CC BY
14
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^OHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHoi' MegnuUHH Ta 6i0TexH0iroriH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies
doi: 10.15421/nvlvet7835
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 619:616.98:619:616.08 (477.83)
ТЛ KJ> •• • 1 ••• • *_» •
Видовии склад циркулюючо1 м1крофлори та п ст1ик1сть до антибактер1альних препарат1в в умовах ПАФ «Бережниця» Жидач1вського раИону Льв1всько*1 област1
Я.В. Kicepa, Ю Г. Сторчак, Л.Я. Божик kisera53 @ukr.net, juliettus1@gmail.com
Львiвський нацюнальний унгверситет ветеринарно1 медицини та бютехнологт iMeHi С.З. Гжицького,
вул. Пекарська, 50, Львiв, 79010, Укра'ша
Головним питанням сьогодення е забезпечення безпечноi та ятсног тваринницькоi продукцн i3 врахуванням ycix аспек-mie виробництва nродуктiв харчування, вiд ферми до столу. З метою збeрeжeноcтi молодняку тварин, тдвищення отрно-cmi жунног системи оргашзму, запоб^ання впливу тфекцтних патогетв на макрооргатзм та навколишне середовище проведет до^дження з визначення циркулюючог в умовах господарства мжрофлори. Бакmeрiологiчнi до^дження включали в себе поав до^джуваного маmeрiалу на живильш середовища, ix iдeнmифiкцiю та вивчення чуmливоcmi до анmибiоmикiв. Для проведення аналiзу чуmливоcmi мiкроорганiзмiв до лжарських (анmибакmeрiальниx) речовин диско-дифузшним методом використовували на поживне середовище АГВ, на яке «газоном» виавали аналiзуючi культури та використовували диски з анmибакmeрiальними препаратами. За результатами бакmeрiологiчниx до^джень проб молока встановлено, що у 70% до^джуваних проб патогенноi мжрофлори не видыено. У 30% до^джуваних проб встановлено наявтсть у пробах молока таких патогенних мiкроорганiзмiв, як Staphylococcus aureus та Proteus vulgaris. Бакmeрiологiчнi до^дження ексудату з тхви, вiдiбраного у корiв тсля отелу, заcвiдчили наявтсть у них Streptococcus epidermidis, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Proteus vulgaris та плiceнeвиx грибiв роду Aspergillus spp. До^дженнями ексудату з носових xодiв та зieу у телят встановлено, що у вах до^джуваних пробах присутня Escherichia coli. Результатами до^джень калу телят встановлена наявтсть ряду мiкроорганiзмiв: Escherihia coli, Proteus vulgaris, Escherihia coli haemolitica, Staphylococcus haemoliticus, плкеневих грибiв роду Aspergillus у рiзниx вiдcоmковиx cпiввiдношeнняx. При визначeннi чуmливоcmi видыених культур до анmибакmeрiальниx прeпараmiв встановлено, що культури Staphylococcus та Escherihia coli haemolitica е чутливими до вЫх анmибiоmикiв; Proteus vulgaris проявив сттюсть до амтцилту, амоксициклту.
Knmnoei слова: бiологiчна безпека, факторн хвороби, умовно-патогенна мжрофлора, молоко, фекалп, Escherichia coli, Proteus vulgaris, плiceнeвi гриби роду Aspergillus, анmибакmeрiальнi препарати, сттюсть.
ВидовоИ состав циркулирующей микрофлоры и ее стоИкость к антибактериальным препаратам в условиях ЧАФ «Бережница» Жидачевского района Львовской области
Я.В. Кисера, ЮГ. Сторчак, Л.Я. Божик kisera53 @ukr.net, juliettus1@gmail.com
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого,
ул. Пекарская, 50, г. Львов, 79010, Украина
Главным вопросом сегодня является обеспечение безопасной и качественной животноводческой продукции с учетом всех аспектов производства продуктов питания, от фермы до стола. С целью сохранности молодняка животных, повышения сопротивляемости иммунной системы организма, предотвращения воздействия инфекционных патогенов на мак-
Citation:
Kisera, Y.V., Storchak, Y.G., Bozsik, L.Y. (2017). Special composition of circular microflora and its stability to antibacterial preparations in the conditions of PAF «Brezhnitsya» of the Zhedachivsky district of Lviv region. Scientific Messenger LNUVMB, 19(78), 172-176.
