CC BY
8Вчеш записки Тавршського нацiонального унiверситету ím. В.1. Вернадського Серiя «Бюлопя, xímíh». Том 27 (66). 2014. № 1. С. 207-214.
УДК 612.35+616.36+591.132.5
УЧАСТЬ ПРОСТАГЛАНДИН1В У РЕАЛ1ЗАЦП ВПЛИВУ БОМБЕЗИНУ НА МЕМБРАННИЙ ПОТЕНЦ1АЛ ГЕПАТОЦИТ1В
Цапенко П.К., Оглобля О.В., Лященко Т.П.
Кшвський нащональний утверситет 1мет Тараса Шевченка, Кшв, Украгна
E-mail: tsapenkopetr@yahoo.com
Показано, що простагландин F2a, котрий е посередником мiж рiзними субпопуляцiями клiтин печiнки, спричиняе пперполяризащю мембран гепатоцитiв, тобто чинить збуджуючий вплив на цi клiтини. При цьому простагландини опосередковують та посилюють дiю норадреналiну на паренхiмнi клоним печiнки, що позначаеться на величин змiн мембранного потенцiалу. Блокада синтезу екзогенних простагландишв за допомогою ацетилсалщилово! кислоти не позначаеться на ефектах бомбезину. Отримаш данi свiдчать, що вплив бомбезину на мембранний потенщал гепатоци™ щурiв не опосередкований дiею простагландинiв.
Ключовi слова: бомбезин, мембранний потенщал, гепатоцит, простагландини.
ВСТУП
Бомбезин та спорщнеш з ним пептиди поширеш у багатьох системах оргашв вищих тварин та здшснюють вплив на велику кшьюсть ф1зюлопчних процеав, у тому числ1 гепатобшарно! системи. Зокрема, показано, що бомбезин та гастрин-ришзинг пептид вщграють важливу роль у канальцевш секрецп жовч1, а також забезпечують скорочення жовчного м1хура та вихщ жовч1 у дванадцятипалу кишку [1]. Дослщження жовчосекреторно! функцл печ1нки щур1в in vivo показали стимулювальний вплив бомбезину на процес жовчоутворення [2]. 1снують дат про те, що бомбезин посилюе протипухлинт ефекти субстанцл Р [3], про вплив бомбезину на прол1феращю гепатоципв [4] та пригтчуючий вплив його антагошспв на рют пухлинних клпин [5]. Проте, не зважаючи на численш вщомосп щодо впливу бомбезину на функцюнування печ1нки, мехашзми цього впливу лишаються дотепер нез'ясованими.
Вщомо, що внутршньоклпинт посередники дл бомбезинових пептищв представлен шозитолтрифосфатом та д1ацилглщеролом [6]. Наш1 попередт дослщження показали деполяризуючу дда бомбезину на мембранний потенщал гепатоципв, при цьому зм1ни цього показника пов'язаш виключно з хемокерованими каналами [7-9]. Разом з тим вазопресин, д1я якого на гепатоцити так само пов'язана з системою шозитолтрифосфату та д1ацилглщеролу, викликав гшерполяризащйш зм1ни мембранного потенщалу гепатоципв [9], що змушуе припустити непряму дда бомбезину на кштини паренх1ми печшки. Так, показано, що катехолам1ни справляють свш вплив на функцл гепатоципв не лише прямим шляхом, але й опосередковано через дда на непаренх1мт клпини печ1нки та видюлюваш цими клпинами простагландини [10, 11]. Дослщження питання участ ендогенних простагландишв в ефектах бомбезину
i стало метою дано! роботи. У якост показника функщонального стану клггин ми використовували мембранний потенщал, оскiльки BiH вiдображаe процеси синтезу та мембранного транспорту у секреторних клггинах, зокрема, гепатоцитах [7, 12].
