CC BY
24
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ПРИ ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ЛИМФОАДЕНОПАТИЯХ У ДЕТЕЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Мирсаяпова И.А., Хайруллина Р.М., Хаматдинова З.Р., Мавзютов А.Р.
ГБУЗ «Республиканская детская клиническая больница» Уфа, Россия
ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет», Уфа, Россия
Одно из ведущих мест в структуре обращаемости к врачу педиатру-иммунологу в Республиканской детской клинической больнице r. Уфы занимают доброкачественные лимфоаденопатии. По данным авторов, изучавших патологию лимфоузлов в Республике Башкортостан, установлена доминирующая роль ЦМВ-инфекции у детей, выявлены маркеры дисбаланса клеточного и гуморального звеньев системы иммунитета с формированием вторичного иммунодефицита у взрослых пациентов (Терегулова Л.М., 2006).
Цель. Установить особенности иммунологической реактивности у детей при лифаденитах, ассоциированных с ЦМВ-инфекцией.
Материалы и методы. Для достижения поставленной цели были изучены показатели гуморального и клеточного иммунитета 37 детей: в первую группу вошли 19 детей в возрасте от 1-11 лет, находившихся на стационарном лечении в РДКБ г. Уфы с диагнозом «серозный подчелюстной лимфаденит, ассоциированный ЦМВ инфекцией», во вторую — 12 детей в возрасте от 1-11 лет, находившихся на стационарном лечении с диагнозом «серозный подчелюстной лимфаденит, бактериальной этиологии» и в третью — 6 практически здоровых детей, не имеющих в анамнезе лимфоаденопатии и ЦМВИ. Для определения популяционного и субпопуляционного состава лимфоцитов проводили иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови c использованием моноклональ-ных антител фирмы BectonDickinson, методом проточной цитометрии (BDFACSConton). Гуморальная система иммунитета оценивалась по содержанию иммуноглобулинов классов А, М, G и уровня циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови. Для обнаружения специфических антител класса IgG и IgM к ЦМВ проводился иммунохемилюминесцентный анализ (ИХА), а также ПЦР-исследование крови и мазка из зева. Клинико — лабораторное обследование включало также определение лейкоцитограммы, бактериологическое исследование мазка из зева и носа на флору, также уровня антистреп-толизина — О в сыворотке крови. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 7.0. Для сравнения данных использовали параметрический критерий Стьюдента.
Результаты. По данным лейкограммы у детей с подчелюстным лимфаденитом, ассоциированным с ЦМВИ, по сравнению со второй и третьей группами отмечался лим-фоцитоз (62,26±2,79, p < 0,05) и моноцитоз (11,67±1,23, p < 0,05). По результатам бактериологического обследования бактериальная инфекция была детектирована только у второй группы пациентов. Уровень А-стрептолизина— О находился в пределах референсных значений у первой группы пациентов, тогда как во второй группе этот показатель был статистически значимо выше (337,08±44,62, p < 0,05) по сравнению с первой и третьей группами.
По данным иммунологического обследования уровни сывороточных иммуноглобулинов класса А, М, G первой группы достоверно не отличались от показателей здоровых детей и детей с проявлениями серозного подчелюстного лимфаденита, бактериальной этиологии. По данным иммунофенотипирования лимфоцитов методом проточной цитометрии в первой группе детей отмечалась Т-клеточная недостаточность в виде: снижения общих Т-лифоцитов (CD3+) (58,89±3,23) и статистически значимого подавления цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+) (18,95±2,75,p < 0,05) и Т-лимфоцитов - хелперов (CD4+) (30,2±2,13p < 0,05) на фоне повышения естественных кил-лерных клеток (CD16+) (14,15±1,84, p > 0,05). Причем выраженная Т-хелперная недостаточность (26,2±2,41) была установлена у 8 детей первой группы, которых по данным ПЦР была обнаружена ДНК ЦМВ в крови. Следует отметить, что уровень В-лимфоцитов (CD19+) находился на нижней границе референсных значений (10,15±1,84). Во второй группе детей было выявлено повышение общих Т-лимфоцитов (67,96±1,65, p < 0,05), Т-хелперов (48,89±1,37, p < 0,05) и В-лимфоцитоза (22,5±1,23, p < 0,05) в сравнении с третьей группой обследуемых.
