CC BY
47
37. Van Keeken N, Van Hattum E, de Boer W.A. Validation of a new commercially available dry rapid urease test for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in gastric biopsies. // Neth. J. Med. - 2006. - Vol. 64. - P. 329-333.
38. Weiss J., Mecca J, Da Silva E. et al. Comparison of PCR and other diagnostic techniques for detection of Helicobacter pylori infection in dyspeptic patients. // J. Clin. Microbiol. - 1994. - Vol. 32. - P. 1663-1668.
УДК 616.24-002
39. Yodavudh S., Tangjitgamol S., Puengsa — art S. Mixture of carbol fuchsin and alcian blue staining of gastric tissue for the identification of Helicobacter pylori and goblet cell intestinal metaplasia.// Southeast Asian J Trop Med Public Health. — 2008. — Vol.3 9. — P. 253-259.
40. Zaitoun A.M. Use of Romanowsky type (Diff-3) stain for detecting Helicobacter pylori in smears and tissue sections // J. Clin. Pathol. — 1992. — Vol. 45. — P. 448-449.
ВЛИЯНИЕ АДАПТОГЕНОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ПРИ ОСТРОЙ БРОНХОЛЕГОЧНОЙ ПАТОЛОГИИ У ЛИЦ ПРИЗЫВНОГО ВОЗРАСТА
Сергей Тихонович Кохан1*, Петр Петрович Коновалов2, Линар Анасович Ахметянов3, Лариса Николаевна Шантанова4
1 Читинский государственный университет,2354 Окружной военный клинический госпиталь, г. Екатеринбург, 3361 Военный госпиталь, г. Казань,4 Институт общей и экспериментальной биологии Бурятского научного центра Сибирского отделения РАН, г. Улан-Удэ
Реферат
Исследована возможность коррекции свободнорадикального окисления липидов сыворотки крови в условиях воспаления легочной ткани путем включения в состав базовой терапии фитопрепарата — Аруры-7. Показано, что использование растительного адаптогена в комплексной терапии внебольничных пневмоний в большей степени препятствует накоплению продуктов перекисного окисления липидов сыворотки крови, нормализует показатели антиоксидантной системы организма.
Ключевые слова: адаптогены, перекисное окисление липидов, внебольничная пневмония.
THE EFFECTS OF VEGETABLE ADAPTOGENS ON THE INTENSITY OF LIPID PEROXIDATION DURING ACUTE BRONCHIAL AND PULMONARY PATHOLOGY
IN MILITARY AGE PATIENTS
S.T. Kokhan1*, P.P. Konovalov2, LA. Akhmetyanov3, L.N. Shantanova4
'Chita State University,2354 District Military Clinical Hospital, Yekaterinburg city, 3361 Military Hospital, Kazan city, Russia 4Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences,
Ulan-Ude
Summary
Studied was the possibility of correction of free radical lipid peroxidation in blood serum during inflammation of lung tissue by the inclusion into the basic therapy of a phytopreparation - Aroura-7. It was shown that the use of a herbal adaptogen in the treatment of community-acquired pneumonia to a greater extent prevents the accumulation of lipid peroxidation products in blood serum, and normalizes the anti-oxidative system features of the body. Key words: adaptogens, lipid peroxidation, community-acquired pneumonia.
В настоящее время не вызывает сомнения, что многие заболевания органов дыхания, в том числе пневмонии, вызывают развитие окислительного стресса, который может, в свою очередь, стать причиной развития иммунной недостаточности и, как следствие, хронизации патологического процесса в легких [4, 11]. Основным фактором регуляции процессов свободнорадикального окисления (СРО) является состояние антиоксидантой системы (АОС) органов и тканей [2, 5, 12, 13]. Однако известно, что лекарственные препараты группы адаптогенов, повышая сопротивляемость организма к широкому кругу неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды и обладая антиок-сидантным действием, способствуют стабилиза-
* Автор для переписки: SKokhan@yandex.ru
ции показателей перекисного окисления липидов (ПОЛ) в условиях воспаления. Перспектива использования фитотерапевтических средств в комплексной терапии пневмоний в качестве стресс-корректоров прооксидантного воздействия [7, 9, 10, 13] представляет несомненный интерес.
Цель настоящего исследования — изучение влияния адаптогенов растительного происхождения, содержащихся в фитосборе «Арура-7» в сочетании с базовой терапией на интенсивность показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы организма у больных внебольничной пневмонией.
