90-е сутки эксперимента при воздействии руды № 1 на макрофаги (269,0± ±3,5; контроль 491±11) и наименьшее — на 180-е сутки (172±4; контроль 419±7). Что касается содержания ШИК-положительных веществ в макрофагах при воздействии пыли руды № 2, то наибольшим оно было к концу 270-х суток, а наименьшим — к 10-м суткам эксперимента (153±55, контроль 346±5,5).
Содержание РНК и ШИК-положительных веществ в макрофагах при воздействии пыли медно-никелевой руды № 1 в 5-суточном эксперименте было почти одинаковым. К 30-м суткам количество РНК начало снижаться до 40±1,5 (контроль 57±2) и к 90-м суткам стало наименьшим (31±0,5; контроль 55±1), а количество ШИК-положительных веществ, наоборот к 30-м суткам увеличилось до 233±6 (контроль 369±7) и к 90-м суткам было наибольшим (269±8,5; контроль 491±7). К 180-м суткам количество РНК начало возрастать (53±4), а количество ШИК-положительных веществ снизилось до 172±4 (контроль 419±2). К 270-м суткам отмечалась обратная зависимость: содержание РНК снизилось до 45±1,5 (контроль 60±1,5), а количество ШИК-положительных веществ возросло до 206±9 (контроль 333±5). Содержание РНК и ШИК-положительных веществ в макрофагах при воздействии пыли медно-никелевой руды № 1 было значительно ниже (почти в 2 раза), чем при воздействии пыли руды № 2. Результаты динамических изменений содержания РНК и ШИК-положительных веществ в цитоплазме макрофагов указывают на нарушения белкового и углеводного обменов.
Выводы
1. Цитоспектрофотометрический метод как объективный критерий оценки функционального и патологического состояния клеток показал снижение содержания РНК и ШИК-положительных веществ в макрофагах легких от воздействия пыли 2 руд и особенно руды № 1.
2. Сравнительное количественное изучение содержания РНК и ШИК-положительных веществ в цитоплазме макрофагов может быть использовано при гигиенической оценке цитопатогенных свойств промышленных аэрозолей.
ЛИТЕРАТУРА. Автандилов Г. Г., Червоная Л. В. Сравнительное ми кроспектрсфотометрическое исследование содержания ДНК в клетках первичных очагов злокачественной меланомы и ее метастазов. — «Бюлл. экспер. биол.», 1973, № 4, с. 77—79.
Поступила 19/ХП 1974 г.
УДК 613.632.4+ 6Н.72Ы546.2Н+543.272.31-074
Д. А. Шустов, Л. А. Бакулина
УПРОЩЕННЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОЗОНА И ДВУОКИСИ АЗОТА ПРИ СОВМЕСТНОМ ИХ ПРИСУТСТВИИ В ВОЗДУХЕ
Кафедра радиационной гигиены Центрального института усовершенствования врачей, Москва
Существует несколько методов определения озона и окислов азота при совместном их присутствии в воздухе. Каждый из них имеет свои преимущества, а также недостатки, к которым относятся сложность аппаратуры, малодоступность реактивов, необходимость высокой квалификации исполнителя и др. Мы предлагаем сравнительно простой метод определения озона и двуокиси азота при совместном их присутствии в воздухе, в значительной степени исключающий перечисленные выше недостатки. Чувствительность метода равна 10~в г/л, точность составляет ±10%. К ним относится: продолжительность опыта, усредненные значения и др.
Г
Озон и двуокись азота являются сильными окислителями. Они из нейтральных растворов йодистого калия выделяют йод в ходе следующих реакций:
1) 2К1 + 03 + Н20 = 12 + 02 + 2КОН; 2) 2К1 + Ш2 + НаО = 12 + N0 + 2КОН.
Одна капля 0,1 н. раствора йода придает бледно-желтый цвет 100 мл воды. Более отчетливое окрашивание раствора наблюдается при пользовании в качестве индикатора крахмала, который в присутствии йода и йодистого калия дает интенсивное синее окрашивание.
Следовательно, озон и двуокись азота можно количественно определить с помощью объемного анализа (йодометрия). Сначала определяют суммарное количество озона и двуокиси азота в воздухе, а затем, после поглощения двуокиси азота раствором щелочи, определяют озон. Вычисляя разность между суммарным содержанием озона и двуокиси азота и содержанием озона, определяют двуокись азота.
Ход анализа. 100 мл воды, содержащие 4 г йодистого калия, помещают в поглотительный прибор или в склянку Дрекселя диаметром 3,5 см и пропускают определенный объем анализируемого воздуха со скоростью 0,05 л/мин через раствор до появления желтого окрашивания. Затем раствор переносят в химический стакан и титруют 0,001 н. раствором тиосульфата натрия до заметного ослабления желтой окраски. После этого в раствор добавляют 5 мл 0,2% раствора крахмала и титрование продолжают до исчезновения синего окрашивания. В этом случае определяется суммарное ' количество озона и двуокиси азота, так как в растворе йодида калия идут одновременно обе указанные выше реакции. Затем опыт повторяют, но с той разницей, что перед склянкой Дрекселя с йодистым калием ставят склянку Дрекселя, заполненную 100 мл 10% раствора едкого натра (раствор едкого натра можно и нужно использовать многократно). В этом случае определяется только озон, так как в растворе йодида калия идет первая из приведенных выше реакций (определение озона и двуокиси азота можно проводить одновременно, создавая 2 параллельные линии). Объем пропущенного воздуха в обоих случаях должен быть одинаковым.