Заключение. Таким образом, у детей с ЦМВ-ассоциированными лимфоаденопатиями установлен избирательный дефицит Т-клеточного звена иммунитета: общие Т-лимфоциты (CD3+), цитотоксические Т-лимфоциты (CD8+) и Т-хелперы-индукторы (CD4+), что в целом согласуется с концепцией прямого избирательного действия ЦМВ на эти клетки. Кроме того, депрессия Т-лимфоцитов — хелперов может служить фоном, на котором происходит инфицирование. Выявлены различия степени выраженности Т-клеточной недостаточности в зависимости от наличия вирусемии по данным ПЦР-исследования в виде значительного подавления Т-хелперной активности клеток. Результаты предварительного этапа исследований, по нашему мнению, являются неоспоримым доказательством целесообразности проведения комплексного диагностического тестирования, включающего определение специфических антител к ЦМВ и ПЦР. Кроме того, для оценки эффективности противовирусной терапии необходимо осуществление иммунологического мониторинга, а именно проточной цитометрии.
УРОВЕНЬ IL-8, IL-13 У ЖЕНЩИН С ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Невежкина Т.А., Кныш С.В., Чагина Е.А.
ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Владивосток, Россия
Введение. Папилломавирусная инфекция (ПВИ) является одним из самых распространенных заболеваний, передающимся половым путем (Роик Е.Е., Баранов А.Н., 2015). ПВИ способствует не только развитию рака шейки матки, но и существенно влияет на репродуктивную функцию женщины. Состояние иммунной системы является решающим фактором, определяющим тяжесть и продолжительность воспалительных заболеваний, особенностей течения «медленных» вирусных инфекций, в том числе и ПВИ (Барановская Е.А., Кустова М.А., 2012). При ПВИ наблюдается снижение клеточного иммунитета, а так же дефицит местного и общего интерферона. Присутствие цитокинов играет важную роль и в
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология инфекций Immunology infections
модулировании иммунного ответа к инфекциям, и в установлении и подержании беременности.
Цель и задачи. Оценить уровень IL-8 и IL-13 у женщин с ранними клиническими проявлениями ПВИ.
Материалы и методы. Определение уровня IL-8 и IL-13 в сыворотке крови методом ИФА (R&D Systems, USA) у 32 пациенток с ПВИ, в возрасте от 25 до 44 лет. Пациентки разделены на группы: I — пациентки, с кондиломатозными поражениями шейки матки; II — с цервицитом без конди-ломатозных изменений шейки матки; III — контрольная группа здоровых женщин. Статистический анализ проводился с помощью ранжирования вариационного ряда методом Турки. Результаты выражали в пг/мл.
Результаты. Определено повышение уровня IL-13 в сыворотке крови в I и II группе по сравнению с группой контроля в 7 раз (IL-13 в I группе — 73,17 [49,3; 76,2] пг/мл; во II группе - 76,28 [73,17; 90,82] пг/мл, в сравнении с группой контроля — 9,14 [2,0; 13,24] пг/мл). Уровень IL-8 в I группе — 4,2 (1,67; 14,27) пг/мл; во II группе — 21,93 (14,27; 23,19) пг/мл; в сравнении с группой контроля — 3,23 (2,8; 8,41) пг/мл. Не выявлено существенных изменений уровня IL-8 в I группе. Это свидетельствует об отсутствии активации нейтрофилов у этой категории пациенток. Однако повышение IL-8 во II группе свидетельствует о прогрес-сировании воспалительного процесса с активацией нейтрофилов, которые вырабатывают провоспалитель-ные медиаторы. Последние играют двоякую роль: локальной защиты шейки матки, но при гиперпродукции способны повреждать ткани и усиливать воспаление. Для подтверждения данных требуется провести дополнительные исследования.
