CC BY
47
ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С РАЗНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ
Я.В. Кухарев1, А.В. Черников2, А.В. Сорокина2, Ч.К. Серенот2, Е.Ю. Гарбуков1, А.В. Дорошенко1, Н.А. Красулина1, Ю.Л. Кокорина1
ГУ «НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН», г. Томск1,
ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет», г. Томск2
Актуальность. Одним из основных методов лечения раком молочной железы (РМЖ) является использование цитостатиков, в том числе в режиме неоадъювантной химиотерапии (НАХТ). По данным ряда авторов, иммунная система играет существенную роль в контроле за опухолевым ростом (Кадагидзе З.Г., 2007; Schirrmacher V. et а1., 2002; Nagosen D. et а!.. 2003; Кшйепкоу О. et а1., 2005,). В ходе проведения НАХТ влияние цитостатиков реализуется в отношении как опухолевых клеток, так и клеток иммунной системы. Результирующий эффект лечения, вероятно, определяется чувствительностью клеток опухоли к химиопрепаратам, а также способностью иммунной системы к реализации противоопухолевых иммунных реакций после цитостатического воздействия.
Цель исследования. Выявление особенностей иммунного статуса у больных раком молочной железы с различной эффективностью НАХТ.
Материал и методы. Обследованы 52 больные РМЖ (П-Ш стадии), которые в предоперационном периоде были пролечены с помощью НАХТ на базе НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, г. Томск. До начала терапии и по завершении НАХТ оценивались следующие иммунологические параметры: субпопуляции лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD16, CD72, CD25, CD95; концентрация сывороточных иммуноглобулинов классов А, М, G и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), гемограмма. Исходные размеры опухоли и их изменения в ходе проведения НАХТ оценивались с использованием УЗИ и маммографии. Исходные параметры системы иммунитета у больных РМЖ сопоставлялись с таковыми у относительно здоровых женщин.
Статистический анализ проводился с помощью программы STAПSTICA 6.0 с использованием критерия Манна-Уитни.
Результаты. В зависимости от результатов непосредственной эффективности НАХТ больные были разделены на 3 группы: полной регрессии опухоли (I группа), частичной регрессии (II группа) и стабилизации опухолевого роста (III группа). Больные РМЖ с полной клинической регрессией опухолей (I группа) характеризовались исходно повышенным по сравнению с контролем процентным содержанием CD4+- и CD8+-лимфоцитов. У пациентов II группы до лечения регистрировались: повышенное по сравнению со здоровыми общее количество лейкоцитов, абсолютное и относительное содержание лимфоцитов и концентрация ЦИК в периферической крови. В группе пациентов с низкой чувствительностью опухоли к НАХТ исходно регистрировались достоверно более низкое содержание CD3+-лимфоцитов и низкий уровень ^М на фоне повышенного содержания CD16+-, CD72+- и CD95+-клеток. Сравнительная оценка исходных уровней иммунологических показателей у пациентов разных групп показала, что процентное содержание CD4+-клеток было наибольшим у больных в группе с полной регрессией опухолевого очага. У пациентов III группы наблюдались достоверно более высокие значения процентного содержания CD72+-лимфоцитов в сравнении с пациентами других групп.
После лечения НАХТ у больных I группы на фоне стабильного уровня CD8+-лимфоцитов отмечено снижение относительного количества CD4+-клеток, что проявлялось в достоверном снижении соотношения CD4+- и CD8+-лим-
фоцитов. Отмечено также достоверное уменьшение содержания CD95+-лимфоцитов после лечения у пациентов данной группы. В группе пациентов с частичной регрессией первичного опухолевого узла отмечено достоверное снижение процентного и абсолютного количества лимфоцитов и CD3+-клеток после применения НАХТ. Динамика показателей иммунного статуса III группы была следующей: после лечения НАХТ сократилось процентное содержание CD4+- и CD72+-клеток. Причём у больных со стабилизацией опухолевого процесса средние значения абсолютного количества CD4+- и CD8+-клеток были достоверно снижены, а содержание CD95+-клеток и концентрация ЦИК -повышены по сравнению с показателями здоровых доноров.
Выводы. Таким образом, результативность НАХТ связана с исходным состоянием иммунной системы. Иммунный статус пациентов с высокой эффективностью НАХТ характеризуется повышенным в сравнении со здоровыми содержанием CD4+- и CD8+-лимфоцитов (Т-хелперы и Т-цитотоксические клетки). Низкое количество в периферической крови Т-лимфо-цитов (CD3+-клетки) и высокое процентное содержание субпопуляций CD16+ ^К-клетки), CD72+ (В-лимфоциты), а также активированных лимфоцитов (CD95+) сопряжены со слабой эффективностью НАХТ. Снижение количества CD4+-клеток после НАХТ свидетельствует о высокой чувствительности субпопуляции регуляторных Т-клеток к воздействию цито-статиков.
УВЕЛИЧЕНИЕ ДНК-СВЯЗЫВАЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ТАТА-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА В ЭКСТРАКТАХ ЯДЕР ПЕРЕВИВАЕМЫХ ОПУХОЛЕЙ ПЕЧЕНИ И ЛЕГКОГО МЫШЕЙ
М.В. Лысова, Т.В. Аршинова, В.И. Каледин, Л.К. Савинкова
Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск
Актуальность. Из литературы известно, что в клетках карциномы толстой кишки человека экспрессия гена ТАТА-связывающего белка (ТВР) повышена и увеличено количество белка по сравнению с нормальным эпителием. Показано также, что экспрессия гена ТВР повышена в карциномах легкого и молочной железы человека и в клеточных линиях карциномы легкого. Имеющиеся литературные данные свидетельствуют о том, что способность ТВР участвовать в транскрипции, осуществляемой РНК-полиме-разой II, и привлекаться на ТАТА-содержащие промоторы необходима для инициирования клеточной трансформации. Но остается много нерешенных вопросов о том, нужны ли для процесса трансформации ТВР-индуцируемые изменения транскрипции, осуществляемой РНК-полимеразами I и III, и достаточны ли они для того, чтобы пройти многоступенчатый путь, ведущий к образованию опухоли.
Цель работы. Изучение ТАТА-связывающей способности ТВР, входящего в состав белков
ядерных экстрактов перевиваемых опухолей печени и легких мышей линий А/Sn и C57BL/6 соответственно.
Материал и методы. В работе использовали перевиваемую гепатокарциному НА-1 и аденокарциному легких Lewis, полученные из банка опухолевых штаммов Института цитологии и генетики СО РАН. Опухоли поддерживали соответственно на мышах линий А/Sn и C57BL/6 в солидной форме, перевивая в мышцы бедра 1 раз в 2 нед. Для получения ядерных экстрактов использовали периферическую часть опухолевых узлов только что умерщвленных декапитацией животных (2-4 особи). В качестве контрольных органов использовали печень и легкие интакт-ных животных соответствующих линий.
Выделение ядерных экстрактов, получение меченых олигонуклеотидов, анализ связывания белков с радиоактивно меченым олигонуклеотидом (EMSA) проводили по стандартным методикам с использованием «забивочной» ДНК. Олигодезоксирибонуклеотиды, идентич-
