Визначення титру антименінгококових антитіл у донороздатного специфічно неімунізованого населення Житомирської області Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© Терещук Т. О. УДК 615. 373. 3 Терещук Т. О.

ВИЗНАЧЕННЯ ТИТРУ АНТИМЕН1НГОКОКОВИХ АНТИТ1Л У ДОНОРОЗДАТНОГО СПЕЦИФ1ЧНО НЕ1МУН1ЗОВАНОГО НАСЕЛЕННЯ ЖИТОМИРСЬКОТ ОБЛАСТ1

ДУ «1нститут гематологи та трансфузюлогГГ НАМН УкраГни»

(м. КиГв)

Дана робота е фрагментом НДР «Обфунтувати рекомендацп щодо оцшки стану здоров'я донор1в як складово) системи управлЫня якютю донорсько) кров1 та II компонен^в», № держ. реестрацп 0114U001098.

Вступ. Мен1нгококова ¡нфекц1я (Ml) - антропоноз-не захворювання, викликане Neisseria meningitidis, ре-еструеться в уЫх клiматичних зонах рiзних краУн св^ i е всесвiтньою проблемою охорони здоров'я. У струк-турi Ыфекцмно) захворюваностi це одна з небезпеч-них для життя i непередбачувана за блискавичнютю перебiгу iнфекцiя. Рiвень захворюваностi на Ml е вщ-носно невисоким у порiвняннi з Ышими iнфекцiями, а летальнiсть при нм складае ~ 15 %. Щороку в свiтi ре-еструеться близько 500 000 випадкiв Ml, з яких 50 000 заюнчуеться летально [2, 9].

В УкраУн захворюванють на Ml досягае 2000 ви-падкiв на рiк при летальност 11-17 %. Не дивлячись на високий рiвень розумiння патогенезу Ml та наявнють сучасних антибютиюв, майже 10-15 % осiб, як пере-хворiли на Ml, мають ускладнення (втрату слуху, дис-лекЫю, олiгофренiю, паралiчi тощо), що попршують якiсть життя [3].

За даними науково) лiтератури, одним iз перспек-тивних способiв боротьби з Ыфекцмними захворю-ваннями е пасивна iмунотерапiя iз використанням алогенно) специфiчноi плазми. Для одержання iмун-них препара^в використовують плазму донорiв, яким проводили профтактичну iмунiзацiю (наприклад: проти правця, дифтерп, стафiлококу та iн.). Обме-женiсть кадрiв iмунних донорiв, вщсутнють затвер-джених антигенних препаратiв (вакцин, анатоксиыв) призвели до дефiциту алогенних антибактерiальних препаратiв. Данi наукових дооглджень доводять, що одержання специфiчноi плазми можливе без прове-дення активно! iмунiзацii. В якостi додаткового дже-рела iмунноi сировини може бути використана кров донорiв, якi мютять високий рiвень «природних» си-роваткових антибактерiальних антитiл (АТ) [5, 8].

«Природними» вважаються АТ, що виявляються в оЫб, якi не пщдавалися спецiально спрямованiй iму-нiзацii проти меншгокоюв, а також у таких, що не хво-рiли на меынпт у перiод, передуючий обстеженню. Слщ зазначити, що причини появи АТ остаточно не встановленк вони можуть продукуватися внаслiдок контактiв iз мiкроорганiзмами зовнiшнього оточення

та/або перехресно1' iмунiзацii антигеноподiбними структурами [4].

Необхщнють одержання специфiчноi антименiн-гококовоУ плазми викликана потребою практичноi ланки охорони здоров'я через недостатню ефектив-нють антибiотикотерапii в умовах збiльшення випад-кiв тяжких форм перебiгу Ml i пов'язаного з цим пщви-щення смертностi та вiдсотку швалщизацп, особливо серед дiтей. На превеликий жаль, в Укра1'ы вiдсутнi як антигены менiнгококовi вакцини, так i алогеннi анти-менiнгококовi препарати [1].