МАТЕР1АЛИ I МЕТОДИ
Дослiди проводили на самцях лабораторних бiлих щурiв масою 200-250 г, якi утримувались в стандартних умовах вiварiю. Дослщження на тваринах проведенi з дотриманням мiжнародних принципiв Свропейсько! конвенцп про захист хребетних тварин, що використовуються для дослiдних та iнших наукових цшей.
Дiю бомбезину на мембранний потенщал гепатоципв дослiджували за допомогою мшроелектродно! технiки за методом печшкових слайсiв [13]. Для цього у наркотизованих щурiв проводили вiдмивання печшки вiд кровi за методикою Сеглена [14]. Препарат печшки перфузували у експериментальнш камерi стандартним позаклiтинним сольовим розчином, температура розчину становила 37°С; склад розчину був таким (у ммоль/л): 140 NaCl, 4 KCl, 1 CaCl2, 1 MgCl2, 10 глюкоза, 1 KH2PO4, 10 HEPES (pH 7,4, NaOH) [7].
Мшроелектроди виготовляли з боросилiкатних заготовок зовшшнього дiаметру 1,45 мм на твавтомап для виготовлення скляних мiкроелектродiв МЭ-4. Мiкроелектроди заповнювали 2,5 М розчином KCl у термостат за температури 50°С протягом 10 годин. Ошр готових мiкроелектродiв становив 100-120 МОм. Потенщал реестрували за допомогою диференцшного пiдсилювача, що був виготовлений дослщно-конструкторським виробництвом 1нституту фiзiологil iм. О.О.Богомольця НАН Украши на основi м^осхеми К140УД8Б. Сигнал вiд пiдсилювача спрямовувався через аналогово-цифровий перетворювач до комп'ютера, на якому рееструвався за допомогою спещально! програми. Пiсля реестрацп дат збер^алися у виглядi таблиць в файлах формату Excel, тсля чого проводилася 1'х статистична обробка.
Експеримент складався з таких серш:
1. З метою визначення, як позначаеться на мембранному потенцiалi опосередкувуння ди норадреналiну простагландинами, ми дослiджували вплив норадреналiну на тлi ди ацетилсалщилово! кислоти та порiвнювали з дiею самого катехоламiну та само! ацетилсалщилово! кислоти.
2. Визначаючи характер ди простагландинiв, вивчали вплив на мембранний потенщал гепатоципв простагландину F2a (единого простагландину, до якого на гепатоцитах мютяться рецептори [10]).
3. З'ясовували роль ендогенних простагландинiв у реалiзацil ефектiв бомбезину, застосовуючи пептид на rai ди ацетилсалiцилово! кислоти.
Ми перфузували препарат розчином дослщжуваних речовин в максимально ефективнш концентрац^: норадреналш («Здоров'я», Харкiв) - 1 мкмоль/л [15], бомбезин («Sigma», США) - 50 нмоль/л [16], простагландин F2a - 5 мкмоль/л [17], ацетилсалщилова кислота - 500 мкмоль\л [18].
Фактичний матерiал було оброблено методами варiацiйноl статистики. Проводився тест на нормальнють розподiлу Шапiро-Уiлка, нормально розподшеш данi обчислювалися за критерiем Стьюдента для залежних вибiрок з урахуванням тесту Левена на гомогеннiсть вибiрки. Статистично значущими вважалися змiни при p<0,05.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ОБГОВОРЕННЯ
Результати наших дослiджень свiдчать, що за умов блокади циклооксигенази норадреналш викликае гiперполяризацiю мембран гепатоцитiв, але меншо! величини, нiж за умов застосування самого норадреналiну (Рис. 1). При цьому сама ацетилсалщилова кислота не спричиняла змiн мембранного потенцiалу гепатоципв, а отже будь-яка модуляцiя даного показника була пов'язана саме з дiею гормону.
