CC BY
28
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология инфекций Immunology infections
модулировании иммунного ответа к инфекциям, и в установлении и подержании беременности.
Цель и задачи. Оценить уровень IL-8 и IL-13 у женщин с ранними клиническими проявлениями ПВИ.
Материалы и методы. Определение уровня IL-8 и IL-13 в сыворотке крови методом ИФА (R&D Systems, USA) у 32 пациенток с ПВИ, в возрасте от 25 до 44 лет. Пациентки разделены на группы: I — пациентки, с кондиломатозными поражениями шейки матки; II — с цервицитом без конди-ломатозных изменений шейки матки; III — контрольная группа здоровых женщин. Статистический анализ проводился с помощью ранжирования вариационного ряда методом Турки. Результаты выражали в пг/мл.
Результаты. Определено повышение уровня IL-13 в сыворотке крови в I и II группе по сравнению с группой контроля в 7 раз (IL-13 в I группе — 73,17 [49,3; 76,2] пг/мл; во II группе - 76,28 [73,17; 90,82] пг/мл, в сравнении с группой контроля — 9,14 [2,0; 13,24] пг/мл). Уровень IL-8 в I группе — 4,2 (1,67; 14,27) пг/мл; во II группе — 21,93 (14,27; 23,19) пг/мл; в сравнении с группой контроля — 3,23 (2,8; 8,41) пг/мл. Не выявлено существенных изменений уровня IL-8 в I группе. Это свидетельствует об отсутствии активации нейтрофилов у этой категории пациенток. Однако повышение IL-8 во II группе свидетельствует о прогрес-сировании воспалительного процесса с активацией нейтрофилов, которые вырабатывают провоспалитель-ные медиаторы. Последние играют двоякую роль: локальной защиты шейки матки, но при гиперпродукции способны повреждать ткани и усиливать воспаление. Для подтверждения данных требуется провести дополнительные исследования.
Заключение. Увеличение содержания в сыворотке крови противовоспалительного цитокина IL-13 свидетельствует о преобладании ^2-типа иммунного ответа при ПВИ. Не установлено изменения уровня IL-8 в группе с кондиломатозом шейки матки. Определено увеличение IL-8 в крови пациенток с ПВИ цервицитом, что отражает активацию нейтрофилов у этой категории больных.
СОДЕРЖАНИЕ НЕКОТОРЫХ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ БОЛЬНЫХ ЛЕПТОСПИРОЗОМ
Петрова О.А.1, 2, Любимова Н.Е.1, Арсентьева Н.А.1, Стоянова Н.А.1, Токаревич Н.К.1, Тотолян Арег А.1, 2
1ФБУН«Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург, Россия 2 ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Лептоспироз является одной из наиболее широко распространённых и социально значимых зооантропоноз-ных инфекций. Возбудителями являются бактерии рода лептоспир (Leptospira). В настоящее время идентифицировано более 250 серовариантов патогенных лептоспир.
В ряде случаев лептоспироз у человека протекает в лёгкой форме, сопровождаясь неспецифическими симптомами, однако у 10-15% больных развивается тяжёлая форма, которая часто быстро прогрессирует и может привести к летальному исходу. Летальность в случае развития тяжёлых форм лептоспироза достигает 20%, а в случае
развития лёгочного геморрагического синдрома превышает 50%. Предполагается, что тяжесть и исход заболевания зависит от вида продуцируемых цитокинов и от их концентрации.
Цель. Изучение роли про- и противовоспалительных цитокинов для углубления знаний об иммунопатогенезе лептоспирозов.
Материалы и методы. Объектом исследования послужили сыворотки крови от больных лептоспирозом (n = 147). В качестве контрольной группы — сыворотки от практически здоровых лиц. Для экспериментальной части работы был взят штамм из коллекции лаборатории зооантропонозных инфекций НИИ Пастера — Leptospirainterrogans. Данным штаммом проводилась 24 часовая стимуляция цельной крови здорового донора с дальнейшим отбором супернатантов. Определение ци-токинов в биоматериалах (сыворотки и супернатанты) проводилось на анализаторе MagPix (Millipore, США) с использованием стандартной панели из 9 аналитов: TNFa, MCP-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-10, IL-1ra, Ш-12(р70), IFNy. Математическую обработку данных осуществляли с применением программы GraphPadPrizm6 (GraphPadSoftware, США).
