Вивчення мікробіологічних властивостей Streptococcus pneumoniae Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК: 619.98:576.8

Kicepa Я.В., д. вет. н., професор Сторчак Ю.Г., acnipaHT © Лъв\всъкий нацюналънийутеерситет ветеринарногмедицини та бютехнологш iмет С.З. Гжицъкого

ВИВЧЕННЯ М1КРОБЮЛОГ1ЧНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE

При nociei Streptococcus pneumoniae на кров'янии МПА гз додаванням 10% глюкози picm кулътури проходив у вигляд1 плоских колоти блакитного колъору гз вираженою зоною а-гемол1зу. Штами Streptococcus pneumoniae мали виражену чутлив1стъ щодо затримкиросту на енрофлоксацин та офлоксацин, арезистенттстъ була виявленаутръох штамах до тетрацикл1ну.

Патогенною д1ею найбыъш володттъ видгленг штами кулътури 107, 106, 108, якг викликали загибелъ тварин eidnoeidno через 12, 16 та 36 годин.

Ключое1 слова: тфекщя, стрептококи, патогент властивост1, бт Murni.

Вступ. Стрептококи широко поширеш у природ^ викликаючи захворювання як людей, так i тварин. Багатограншсть фактор1в i систем захисту створили умови для нормального функцюнування оргашзму, проте особливу небезпеку викликають захворювання молодняку сшьськогосподарських тварин.

Метою нашо! роботи було вивчити морфолопчно-тинктор1альш, культурально-бюх1м1чш та бюлопчш властивост1 штам1в культур Streptococcus pneumoniae.

Матер1ал i методи. Дослщження проведенш в лабораторп бактерюлопчного контролю якост1 i безпечност1 ветеринарних препарат1в Державного науково-дослщного контрольного шституту ветеринарних препарат1в та кормових добавок. В умовах в1варш шституту проведен! експериментальш дослщження на бших мишах, яю були шфжоваш трьома р1зними штамами Streptococcus pneumoniae (штам 106, 107, 108). Проведен! дослщження з визначення культурально-морфолопчних, бюх1м1чних, бюлопчних властивостей (LD50) i резистентност1 дослщжуваних штам1в до антибактер1альних засоб1в.

Морфологш бактерш вивчали мжроскошчними дослщженнями в мазках, фарбованих за Грамом. При вивченш культурально-морфолопчних властивостей штам1в визначали характер росту на сироватково-цукровому МПА (шоколадний агар), а також на сироватковому МПБ. В1рулентшсть штам1в для бших мишей визначали методом титрування [4, 5] i проводили визначення величини ЛД50 в десятикратних розведеннях вщ 1 до 10 ступешв. Розрахунок величини ЛД50 проводили за методом Кербера [6]. Антибютикорезистентшсть штам1в визначали стандартним дискодифузшним методом [7, 8]. У дослщженнях використовували комерцшш диски з р1зними антибактер1альними препаратами.

©

136

Результати дослщження. При дослщженнях Streptococcus pneumoniae picT культури спостер1гався у Bcix трьох дослщжуваних штамах. Розм1р колонш становив 1,5 (штам 106), 1,2 (штам 107) та 1,4 мм (штам 108). Розмщення стрептокоюв попарне, у МПБ - короткими ланцюжками, вони не рухлив1 та не утворюють спор. Фарбуються за Грамом позитивно (стрептококи зафарбоваш у синш кол1р). Розм1р колонш у штамах варше вщ 1,2 до 1,5 мм (таблиця 1).

Таблиця 1

МорфолоНчно-тинктор1альш властивосп штам1в

_Streptococcus pneumoniae__

Показники штам 106 штам 107 штам 108

Po3Mip колон1й, мм 1,5 1,2 1,4

Розташування попарно

Рухлив1сть -

Утворення спор -

Фарбування за Грамом +

Проведениям дослщжень на культурально-бюх1м1чш властивост1 (таблиця 2) встановлено, що на кров'яному МПА з додаванням 1% глюкози в ycix трьох штамах спостер1гався picT i3 вираженими плоскими колошями блакитного кольору та утворенням ч1ткою зоною а-гемол1зу.