роорганизм и окружающую среду проведены исследования по определению циркулирующей в условиях хозяйства микрофлоры. Бактериологические исследования включали в себя посев исследуемого материала на питательные среды, их иденти-фикцию и изучение чувствительности к антибиотикам. Для проведения анализа чувствительности микроорганизмов к лекарственным (антибактериальным) препаратам диско-диффузным методом использовали питательную среду АГВ, на которую «газоном» высевали анализирующие культуры и использовали диски с антибактериальными препаратами. По результатам бактериологических исследований проб молока установлено, что у 70% исследуемых проб патогенную микрофлору не выделено. В 30% исследуемых проб установлено наличие в пробах молока таких патогенных микроорганизмов, как Staphylococcus aureus и Proteus vulgaris. Бактериологические исследования экссудата из влагалища, отобранного у коров после отела, показали наличие в них Streptococcus epidermidis, Enterobacter cloacae, EscheriMa coli, Proteus vulgaris и плесневых грибов рода Aspergillus spp. Исследованиями экссудата из носовых ходов и зева у телят установлено, что во всех исследуемых пробах присутствует Escherichia coli. Результатами исследований кала телят установлено наличие ряда микроорганизмов: Escherihia coli, Proteus vulgaris, Escherihia coli haemolitica, Staphylococcus haemoliticus, плесневых грибов рода Aspergillus в разных процентных соотношениях. При определении чувствительности выделенных культур к антибактериальным препаратам установлено, что культуры Staphylococcus и Escherihia coli haemolitica чувствительны ко всем антибиотикам Proteus vulgaris проявил устойчивость к ампициллину, амоксициклин.
Ключевые слова: биологическая безопасность, факторные болезни, условно-патогенная микрофлора, молоко, фекалии, Escherichia coli, Proteus vulgaris, плесневые грибы рода Aspergillus, антибактериальные препараты, устойчивость.
Special composition of circular microflora and its stability to antibacterial preparations in the conditions of PAF «Brezhnitsya» of the Zhedachivsky district of Lviv region
Y.V. Kisera, Y.G. Storchak, L.Y. Bozsik kisera53 @ukr.net, juliettus1@gmail.com
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska Str., 50, Lviv, 79010, Ukraine
The main issue today is the provision of safe and high-quality livestock products, taking into account all aspects offood production, from farm to table. In order to preserve the young animals, increase the resistance of the immune system of the organism, prevent the influence of infectious pathogens on macroorganism and the environment, studies have been conducted to determine the microflora circulating in the conditions of the economy. In particular, from the point of view of food safety, E. coli is a dangerous factor affecting their quality, causing various diseases in humans and animals. In the body of a healthy bovine animal, Escherichia coli may be present in an admissible concentration of up to 107 CFUs, Escherichia coli haemolitica is normally absent in the animal body. Bacteriological studies included seeding of the test material on the nutrient medium, their identification and the study of antibiotic susceptibility. For the analysis of the sensitivity of microorganisms to medicinal (antibacterial) substances by disco-diffusion method, they used a nutrient medium of AGV, on which the «lawn» was sown analyzing cultures and used discs with antibacterial preparations. According to the results of bacteriological studies of milk samples, it has been determined that 70% of the examined samples of pathogenic microflora have not been isolated. In 30% of the tested samples, the presence of pathogenic microorganisms such as Staphylococcus aureus and Proteus vulgaris in milk samples was established. Bacteriological studies of vaginal exudate taken from cows after the calving have shown that they have Streptococcus epidermidis, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Proteus vulgaris and fungus of the genus Aspergillus spp. Investigations of the exudate from the nasal passages and the calving of the calves have revealed that Escherichia coli is present in all the samples tested. The results of studies of calf sturgeon revealed the presence of a number of microorganisms: Escherihia coli, Proteus vulgaris, Escherihia coli haemolitica, Staphylococcus haemoliti-cus, molds of the genus Aspergillus in different percentages. When determining the sensitivity of isolated cultures to antibacterial drugs by the disc diffusion method, it has been established that Staphylococcus and Escherihia coli haemolitica cultures are susceptible to all antibiotics; Proteus vulgaris exhibits resistance to ampicillin, amoxicillin.
Key words: biological safety, factor diseases, conditionally pathogenic microflora, milk, feces, Escherichia coli, Proteus vulgar-is, molds of the genus Aspergillus, antibacterial drugs, resistance.
Вступ
Недотримання саштарно-ппешчних правил утри-мання тварин, застосування штенсивних технологш та надм1рне скупчення тварин - усе це сприяе виник-ненню асощативних захворювань, особливо серед молодняку тварин. Доведено, що в шфекцшнш патологи тварин домшуюче значения мають умовно пато-генш бактери, яш спричиняють факторш шфекцп. На долю цих хвороб припадае 81,4% випадшв (Peleno, 2012).