" -10
80 100 час, с
-норадреналш+ацетилсалщилат ■норадреналш -ацетилсалщилова кислота
-15
с га
-20
-25
га с ю
-30 -
-35
-40
перфузiя норадреналiну в^мивання
Л 1
I
К ш
Ю \Ю и *
1 20 39 58 77 96 115 134 153 час, с
А
Б
Рис. 1. А.- Вплив норадренал^, ацетилсалщилово! кислоти та норадренал^ на тлi дп ацетилсалщилово! кислоти на мембранний потенцiал гепатоцитiв. * -р<0,05 щодо вихiдного рiвня; + - р<0,05 щодо перфузп самого норадреналiну. Б -Вплив норадреналшу на тлi дп ацетилсалщилово! кислоти на мембранний потенщал гепатоципв (оригiнальнi записи).
Також слiд зазначити, що при дп норадреналiну на тлi дi! ацетилсалiцилово! кислоти спостер^алися секреторнi потенцiали, а отже стимулювальний вплив норадреналiну не повнiстю опосередковуеться дiею через непаренхiмнi клiтини печшки, проявляеться й пряма дiя гормону (рис.1).
Отже, нашi данi шдтверджують вiдомостi про опосередкування ефектiв норадреналшу простагландинами i одночасно свiдчать про те, що блокада циклооксигенази проявляеться на величиш змш мембранного потенщалу гепатоцитiв пiд впливом регулятора, дiя якого опосередкована ейкозано!дами.
-10
-20
3- -30
-60
-70
З метою nepeBÎpm гшотези про опосередкування ди бомбезину простагландинами, ми на першому етапi перфузували препарат розчином ейкозанощу (рис.2). Нашi результати свщчать, що простагландин F2a спричиняе гiперполяризацiю мембран гепатоцитiв, при цьому клпини в значнiй мiрi проявляють iндивiдуальнi особливостi (рис.2), що може бути пов'язане з рiзним ступенем ïx функцiональноï активностi. Адже в умовах нашого експерименту ми не можемо контролювати вiд клiтини якоï зони печiнкового ацинусу (зони 1-3 або перипортальноï чи перивенозноï зони за рiзними класифiкацiями) ми проводимо вщведення потенцiалу.
А Б
Рис. 2. А - Змши мембранного потенщалу гепатоцитiв щурiв пiд впливом простагландину F2a, та бомбезину на rai ди ацетилсалiциловоï кислоти. * - р<0,05 щодо контролю. Б - Вплив простагландину F2a на мембранний потенщал гепатоципв (оригiнальнi записи).
Статистична обробка показала, що застосування простагландину F2a призводило до зростання мембранного потенщалу в середньому на 82%. Це зростання було значущим: t-критерш Стьюдента дорiвнював 65,54, а рiвень статистично1' значущостi був меншим за 0,001. Звертае увагу факт, що простагландин F2a викликае появу секреторних потенщатв порiвняно високо1' амплiтуди (рис. 2), тобто значно стимулюе процеси трансмембранного транспорту
клiтин паренхiми печiнки, що може бути свiдченням посилення видшенш компоненпв жовчi через апiкальну мембрану гепатоципв або посилення захоплення жовчних кислот через базолатеральну мембрану кл^ин.
Застосування бомбезину на тлi попереднього застосування блокатору циклооксигенази ацетилсалщилово! кислоти викликало деполяризацiйнi змiни мембранного потенщалу гепатоцитiв, якi не вiдрiзнялися вщ таких за умов застосування самого пептиду (рис.3). Це свщчить про незалучення метаболiтiв арахщоново! кислоти в реатзацп впливу бомбезину на електричш процеси на мембранах гепатоцитiв щурiв. Отже, бомбезин справляе свiй вплив на гепатоцити через шший посередник, найвiрогiднiше, внутрiшньоклiтинний, оскiльки за даними лтератури iншi вiдомi мiжклiтиннi посередники в печшщ або ж не справляють свого впливу на процеси жовчоутворення, або ж виступають у ролi iнгiбiторiв цих процесiв [11, 19]. Це дозволяе припустити, що деполяризуюча дiя бомбезину пов'язана iз дiею самого пептиду та його власними специфiчними внутрiшньоклiтинними механiзмами сигналiзацil. Оскiльки ж показано, що зв'язування бомбезинових рецепторiв iз сво!м агонютом спричиняе активацiю фосфолiпази С та li каскадних механiзмiв, яка зумовлюе гiперполяризацiю мембран гепатоцитiв через вщкривання кальцiй-залежних калiевих каналiв, то деполяризащя мембран клiтин пареними печiнки шд впливом бомбезину може бути пов'язана з наявшстю iнших внутрiшньоклiтинних сигнальних шлях1в пептиду. Питання встановлення цих шляхiв бомбезину та переключення мiж ними лишаеться вiдкритим та потребуе подальших дослiджень.
