CC BY
6
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»
Санкт-Петербург 23-24 июня 2016 г.
зовался с ДНК пробами: LSI 13(RB1)13q14, IGH/ CCND1, IGH/FGFR3, LSI TP53 (l7q13.l). Пятиц-ветная проточная цитометрия применялась с антителами к CD45, CD38, CD138, CD56, CD19, CD20, CD27, CD117.
Результаты. Транслокация t(11;14) была выявлена у 24,3 % пациентов, делеция del(13q) — 22,1 %, транслокация t(4;14) — 20,8 %, гиподи-плоидия — 6,1 %, делеция del(17р) — 2,2 %, ги-пердиплоидия — 2,2 %. Фенотип характерный для клональных ПлК (CD38+CD138+CD45-) был выявлен у 100 % пациентов. Экспрессия CD56+ выявлена у 52,2 % пациентов, CD19+ — у 47,9 %, CD117+ — у 20,4 %, CD27+ — у 6,8 %, CD20+ — у 6,8 %. Частота выявления ГА составила 36,2 % при CD56+ фенотипе, 24,2 % — CD20+, 23,1 % — CD19 -, 22,6 % — CD27-,
24,2 % — CD117- 24,2 % — CD20-, 23,1 % — CD19+, 20,1 % — CD117+, 18,3 % — CD56-, 0 % — CD27+ фенотипе. В группе стандартного и промежуточного риска (шкала mSMART 2.0) пациенты с ГА чаще имели CD19- фенотип ПлК, чем CD19+. Неблагоприятные генетические аномалии были выявлены у пациентов с CD19- фенотипом. 3-летняя общая выживаемость пациентов в группе стандартного риска с CD19- фенотипом составила 91,4 %, с CD19+ — 77,6 %.
Выводы. Наличие CD19+ фенотипа клональных ПлК предопределяет риск неблагоприятного прогноза течения впервые выявленной ММ. Комплексное определение фенотипических особенностей ПлК и ГА у больных ММ улучшает стратификацию риска.
Гончарова Н. В.1, Анацкая Л. Н.2, Северин И. Н.1
1 Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий Министерства здравоохранения Республики Беларусь, г. Минск
2 Республиканский научно-практический центр неврологии и нейрохирургии Министерства здравоохранения Республики Беларусь, г. Минск
УРОВЕНЬ АНГИОГЕННЫХ Т-ЛИМФОЦИТОВ И ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК У ПАЦИЕНТОВ С ЛАКУНАРНЫМИ ИНФАРКТАМИ МОЗГА КАК ПРОГНОСТИЧЕСКИЙ ФАКТОР ПРИ ЦЕРЕБРАЛЬНОЙ МИКРОАНГИОПАТИИ
Примерно 75 % лакунарных инфарктов мозга (ЛИМ) обусловлены церебральной микроанги-опатией (ЦМА). Сравнительные исследования прогноза церебральных макро- и микроангио-патий показали, что отдаленный прогноз хуже при церебральной микроангиопатии, за счет повторных ЛИМ, развития деменции и сосудистого паркинсонизма. Ведущим патогенетическим фактором развития ЛИМ и ЦМА является хроническая дисфункция эндотелия, связанная с нарушением гомеостатического баланса эндотелия в сторону деструкции. Поэтому одной из основных терапевтических стратегий при ЛИМ, обеспечивающих функциональное восстановление пациента, является индукция репарации эндотелия и церебрального ангиогенеза. В последние годы появились публикации о роли ангиогенных Т-лимфоцитов (Танг) CD3+CD31+CD184+ в регуляции репаративной функции эндотелиальных клеток-предшественниц (ЭКП) и их жизнеспособности. По некоторым данным выраженность молекул CD31 и CD184 на CD3+-клетках и количество Танг в периферической крови коррелируют с уровнем ЭКП. Высказано предпо-
ложение, что ангиогенные CD3+CD31+CD184+ Т-лимфоциты могут стимулировать функциональные возможности ЭКП, содействуя формированию новых кровеносных сосудов и эндоте-лиальной репарации.
Цель. Изучить возможность применения показателей уровней циркулирующих эндотели-альных клеток и ангиогенных Т-лимфоцитов в качестве прогностических факторов при ЦМА у пациентов с ЛИМ.