З точки зору безпеки харчових продуклв E. coli е небезпечним чинником, що впливае на !х яшсть (Bean and Griffin, 1990; Mead et al., 1999; Bryan, 2001). Шта-
mh E. coli BHK^HKaroTb pi3Hi 3axBoproBaHHH y groguHH Ta TBapHH. TeMomTHHHa E. coli MO^e npu3BecTH go reMO-pariHHoro Kogiry, reMogiTHHHoro ypeMiHHoro CHHgpoMy Ta TpoM6oTHHHoi' тpoм6oцнтопeнiннoI xBopo6u. B op-raHi3Mi 3gopoBoI BeguKoI poraToI xygo6u Escherichia coli MO^e 3HaxogHTHca y gonycTHMiä KOH^mpa^I go 107 KyO, Escherichia coli haemolitica b opraHi3Mi TBa-puH y HopMi He noBHHHO 6yTH (Dorn, 1993; Boyce et al., 1995).
3 MeToro 36epe®eHOCTi MogogHmy TBapuH, nigBH-^eHHH onipHOCTi iMyHHoI CHCTeMH opraHi3My Heo6xigHO npoBogHTH gocgig^eHHH цнpкygroroнoI b yMOBax roc-nogapcTB MiKpo^gopu. BroHaneHHH BugoBoro CKgagy цнpкygroroнoI MiKpo^gopu, Ii BipygeHTHicTb Ta crin-
к1сть до антибактер1альних препарапв е важливим фактором бюлопчного захисту (Holovko, 2009).
Мета i завдання дослгджень: визначити в умовах ПАФ «Бережниця» Жидач1вського району Льв1всько! обласп видовий склад циркулюючо! бактер1ально! м1крофлори та ii стшшсть до антибактер1альних препарата. Для досягнення дано! мети були поставлен! наступш завдання: провести бактерюлопчш досль дження змив1в з носа, з1ву та калу, вщбраних в1д телят; секрет 1з молочно! залози та ексудат 1з матки у кор1в; вивчити морфолопчш властивосп бактер1аль-но! м1крофлори, процентне сшвввдношення ii видового складу та визначити чутливють до антибютишв.
Бактерюлопчш дослвдження проводились за методикою Висоцького А.£ 1з сшвавторами, як1 включали поав досл1джуваного матер1алу на живильш середовища, вис1в отриманих культур на диференщальш середовища з метою визначення !х морфолопчних властивостей, вивчення !х чутливоси до антибютишв (Vysockij and Baranovskaja, 2002; Guardabassi, 2008; Levkivska et al., 2017). Для вивчення антибютикочутливосп 1золяти виавали на середовище АГВ та використовували диски з антибактер1альними препаратами.
Результата та Тх обговорення
Матерiал та методи дослвджень
Дослщження проводились у ПАФ «Бережниця» Жидач1вського району Льв1всько! обласп, в умовах кафедри ешзоотологп Льв1вського нацюнального ушверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш 1меш С.З. Гжицького. Для дослвджень в1д кор1в тсля отелу ввдбирали молоко та ексудат з тхви, ввд телят 2-тижневого в1ку - змиви з носа, з1ву та кал. У досль дах було зад1яно 20 кор1в та 20 телят симентальсько! породи.
Видовий склад патогенно'' t
3a pe3ygbTaTaMH 6aKTepiogoriHHHx gocgig^eHb mogoKa (Ta6g. 1) BCTaHOBgeHO, ^o y 70% gocgigjKyBaHux npo6 naToreHHoI Ta yMOBHO-naToreHHoI MiKpo^gopu BugigeHO He 6ygo. y 30% gocgig^yBaHux npo6 6ygo BCTaHOBgeHO HaaBHicTb y npo6ax MogoKa Staphylococcus aureus y KigbKOCTi 102 Ta Proteus vulgaris y KigbKOCTi 104.
BaKTepiogorinHi gocgig^eHHH MaTepiagy, Bigi6paHO-ro 3 nixBH Big KopiB nicjia OTegy (Ta6g. 2), 3acBiggiHgH HaaBHicTb y hhx Streptococcus epidermidis, Enterobacter cloacae, Escherihia coli, Proteus vulgaris, Staphylococcus haemolyticus Ta ngiceHeBux rpu6iB pogy Aspergillus spp.
Та6мицм 1
№ п/п Ha3Ba MiKpoopraHi3My Концентращя збудника, КУО
1 Staphylococcus aureus 102
2 Proteus vulgaris 104
Таблиц Концентрацiя мiкроорганiзмiв, видiлених з шхви в1д ко|)1в пiсля отелу, КУО, n = 20
№ п/п Proteus vulgaris Streptococcus epidermidis Escherichia coli Enterobacter cloacae Staphylococcus haemolyticus Aspergillus spp.