ВИСНОВКИ
1. Бомбезин деполяризуе мембрани гепатоципв, що може вказувати на змши метаболiчноl активносп гепатоцитiв та свiдчить про активащю трансмембранного транспорту клiтин.
2. Простагландини викликають гiперполяризацiю мембран гепатоцитiв, що е свщченням зростання !х метаболiчноl активностi, та опосередковують i посилюють дiю норадреналiну на цi кттини.
3. Оскiльки пригнiчення активностi циклооксигенази не змшюе характер ди бомбезину на мембранний потенщал гепатоцитiв, то це вказуе на те, що дiя бомбезину на гепатоцити не залучае простагландини.
Список лггератури
1. Cho W.K. Intracellular pH regulation in bombesin-stimulated secretion in isolated bile duct units from rat liver / Cho W.K., Mennone A., Boyer J.L. // AJP - Gastrointest. Liver Physiol. - 1998.- vol. 275, issue 5. - P. 1028-1036.
2. Мороз О.Ф. Участь бомбезину у регуляцп жовчосекреторно! функцп печшки щурiв / Мороз О.Ф.: Автореферат... к. бюлог. наук, спец.: 03.00.13 - фiзiологiя людини i тварин. — К. : Кшвський нац. ун-т ¡м. Т. Шевченка, 2009. — 19 с.
3. MacKinnon A.C. Expression of V1A and GRP receptors leads to cellular transformation and increased sensitivity to substance-P analogue-induced growth inhibition / MacKinnon A.C., Tufail-Hanif U., Lucas C.D. et al. // Br. J. Cancer.- 2005.- Vol.92(3).- P. 522-531.
4. Assimakopoulos S.F. Stimulation of oval cell and hepatocyte proliferation by exogenous bombesin and neurotensin in partially hepatectomized rats / Assimakopoulos S.F., Tsamandas A.C., Alexandris I.H., Georgiou C., Vagianos C.E., Scopa C.D. // World J. Gastrointest. Pathophysiol.- 2011.- Vol.2(6).- P.146-154.
5. Bajo A.M. Bombesin antagonists inhibit proangiogenic factors in human experimental breast cancers / Bajo A.M., Schally A.V., Groot K., Szepeshazi K. // Br. J. Cancer.- 2004.- Vol.90, N1.- P. 245-252.
6. Santiskulvong C. EGF receptor function is required in late G1 for cell cycle progression induced by bombesin and bradykinin / Santiskulvong C., Sinnet-Smith J., Rozengurt E. // Am J Physiol Cell Physiol. - 2001.- vol. 281, issue 3. - P. 886-898.
7. Aromataris E.D. Glucagon activates Ca2+ and Cl- channels in rat hepatocytes / Aromataris E.D., Roberts M.L., Barritt G.J. et al. // J. Physiol. - 2006. - 573. - Issue 3. - P.611-625.
8. Цапенко П.К. Вплив бомбезину на електричну актившсть гепатоципв щурiв / Цапенко П.К., Оглобля О.В., Лященко Т.П. // Фiзика живого. - 2009. - №2. - С.68-73.
9. Цапенко П.К. Змши мембранного потенщалу гепатоципв щурiв тд впливом вазопресину / Цапенко П.К., Лященко Т.П. // Фiзiологiчний журнал. - 2011. - №4. - С.77-82.