Таблиця 2

Культурально-бшх1м1чш властивост1 штам1в Streptococcus pneumoniae

Показники штам 106 штам 107 штам 108

PicT на поживному середовищ1

5%-й кров'яний МПА з 1% глюкози плосю колон!! блакитного кольору з ч1ткою зоною а-гемол1зу

Сироватковий МПБ piBHOMipHe помутншня piBHOMipHe помутншня з невеликим осадом на дш проб1рки невеликий осад

BioxiMinm властивост1

Глюкоза + + +

Лактоза + + +

Арабшоза - - -

Мальтоза + + +

1нул1н + + -

МПБ з 20% жовч1 + + +

На сироватковому МПБ штам 106 спричинив р1вном1рне помутн1ння, а у штам1 107 спостер1галось р1вном1рне помутншня i3 утворенням незначного осаду на дш проб1рки. Штам 108 також спричинив утворення незначного осаду.

При проведенш 6ioxiMi4HHx досл1джень кожного i3 штам1в спостер1галось розщеплення глюкози, мальтози та лактози. Розщеплення араб1нози не спостер1галось у жодного i3 штам1в. Розщеплення ¿нул1ну спостер1галось при дослщженш штаму 106 та 107.

137

Зарезультатами вивчення бюлопчних властивостей (таблиця 3) видно, що штам збудника 107 мае бшьш виражену патогенну дш на оргашзм пщдослщних лабораторних тварин, викликавши загибель протягом 12 годин. Штами 106 та 108 володшть невисокою патогеншстю, викликавши загибель тварин за 16 год (у концентраци 6,8х104 м.т.) та за 36 годин ¿з найбшьшою концентращею введения культури вщповщно.

Таблиця 3

Показники штам 106 штам 107 штам 108

LD50 6,8x104 1,0x104 1,0x106

Терм1н загибел1 тварин, год. 16 12 36

Дослщження чутливост1 штам1в 106, 107 та 108 (таблиця 4) до р1зних антибактер1альних препарат1в засвщчили, що Bei штами чутлив1 до енрофлоксацину, висока чутливкть у штаму 106 до офлоксацину. До тетрациклшу резистентш yci дослщжуваш штами, а також штам 107 резистентний до ванкомщину, цефалексину, стрептомщину, амоксициклшу, амщилшу, цефазолшу та лшкомщину. У штаму 108 резистентшсть виявлена до цефалексину, доксициклшу, стрептомщину, цефазолшу та еритромщину.

Таблиця 4

Чутлив1сть культури Streptococcus pneumoniae

Назва препарату штам 106 штам 107 штам 108

Затримка росту, мм

Енрофлоксацин 35 35 35 25 24 26 24 23 23

Фурадошзол 19 19 20 17 18 18 20 20 20

Ванкомщин 17 18 17 - - - 17 18 18

Рифамп1цин 24 22 23 22 21 21 24 25 24

Тетрацикл1н - - - - - - - - -

Пол1м1ксин В 13 12 14 18 19 19 12 11 12

Канамщин 24 23 23 16 15 16 22 22 22

Цефалексин 14-20 16-21 15-18 - - - - - -

Доксицикл1н 19 20 20 16 17 17 - - -

Офлоксацин 25-28 25-27 24-26 14 13 13 20 22 21

Гентамщин 24 25 24 16 15 17 22 21 21

Стрептом1цин 16 16 17 - - - - - -

Амоксицикл1н 18 17 18 - - - 14 15 14

Амп1цил1н 14-18 13-18 14-17 - - - 12 12 13

Цефазол1н 17 17 18 - - - - - -

Лшкомщин 12 11 11 - - - 15 15 16

Еритром1цин 22 22 23 20 22 20 - - -

Висновки:

1. Дослщжуваш штами Streptococcus pneumonia за Грамом фарбуються у син1й кол1р (Грам +), стрептококи розташован1 попарно, в МПБ - невеликими ланцюжками, не рухлив1, спор не утворюють.