1 - 102 103 - - +
2 103 - 105 - - +
3 103 - - 103 - +
4 - - 105 - 103 -
5 104 - 102 - - +
6 - 102 102 - - +
7 103 - 105 - - +
8 102 - - 105 - +
9 - - 103 - 104 -
10 104 - 105 - - +
11 - 102 104 - - +
12 103 - 105 - - +
13 102 - - 105 - +
14 - - 105 - 103 -
15 103 - 102 - - -
16 - 102 105 - - +
17 103 - 105 - - +
18 102 - - 104 - +
19 - - 105 - 102 +
20 104 - 103 - - -
3 20-h gocgig^yBaHux npo6 y 16-h npo6ax BugigeHO
Escherichia coli, y 15-h npo6ax - Aspergillus spp,. y 12-h npo6ax - Proteus vulgaris, y 4-x npo6ax - Staphylococcus haemoliticus, y 4-x npo6ax - Streptococcus epidermidis, y 4-x npo6ax - Enterobacter cloacae.
^ocgig^eHHHMH eKcygaiy 3 hocobhx xogiB Ta 3iBy y TegaT (Ta6g. 3) BCTaHOBgeHO, ^o y Bcix 20-h go-cgig^yBaHux npo6ax npucyTHa E. coli. y 4 npo6ax bh-aBgeHO Proteus vulgaris, Proteus morganii, Citrobacter spp., Enterobacter cloacae.
Таблиця 3
Концентращя м1крооргашзм1в, видшених з носа i з1ву телят, КУО, n = 20_
№ п/п Proteus vulgaris Proteus morganii Escherichia coli Enterobacter cloacae Citrobacter spp.
1 - - 103 - -
2 - - 102 103 -
3 102 - 104 -
4 - - 103 - 102
5 - 103 102 - -
6 - - 103 - -
7 - - 102 - 104
8 102 - 103 - -
9 - 102 103 102 -
10 - - 102 - -
11 - - 104 - -
12 - 103 103 102 -
13 - - 102 - -
14 103 - 103 - 102
15 - - 102 - -
16 - - 102 104 -
17 - 104 104 - -
18 103 - 103 - -
19 - - 102 - -
20 - - 102 - 103
Як видно з таблиц 4 при дослвджеш 20-и проб ка- Staphylococcus haemoliticus у 4-х пробах, Staphylococ-
лу телят виявлено Escherichia coli у Bcix пробах, Pro- cus aureus у 4-х пробах, raiceHeBi гриби роду Aspergil-
teus vulgaris у 15-и пробах, Enterobacter faecalis у 6-и lus у 6-и пробах. пробах, Escherichia coli haemolitica у 3-х пробах,
Таблиця 4
Концентращя мiкроорганiзмiв, видшених з калу ввд телят, КУО, n = 20 _
№ п/п Pr. vulgaris E. coli E. coli haem. Enterobacter faecalis S. haemolyticus S. aureus Asp. spp.
1 103 103 - - - - +
2 102 105 104 - - 104 -
3 104 104 - - 102 - -
4 - 105 - - - - -
5 104 104 - 104 - - -
6 105 104 - 103 - - +
7 102 104 104 - - 105 +
8 102 104 - - 104 - -
9 103 105 - 105 - - -
10 102 103 - - - - -
11 104 104 - - - - +
12 102 105 - 105 - 102 -
13 - 103 - - 103 - -
14 - 105 - - - - -
15 104 104 - 104 - - -
16 104 105 - - - - +
17 - 103 103 - - 104 +
18 102 102 - - - - -
19 - 105 - 105 - - -
20 105 104 - - 103 - -
При визначенш чутливосп видшених культур до антибактeрiальних препарапв (табл. 5) встановлено, що стафшокок чутливий до вах антибютишв; протей проявив cтiйкicть до амтцилшу, амокcициклiну та чутливicть до цефотоксиму, цeфтрiакcону, цефтази-диму, гeнтамiцину, iмiпiнeму, цeфeнiлу, цефоперазо-ну, iмiкацину, цефшрому; гeмолiтична eшeрихiя чут-лива до вах антибактeрiальних прeпаратiв.