Материалы и методы. Объект исследования — ЭКП и Танг пациентов с ЛИМ при ЦМА (первые 48 ч ЛИМ) и на 7 сутки стандартной терапии с применением методов квантовой терапии (56 исследований). Возраст пациентов на момент исследования — 60,7 ± 5,4 лет. Средний показатель количества сосудистых факторов риска составил 2,3+0,4. Группа контроля — 20 условно здоровых доноров крови. Фенотипиче-ский профиль субпопуляций циркулирующих эндотелиальных клеток выявлялся при помощи комбинации моноклональных антител (МКА, Beckman Coulter и Becton Dickinson, США) к CD31, CD309, CD34, CD95, vWF, CD133,
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XII, № 2, 2016
CD117, CD 106, CD144, CD45, CD146, CD71, CD14, CD62P, CD73, CD147, CD116, FLT1, CD54, CD18, CD36; ангиогенных Т-клеток на основании экспрессии CD31/CD184/CD3 с использованием методов проточной иммуноцитометрии. Полученные данные обрабатывались с использованием пакетов статистических программ EXCEL, BIOSTAT и Statistica 6.0.
Результаты. Исследованы уровни эндотели-альных клеток на различных стадиях дифферен-цировки и Танг, содержащихся в мононуклеар-ной фракции периферической крови пациентов с ЛИМ при ЦМА. В первые 48 ч ЛИМ в периферической крови пациентов определялось до 5,510,5 % 34+-ЭКП, обладающих метаболической и пролиферативной активностью, но с достаточно слабым потенциалом к межклеточному взаимодействию, а также повышенное содержание в кровотоке так называемых «слущенных» CD31+CD309+CD144+ эндотелиоцитов (p < 0,05). Количество CD34+-клеток, способных принять блокирующий сигнал через FLT1, было увеличено (р < 0,05), при этом соотношение ингибитора ангиогенеза FLT1 к стимулятору ангиоге-неза CD309 составляло 1,75 (р < 0,05). Исходно низкие уровни относительного содержания пула циркулирующих «зрелых» эндотелиальных клеток начинало расти к 7 суткам терапии (p < 0,05).
Доля Танг минорного пула CD31hI к 7 суткам терапии суммарно возрастала (р < 0,01), а исходно высокий уровень экспрессии молекулы CXCR4 сохранялся. Выявлена отрицательная корреляционная связь между уровнем Танг и степенью экспрессии CD95 (г = -0.69, р < 0,05). Экспрессия CD106 была повышена (р < 0,01), что может быть связано с хронической эндотелиальной дисфункцией при ЦМА. Изучена связь проли-феративного и функционального потенциалов ЭКП: установлена корреляционная связь между экспрессией CD116 и экспрессией CD309 (г=0,84, р < 0,05), а также между экспрессией CD73 и CD71 (г=0,86, р < 0,05) и между CD73 и CD116 (г=0,55, р < 0,05).
Выводы. Определение экспрессии молекул CD34, CD31, CD309, CD133, CD117, CD146, CD54, CD106 и CD144 в различных комбинациях может служить биомаркером эндотелиально-го баланса в периферическом кровотоке. Определение баланса циркулирующих ЭКП и зрелых ЭК может быть использовано при оценке репа-ративной функции эндотелия церебрального ми-кроциркуляторного русла с целью оптимизации проводимого лечения. Определение Танг может служить дополнительным маркером лейкоцитар-но-эндотелиального взаимодействия в острейшем периоде ЛИМ при ЦМА.
Грицаев С. В., Сидорова Ж. Ю., Кострома И. И., Тиранова С. А., Свитина С. П., Дрижун Ю. С., Чубукина Ж. В., Мартынкевич И. С., Капустин С. И., Бессмельцев С. С.
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
ОЦЕНКА ГИПЕРМЕТИЛИРОВАНИЯ ПРОМОТОРНЫХ ОБЛАСТЕЙ ГЕНОВ SOX7, P15INK4B И АНТАГОНИСТОВ СИГНАЛЬНОГО ПУТИ WNT У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ МИЕЛОИДНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
Цель. Изучение статуса аберрантного метилирования генов SOX7, p15INK4b и антагонистов сигнального пути Wnt у больных острым мие-лоидным лейкозом (ОМЛ) для выявления частоты аберрантного метилирования с морфологическим вариантом и характером хромосомных аберраций.
Материалы и методы. Были отобраны образцы геномной ДНК 57 больных ОМЛ. В исследование не включались больные с острым промиелоцитарным лейкозом. Возраст больных, из которых 20 мужчин и 37 женщин, был в диапазоне от 20 до 79 лет, с медианой 51 год. Распределение по вариантам было следующим: 2 боль-
ных М0 вариантом, 7 больных М1, 23 больных М2, 4 больных М4, 8 больных М5, 3 больных М6 вариантом и 10 больных ОМЛ с миелодисплази-ей. По результатам изучения кариотипа, известного у 56 больных, были выделены три группы: 31 (54,4 %) больной с нормальным кариотипом, 8 (14,0 %) с комплексным кариотипом и 17 (29,8 %) с другими хромосомными аберрациями. Статус метилирования генов изучали посредством ме-тилспецифической полимеразной цепной реакции.
Результаты. Признаки аберрантного метилирования >1 генов выявлены у 52 из 57 больных (91,2 %) ОМЛ. Наиболее частой находкой было