Заключение. Увеличение содержания в сыворотке крови противовоспалительного цитокина IL-13 свидетельствует о преобладании ^2-типа иммунного ответа при ПВИ. Не установлено изменения уровня IL-8 в группе с кондиломатозом шейки матки. Определено увеличение IL-8 в крови пациенток с ПВИ цервицитом, что отражает активацию нейтрофилов у этой категории больных.
СОДЕРЖАНИЕ НЕКОТОРЫХ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ БОЛЬНЫХ ЛЕПТОСПИРОЗОМ
Петрова О.А.1, 2, Любимова Н.Е.1, Арсентьева Н.А.1, Стоянова Н.А.1, Токаревич Н.К.1, Тотолян Арег А.1, 2
1ФБУН«Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург, Россия 2 ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Лептоспироз является одной из наиболее широко распространённых и социально значимых зооантропоноз-ных инфекций. Возбудителями являются бактерии рода лептоспир (Leptospira). В настоящее время идентифицировано более 250 серовариантов патогенных лептоспир.
В ряде случаев лептоспироз у человека протекает в лёгкой форме, сопровождаясь неспецифическими симптомами, однако у 10-15% больных развивается тяжёлая форма, которая часто быстро прогрессирует и может привести к летальному исходу. Летальность в случае развития тяжёлых форм лептоспироза достигает 20%, а в случае
развития лёгочного геморрагического синдрома превышает 50%. Предполагается, что тяжесть и исход заболевания зависит от вида продуцируемых цитокинов и от их концентрации.
Цель. Изучение роли про- и противовоспалительных цитокинов для углубления знаний об иммунопатогенезе лептоспирозов.
Материалы и методы. Объектом исследования послужили сыворотки крови от больных лептоспирозом (n = 147). В качестве контрольной группы — сыворотки от практически здоровых лиц. Для экспериментальной части работы был взят штамм из коллекции лаборатории зооантропонозных инфекций НИИ Пастера — Leptospirainterrogans. Данным штаммом проводилась 24 часовая стимуляция цельной крови здорового донора с дальнейшим отбором супернатантов. Определение ци-токинов в биоматериалах (сыворотки и супернатанты) проводилось на анализаторе MagPix (Millipore, США) с использованием стандартной панели из 9 аналитов: TNFa, MCP-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-10, IL-1ra, Ш-12(р70), IFNy. Математическую обработку данных осуществляли с применением программы GraphPadPrizm6 (GraphPadSoftware, США).
Результаты. При изучении цитокинов in vivo в группе больных лептоспирозом по сравнению с контрольной группой выявлены достоверно повышенные уровни IL-8, IL-10, MCP-1, TNFa (p < 0,05). Выявлены корреляционные связи между TNFa и MCP-1, TNFa и IL-1ra (r = 0,51; r = 0,49 соответственно), такие же связи были обнаружены и в группе контроля (но более сильные: r = 0,69 для обоих случаев). Выявлена корреляционная связь между Ш-12(р70) и IFNy (r = 0,55) в опытной группе нехарактерная для группы контроля. Установлено, что увеличение уровня провоспалительных цитокинов к 3 неделе болезни на фоне низких концентраций противовоспалительных цитокинов играет важную роль в развитии поздних осложнений при лептоспирозе.
В части in vitro впервые было показано, что пик стимуляции для большинства цитокинов приходится на 2-3 час стимуляции (IFNy, IL-12p(70), IL-1ra, IL-4 (причём для двух последних цитокинов после достижения пика, продукция цитокинов выходит на плато). Непохожую на остальные цитокины динамику дали IL-8 и TNFa, которые имеют пики стимуляции приходящиеся на 6 ч.
Выводы. Необходимо проводить новые, обширные исследования о взаимодействии цитокинов и их роли в иммунопатогенезе лептоспирозов.
КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ПАРОДОНТИТОМ
Полушина Л.Г., Светлакова Е.А., Мандра Ю.В. Базарный В.В.
ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Екатеринбург, Россия
В настоящее время болезни пародонта имеют широкую распространенность, отличаются тяжелым течением, негативным влиянием на здоровье человека и качество его жизни. Несмотря на определенные достижения в разработке методов профилактики и лечения данного заболевания, еще существует проблема в поиске объективных
