CC BY
20
УДК 579.62
Т.М. ПАШКОВА1, 2, М.В. СЫЧЕВА1, 2, О.Л. КАРТАШОВА1, 2
1 Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург
2
Оренбургский государственный аграрный университет, Оренбург
ВИДОВОЙ СОСТАВ И АНТИМИКОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ГРИБОВ РОДА CANDIDA, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ
Представлен видовой состав и регистр антимикотикорезистентности грибов рода Candida, изолированных из помета цыплят-бройлеров. В видовом разнообразии доминировал вид C. intermedia (36,8%), реже встречались C. glabrata (26,3%), C. utilis (21,1%) и C. albicans (15,8%). Для количественной характеристики антимикотикорезистентности Candida spp. использован показатель «маркер резистентности» -МР. Показано, что МР выделенных Candida spp. к противогрибковым препаратам равен 0,21 ± 0,02. Что касается межвидовых различий, максимальный уровень МР установлен у C. glabrata (0,4 ± 0,05), минимальный - у C. albicans (0,12 ± 0,03). У C. intermedia МР - 0,21 ± 0,04. Таким образом, в результате проведенных исследований выявлена максимальная чувствительность грибов рода Candida к клотримазолу и нистатину. Полученные данные будут способствовать выбору препаратов для эффективной терапии животных с факторными инфекционно-воспалительными заболеваниями, вызванными Candida spp.
Ключевые слова: грибы рода Candida, антимикотики, цыплята-бройлеры.
Введение
В настоящее время наблюдается распространение условно патогенных дрожже-подобных грибков рода Candida среди больных и здоровых людей и животных, а также рост заболеваемости кандидозом [1]. Candida spp., являясь оппортунистическим патогеном, может вызывать поражение слизистых оболочек разной степени тяжести, вплоть до развития системных микозов [2].
Данные о чувствительности грибов рода Candida к противогрибковым препаратам имеют региональные особенности и носят разрозненный характер [3]. Для эффективной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных Candida spp., необходимо учитывать результаты регионального мониторинга распространения антимикотикорезистентности грибов рода Candida.
Цель исследования - изучить видовое разнообразие и антимикотикорезистент-ность дрожжеподобных грибов рода Candida, выделенных из помета цыплят-бройлеров.
Материалы и методы
В работе использовано 38 штаммов грибов рода Candida, изолированных из помета цыплят-бройлеров. Выделение и идентификацию грибов рода Candida проводили по Р.Н. Ребровой (1989) [4]. Восприимчивость к антимикотическим препаратам определяли с помощью расширенного набора дисков (нистатин - 80 мкг/диск, итраконазол -10 мкг/диск, флуконазол - 40 мкг/диск, клотримазол - 10 мкг/диск, кетоконазол -20 мкг/диск, амфотерицин В - 40 мкг/диск) для оценки чувствительности к противогрибковым препаратам диско-диффузионным методом (ФБУН «НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург).
Статистически полученные результаты обработаны с помощью параметрических методов [5].
© Пашкова Т.М., Сычева М.В., Карташова О.Л., 2018
Результаты исследований
Показано, что из 40 обследованных цыплят-бройлеров у 38 (95%) из фекалий изолированы Candida spp. с показателем микробной обсемененности от 1 • 103 до 1 • 104 КОЕ/г.
Проведена идентификация выделенных грибов Candida. Установлено видовое разнообразие: C. intermedia, C. glabrata, C. utilis, C. albicans. Доминировал вид C. Intermedia: в 36,8% случаев. 26,3% фекальных изолятов отнесены к виду C. glabrata, 21,1% штаммов дрожжеподобных грибов идентифицированы как C. utilis и 15,8% - как C. albicans.
На следующем этапе исследования была изучена резистентность выделенных грибов рода Candida к противогрибковым препаратам.
Показана максимальная чувствительность грибов рода Candida к клотримазолу (79% изолятов) и нистатину (60,5% штаммов). Отмечена минимальная чувствительность (2,6% изолятов) к итраконазолу.
Вместе с тем выявлен высокий процент резистентности выделенных грибов к противомикробным препаратам: к итраконазолу резистентны 50% изолятов, к нистатину - 39,5% штаммов, к кетоконазолу - 34,2%.
