CC BY
5
УДК 615.285.7.099:612.017.1
Е. Ф. Горбачевская
ВЛИЯНИЕ у-ИЗОМЕРА ГЕКСАХЛОРЦИКЛОГЕКСАНА НА ОБРАЗОВАНИЕ АНТИТЕЛ В УСЛОВИЯХ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Целью настоящей работы являлось выяснение состояния иммуяогенеза у крольчих в процессе хронической интоксикации у-изомером гексахлорциклогексана (ГХЦГ) до момента спаривания их с иитактными самцами и непосредственно после рождения потомства. ИсследованиЬ проведено на 20 крольчихах породы шиншилла массой от 2500 до 3000 г. Животные были разделены на 2 группы (по 10 в каждой). Животным 1-й группы ежедневно на протяжении 3 мес через желудочно-кишечный тракт вводили у-изомер ГХЦГ в дозе 4 мг/кг (1/50 ЬО60) в виде 10 % взвеси в подсолнечном масле, животные 2-й группы получали там же путем и в том же темпе подсолнечное масло в тех количествах, которые поступали в организм крольчих 1-й группы. По истечении 3-месячного срока введение яда (или масла) прекращалось, и крольчихи спаривались
Таблица 1
Количество эритроцитов, ретикулоцитов, общего гемоглобина и иммуиокомпетентных клеток у крольчих, подвергавшихся воздействию яда, М + т
Время исследования Эритроциты, млн. Ретикуло-ииты, •/.. Общий гемоглобин, г/100 мл Иммунокомпетентные клетки. %
Фон 5,16+0,42 15,7+0,88 12,7+1 ,2 5,1+0,21
Через 1 мес Р Через 2 мес Р Через 3 мес Р 4,67+0,48 <0,001 3,70+0,26 <0,001 3,5+0,10 <0,001 22,3+0,85 <0,001 28,5+0,64 <0,001 30,6+0,17 <0,001 9,6+0,18 <0,01 8,5+0,09 <0,001 8,2+0,14 <0,001 11,6+0,13 <0,001 17,8+0,32 <0,001 23,0+0,63 <0,001
Таблица 2
Количество противоэритроцитных аутоантител в крови крольчих, подвергавшихся воздействию яда
Время исследования Средний титр (7) агглютинирующих аутоантител Титры преинлити-рующих аутоантител
Фон 1,02 (+12,1%, —11,4%) —
Через 1 мес 6,96 (+14,1 %, —12,3%) Я<0,001 От + до ++ Повышение тит-
Через 2 мес 27,8 (+30,1%, —23,1%) /><0,001 ров, достоверность >99% От ++ до +++ Повышение тит-
Через 3 мес 97,02 (+14,1%. —12,3%) Р<0,001 ров, достоверность >99% От +++ ДО ++++ Повышение титров, достоверность >99%
с интактными самцами. Иммунокомпетентные клетки исследовали в периферической крови животных по методике Н. Н. Клемпарской (1969). Анализ крови у каждой самки проводили до начала опытов, затем в динамике через каждые 2 нед до прекращения введения в организм яда («ли масла) и спаривания животных, а также через 1 сут после родов. Помимо этого, для определения аутоантител агглютинирующего и преципитирующего порядка использовали реакции пассивной гемагглютинации (П. А. Кар-ташов и Н. Н. Клемпарская) и микропреципитации в жидкой среде (Н. Н. Клемпарская и Н. В. Раева).
Первоначальный (до начала опытов) анализ крови животных свидетельствовал о наличии у них определенного количества бляшкообразных клеток (БОК) или иммуиокомпетентных клеток (до 6 %), что не противоречит данным Н. Н. Клемпарской о высоком содержании в норме таких клеток именно у кроликов.
^Последующие наши исследования свидетельствовали о постепенном нарастании уровня иммунокомпетентним клеток у самок по мере развития у них интоксикации у-изомером ГХЦГ (вплоть до 23,0± 0,63 % — табл. 1).
Факт развития интоксикации у животных устанавливался на основании наличия анемии.