10. Kmiec Z. Cooperation of liver cells in health and disease / Kmiec Z. // Adv. Anat. Embryol. Cell Biol. -2001. - Vol.161. - P.149-151.
11. Oben J.A. Sympathetic nervous system regulation of liver repair / Oben J.A., Diehl A.M. // Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol.- 2004.- Vol. 280(1).- P. 874-883.
12. Фролькис В.В. Влияние активации биосинтеза белка на уровень мембранного потенциала клеток / Фролькис В.В. // Биофизика. - 1974. - 19. - №3.- С.470-473.
13. Lyall V. Measurment of intracellular chloride activity in mouse liver slices with microelectrodes / Lyall V., Croxton T.L., Armstrong W.M. // Biochim. Biophys. Acta. - 1987. - N.903(1). - P.56-67.
14. Li A.P. Human hepatocytes: isolation, cryopreservation and applications in drug development / Li A.P. // Chemico-biological interactions. - 2007. - V.168(1). - 16-29.
15. Sanchez-Gutierez J.C. Modulation of gluconeogenesis by epinephrine in hepatocytes isolated from genetically obese (fa/fa) Zucker rats / Sanchez-Gutierez J.C. // Arch. Biochem. Biophys.- 2000.-Vol.373(1).- P. 249-254.
16. Mitchell F.M. Differential modulation of bombesin-stimulated phospholipase C and mitogen-activated protein kinase activity d-Arg, d-Phe, D-Trp, Leu Substance P / Mitchell F.M., Heasley L.E., Qian N.-X. et al. // American socity for Biochemistry and molecular biology, inc.- 1995.- Vol.210, No 15.- issue 14.-P. 8623-8628.
17. Koukoui O. Effects of the prostaglandins PGF2 and PGE2 on calcium signaling in rat hepatocyte doublets / Koukoui O., Boucherie S., Sezan A. et al. // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.- 2006.-Vol. 290.- P. G66-G73.
18. Sils D. Inhibition of platelet aggregation and thromboxane production by low concentrations of aspirin in vitro / Sils D., Rodgers S.E., Lloyd J.V. et al. // Clin. Sci.- 1988.- Vol. 74(5).- P. 491-497.
19. Boyer J.L. Bile formation / Boyer J.L., Nathanson M.H. // Shiffs deseases of the liver.- Philadelphia.-1999.- P. 119-142.
Цапенко П.К. Участие простагландинов в реализации влияния бомбезина на мембранный потенциал гепатоцитов / П.К. Цапенко, О.В. Оглобля, Т.П. Лященко // Ученые записки Таврического национального университета им. В.И. Вернадского. Серия «Биология, химия». - 2014. -Т. 27 (66), № 1. - С. 207-214.
Показано, что простагландин Р2а, который является посредником между разными субпопуляциями клеток печени, вызывает гиперполяризацию мембран гепатоцитов, то есть оказывает возбуждающее воздействие на эти клетки. При этом простагландины опосредуют и усиливают действие норадреналина на паренхимные клетки печени, что сказывается на величине изменений их мембранного потенциала. Блокада синтеза екзогенных простагландинов при помощи ацетилсалициловой кислоты не изменяет эффекты бомбезина. Полученные данные свидетельствуют, что влияние бомбезина на мембранный потенциал гепатоцитов крыс не опосредован воздействием простагландинов.
Ключевые слова: бомбезин, мембранный потенциал, гепатоцит, простагландины.
yHACTb nPQCTArfiAHflMHIB y PEAflI3A^i BnflMBy E0MEE3MHy .
THE ROLE OF PROSTAGLANDINS IN REALIZATION OF BOMBESIN INFLUENCE ON HEPATOCYTES MEMBRANE POTENTIAL
Tsapenko P.K., Ogloblya O.V., Liashchenko T.P.