Установлены и межвидовые различия антимикотикочувствительности выделенных грибов рода Candida (рисунок). %
100 90 80 70 60 50 -40 -30 -20 -10 0
■ C. albicans О C. glabrata й C. intermedia ■ C. utilis
Антимикочувствительность разных видов грибов рода Candida, выделенных из помета цыплят-бройлеров: «*» - достоверность различий частоты встречаемости штаммов, резистентных / чувствительных / умеренно резистентных к одному препарату по сравнению с другим (p < 0,05)
Показано, что кишечные изоляты C. albicans максимально чувствительны к клотримазолу - 83,3%. 50% выделенных штаммов продемонстрировали чувствительность к нистатину, флуко- и кетоконазолу.
Отмечено, что для половины штаммов C. albicans характерна резистентность к нистатину, 33,3% культур - к флуко-, итрако- и кетоконазолу.
Показано, что достоверно чаще встречались штаммы, умеренно устойчивые к итраконазолу (66,7%), чем к флуко- и кетоконазолу (16,7%) (p < 0,05).
Изоляты C. glabrata значимо чаще проявляли чувствительность к нистатину (80%), чем к клотримазолу (50%), флуко- и кетоконазолу (30%) (p < 0,05). Не выявлены штаммы, чувствительные к итраконазолу.
Для 50% изолятов C. glabrata характерна устойчивость к действию клотримазола, итрако- и кетоконазола, 40% - флуконазола и 20% - нистатина.
Выявлена умеренная устойчивость 50% кишечных штаммов C. glabrata к итраконазолу, 30% - к флуконазолу, 20% - к кетоконазолу.
Установлено, что гораздо чаще штаммы C. intermedia проявляли чувствительность к клотримазолу - 85,7%, чем к нистатину (35,7%), кетоконазолу (28,5%) и флуконазолу (7,1%) (p < 0,05). К итраконазолу выделенные штаммы чувствительности не проявляли.
Отмечено, что 64,3% изолятов C. intermedia обладали резистентностью к нистатину, 57,2% - к итраконазолу, 35,7% - к кетоконазолу, 21,5% - к флуконазолу и 14,3% - к клотримазолу.
Обнаружено, что больше всего штаммов C. intermedia (71,4%) проявляло умеренную устойчивость к флуконазолу, к итраконазолу - 42,8% кишечных изолята, к кетоко-назолу - 35,8% штаммов.
Достоверно чаще кишечные изоляты C. utilis были чувствительны к клотримазолу (100%) и нистатину (87,5%), чем к кетоконазолу (50%), флуконазолу (37,5%) и итраконазолу (12,5%) (p < 0,05).
Половина выделенных штаммов C. utilis продемонстрировала резистентность к итраконазолу, 12,5% изолятов - к нистатину, флуко- и кетоконазолу, при этом штаммов, резистентных к клотримазолу, не обнаружено.
Выявлена умеренная устойчивость к флуконазолу у 50% кишечных штаммов C. utilis и у 37,5% изолятов - к итрако- и кетоконазолу.
В отношении нистатина и клотримазола умеренная устойчивость у кишечных изолятов Candida spp. не отмечена.
Заключение
Для количественной характеристики антимикотикорезистентности изученных штаммов дрожжеподобных грибов рода Candida использован показатель «маркер резистентности» - МР [6].
При анализе чувствительности Candida spp. к противогрибковым препаратам МР равен 0,21 ± 0,02.
Что касается межвидовых различий, максимальный уровень антимикотикорези-стентности установлен у C. glabrata (МР 0,4 ± 0,05), минимальный - у C. albicans (МР 0,12 ± 0,03). У C. intermedia МР - 0,21 ± 0,04.
Таким образом, в результате проведенных исследований изучены региональные особенности видового состава и антимикотикорезистентности дрожжеподобных грибов, выделенных из помета цыплят-бройлеров. Показана максимальная чувствительность грибов рода Candida к клотримазолу и нистатину.
Выводы
Доминирующее положение в видовом составе кишечного биотопа цыплят-бройлеров занимали культуры дрожжеподобных грибов non-albicans видов C. intermedia (36,8%), C. glabrata (26,3%), C. utilis (21,1%). Доля C. albicans - 15,8% изолятов.
