CC BY
2
0,0002 до 0,002 мг фтора с интервалом 0,0002 мг. Объем растворов в# всех пробирках доводят до 1 мл 0,02 н. раствором триэтаноламина. Затем ко всем растворам стандартной шкалы и анализируемым пробам прибавляют 1 мл азотнокислого тория с содержанием 0,024 мг/мл, 0,25 мл 1 н. НС1 и 3 капли 0,05% раствора торона. Через 5 минут сравнивают окраску анализируемого раствора со стандартной шкалой.
Чувствительность метода 0,0001 мг фтор-иона в пробе.
Поступила 4/ХП МХ» г.
# ¿Т
УСКОРЕННЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КИШЕЧНОЙ
ПАЛОЧКИ
Старший научный сотрудник Л. А. Банникова
Из Всесоюзного научно-исследовательского института молочной промышленности
ч ^
Во Всесоюзном научно-исследовательском институте молочной промышленности разработана методика приготовления индикаторных бумажек для определения кишечной палочки по методу «бактострип» [Ферг (Иое^)] при оценке качества молока.
Сущность метода заключается в выявлении кишечной палочки на полоске бумаги, пропитанной питательной средой, содержащей индикатор (трифенилтетразолий хлористый или другой).
Для приготовления индикаторных бумажек рекомендована хрома-тографическая бумага весом 200 г/м2, имеющая впитываемость по Клемму около 50 и состав по волокну 100% тряпичной полумассы.
Для стерилизации бумаги поверхность листов обрабатывают под бактерицидной лампой (с каждой стороны по 30 минут), после чего пропитывают стерильной питательной средой (мясной бульон с 5% гидро-лизованного молока, 0,5% лактозы и 0,1% агара рН 7,2—7,5) с добавлением 2% водного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлористого (из расчета 11 мл на 100 мл среды).
Бумагу сушат в сушильном шкафу при 40° в течение 14—16 часов и разрезают на прямоугольные полоски размером 100X26 мм (каждая из них впитывает 1 мл молока). Готовые индикаторные бумажки, принимающие белый или бледно-кремовый цвет, расфасовывают в пакетики из полиэтилена высокого давления, нестабилизованного, в виде рукава. Наиболее удобен полиэтилен, имеющий ширину рукава 7 см. Пакетики склеивают либо на пламени спиртовой или газовой горелки, либо на специальном приборе при 130—135°.
Расфасованные индикаторные бумажки хранят в светонепроницаемых пакетах.
Приготовленные указанным способом индикаторные бумажки (около 1000 штук) были испытаны на чистых культурах кишечной палочки, а также проверены на выявление кишечной палочки в пастеризованном молоке в сравнении со стандартным бродильным методом (на среде Кесслера).
Способ применения индикаторных бумажек несложен. Полиэтиленовый пакетик с одной стороны разрезают ножницами (рис. 1), вынимают индикаторную бумажку и смачивают ее в исследуемой пробе путем однократного погружения (рис. 2). Излишек молока удаляют прикосновением конца бумажки к стенке сосуда. При этом индикаторная бумажка впитывает 1 мл молока.
Затем ее вновь помещают в полиэтиленовый пакетик. После этого следует тщательно прогладить пакетик между двумя пальцами, чтобы полиэтиленовая пленка плотно прилегала с обеих сторон к смоченной »бумажке и из пакетика был удален воздух. Разрезанный конец пакетика зажимают между двумя пластинками и запаивают на пламени газовой горелки или спиртовки (рис. 3).
Полиэтиленовый пакетик с индикаторной бумажкой помещают в термостат и выдерживают в течение 11 часов при 43°. При наличии кишечной палочки на бумажке появляются красные пятнышки. Подсчет красных пятнышек производят на одной стороне. Правильный результат дают лишь те бумажки, на которых выявляют от 10 до 100 пятны-нек. Пересчет количества пятнышек на соответствующее разведение
Рис. 1. Полиэтиленовый пакетик разрезают ножницами.
Рис. 2. Индикаторную бумажку погружают в исследуемую пробу.
Рис. 3. Разрезанный конец пакетика с пропитанной индикаторной бумажкой запаивают на пламени газовой горелки.
образца дает ответ о содержании кишечной палочки в 1 мл молока.
Исследования показали, что индикаторные бумажки позволяют выявить различных представителей кишечной палочки (В. coli commune, В. aörogenes, В. coli citrovorum, В. paracoli).
Было исследовано 74 образца пастеризованного молока. Полученные данные показывают, что совпадаемость результатов по индикаторным бумажкам и- стандартному бродильному методу составляет 80,8—85% от количества исследуемых образцов.
В микробиологической лаборатории Останкинского молочного завода (Н. С. Королева и А. И. Архипова) также исследовали 54 образца пастеризованного молока (разлитого в бутылки) на содержание кишечной палочки в сравнении с бродильным методом (среда Кесслера). Исследования указывают на совпадаемость результатов этих двух методов в 70% от количества исследуемых образцов.
Поступила I5/X 1962 г.
Ъ iir -fr