Отже, результата дослвджень заcвiдчили, що в умовах господарства серед велико! рогато! худоби
цнpкygroe TaKa MiKpo^gopa: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemoliticus, Streptococcus epidermidis, Proteus vulgaris, Proteus morganii, Enterobacter cloacae, Enterobacter faecalis, Escherichia coli, Escherichia coli haemolitica, Citrobacter spp., ngiceHeBi rpu6u pogy Aspergillus. BcraHOB^eHO, ^o gocgig^yBam Kygbrypu nyT^HBi go Bcix aHTH6ioTHKiB, ^o CBigHHTb npo Big-cyTHicTb pe3HCTeHTHocTi go amu6ioTHKiB nepe3 HeKoH-TpogboBaHe i'x BHKopucTaHHa.
Таблиця 5
Чутливкть видшених патогенних культур до антибактерiальних ирсиаратш_
Назва антибактeрiального препарату Staphylococcus aureus Proteus vulgaris Escherichia coli haemolytica
Оксацилш Ч Ч Ч
Еритромшин Ч Ч Ч
Клшдамщин Ч Ч Ч
Ципрофлоксацин Ч Ч Ч
Гeнтамiцин Ч Ч Ч
Ванкомiцин Ч Ч Ч
Тетрациклш Ч Ч Ч
Рiфампiцин Ч Ч Ч
Лiнeзолiд Ч Ч Ч
Цeфпiром Ч Ч Ч
Iмiпiнeм Ч Ч Ч
Ампшилш Ч Р Р
Амокcициклiн Ч Р Ч
Цефотоксим Ч Ч Ч
Цeфтрiакcон Ч Ч Ч
Цефтазидим Ч Ч Ч
Цефешм Ч Ч Ч
Цефоперазон Ч Ч Ч
Амiкацин Ч Ч Ч
Висновки
1. Бактeрiологiчним доcлiджeннями молока та ексудату з шхви, вщбраних вiд корiв тсля отелу, встановлена наявнicть Streptococcus epidermidis, En-terobacter cloacae, Escherichia coli, Proteus vulgaris та плгсеневих грибгв роду Aspergillus spp.
2. 3i змивiв з носа, зiву та калу, вiдiбраних вiд телят, видшено Escherichia coli, Proteus та плiceнeвi гриби Aspergillus.
3. Доcлiджуванi культури мiкроорганiзмiв е чут-ливими до антибактeрiальних прeпаратiв.
Перспективи подальших дослгджень полягають у подальшому ретельному мониторингу циркулюючо! мiкрофлори з метою розробки рекомендацш щодо профiлактики захворювань велико! рогато! худоби в умовах ПАФ «Бережниця» Жидачiвcького району Львiвcько! область
Бiблiографiчнi посилання
Peleno, R.A. (2012). Epizootolohichnyi monitorynh khvorob svynei v Ukraini. Veterynarna biotekhnolohiia. 21, 330-335 (in Ukrainian). Bean, N.H., Griffin, P.M.G. (1990). Foodborne disease outbreaks in the US 1973-1987: Pathogens, vehicles, and trends. J. Food Prot. 53, 804-817. Mead, P.S., Slutsker, L., Dietz, V., McCraig, L.F., Bresee, J.S., Shapiro, C., Griffin, P.M., Tauxe, R.V.
(1999). Food-related illness and death in the United States. Emerg. Infect. Dis. 5, 607-625.
Bryan, F.L. (2001). Reflections on a career in public health: Evolving foodborne pathogens, environmental health, and food safety programs. J. Environ. Health. 65, 14-24.
Dorn, C.R. (1993). Review of food borne outbreak of Escherichia coli O157:H7 infection in the western United States. J. Am. Vet. Med. Assoc. 203:15831587.
Boyce, T.G., Swerdlow, D.L., Griffin, P.M. (1995). Escherichia coli O157:H7 and the hemolyt-icuremic syndrome. N. Engl. J. Med. 333, 364-368.
Holovko, A.M. (2009). Biolohichna ta henetychna bezpeka Ukrainy Mizhvid. nauk. temat. zbirnyk. «Veterynarna medytsyna». Kharkiv. 92, 10-13 (in Ukrainian).
Vysockij, A.Je., Baranovskaja, Z.N. (2002). Spravochnik po bakteriologicheskim metodam izyskanij v veterinarii. Izdatel'stvo Ministerstva sel'skogo hozjajstva Respubliki Belarus' (in Russian).
Levkivska, N.D., Kurtiak, B.M., Levkivskyi, D.M., Padovskyi, A.I., Gutyj, B.V., Semaniuk, V.I. (2017). Laboratorna diahnostyka infektsiinykh khvorob tvaryn bakterialnoi etiolohii. Lviv: SPOLOM (in Ukrainian).
Guardabassi, L. (2008). Guide to Antimicrobial Use in Animals. Blackwell Publishing.
Received 25.09.2017 Received in revised form 21.10.2017 Accepted 24.10.2017