Выявлен высокий процент резистентности C. glabrata (40-50% штаммов) к клотримазолу, флуко-, итрако- и кетоконазолу, штаммов C. intermedia (55-65%) - к нистатину и итраконазолу, изолятов C. albicans (50%) - к нистатину.
Показано, что максимально чувствительны грибы рода Candida к клотримазолу и нистатину.
Рекомендации
Препаратами выбора для терапии инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных Candida spp., могут быть клотримазол и нистатин.
Так как противогрибковая терапия должна проводиться с учетом региональных особенностей антимикотикорезистентности Candida spp., полученные нами данные будут способствовать выбору препаратов для эффективной терапии животных с факторными инфекционно-воспалительными заболеваниями, вызванными дрожжеподобными грибами.
Т.М. Pashkova1'2, M.V. Sycheva1'2, O.L. Kartashovа1'2
institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, Ural Branch of the Russian Academy of
Sciences, Orenburg 2
2Orenburg State Agrarian University, Orenburg
Species composition and antimico-resistance of fungi of the genus Candida
allocated from chicken-broilers
The article presents the species composition and the register of antimycotic resistance of fungi of the genus Candida isolated from the chicken-broilers brood. Species C. intermedia (36.8%) dominated in species diversity, C. glabrata (26.3%), C. utilis (21.1%) and C. albicans (15.8%) were less common.
To quantify the antimycotic resistance of Candida spp. the indicator "resistance marker" - MR was used. It was shown that MR isolated Candida spp. to antifungal agents is 0.21 ± 0.02. As for interspecific differences, the maximum level of MR was established in C. glabrata (0.4 ± 0.05), the minimum level in C. albicans (0.12 ± 0.03). In C. intermedia, MR was 0.21 ± 0.04.
The maximum sensitivity of fungi of the genus Candida to clotrimazole and nystatin was shown in the result of this study. The data obtained by us will contribute to the selection of drugs for effective therapy of animals with factor infectious-inflammatory diseases caused by fungi of the genus Candida. Keywords: fungi of the genus Candida, antimycotics, broiler chickens.
Список литературы
1. Годовалов А.П. Особенности Candida sp. из микробных ассоциаций при воспалительных заболеваниях дыхательных путей / А.П. Годовалов, Л.П. Быкова // Успехи медицинской микологии. -2013. - Т. 11. - С. 84-87.
2. Кандидозный дисбиоз и адгезивные свойства Candida spp. у пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника / Е.Б. Авалуева [и др.] // Успехи медицинской микологии. - 2010. - Т. 12. -№ 1. - С. 10-14.
3. Желтикова Т.М. Фунгицидное действие различных системных антимикотиков на грибы рода Candida in vitro / Т.М. Желтикова, А.М. Глу-шакова // Акушерство и гинекология. - 2010. -№ 4. - С. 79-81.
4. Реброва Р.Н. Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии / Р.Н. Реброва. -М. : Медицина, 1989. - 128 с.
5. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. -М. : Высшая школа, 1990. - 352 с.
References
1. Godovalov A.P. Osobennosti Candida sp. iz mikrobnyih assotsiatsiy pri vospalitelnyih zabole-vaniyah dyihatelnyih putey / A.P. Godovalov, L.P. Byikova // Uspehi meditsinskoy mikologii. -2013. - T. 11. - S. 84-87.
2. Kandidoznyiy disbioz i adgezivnyie svoyst-va Candida spp. u patsientov s vospalitelnyimi zabo-levaniyami kishechnika / E.B. Avalueva [i dr.] // Uspehi meditsinskoy mikologii. - 2010. - T. 12. - № 1. -S. 10-14.
3. Zheltikova T.M. Fungitsidnoe deystvie raz-lichnyih sistemnyih antimikotikov na gribyi roda Candida in vitro / T.M. Zheltikova, A.M. Glushakova // Akusherstvo i ginekologiya. - 2010. - № 4. - S. 79-81.
4. Rebrova R.N. Gribyi roda Candida pri zabo-levaniyah negribkovoy etiologi / R.N. Rebrova. - M. : Meditsina, 1989. - 128 s.
