - p<0,05 относительно групп животных.
рефлекторной чувствительности отмечалось при применении дигидрокверцетина в дозе 40 мг/кг, и ЛШ в дозе 2,4 г/кг на фоне стресса, что выражалось в сохранении амплитуды колебаний СрАД при проведении пробы на уровне контрольных животных (рис. 2).
Применение дигидрокверцетина и настоя цветков ЛШ также оказало стрессневилиру-ющее влияние на динамику кардиохроно-тропного компонента барорефлекса в условиях эксперимента.
Отмечено, что в группе стрессированных животных, получавших дигидрокверцетин в
дозе 40 мг/кг, зафиксировано наибольшее значение величины КХТКБР - 1,32+0,14 мс/ мм рт.ст, которое достоверно превышало аналогичный показатель у интактных животных. Дигидрокверцетин в дозе 20 мг/кг и настой цветков ЛШ в дозе 4,8 г/кг также вызывали достоверное повышение чувствительности данного показателя, по сравнению с животными, подвергшимися стрессу и не получавшими лечения (рис. 3).
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о положительном влиянии ди-гидрокверцетина и ЛШ на функциональное
Рис. 2. Амплитуда колебаний СрАД при проведении ортостатической пробы у крыс, получавших дигидрокверцетин и ЛШ на фоне стресса.
Обозначения: і - контрольная группа; 2 - стрессированные животные; 3 - стресс+ЛШ (2,4 г/кг); 4 - стресс+ЛШ (4,8 г/кг); 5 - стресс+ дигидрокверцетин (20 мг/кг); б - стресс+ дигидрокверцетин (40 мг/кг); * - p<0,05 относительно групп животных.
Рис. 3. Значения кардиохронотропного компонента барорефлекса у интактных и стрессирован-ных крыс, а также получавших дигидрокверцетин и ЛШ, на фоне стресса.
Обозначения: і - контрольная группа; 2 - стрессированные животные; 3 - стресс+дигидрокверцетин (20 мг/кг); 4 - стресс+дигидрокверцетин (40 мг/кг); 5 - стресс+ЛШ (2,4 г/кг); б - стресс+ЛШ (4,8 г/кг); * - p<0,05 относительно групп животных.
состояние барорецепторной регуляции АД у животных, повергшихся острому стрессор-ному воздействию. Большие дозы изучаемых средств продемонстрировали более значимое протективное действие в отношении регуляторных систем центральной гемодинамики, повышая ее адаптационные возможности на фоне стресса.
Следует отметить, что полученные результаты демонстрируют перспективность дальнейшего изучения дигидрокверцетина и лекарственных форм ЛШ как средств с кар-диопротекторными свойствами, а флавоно-идные антиоксиданты следует рассматривать как перспективный резерв для изыскания но-
вых цитопротекторных препаратов при пато- 4
логии сердечно-сосудистой системы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР: Вып.1.
Общие методы анализа. - 11-е изд. - М.: Ме- 5
дицина. - 1987. - С. 16-20.
2. Ковалев Г.В., Спасов А.А., Богачев Н.А. и др.
Роль ГАМК-эргической системы в механизме 6
стресс-регулирующего действия фенибута //
Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1987. - № 11. - С. 588-590.
3. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. - М.: Медицина, 1984. - 272 с.
Осадчий Л.И., Балуева Т.В., Сергеев И.В. Зависимость орто- и антиортостатических реакций гемодинамики от исходного тонуса артериальных сосудов у крыс // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. - 1995. - Т. 81, № 9. -С. 111-126.
Соколов С.Я. Современные проблемы фитотерапии и фитофармакологии // Практич. фитотерапия. - 1997. - № 1. - С. 3-6.
Фисенко В.П., Арзамасцев Е.В., Бабаян Э.А. и др. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Минздрав РФ. - 2000. - С. 97-99.