Через вщсутнють комерцмно1' вакцини, придат-ноУ для iмунiзацii донорiв з метою одержання iмунноi плазми, активно)' проти Ml неможливо заготовити антимеынгококову плазму вiд iмунiзованих донорiв. Тому, единий шлях одержати таку плазму - викорис-товувати кров донорiв, якi мають природнi сироват-ковi антименiнгококовi АТ [4].

Мета дослщження - визначити наявнiсть та титр антимеынгококових антитiл у донороздатного неiму-нiзованого населення Житомирсько) областi в залеж-ностi вiд сезону року та фенотипу системи АВ0 для подальшого використання одержаних результат в оргаызацп iмунного донорства.

Об'ект i методи досл1дження. Для визначен-ня титру антимеынгококових АТ обстежено 792 не-iмунiзованi донори, мешканцiв Житомирсько) об-ластi, вiком вiд 18 до 60 роюв, обох статей, уЫх груп кровi за системою АВ0. 1з них: кадровi донори склали 75 осiб ((9,50 ± 0,73) %); безоплатнi 717 оЫб ((90,50 ± 1,56) %); чоловки 598 ((75,50 ± 1,53) %), жiнки 198 ((24,50 ± 1,53) %) (табл. 1).

Визначення груп кровi iзосерологiчноi системи АВ0 проводили перехресним методом за допомогою стандартних сироваток, стандартних еритроци™ та моноклональних АТ (виробник ПП «Групотест», Укра)-на), а також перехресним методом, застосовуючи ге-леву методику DiaMed GmbH (Швейцарiя) [6].

Kiлькiсть донорiв для визначення активнос^ природних антименшгококових АТ у залежностi вiд пори року дорiвнювала 198 осiб у кожнм дослiджуванiй групi (зима-лiто).

Титр АТ визначали у зразках сироватки кровi до-норiв реакцieю непрямо) (пасивно)') гемаглютинацii (РНГА) в мiкромодифiкацii з використанням комерцiй-ного набору реаген^в «Дiагностикум еритроцитарний

172

ВГсник проблем бГологГГ i медицини - 2014 - Вип. 4, Том 4 (116)

Poзпoдiл дoнopiв зa вiкoм тa cтaттю

Koнтингeнт Aohopiß Cтaть Юльюсть oбcтeжeниx зa вiкoм, poки B^oro

18-20 21-30 31-40 41-50 51 тa CTaprne aбc. чиого %, M t m

KaApoßi ч 2 12 22 14 4 54 6,80 + 0,89

ж 5 9 6 1 21 2,70 + 0,57

Бeзoплaтнi ч 35 243 150 93 23 544 68,70 + 1,65

ж 11 41 47 56 18 173 21,80 + 1,47

Bcьoгo ч 37 255 172 107 27 598 75,50 + 1,53

ж 11 46 56 62 19 194 24,50 + 1,53

Taблиця 2

Poзпoдiл aнтимeнiнгoкoкoвиx aнтитiл зa титpoм y cиpoвaтцi кpoвi нeiмyнiзoвaниx ocí6 y piзнi ceзoни po^

(M ± m)

x £ 1 S 1 i o з Aнтимeнiнгoкoкoвi aнтитiлa, титpи

■S fc e О < 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280

о % % % % % % % %

198 Зимш 22,70 ± 1,48 5,00 ± 0,59 16,70 ± 1,32 25,80 ± 1,55 17,70 ± 1,36 7,60 ± 0,94 4,50 ± 0,74 0

198 Beci-ia 32,30 ± 1,66 17,70 ± 1,35 16,20 ± 1,31 15,20 ± 1,27 10,10 ± 1,07 4,50 ± 0,73 3,0 ± 0,6 1,00 ± 0,35

198 Лiтo 35,40 + 1,70 21,20 + 1,45 24,30 + 1,52 13,60 + 1,22 2,00 + 0,49 3,50 + 0,65 0 0

198 Ociнь 33,30 + 1,67 14,60 + 1,25 19,20 + 1,40 19,70 + 1,41 8,10 + 0,96 4,10 + 0,70 1,00 + 0,35 0

792 Зим^-oc^ 30,90 + 1,64 14,60 + 1,25 19,10 + 1,40 18,60 + 1,38 9,50 + 1. 04 4,90 + 0,76 2,10 + 0,50 0,30 + 0,17