Для достижения указанной цели нами проводилось комплексное лабораторное обследование 50 пациентов (молодых мужчин в возрасте 18-20 лет) с диагнозом внебольничной пневмонии (ВП),
Таблица 1
Показатели первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов у больных внебольничной пневмонией при использовании различных методов лечения (М^)
Показатели Контроль (п=25) До лечения (п=50) Группа 1 (п=25) Группа 2 (п=25)
ДК (ДЕ232/мг липидов) 0,10±0,03 0,23±0,07* 0,22±0,03* 0,17±0,04*/** р<0,001
КД и СТ (ДЕ278/мг липидов) 0,05±0,004 0,16±0,05* 0,15±0,02* 0,11±0,01*/** р<0,001
Е 232/220 1,15±0,08 3,2±0,11* 2,7±0,08*/** 2,07±0,08*/** р<0,001
Е 278/220 0,92±0,03 1,70±0,09* 1,60±0,06 * 1,02±0,06*/** р<0,001
ТБК-активные продукты (мкмоль/мг) 1,32±0,08 2,12±0,02* 2,07±0,01* 1,83±0,01*/** р<0,001
Примечание: * в сравнении с контролем; ** между показателями до лечения и другими днями исследования; р — уровень значимости различий на 10-е сутки между 1 и 2-й группами. То же в табл. 2.
нетяжелое течение. Больные были распределены по двум группам: первую составили 25 человек, получавших в условиях стационара традиционную антибактериальную терапию [11], вторую — 25 больных, которым, кроме базовой терапии, назначался прием биологически активной добавки к пище (БАД) — настоя растительного адаптогена «Арура-7», разработанного и изготовленного НИИ общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения РАН (фильтр-пакетики по 1,0 г и 20-60 г) ТУ 9370-007-03533369-10, № гос. регистрации 77.99.11.3.У.2757.4.10 от 28.04.2010 г., 1 г. В состав адаптогенного сбора входят измельченные корни элеутерококка колючего (20%), корни родиолы розовой (15%), корни солодки голой (20%), побеги черники обыкновенной (20%), трава тимьяна ползучего (25%). Для приготовления настоя один фильтр-пакетик «Арура-7» заваривали в 100 мл крутого кипятка, настаивали 10-15 минут, процеживали и принимали его один раз утром за 30 минут до еды на протяжении 10 суток.
В первые сутки госпитализации и через 10 дней после начала курса терапии у всех больных исследовали параметры системы ПОЛ — антиоксиданты в сыворотке крови. Для оценки перекисного статуса определяли показатели промежуточных интермедиатов свободнорадикаль-ного окисления липидов — содержание диеновых конъюгатов (ДК), кетодиенов и сопряженных триенов (КД и СТ), ТБК-активных продуктов [1, 3], скорость каталазной реакции [6], активность супероксиддисмутазы (СОД), глутатионперокси-дазы (ГПО), глутатионредуктазы (ГР) [8] .
Аналогичные показатели перекисного окисления в сыворотке крови, используемые в качестве контрольных цифр, изучались у 25 практически здоровых мужчин соответствующего возраста (группа контроля).
В работе с пациентами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации, Правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. (№ 266). Каждым пациентом было подписано добровольное инфор-262
мированное согласие на проведение биомедицинских исследований с последующей этической экспертизой документов комиссией локального этического комитета Читинского государственного университета.
Полученные данные обрабатывались методом вариационной статистики для связанных и не связанных между собой наблюдений.
Результаты обследования пациентов, проведенные до начала лечения, показали, что содержание как начальных, так и промежуточных продуктов липопероксидации было выше, чем у здоровых лиц, и в среднем превышали средние данные контрольной группы в 1,6 раза; антирадикальная защита организма, наоборот, имела тенденцию к уменьшению, что проявлялось значительным снижением уровня антиоксидантных ферментов. После лечения у больных первой группы с традиционным лечением параметры липопероксида-ции изменились несущественно. Статистически значимо уменьшились коэффициенты Е232/220 и Е2 20 гептановой фазы липидного экстракта (на 23,6% и 25,1% соответственно), хотя и превышали контрольные цифры. Абсолютные значения первичных и вторичных продуктов ПОЛ гептановой фазы, как и изопропанольной, оставались высокими. Содержание ТБК-активного материала уменьшилось лишь на 6,8% (р<0,001) и было выше, чем в контроле, на 56,8% (р<0,001).
Во второй группе, в которой, кроме базисной терапии, больные получали растительный адап-тоген «Арура-7», наблюдалось более существенное снижение продуктов ПОЛ. Так, в гептановой фазе липидного экстракта все показатели были статистически значимо меньше, чем до лечения: ДК — на 26,1%, КД и СТ — на 31,3%, коэффициент Е232/220 — на 33,6% и Е278/220 — на 38,3%. Относительное содержание первичных и вторичных изопропанолрастворимых продуктов свободнора-дикального окисления липидов уменьшилось по сравнению с исходным уровнем соответственно на 16,0% (р<0,001) и 16,5%(р<0,001). Концентрация промежуточных продуктов ПОЛ снизилась на 17,6% (р<0,001). Сравнительный анализ результатов у пациентов второй группы с таковыми у
Таблищ 2
Показатели антиоксидантной защиты крови у больных внебольничной пневмонией при использовании различных методов лечения (М±m)
Активность показателей Контроль (n=25) До лечения (n=50) Группа 1 (базовая терапия) (n=25) Группа 2 базовая терапия + «Арура-7» (n=25)
Каталаза эритроцитов, нмоль/с- мг белка 14,71±0,29 11,14±0,50* 11,06±0,41* 12,09±0,41*/** р<0,001
Глутатиопероксидаза эритроцитов, нмоль/с- мг белка 183,80±44,49 64,70±19,57* 72,56±10,60*/** 92,56±11,65*/** р<0,001
Глутатионредуктаза эритроцитов, мкмоль/с-мг белка 78,70±16,66 38,98±11,72* 39,45±10,95* 56,45±9,75*/** р<0,001
Супероксиддисмутаза эритроцитов, % активности 47,93±7,56 31,79±10,47* 32,60±12,66* 37,60±9,66*/**
больных, получавших лишь традиционное лечение, выявил достоверные различия практически между всеми показателями ПОЛ, которые во второй группе были несколько ниже.