Taras Shevchenko National University of Kyiv, Kyiv, Ukraine
E-mail: tsapenkopetr@yahoo.com
Stimulating effects of bombesin on cholangyocyte secretion activity, gall bladder contraction and bile formation was shown by various authors. Influence of bombesin on hepatocyte proliferation activity is known also. But mechanism of bombesin effects on hepatocyte function is unclear. Our previous investigation suggests that bombesin evokes depolarization of rat liver cells by chemosensitive ionic channels activation. By contrast vasopressin, which has the same second messengers as bombesin, provokes hepatocyte hyperpolarization. It suggests that bombesin effect on hepatocyte membrane potential may involve releasing of prostaglandins by non-parenchymal liver cells, similar to norepinephrine liver cells regulation.
Bombesin effect on hepatocyte membrane potential was investigated by microelectrode technique on liver slices. For the preparation of liver slices, male rats were anaesthetized with an intraperitoneal injection of sodium thiopental (50 mg kg-1 body mass). After laparotomy liver was perfused by standard medium (in mM: 140 NaCl, 4 KCl, 1 CaCl2, 1 MgCl2, 10 glucose, 1 KH2PO4, 10 HEPES, adjusted to pH 7.2-7.4 with NaOH) then it was isolated and sliced. Slices were placed in perfused silgard-covered bath at 37°C. Silver chloride indifferent electrode was attached with medium by salt bridge. Microelectrodes were made from borosilicate glass (interior diameter 1.45 mm, resistance below 110 MQ) and filled by 2.5 M KCl. Hepatocyte membrane potential was measured in the presence of: 1) norepinephrine and norepinephrine at cyclooxygenase inhibition by acetylsalicylic acid, 2) acetylsalicylic acid alone, 3) prostaglandin F2a (only one prostaglandin which has receptors on hepatocytes), 4) bombesin with acetylsalicylic acid.
Norepinephrine evokes hepatocyte hyperpolarization from -25 to -65 mV. By contrast, at cyclooxygenase inhibition norepinephrine provokes hepatocyte hyperpolarization to -35 mV. Acetylsalicylic acid has no effect on rat liver hepatocyte electrical potential, so prostaglandins mediate catecholamine influence on these cells. It should also be stated that norepinephrine in the presence of acetylsalicylic acid induces membrane potential oscillations (secretory potentials). This fact suggests that membrane potential changes are induced by catecholamine and prostaglandin together.
Prostaglandin F2a evokes hepatocyte hyperpolarization; in this case there is an inherent characteristic of hepatocyte membrane potential changes, that may depends on hepatocyte functional activity. It should be noted that prostaglandin F2a provokes high amplitude secretory potentials of rat liver cells, what indicates that prostaglandin activates hepatocyte transmembrane transport system and induces increasing of bile flow trough apical membrane or increasing of bile acid uptake on basolateral cell membrane.
Bombesin at cyclooxygenase inhibition by acetylsalicylic acid causes cell depolarization which was not differ from bombesin-induced depolarization. So, prostaglandins are not mediate bombesin influence on rat hepatocyte membrane potential. It suggests that there is another (maybe intracellular) bombesin messenger. We can assume that bombesin-induced rat liver cells depolarization is not mediated by proteinkinase C intracellular cascade. Therefore intracellular signal pathways of bombesin are still unclear and should be investigated.
Conclusion: prostaglandin F2a, which is a messenger between liver cells subpopulations, evokes hepatocyte membrane hyperpolarization and has a stimulating action on these cells. Prostaglandins mediate and potentiate norepinephrine action on rat liver cells membrane potential difference. Inhibition of endogenous prostaglandins synthesis by acetylsalicylic acid does not change a bombesin effects on hepatocytes electrical membrane potential. This fact suggests that influence of bombesin on rat liver hepatocytes membrane potential does not mediated by prostaglandins. Keywords: bombesin, membrane potential, hepatocyte, prostaglandins.
References
1. Cho W.K., Mennone A., Boyer J.L., Intracellular pH regulation in bombesin-stimulated secretion in isolated bile duct units from rat liver, AJP - Gastrointest. Liver Physiol, 275, 1028 (1998).