Taблиця 3

Poзпoдiл iмyнниx aнтимeнiнгoкoкoвиx aнтитiл y cиpoвaтцi кpoвi нeiмyнiзoвaниx дoнopiв зa гpyпoвoю нaлeжнicтю

ABO (M ± m)

rpyna ^oßi Aohopiß зa cиcтeмoю AB0 Юлькють oбcтeжeниx cиpoвaтoк ^oßi Aohopiß Чacтoтa виявлeння aнтимeнiнгoкoкoвиx aнтитiл y тт-pax 1:80 - 1:1280

aбc.чиcлo BiAhoche чиcлo, %,

0 (I) 225 73 32,40 + 0,77

A (Il) 319 121 37,90 + 0,81

B (Ill) 162 51 31,40 + 0,85

AB (IV) 86 35 40,70 + 0,99

0 (I), A (Il), B (III), AB (IV) 792 280 35,40 + 0,77

Пpимiткa: AB (IV) > A (Il) > 0 (I) > B (Ill); p < 0,05.

мeнiнгoкoкoвий пoлicaxapидниx aнтигeнiв Фупи B, piдкий» (Пiдпpиeмcтвo з виpoбництвa бaктepioлoгiч-ниx пpeпapaтiв iм. Г. M. Гaбpичeвcькoгo, РФ). Tитp AT y

Taблиця 1 cиpoвaтцi кpoвi дoнopoздaтнoгo нa-ceлeння 1:80 тa вищe poзцiнювaли як iмyнний [7].

Aнaлiз oдepжaниx peзyльтaтiв пpoвoдили зa дoпoмoгoю мeтoдiв вapiaцiйнoÏ CTa™c™^ з викopиc-тaння кoмп'ютepнoÏ пpoгpaми Microsoft Excel XP

Peзyльтaти дocлiджeнь тa ïx oбгoвopeння. 3a aнaлiзoм ви-кoнaниx дocлiджeнь, нaвeдeниx y тaбл. 2, вcтaнoвлeнo, ùo y c^ poвaтцi кpoвi нeiмyнiзoвaнoгo дo-нopoздaтнoгo нaceлeння виявля-ютьcя aнтимeнiнгoкoкoвi aнтитiлa в piзниx титpax. Tитpи aнтитiл вiд 1:10 дo 1:40 виявлeнi y cиpoвaт-ц кpoвi 512 ((64,60 t 1,43) o/o) ocí6: у 88 ((44,40 t 1,13) %) oбcтe-жeниx взимку, нaвecнi - y 131 ((66,20 t 1,44) %) ocoби, влiткy - y 160 ((80,90 t 1,55) o/o), вoceни - y 133 ((67,10 t 1,44) %) дoнopiв. Bиcoкi титpи aнтимeнiнгoкoкoвиx AT (1:80 -1:1280) визнaчeнi в cиpoвaтцi кpoвi 280 ocí6 ((35,40 t0,96) o/o). У piзнi пopи poкy виcoкi титpи AT зycтpiчa-ютьcя в cиpoвaтцi кpoвi людeй iз piз-нoю чacтoтoю: взимку були виявлeнi y 110 ((55,60 t 1,15) o/o) ocí6, нaвecнi - y 67 ((33,80 t0,93) o/o), влiткy - y 38 ((19,10 t0,77) o/o), вoceни - y 65 ((32,90 t 0,85) %) ocí6.

Слщ зaзнaчити, ùo AT yтитpi 1:640 виявлялиcя взимку ((4,50 t0,74) %) ocí6, нaвecнi ((3,0 t0,6) %) тa вo-ceни ((1,00 t0,35) o/o). AT y wpi 1:1280 були визнaчeнi лише нaвecнi ((1,00 t 0,35) %).