2. При nocißi на кров'яному МПА i3 1% глюкози досл1джуван1 штами дали picT у вигляд1 плоских колонш блакитного кольору i3 ч1тко вираженою зоною а-гемол1зу. На сироватковому МПБ спостер1галось р1вном1рне помутн1ння та незначний осад на дн1 проб1рки.

138

3. Дослщжуваш штами культури розщеплюють глюкозу, лактозу, мальтозу.

4. Штам 107 мае бшьш виражену патогенну дш на оргашзм лабораторно! тварини, викликавши загибель протягом 12 годин. Штами 106 та 108 викликали загибель тварин за 16 i 36 годин вщповщно.

5. У дослщжуваних штам1в найбшьш виражена затримка росту до енрофлоксацину, у штаму 106 до офлоксацину. Резистентшсть виявлена у трьох штам1в до тетрацикл1ну, а також у штам1в 107 та 108 до цефалексину. Штам 107 проявив резистентшсть до стрептомщину, амоксициклшу, ампщилшу, цефазолшу талшкомщину, штам 108 - до еритромщину.

Л1тература

1. Каришева А.Ф. Спещальна етзоотолопя /А.Ф. Каришева. - К.: Вища осв1та. - 2002. -с.471-477.

2. Кравщв Р.Й. 1нфекцшш хвороби велико1 рогато! худоби /Р.Й. Кравщв., Я.Д. Злонкевич, Б.А. Корж, I.I. Олексюк - Льв1в. - 2001. - С. 318-328.

3. Терехов В.И. Стрептококкоз телят и поросят /В.И.Терехов, А.В.Скориков, О.Б.Терехова //Ветеринария Кубани. - 2007. - №1. - С 5-8.

4. Гайдукевич О.М. Анал1тична х1м1я. / О. М. Гайдукевич, В. В. Болотов, Ю. В. Сич. — X.: Основа; Вид-во НФАУ, 2000.— 432 с.

5. Болотов В.В. Анал1тична х1м1я /В.В. Болотов, О.М.Свечн1кова, С.В.Кол1Сник. - X., 2004. - 447 с.

6. 1вченко В.М. Загальш методи лабораторних досл1джень у лаборатор1ях ветеринарно! медицини /В.М. 1вченко, H.I. Сахнюк, Т.О. Гаркавенко. - Б1ла Церква. - 2012. - 78с.

7. MB 9.9.5-143-2007 Визначення чутливост1 м1крооргашзм1в до антибактер1альних npenapamie. Методичш вказ1вки. - К.и!в, 2007. - С. 43-67.

8. Семина Н.А. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам /Н.А. Семина. С.В, Сидоренко, С.П. Резван. //Методические указания МУК 4.21890-04. - 2004 - 54с.

Summary

Y.V. Kisera, Doctor of Veterinary Sciences, Professor;

Storchak Y.G., postgraduate Lviv national university of veterinary medicine and biotechnology named of S. Z. Gzitskyj STUDYING MICROBIOLOGICAL PROPERTIES OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE When sowing Streptococcus pneumoniae on blood MDA with addition of 10% glucose culture growth took place in the form of flat colonies with blue marked area of a-hemolysis. Strains of Streptococcus pneumoniae were pronounced sensitivity to growth retardation on enrofloxacin and ofloxacin, and resistance was detected in three strains to tetracycline.

Pathogenic action of isolates of culture is 107, 106, 108, which caused the death of animals respectively, in 12, 16 and 36 hours.

Key words: infection, streptococcus, pathogenic properties, white mouse.

Рецензент - д.б.н., професор Маслянко Р.П.

139