У самок контрольной группы по прошествии тех же 3 мес количество эритроцитов, общего гемоглобина, рети-^ кулоцитов и БОК практически соответствовало исходному^ (соответственно 5 210 800+280 000, 12,4± 0,08 г/100 мл. 14,1±1,06%о и 4,9±1,12% до начала эксперимента и 5 170 000± 300 000, 12,7± 0,12 г/100 мл, 15,2± 1,55 %0, 4,8±0,13 % по его окончании. Прекращение введения яда в организм с момента спаривания крольчих с интактными самцами и в последующем — в течение всего периода беременности не привело к нормализации показателей красной крови (эритроцитов 3 200 000, гемоглобина 8,1± ±0,09 г/100 мл, ретикулоцитов 29,8±0,72 %0) и уровня иммуиокомпетентных клеток (21,5± 1,78 %).
Выявленная динамика развития БОК сочеталась с одновременным нарастанием количества аутоиммунных про' тивоэритроцитных антител агглютинирующего и преципитирующего порядка (табл. 2).
После рождения самками потомства титры указанных антител практически не изменились и соответственно равнялись: Т4 = 89,13 (+12,1 %. —11,4 %), Р<0,001 и+++ ногышение титров, достоверность >>99 %). На протяжении эксперимента и к его концу у контрольных самок антитела к аутоэрнтроцитам выявлялись в единичных случаях и в низких титрах.
Таким образом, использование доступной по исполнению модификации Н. Н. Клемпарской метода Ерне может заменить при необходимости трудоемкий и сложный иммунологический анализ в плане выявления в организме аутоиммунных процессов.
Выводы
1. Хроническая (в течение 3 мес) интоксикация животных уизомером ГХЦГ в дозе 4 мг/кг (1/50 LD6o) вызывает анемизацию организма и резкое напряжение иммуногенеза. &
2. Прекращение поступления яда в организм на про-™ тяжении всего периода беременности не ведет к восстановлению красной кровн и уровня иммуногенеза у родивших самок, что может иметь прогностическое значение в плане возможного воздействия аутоиммунных антител материнского организма на потомство.
ЛИТЕРАТУРА
Карташов П. А., Клемпорскпя Н Н — Лабор. дело, 1971,
№ 7. с. 426—428 К.импарская //. //., гиена Н. 13. — Бюлл. экснер. биол., 1961, № 5, с. 77-81.
Клемпарская Н. Н. 21.
Аутоантитела облученного организма. • П. Н. Клемпарской. М., 1972.
' Поступила 28/V 1979 г.
ж. микробиол., 1969, № 8, с. 18— Под ред.
УДК 614.7774-628.1911:61Я.ги5.1
Доктор мед. наук Д. К. Врочинский, канд. мед. наук Т. И. Паныиина, В. М. Воронина, доктор мед. наук Г. А. Родионов, канд. мед. наук В. Г. Ларионов, Л. Я■ Воронина
ГИГИЕНИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ
ФУНГИЦИДОВ АНИЛАТА И ВИТАВАКСА 4
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс Министерства здравоохранения СССР, Киев
В последние годы в качестве протравителей семян предложены фунгициды, производные анилина — анилат и ви-тавакс. Возможность загрязнения пестицидами внешней среды при применении их в сельском хозяйстве обусловливает необходимость установления их гигиенических норм.
С целью нормирования содержания в воде водоемов анилата и витавакса были проведены токсикологические и гигиенические исследования в соответствии с методическими подходами к разработке и научному обоснованию ПДК вредных веществ в воде водоемов, принятыми в нашей стране.
Действие фунгицидов на организм подопытных животных изучали в экспериментах на белых крысах при одно-ькратном и многократном введении.
С учетом химического строения препаратов (производных анилина) в качестве показателей токсического действия определяли суммационно-пороговый показатель, морфологический состав периферической крови, количество гемоглобина и метгемоглобина, активность окислительно-восстановительных ферментов крови каталазы и пероксида-зы. Для выяснения влияния препаратов на функциональное состояние печени изучали уровень общего белка н мочевины в сыворотке крови, пробу Квика — Пытеля, активность ферментов: щелочной фосфатазы, аланин-амино-трансферазы (АЛТ) и аспартат-аминотрансферазы (ACT), холинэстеразы сыворотки крови. О функциональном состоянии почек судили по диурезу, рН мочи и количеству в ней белка, мочевины и хлоридов. В процессе эксперимента следили за поведением животных, потреблением ими пищи, массой тела. По окончании эксперимента определяли относительные коэффициенты массы внутренних органов и проводили патологогистологические исследования.