Як виднo з peзyльтaтiв, нaвeдeниx y тaбл. 3, виздга aктивнicть cиpoвa-тoк кpoвi (1:80 - 1:1280) виявилacя y 280 ocí6. Poзпoдiл cиpoвaтoк кpoвi iз виcoким титpoм зa гpyпaми AB0 був нacтyпним: cиpoвaтки гpyпи кpoвi AB (IV) - (40,70 t 0,99) % (p < 0,01); фупи A (Il) - (37,90 t 0,81) o/o; гpyпи 0(l) - (32,40 t 0,77) %; фупи B (Ill) -(31,40 t 0,85) %.

Taким чинoм, oтpимaнi нaми peзyльтaти пoкaзaли дocить чacтe виявлeння cepeд пpaктичнo здo-poвoгo дoнopoздaтнoгo нaceлeння ЖитoмиpcькoÏ oблacтi ocí6 з вим-ким (1:80 - 1:1280) титpoм пpиpoд-ниx aнтимeнiнгoкoкoвиx AT: cepeд-ньopiчний пoкaзник Ïx виявлeння

зa пepioд cпocтepeжeння cтaнoвив (35,40 t0,77) %. Омби з виcoкими титpaми AT (> 1:80) мoжyть бути зaлyчeнi дo дoнaцiÏ aнтимeнiнгoкoкoвoÏ плaзми як

Вюник пpoблeм бioлoгiï i мeдицини - 2014 - Вип. 4, Ъэм 4 (116)

173

сировини для подальшого виробництва препаратiв спрямовано) дм.

Висновки.

1. У сироватцi кровi практично здорових доно-роздатних неiмунiзованих оЫб Житомирсько) областi були виявленi природы антименiнгококовi АТ з титрами вщ 1:10 до 1:1280 .

2. Природы антименiнгококовi АТ високих ти-трiв (> 1:80) частше за все зустрiчалися взимку ((55,60 ± 1,76) %).

3. Найбтьш високi титри специфiчних АТ визна-чалися в сироватках кровi донороздатного населення групово) належностi АВ (IV) та А (ll).

Перспективи подальших дослГджень у дано-му напрямку полягають в органiзацii ново) форми iмунного донорства, направлено) на отримання ан-тименiнгококовоi плазми вiд донороздатного неiму-нiзованого населення з високим титром природних антимеынгококових антитiл.

^¡TepaTypa

1. BypaK B. H. KnMHMKO-naToreHeTMHecKMe 0C06eHH0CTM MeHMHroKOKKOBOM MH<£eKUMM y AeTeM / B. H. BypaK, A. C. CeprMeHKO // liKapcbKa cnpaBa. - 2011. - № 5/6. - C. 12-17.

2. Ko.ocKOBa O. K. MeHiHrOKOKOBa iH<£eKuia / O. K. Ko.ocKOBa, l. A. iBaHOBa, y. I. MapycMK, O. B. Be.awoBa // AKTya.bHaa mh-^eKTO.orMa. - 2013. - № 1. - C. 123-127.

3. KpaMapeB C. O. AHa.i3 icTopiM XBopo6M AiTeM, ^o noMep.M BiA MeHiHrOKOKOBOi iH<£eKuii b yKpaiHi y 2008 p. / C. O. KpaMapeB, P. O. MOiceeHKO, B. B. lleAaH [Ta ¡h.] // CoBpeMeHHaa neAMaTpMa. - 2009. - № 5. - C. 14-16.

4. KpaMapeB C. O. CynacHMM AOcBiA npo<£i.naKTMKM MeHiHrOKOKOBOi' iH<£eKuii / C. O. KpaMapeB // KniHiHHa iMyHO.oria. Anepro.oria. iH^eKTO.Oria. - 2006. - № 1. - C. 15-18.

5. Ha3apnyK /1. B. npuHunnbi pa3pa6oTKM aHTMcMHerHOMHMX m aHTMnpoTetfHbix npenapaTOB AOHopcKoM KpoBM : amcc. Ha comc-KaHMe yneHoM cTeneHM AOKTopa MeA. HayK : cneu. 14. 00. 29 «TeMaTO.orMa m nepe.MBaHMe KpoBM» / Ha3apnyK llMAMa BacM-.beBHa. - K., 1994. - 338 c.