Результаты. При изучении цитокинов in vivo в группе больных лептоспирозом по сравнению с контрольной группой выявлены достоверно повышенные уровни IL-8, IL-10, MCP-1, TNFa (p < 0,05). Выявлены корреляционные связи между TNFa и MCP-1, TNFa и IL-1ra (r = 0,51; r = 0,49 соответственно), такие же связи были обнаружены и в группе контроля (но более сильные: r = 0,69 для обоих случаев). Выявлена корреляционная связь между Ш-12(р70) и IFNy (r = 0,55) в опытной группе нехарактерная для группы контроля. Установлено, что увеличение уровня провоспалительных цитокинов к 3 неделе болезни на фоне низких концентраций противовоспалительных цитокинов играет важную роль в развитии поздних осложнений при лептоспирозе.
В части in vitro впервые было показано, что пик стимуляции для большинства цитокинов приходится на 2-3 час стимуляции (IFNy, IL-12p(70), IL-1ra, IL-4 (причём для двух последних цитокинов после достижения пика, продукция цитокинов выходит на плато). Непохожую на остальные цитокины динамику дали IL-8 и TNFa, которые имеют пики стимуляции приходящиеся на 6 ч.
Выводы. Необходимо проводить новые, обширные исследования о взаимодействии цитокинов и их роли в иммунопатогенезе лептоспирозов.
КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ПАРОДОНТИТОМ
Полушина Л.Г., Светлакова Е.А., Мандра Ю.В. Базарный В.В.
ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Екатеринбург, Россия
В настоящее время болезни пародонта имеют широкую распространенность, отличаются тяжелым течением, негативным влиянием на здоровье человека и качество его жизни. Несмотря на определенные достижения в разработке методов профилактики и лечения данного заболевания, еще существует проблема в поиске объективных
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
способов диагностики пародонтита, оценки активности процесса и прогноза прогрессирования заболевания.
Цель. Выявить клинико-иммунологические особенности больных хроническим пародонтитом.
Материалы и методы. Работа основана на исследовании 101 человек, которые на основе ретроспективного анализа были распределены на две группы. Основная группа — 69 больных с пародонтитом средней и тяжелой степени. Клиническое обследование на ряду со стандартным стоматологическим осмотром включало дополнительные методы: подсчет индекса интенсивности кариеса зубов (КПУ), определение значения упрощенного индекса гигиены (OHS) и папиллярно-маргинально-альвеолярного индекса (РМА). Контрольная группа — 32 практически здоровых добровольцев.
Содержание в ротовой жидкости (РЖ) интерлей-кина-2 (IL-2), интерлейкина-4 (IL-4) интерлейкина-17 (IL-17) и лактоферрина (Лф) определяли методом твердофазного гетерогенного ИФА с использованием тест систем «Вектор-Бест» и регистрацией на фотометре Multiscan.
Статистическая обработка результатов проводилась на основании принципов вариационной статистики с использованием программы Gretl. Переменные с непараметрическим распределением сравнивались при помощи критерия Манна—Уитни. Для оценки диагностической эффективности лабораторных тестов проводили ROC-анализ.
Результаты и обсуждение. Объективными клиническими показателями состояния полости рта являются стоматологические индексы. Их значительное повышение указывает на поражение тканей полости рта, особенно — индекс РМА, отражающий тяжесть поражения пародонта.
У больных пародонтитом концентрация IL-2 в РЖ повышалась на 31,1% (р = 0,05). У этих же пациентов наблюдалось значительно возрастание уровня IL-4 в 26 раз (р = 0,001) в сравнении с контрольной группой. Это дает основание предположить, что цитокиновый баланс при пародонтите характеризуется преобладанием Th-2 продуцируемых факторов, то есть при пародонтите активируются «противовоспалительные» иммуноопосредован-ные механизмы. Концентрация IL-17 у пациентов обеих групп существенно не различалась.