Анилат — фунгицид отечественного производства, 97 % технический препарат, применяемый для авиационного опрыскивания растений и протравливания семян пшеницы против ржавчины и пыльной головни.
h'n~0
S03HH,NCH.CH,0H
Действующее вещество — моноэтаноламиновая соль сульфаниловой кислоты. Температура плавления 100 °С, хорошо растворим в воде — 60 г в 100 г (Д. М. Кобахидзе и соавт.; А. А. Шамшурин и М. 3. Кример).
Гигиенические исследования, проведенные для обоснования ПДК в воде водоемов, позволили установить, что 'пороговой (запах интенсивностью I балл) по влиянию на органолептические свойства воды была концентрация 2,2± ± 0,1 мг/л, а практический порог (2 балла) — 5,9± 0,3 мг/л запах остро раздражающий. Привкус имел соленый оттенок.
При стоянии водных растворов анилата в теченйе 10 сут интенсивность запахе и привкуса снижалась; нагревание водных растворов до 60 С на интенсивность запаха и привкуса не влияло.
При изучении влияния на I и II фазы минерализации органического вещества воды выявлено стимулирующее действие анилата на санитарный режим водоемов. Установлено, что пороговая концентрация по влиянию на I фазу минерализации органического вещества (ВПК, растворенный кислород) находилась на уровне 10 мг/л, а под-пороговая равнялась 1,0 мг/л. Такими же оказались пороговые и подпороговые концентрации анилата по влиянию на II фазу минерализации (динамика количества аммонийных солей, нитритов, нитратов).
Данные о токсичности анилата для теплокровных животных немногочисленны и свидетельствуют о его низкой токсичности при однократном поступлении. По данным литературы. LD50 для крыс 8770 мг/кг, для мышей 5380мг/кг. Кумулятивные свойства выражены слабо (Г. А. Бело-ножко). По нашим данным, анилат оказался также малотоксичным. Среднесмертельная доза для крыс, установленная по В. Б. Прозоровскому, равна 5300 мг/кг.
Токсичность анилата в хроническом эксперименте изучена при введении в желудочно-кишечный тракт белым крысам препарата в дозах 10,7 мг/кг (1/500 LD50) и 2,65 мг/кг (1/2000 LDS0) в течение 6 мес. Видимых признаков интоксикации у животных в течение эксперимента не отмечено, масса тела не отличалась от таковой животных контрольной группы. Не было изменений количества гемоглобина, метгемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов. Некоторые сдвиги обнаружены в гемограмме: при действии анилата в обеих дозах наблюдалось достоверное повышение процента эозинофилов, уменьшение количества нейтрофилов и увеличение процента лимфоцитов. У животных обеих групп отмечены фазовые изменения активности каталазы с нормализацией к концу эксперимента, снижение к концу опыта на 79—69 % активности щелочной фосфатазы. Некоторые сдвиги в ряде изучаемых тестов при действии дозы анилата 10,7 мг/кг (снижение активности АЛТ и ACT на 44—36 %, повышение содержания в крови мочевины на 62 % и др.). Во второй половине опыта сдвиги в основном исчезали.
При латологоморфологическом исследовании установлено, что анилат в дозе 10,7 мг/кг в день через 6 мее вызывал в печени небольшое увеличение числа двуядер-ных клеток паренхимы, появление гепатоцитов с полиплоидными ядрами. В легких иногда отмечалось некоторое утолщение межальвеолярных перегородок, была заметна умеренная гиперплазия перибронхиальных лимфоаденоид-ных узелков. Ткань селезенки, головного мозга, почек, надпочечников умеренно полнокровна. При введении анилата в дозе 2,65 мг/кг в печени и легких лишь у части жв-