6. HaKa3 MO3 yKpai'HM BiA 05. 07. 99 №164 «llpo 3aTBepAxeHHa iHcTpyKuiM, pernaMeHTyioHMX Aia.bHicTb 3aK.aAiB c.yx6M KpoBi yKpai'HM», «iHcTpyKuiro 3 BM3HaneHHa rpyn KpoBi 3a cMcTeMaMM AB0 Ta pe3yc», «iHcTpyKuia 3 AOHopcbKoro n.a3Ma<£epe3y» [E.eKTpoHHMM pecypc] / PexMM AocTyny: http://mozdocs. kiev. ua/view. php?id = 565.

7. HaKa3 MO3 yKpaiHM BiA 15. 04. 2005 p. № 170 «llpo 3aTBepAxeHHa MeTOAMHHMX BKa3iBOK 3 MiKpo6io.oriHHoi AiarHocTMKM MeHiHrOKOKOBOi iH<£eKuii Ta rHiMHMX 6aKTepia.bHMX MeHiHriTiB» [EneKTpoHHMM pecypc] / PexMM AocTyny :

8. http://www. moz. gov. ua/ua/portal/dn_20050415_170. html

9. nepexpecTeHKO ll. M. iMyHHe aohopctbo: po3bmtok Ta nepcneKTMBM / n. M. llepexpecTeHKO, l. B. Ha3apnyK // yKp. xypHa. reMaTO.orii Ta TpaHc<£y3io.noni. - 2009. - № 5. - C. 19-22.

10. Harrison L. H. Global epidemiology of meningococcal disease / L. H. Harrison, C. L. Trotter, M. E. Ramsay // Vaccine. - 2009. - Vol. 27, Suppl. 2. - P. 51-63.

УДК 615. 373. 3

ВИЗНАЧЕННЯ ТИТРУ АНТИМЕН1НГОКОКОВИХ АНТИТ1Л У ДОНОРОЗДАТНОГО СПЕЦИФ1ЧНО НЕ1МУ-Н1ЗОВАНОГО НАСЕЛЕННЯ ЖИТОМИРСЬКО1 ОБЛАСТ1

Терещук Т. О.

Резюме. Висв^леы результати доошджень щодо наявност та титру «природних» антимеынгококових ан-титiл до Neisseria meningitidis (N. meningitidis) серогрупи В у специфiчно неiмунiзованого донороспроможного населення Житомирсько) област в залежност вiд груп кровi за системою АВ0 та сезоыв року для вщбору осiб з метою одержання антимеынгококово) плазми.

Встановлена наявнiсть природних антименшгококових антитiл з рiзним титром (вщ 1:10 до 1:1280) у оЫб вiком вiд18 до 60 роюв, обох статей, усiх груп кровi за системою АВ0. Сезоны спостереження показали, що високий вщсоток сироваткових антимеынгококових антитiл у титрах > 1:80 частiше за все зустрiчався взимку ((55,60 ± 1,15) %). Сироватки кровi з високим титром специфiчних антитiл визначалися у оЫб групово) належ-ностi АВ (IV) ((40,70 ± 0,99) %) та А (ll) ((37,90 ± 0,81) %).

Доведена можливiсть одержання алогенно) iмунноi плазми з високим вмютом антименiнгококових анти-тiл без активно) iмунiзацii специфiчним антигенним препаратом (меынгококовою вакциною), використовуючи метод скрикування.

КлючовГ слова: донороздатне населення, титр антимеынгококових антитш, природний iмунiтет, групи кровi, сезони року.

УДК 615. 373. 3

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТИТРА АНТИМЕНИНГОКОККОВИХ АНТИТЕЛ У ДОНОРОСПОСОБНОГО СПЕЦИФИЧЕСКИ НЕИММУНИЗИРОВАННОГО НАСЕЛЕНИЯ ЖИТОМИРСКОЙ ОБЛАСТИ

Терещук Т. А.

