CC BY
60
фоцитов. Отмечено также достоверное уменьшение содержания CD95+-лимфоцитов после лечения у пациентов данной группы. В группе пациентов с частичной регрессией первичного опухолевого узла отмечено достоверное снижение процентного и абсолютного количества лимфоцитов и CD3+-клеток после применения НАХТ. Динамика показателей иммунного статуса III группы была следующей: после лечения НАХТ сократилось процентное содержание CD4+- и CD72+-клеток. Причём у больных со стабилизацией опухолевого процесса средние значения абсолютного количества CD4+- и CD8+-клеток были достоверно снижены, а содержание CD95+-клеток и концентрация ЦИК -повышены по сравнению с показателями здоровых доноров.
Выводы. Таким образом, результативность НАХТ связана с исходным состоянием иммунной системы. Иммунный статус пациентов с высокой эффективностью НАХТ характеризуется повышенным в сравнении со здоровыми содержанием CD4+- и CD8+-лимфоцитов (Т-хелперы и Т-цитотоксические клетки). Низкое количество в периферической крови Т-лимфо-цитов (CD3+-клетки) и высокое процентное содержание субпопуляций CD16+ (КК-клетки), CD72+ (В-лимфоциты), а также активированных лимфоцитов (CD95+) сопряжены со слабой эффективностью НАХТ. Снижение количества CD4+-клеток после НАХТ свидетельствует о высокой чувствительности субпопуляции регуляторных Т-клеток к воздействию цито-статиков.
УВЕЛИЧЕНИЕ ДНК-СВЯЗЫВАЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ТАТА-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА В ЭКСТРАКТАХ ЯДЕР ПЕРЕВИВАЕМЫХ ОПУХОЛЕЙ ПЕЧЕНИ И ЛЕГКОГО МЫШЕЙ
М.В. Лысова, Т.В. Аршинова, В.И. Каледин, Л.К. Савинкова
Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск
Актуальность. Из литературы известно, что в клетках карциномы толстой кишки человека экспрессия гена ТАТА-связывающего белка (ТВР) повышена и увеличено количество белка по сравнению с нормальным эпителием. Показано также, что экспрессия гена ТВР повышена в карциномах легкого и молочной железы человека и в клеточных линиях карциномы легкого. Имеющиеся литературные данные свидетельствуют о том, что способность ТВР участвовать в транскрипции, осуществляемой РНК-полиме-разой II, и привлекаться на ТАТА-содержащие промоторы необходима для инициирования клеточной трансформации. Но остается много нерешенных вопросов о том, нужны ли для процесса трансформации ТВР-индуцируемые изменения транскрипции, осуществляемой РНК-полимеразами I и III, и достаточны ли они для того, чтобы пройти многоступенчатый путь, ведущий к образованию опухоли.
Цель работы. Изучение ТАТА-связывающей способности ТВР, входящего в состав белков
ядерных экстрактов перевиваемых опухолей печени и легких мышей линий А/Sn и C57BL/6 соответственно.
Материал и методы. В работе использовали перевиваемую гепатокарциному НА-1 и аденокарциному легких Lewis, полученные из банка опухолевых штаммов Института цитологии и генетики СО РАН. Опухоли поддерживали соответственно на мышах линий А/Sn и C57BL/6 в солидной форме, перевивая в мышцы бедра 1 раз в 2 нед. Для получения ядерных экстрактов использовали периферическую часть опухолевых узлов только что умерщвленных декапитацией животных (2-4 особи). В качестве контрольных органов использовали печень и легкие интакт-ных животных соответствующих линий.
Выделение ядерных экстрактов, получение меченых олигонуклеотидов, анализ связывания белков с радиоактивно меченым олигонуклеотидом (EMSA) проводили по стандартным методикам с использованием «забивочной» ДНК. Олигодезоксирибонуклеотиды, идентич-
ные ТАТА-содержащему участку промотора AdML длиной 26 пар нуклеотидов - 5’^§а agg ggg gcTATAAAAggg ggtgc-3 ’ (ТАТА-ОН), и контрольный олигонуклеотид с нарушенным ТАТА-боксом - 5’-tga agg tgg gcTGCTAGCgct ggt gg-3’ метили радиоактивным фосфором с помощью Т4 полинуклеотидкиназы. Образующиеся комплексы анализировали с помощью метода «торможения» ДНК в геле.
Результаты изучения взаимодействия белков ядерных экстрактов исследуемых опухолей и соответствующих нормальных тканей мышей с 32Р-ТАТА-ОН показали, что во всех случаях образуется один тип комплексов, которому соответствует одна полоса задержки в геле, причем с белками гепатокарциномы и аденокарциномы легких образуется на 25 % и 60 % соответственно комплексов больше, чем с белками ядерных экстрактов тканей контрольных животных. Следует отметить, что при образовании комплексов наблюдается зависимость их количества от концентрации белка, что свидетельствует о специфичности образуемых комплексов. Результаты вытеснения 32Р-ТАТА-ОН «холодным» ТАТА-ОН из комплексов с белком показали,
что 32Р-ТАТА-ОН полностью вытесняется из комплексов уже при 25-кратном молярном избытке «холодного» олигонуклеотида. Это также свидетельствует о специфическом характере образуемых комплексов с 32Р-ТАТА-ОН и отсутствии неспецифической компоненты во взаимодействии. Таким образом, все полученные результаты свидетельствуют в пользу того, что с 32Р-ТАТА-ОН взаимодействует только ТВР. Дополнительным свидетельством в пользу этого является также небольшое связывание ТВР с олигонуклеотидом, у которого нарушен ТАТА-бокс. Как известно, ТВР имеет невысокое неспецифическое сродство к ТАТА-несодержа-щей ДНК.
Выводы. Таким образом, полученные в работе данные свидетельствуют об увеличении ТАТА-связывающей активности ТВР и, соответственно, об изменениях в транскрипционном аппарате опухолей НА-1 и LLC мышей. Дальнейшие эксперименты будут направлены на изучение молекулярных взаимодействий ТВР и выяснение пускового механизма увеличения его количества.
ЛАПАРОСКОПИЯ В ОПРЕДЕЛЕНИИ ОПЕРАБЕЛЬНОСТИ КАРДИОЭЗОФАГЕАЛЬНОГО РАКА
А.Т. Маймаков
Южно-Казахстанская государственная медицинская академия, областной онкологический диспансер, г. Шымкент, Казахстан
Актуальность. По данным литературы, за последние 20 лет во всем мире отмечено увеличение (до 30 %) частоты рака кардиоэзофаге-альной зоны. Темпы роста этой заболеваемости превысили таковые при других злокачественных новообразованиях. Применение лапароскопии в диагностике и лечении заболеваний органов брюшной полости имеет более чем 80-летнюю историю. Однако это исследование в онкологической практике не получило достаточно широкого распространения, так как недостаточно четко были определены пределы, возможности, показания и противопоказания к лапароскопии у онкологических больных. Учитывая высокую
заболеваемость раком желудка, лапароскопия часто применяется при этой патологии. Высокие показатели оценки потенциальной ре-зектабельности при гастроэзофагеальном раке представил М^. Finch et а1. (1997), по данным которого, чувствительность лапароскопии составила 100 %, а специфичность - 73 %, против 75 % и 60 % при компьютерной томографии. Выявленные этими методами очаговые образования внутренних органов требуют морфологического подтверждения и оценки распространенности, то есть стадии заболевания, которая определяет выбор рациональной лечебной тактики, что возможно при лапароскопии.