Расчет концентрации (С) озона проводят по следующей формуле:
0,024-К-У С =-у- мг/л,
где К — поправочный коэффициент 0,001 н. раствора тиосульфата натрия; V" — объем 0,001 н. раствора тиосульфата натрия, израсходованного на титрование йода, выделившегося по первой реакции (в мл); V — объем воздуха, пропущенного через раствор (в л); 0,024 — количество озона, соответствующее 1 мл 0,001 н. раствора тиосульфата натрия (в мг).
Расчет концентрации (С) двуокиси азота проводят по следующей формуле:
0,023-к (V' — V") С =-у- мг/л,
где К, У"У — имеют те же значения, что и при расчете концентрации озона; V' — объем 0,001 н. раствора тиосульфата натрия, израсходованного на титрование йода, выделяющегося по 1-й и 2-й реакциям (в мл); 0,023 —количество двуокиси азота, соответствующее 1 мл 0,001 н. раствора тиосульфата натрия (в мг).
Приготовление основного стандартного 0,1 н. раствора тиосульфата натрия (из фиксанала). 24,8 г Ыа25203-5 Н30 растворяют в 1 л свежепро-кипяченной и охлажденной дистиллированной воды. К полученному раствору прибавляют 0,1 г Ыа2С03. Раствор тиосульфата натрия для защиты от света и СО, следует хранить в темной бутыли с пробкой, снабженной хлоркальциевой трубкой с натронной известью. Для приготовления стан •
дартных санти- и миллинормального растворов тиосульфата натрия применяют метод разбавления основного стандартного 0,1 н. раствора тиосульфата натрия. Титр раствора тиосульфата натрия не изменяется в течение 3 мес и более, если он приготовлен правильно и правильно хранится.
Приготовление 0,2% раствора крахмала. 2 г картофельного крахмала смешивают с небольшим количеством воды и полученную суспензию медленно вливают при перемешивании в 1 л воды при температуре 55—65°. Нагревание продолжают (иногда до кипения), пока раствор не станет прозрачным. После охлаждения раствор перемешивают и переливают в склянку с притертой пробкой. Раствор приготовляют перед проведением опыта. В качестве консервирующего вещества добавляют 10 мг йодида двухвалентной ртути. Раствор крахмала пригоден в течение 2—3 дней.
Приготовление мерной посуды. Вся мерная посуда при объемном анализе должна быть очень чистой, так как отсчет калиброванной посуды может быть затруднен, если она недостаточно хорошо отмыта от жиров и других соединений. Для этого бюретки, пипетки, мерные колбы после промывки хромовой смесью сушат спиртом. Это необходимо для того, чтобы при спуске жидкости стенки посуды были без капелек титрующей жидкости.
При рассмотрении изложенного выше метода определения озона и двуокиси азота при совместном их присутствии в воздухе могут возникнуть некоторые вопросы. Успевают ли озон и двуокись азота полностью прореагировать с йодистым калием при прохождении слоя раствора? Не окисляется ли образующаяся по реакции окись азота в растворе йодистого калия до двуокиси азота и не выделяется ли вследствие этого вторично йод? Успевает ли двуокись азота полностью поглощаться 10% водным раствором едкого натра?
Чтобы ответить на первые 2 вопроса, мы после 1-й склянки Дрекселя с водным раствором йодистого калия ставили 2-ю с таким же раствором. Выделения йода во 2-й склянке не наблюдалось. Это свидетельствовало о том, что озон и двуокись азота полностью реагировали с йодистым калием в 1-й склянке, а также указывало на то, что окись азота окисляться до двуокиси не успевала. Ответ на 3-й вопрос был получен путем увеличения концентрации едкого натра с 10 до 20%. В том и другом случае определяемая концентрация озона была одинаковой; это доказывало, что двуокись азота в склянке с 10% раствором едкого натра поглощалась полностью. На отсутствие окиси азота в растворе йодистого калия указывал и тот факт, что по окончании титрования йода тиосульфатом натрия раствор йодистого калия не окрашивался в синий цвет.
Необходимые для проверки метода озон и двуоксиь азота получали в специально изготовленном аппарате объемом около 3 л при воздействии на воздух тихих электрических разрядов. Концентрация озона в аппарате в зависимости от положения электродов составляла 0,05—0,3 мг/л. Концентрация двуокиси азота, как правило, превышала концентрацию озона в 2— 3 раза. Воздух из аппарата, содержащий озон и двуокись азота, протягивался через раствор йодистого калия с помощью серийной градуировочной воздуходувки (тип 822). Для просасывания воздуха можно использовать воздухоструйный насос, если между ним и склянкой Дрекселя будет поставлен прибор, измеряющий скорость воздуха.
Поступил» 12/11 1976 г.