Среди параметров врожденного иммунитета оценивали содержание ЛФ, которое возрастало при пародонтите как отражение активности воспалительного процесса.
Для оценки диагностических характеристик изучаемых показателей использован ROC анализ с определением площади под ROC кривой (AUC — Area Under Curve). Он позволил установить, что наиболее высокую диагностическую эффективность имеет уровень IL-4 в РЖ при пародонтите: диагностическая чувствительность — 88%, диагностическая специфичность — 99%, AUC = 0,95.
В ходе исследования нами разработаны новые подходы к традиционному цитологическому исследованию буккального эпителия. Подсчет цитограммы показал, что у пациентов с пародонтитом значительно чаще выявляются кариологические аномалии (микроядра, пикноз и др.), что позволило оценить реактивность слизистой оболочки полости рта при воспалительном процессе.
Заключение. На основании результатов данного исследования мы пришли к заключению, что определение иммунологических показателей в РЖ (в частности IL-4
и Лф), а также микроядерный тест с буккальным эпителием могут рассматриваться в качестве дополнительного инструмента лабораторной диагностики воспалительных заболеваний полости рта, в частности пародонтита. Поэтому сегодня вполне обосновано включение обсуждаемых показателей в алгоритмы диагностики заболеваний полости рта в комплексе с другими методами.
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН ИММУНОВАК ВП-4 И СТАФИЛОВАК
Серова Т.А.1, Краснопрошина Л.И.1, Феофанова Т.В.2, Бишева И.В.1, Фошина Е.П.1
1ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», Москва, Россия 2 ФГБУ«ГНЦИнститут иммунологии» ФМБА, Москва, Россия
В течение последних десятилетий наблюдается значительный рост рецидивирующих инфекционно-воспали-тельных заболеваний, сопровождающихся нарушениями у больных как системного, так и местного иммунитета. Такие пациенты нуждаются в проведении иммуномоду-лирующей терапии, и наиболее перспективными для этой цели являются терапевтические бактериальные вакцины. Первыми отечественными препаратами такого рода являются Иммуновак ВП-4, содержащий компоненты 4-х условно-патогенных микроорганизмов (для взрослого контингента применяются две схемы введения: инъекционное и назально-оральное), и моновакцина Стафиловак.
Цель. Выявление особенностей динамики иммунологических показателей при трех различных способах иммунотерапии: инъекционном и назально-оральном применении Иммуновак ВП-4 и инъекционном применении вакцины Стафиловак.
Материалы и методы. Больные в возрасте 18-50 лет с хроническими воспалительными заболеваниями кожи и ЛОР-органов были распределены в три группы: первая (1) — 11 чел. — получала Иммуновак ВП-4 назально-орально, вторая (2) — 9 чел. — инъекционно, и третья (3) — 8 чел. — получала инъекционно вакцину Стафиловак. До и через 0,5-1,5 месяца после последнего приема препарата у больных определяли параметры системного иммунитета (субпопуляционный состав лимфоцитов и общие иммуноглобулины) и уровень специфических антител к антигенам S. aureus и Kl. pneumoniae разных изотипов в сыворотке крови, слюне и назальном секрете методом твердофазного ИФА. Для сравнения показателей в трех группах до и после лечения использовали критерий множественного сравнения — медианный тест с уровнем статистической значимости рмт < 0,05. Для оценки однородности групп по полу применяли критерий %2 Пирсона с уровнем статистической значимости рХИ < 0,05. Для парного сравнения использовали критерий Манн—Уитни с поправкой Бонфер-рони (рми-в < 0,0167). Значение величины p для поправки Бонферрони было найдено по формуле рми-в = рми/к, где k — число сравнений между группами (в нашем случае k = 3), а рми = 0,05. Результаты расчетов представлены медианой (Ме) и размахом (min-max).
Результаты. Группы были однородны по полу (рХИ = 0,25) и возрасту (рмт = 0,14), исследуемые показа-