5. Lakin G.F. Biometriya / G.F. Lakin. - M. : Vyisshaya shkola, 1990. - 352 s.
6. Бондаренко В.И. Вирулентность и анти-биотикорезистентность эшерихий, выделенных от человека / В.И. Бондаренко, А.И. Ференц // Микробиологический журнал. - 1990. - Т. 52. - № 3. -С. 66-69.
Пашкова Татьяна Михайловна, канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаборатории по изучению механизмов и регуляции персистенции бактерий ИКВС УрО РАН, доцент кафедры микробиологии и заразных болезней, Оренбургский ГАУ, pashkova070782@mail.ru; Сычева Мария Викторовна, д-р биол. наук, заведующая кафедрой микробиологии и заразных болезней, Оренбургский ГАУ, с.н.с. лаборатории по изучению механизмов и регуляции персистенции бактерий ИКВС УрО РАН, sycheva_maria@mail.ru; Карташова Ольга Львовна, д-р биол. наук, вед. науч. сотр. лаборатории по изучению механизмов и регуляции пер-систенции бактерий ИКВС УрО РАН, профессор кафедры микробиологии и заразных болезней, Оренбургский ГАУ, labpersist@mail.ru.
6. Bondarenko V.I. Virulentnost i antibioti-korezistentnost esherihiy, vyidelennyih ot cheloveka / V.I. Bondarenko, A.I. Ferents // Mikrobiologicheskiy zhurnal. - 1990. - T. 52. - № 3. - S. 66-69.
Pashkova Tatyana Mikhailovna, Cand. Biol. Sci., senior researcher Laboratory for the study of the mechanisms and regulation of the persistence of bacteria Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, associate professor Department of microbiology and infectious diseases, Orenburg SAU, pashko-va070782@mail.ru; Sycheva Maria Viktorovna, Dr. Biol. Sci., head of Department of microbiology and infectious diseases, Orenburg SAU, senior researcher Laboratory for the study of the mechanisms and regulation of the persistence of bacteria Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, sycheva_maria@mail.ru; Kartashova Olga Lvovna, Dr. Biol. Sci., leading researcher Laboratory for the study of the mechanisms and regulation of the persistence of bacteria Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, professor Department of microbiology and infectious diseases, Orenburg SAU, labpersist@mail.ru.
УДК 619:614.9
Р.Е. СЕРИКБАЕВ, ТВ. ЕРМАКОВА, А.В. ЗУЕВ
Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина, Омск
СРЕДСТВА, МЕТОДЫ, ТЕХНИКА ДЛЯ ДЕЗИНФЕКЦИИ ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ
ОМСКОЙ ОБЛАСТИ
При планировании противоэпизоотических и лечебно-профилактических мероприятий ежегодно большое внимание уделяется ветеринарно-санитарным мероприятиям. Наиболее важно для ветеринарной службы проведение дезинфекции. На животноводческих фермах, комплексах и птицефабриках, мясокомбинатах, молокозаводах и других объектах ежегодно обеззараживаются миллионы квадратных метров площади. Качественное проведение большого объема дезинфекционных работ, высокая трудоемкость их выполнения требуют применения высокопроизводительных технических средств механизации различной конструкции. В статье дан анализ применения специализированного технического оборудования и результатов бактериологического контроля качества дезинфекции на объектах ветеринарно-санитарного надзора, расположенных на территории Омской области. За 10 лет из общего объема исследовано 330 949 проб, из которых 657 были положительными. С бактериологическим контролем качества дезинфекции проведена проверка 17 452 проб. Эффективность применяемых дезинфицирующих средств составляет 99,80%, а контроль качества дезинфекции в среднем проводится в 14,78% случаев от всего объема профилактической дезинфекции. Низкий процент положительных результатов 0,20% показывает высокий уровень предварительной подготовки ветеринарно-санитарных объектов к проведению дезинфекции. Наиболее широкое применение в Омской области получила техническая дезинфекционная установка ДУК, также для проведения влажной дезинфекции используются другие средства: распылитель
© Серикбаев Р.Е., Ермакова Т.В., Зуев А.В., 2018