2. Moroz O.F., Effect of bombesin on bile formation in the rat liver, Dissertacion for the candidate biological science degree in speciality 03.00.13 - human and animal physiology (Taras Shevchenko Kyiv National University, Kyiv, 2009), 19 p.
3. MacKinnon A.C., Tufail-Hanif U., Lucas C.D. Expression of V1A and GRP receptors leads to cellular transformation and increased sensitivity to substance-P analogue-induced growth inhibition, Br. J. Cancer., 92, 522 (2005).
4. Assimakopoulos S.F., Tsamandas A.C., Alexandris I.H., Georgiou C., Vagianos C.E., Scopa C.D., Stimulation of oval cell and hepatocyte proliferation by exogenous bombesin and neurotensin in partially hepatectomized rats, World J. Gastrointest. Pathophysiol., 2, 146 (2011).
5. Bajo A.M., Schally A.V., Groot K., Szepeshazi K., Bombesin antagonists inhibit proangiogenic factors in human experimental breast cancers, Br. J. Cancer., 90, 245 (2004).
6. Santiskulvong C., Sinnet-Smith J., Rozengurt E., EGF receptor function is required in late Gj for cell cycle progression induced by bombesin and bradykinin, Am J Physiol Cell Physiol., 281, 886 (2001).
7. Aromataris E.D., Roberts M.L., Barritt G.J., Glucagon activates Ca2+ and Cl- channels in rat hepatocytes, J. Physiol., 573, 611 (2006).
8. Tsapenko P.K., Ogloblia O.V., Lyashchenko T.P., Influence of bombesin on electrical activity of rat hepatocytes, Physics of the alive, 2, 68 (2009).
9. Tsapenko P.K., Liashchenko T.P., Effect of vasopressin on the membrane potential of rat hepatocytes, Fiziolohichnyi zhurnal, 4, 77 (2011).
10. Kmiec Z., Cooperation of liver cells in health and disease, Adv. Anat. Embryol. Cell Biol., 161, 149 (2001).
11. Oben J.A., Diehl A.M., Sympathetic nervous system regulation of liver repair, Anat. Rec. A Discov. Mol. CellEvol. Biol., 280, 874 (2004).
12. Frol'kis V.V., Effect of activation of protein biosynthesis on the magnitude of cell membrane potential, Biofizika, 19, 470 (1974).
13. Lyall V., Croxton T.L., Armstrong W.M., Measurment of intracellular chloride activity in mouse liver slices with microelectrodes, Biochim. Biophys. Acta., 903, 56 (1987).
14. Li A.P., Human hepatocytes: isolation, cryopreservation and applications in drug development, Chemico-biological interactions., 168, 16 (2007).
15. Sanchez-Gutierez J.C., Modulation of gluconeogenesis by epinephrine in hepatocytes isolated from genetically obese (fa/fa) Zucker rats, Arch. Biochem. Biophys., 373, 249 (2000).
16. Mitchell F.M., Heasley L.E., Qian N.-X., Differential modulation of bombesin-stimulated phospholipase C and mitogen-activated protein kinase activity d-Arg, d-Phe, D-Trp, Leu Substance P, American socity for Biochemistry and molecular biology, inc., 210, 8623 (1995).
17. Koukoui O., Boucherie S., Sezan A., Effects of the prostaglandins PGF2 and PGE2 on calcium signaling in rat hepatocyte doublets, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol., 290, G66 (2006).
18. Sils D., Rodgers S.E., Lloyd J.V., Inhibition of platelet aggregation and thromboxane production by low concentrations of aspirin in vitro, Clin. Sci., 74, 491 (1988).
19. Boyer J.L., Nathanson M.H., Bile formation, Shiff's deseases of the liver, edited by Schiff E.R., Sorrell M.F., Maddrey W.C. (Lippincott-Raven, Philadelphia PA, 1999), 119.
Поступила в редакцию 25.01.2014 г.