Резюме. Представлены результаты исследования наличия и титра естественных антименингококковых антител к Neisseria meningitidis (N. meningitidis) серогрупы В у специфически неиммунизированного донорос-пособного населения Житомирской области в зависимости от групп крови по системе АВ0 и сезонов года для отбора лиц с целью получения антименингококковой плазмы.

Установлено наличие естественных антименингококковых антител с разным титром (от 1:10 до 1:1280) у лиц возрастом от 18 до 60 лет, обоего пола, всех групп крови по системе АВ0. Сезонные наблюдения показали,

174

ВГсник проблем бюлош i медицини - 2014 - Вип. 4, Том 4 (116)

что высокий процент сывороточных антименингококковых антител в титрах > 1:80 чаще всего встречался зимой ((55,60 ± 1,15) %). Сыворотки крови с высоким титром специфических антител определялись у людей групповой принадлежности АВ (IV) ((40,70 ± 0,99) %) и А (II) ((37,90 ± 0,81) %).

Показана возможность получения аллогенной плазмы с высоким содержанием антименингококкових антител без проведения активной иммунизации менингококковой вакциной, используя метод скрининга.

Ключевые слова: донороспособное население, титр антименингококковых антител, естественный иммунитет, группы крови, сезоны года.

UDC 615. 373. 3

Determination of Antimenigococcal Antibodies Titer in Donorable Specific Non-Immunized Population of Zhytomir Region

Tereschuk T. O.

Abstract. At the present stage of social development practical medicine needs for immune allogenic blood components and blood products of high quality are conditioned by the incidence of infectious diseases among the population. Among socially dangerous diseases meningococcal infection (MI) is becoming increasingly important due to the fact that it is not regulated by methods of specific prevention and it is one of the life-threatening and unpredictable diseases in the structure of infectious disease incidence due to its clinical course. Annually worldwide 500000 cases of MI are reported, 50000 of which have fatal outcomes.

The aim of the research is to determine the presence and titer of antimeningococcal antibodies in donorable non-immunized population of Zhytomyr Region depending on the seasons and AB0 blood groups system for further usage of the obtained results while organizing immune donation.

Research methods. To identify the titer of anti-meningococcal antibodies 792 non-immunized donors of Zhytomyr Region aged from 18 to 60 years, both sexes, all AB0 blood groups were investigated. Number of donors for identifying the activity of natural anti-meningococcal antibodies depending on the season comprised 198 people in each diagnosed group (winter-summer).

Titer of anti-meningococcal antibodies in serum and plasma samples of blood donors was identified using indirect (passive) hemagglutination reaction in micro modification using commercial kit of reagents «Diagnosticum erythrocytic meningococcal of polysaccharide antigens of group B, liquid» (Enterprise for Producing Bacteriological Products Named after G. M. Gabrichevskiy, Russian Federation). Antibody titer in blood serum of donor population of 1:80 and higher was regarded as immune.

Results. Presence of natural anti-meningococcal antibodies with different titers (from < 1:10 to 1:1280) among population aged from 18 to 60 years, both sexes, all AB0 blood groups, during the year was determined. Seasonal observations have shown that a high percentage of serum anti-meningococcal antibody titers (> 1:80) were identified more often in winter ((55,60 ± 1,15) %). Blood serum with high titers of specific antibodies (> 1:80) were identified in patients with AB (IV) ((40,70 ± 0,99) %) and A (II) ((37,90 ± 0,81) % ) blood groups.

Conclusion. Natural anti-meningococcal antibody titers from < 1:10 to 1:1280 were identified in blood serum of apparently healthy non-immunized donor population of Zhytomyr Region. Antibodies to Neisseria meningitidis of se-rogroup B of high titers (> 1:80) were identified more often in winter ((55,60 ± 1,76) %). The highest titers of specific antibodies were identified in blood serum of donor population of AB (IV) and A (II) blood groups.

Keywords: donorable population, titer of anti-meningococcal antibodies, natural immunity, blood groups, seasons of the year.

Рецензент - проф. Кочина M. Л.

Стаття надшшла 11. 09. 2014 р.

BicHMK проблем бюлош i медицини - 2014 - Вип. 4, Том 4 (116)

175