CC BY
8
Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием 178 «Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний» (21-22 июня 2021 г.)
UPAR РЕГУЛИРУЕТ АНГИОГЕННЫЕ СВОЙСТВА РЕЗИДЕНТНЫХ
КАРДИАЛЬНЫХ ВАСКУЛОГЕННЫХ КЛЕТОК-ПРЕДШЕСТВЕННИЦ
Цоколаева З.И.1, 3, Дергилев К.В.1, Белоглазова И.Б.1, Василец Ю.Д.1, 2, Парфенова Е.В.1, 2
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Российская Федерация; 2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Москва, Российская Федерация; 3 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии», Москва,
Российская Федерация
Введение. Ключевой составляющей репаратив-ных процессов в постинфарктном сердце является формирование новой сосудистой сети. Известно, что рецептор активатора плазминогена урокиназ-ного типа (uPAR) играет важную роль в регуляции функций эндотелиальных клеток и в процессах постнатального ангио/васкулогенеза.
Цель. В данном проекте была исследована роль uPAR в регуляции пула резидентных карди-альных васкулогенных клеток-предшественников (ркВКП), которые представляют собой популяцию клеток, проявляющих эндотелиоподобное поведение и способны восстанавливать сосудистую сеть после повреждения.
Материалы и методы. Моделирование инфаркта сердца мыши выполнялось путем перевязки передней нисходящей коронарной артерии у животных uPAR-/- и дикого типа. Характеристика Seal клеток, васкуляризации ткани выполнялось путем иммунофлуоресцентного окрашивания криосрезов сердца. Подавление экспрессии Plaur (uPAR) выполняли c помощью CRISPR/Cas9. Ангиогенные свойства клеток исследовались с помощью Tube Assay и культивирования в дифференцировочных средах.
Результаты. Было показано, что у животных дикого типа после острого ишемического повреждения наблюдается накопление Sca-1+ ркВКП, большинство из которых экспрессируют на клеточной мембране рецептор урокиназы, маркеры эндотелиальных клеток (CD31, vWF), и способны к пролиферации и интеграции в состав формирующихся сосудов в зоне повреждения. Эти данные указывают на возможное участие этих клеток в процессе васкуляризации после инфаркта. Сравнительное исследование срезов миокарда мышей
дикого типа и нокаутированных по гену uPAR показало, что к 6-му дню после инфаркта миокарда наблюдается снижение числа капилляров и артери-ол, а также снижение числа ркВКП, что указывает на нарушение процессов ангио- и васкулогенеза при отсутствии рецептора. Проведенные исследования in vitro позволяют утверждать, что Sca-1+ ркВКП, полученные из сердец uPAR-/- мышей, демонстрировали сниженную способность к формированию капилляроподобных структур, в сравнении с Sca-1+ ркВКП из сердец мышей дикого типа. Морфометрические обсчеты показали, что общая длина сосудистых структур, способность к ветвлению и формированию замкнутых сосудистых петель была достоверно снижена в Sca-1+ ркВКП, полученные из сердец uPAR-/- мышей, в сравнении с контрольными животными. Нарушения «эндоте-лиоподобного» поведения сочетались с нарушением способности Sca-1+ ркВКП к эндотелиальной дифференцировке, индуцированной специализированной средой. Снижение экспрессии uPAR в ркВКП (с помощью CRISPR/CAS9 технологии) также приводило к подавлению эндотелиоподобно-го поведения клеток. Выявленное снижение ангио-генных свойств Sca-1+ uPAR-/- ркВКП может быть одним из объяснений нарушения процессов восстановления/формирования de novo сосудистой сети в постинфарктном сердце uPAR-/- животных
Заключение. Таким образом, uPAR играет важную роль в реализации ангиогенных свойств резидентных кардиальных васкулогенных клеток-предшественниц, участвующих в постнаталь-ном репаративном ангио-/васкулогенезе.
Финансирование. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 19-015-00231.