Изменения со стороны факторов антирадикальной защиты (АРЗ) выглядели следующим образом (табл. 2). До начала лечения регистрировались сниженные скорость обезвреживания супероксидного анион-радикала на 33,7% (р<0,001) и каталазная активность на 24,3% (р<0,001) в эритроцитах по сравнению с нормой. Ниже контроля была активность другой пары ферментов: глута-тионпероксидазы — на 64,8% (р<0,001) и глутати-онредуктазы — на 50,5% (р<0,001). Полученные результаты можно считать вполне закономерными, так как повышенный фон свободных радикалов и высокая интенсивность процессов липопероксида-ции приводят к истощению антиоксидантных ресурсов организма. Однако существенное снижение обезвреживания органических гидропероксидов с участием ГПО является крайне неблагоприятным фактом, поскольку эти нестойкие молекулы, включая гидропероксиды полиненасыщенных жирных кислот, служат предшественниками свободных радикалов и других цитотоксичных соединений, генерация которых еще в большей степени приводит к интенсификации ПОЛ.
Результаты обследования, проведенного через 10 суток после начала лечения, показали, что в первой группе антирадикальная обеспеченность осталась низкой. Активность всех ферментов была статистически значимо меньше контроля и не отличалась от исходного уровня. Во второй группе с назначением адаптогена «Арура-7» в сочетании с базовой терапией произошли благоприятные изменения со стороны антиоксидантного статуса. Увеличилась скорость обезвреживания супероксидного анион-радикала и пероксида водорода с участием каталазы соответственно на 18,3% (р=0,008) и 8,5% (р<0,001). Активность ГПО возросла на 43,1% (р<0,001), а ГР — на 44,8% (р<0,001) по сравнению с результатами до лечения. Значения двух последних ферментов были значимо выше, чем в первой группе.
Таким образом, сочетанное применение стандартной терапии и фитотерапии адаптогенами с целью как усиления терапевтического эффекта, так и снижения побочных эффектов является весьма перспективным.
ЛИТЕРАТУРА
1. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А, Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой // Лаб. дело. — 1988. — № 11. — С. 41-43.
2. Васильев А.В. и др. Влияние алиментарного мик-роэлементоза на активность глутатионпероксидазы и супероксиддисмутазы // Биомед. хим. — 2008. — Т. 54, вып. 2. — С. 236-43.
3. Волчегорский И.А., Налимов А.Г.. Яровинский Б.Г. и др. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопр. мед. хим. — 1989. — № 1. — С. 127-131.
4. Горожанская Э.Г. Свободнорадикальное окисление и механизмы антиоксидантной защиты в нормальной клетке и при опухолевых заболеваниях (лекция) // Клин. лаб. диагн. — 2010. — № 6. — С. 28-44.
5. Зенков Н. К, Ланкин В.З., Меньщикова Е.Б. Окислительный стресс.- М., 2001. — 343 с.
6. Королюк М.А., Иванова Л.И, Майорова И.Г. Метод определения каталазы // Лаб. дело. — 1988. -№ 1. — С. 16-19.
7. Кохан С.Т., Ткаченко А.Э., Кривошеева Е.М. Применение адаптогенов в комплексном лечении детей с респираторными заболеваниями // Вестн. Рос. воен.-мед. акад. — СПб, 2009. — Т. 25, № 1. — С. 307-308.
8. Медицинские лабораторные технологии. Справочник. / Под ред. А.И. Карпищенко. — СПб: Интермедика, 2002. — 600 с.
9. Мельников В.И. Биологически активные добавки растительного происхождения // Теория и практика физ. культуры. — 2007. — № 6. — С. 47-48.
10. Симонова Н.В, Доровская В.А., Штарберг МА. Влияние адаптогенов растительного происхождения на интенсивность процессов перекисного окисления липидов биомембран в условиях ультрафиолетового облучения // Дальневост. мед. ж. — 2010. — № 2. — С. 112-115.
11. British Thoracic Society guidelines for the management of community — acquired pneumonia in adults // Thorax. — 2001. — Vol. 56, Suppl. 4. — P. 1-64.
12. Halliwell B, Gutterige J.M.C. Free radicals in Biology and Medicine / // 3rd Ed. — Oxford, 1999. — 158 p.
13. Nikolayev S.M. et al. Free radical oxidation and screening of antioxidants / Current situation and future trends of drug research and development from natural sources: International scientific conference. — Mongolia, 2010. — P. 56-59.
