CC BY
38
Полушин A.B., Горшков A.C., Карпова Е.М. ЦИТОТОКСИЧЕСКОЕДЕЙСТВИЕ СИНТЕТИЧЕСКОГО ХЕРАЛЬНОГО ПРОИЗВОДНОГО ИЗОПРЕНОИДОВ И ПОРФИРИПОВ Кировская государственная медицинская академия, кафедра медицинской биологии и генетики Зав. кафедрой: профессор A.A. Косых Научные руководители: профессор A.A. Косых; профессор Н.К. Мазина
В настоящее время ведется активный поиск средств, способных влиять на рост и развитие опухолей. Одним из направлений является применение полусинтетических растительных препаратов. В рамках договора № 462 МА/01-2008 с Институтом химии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук (ИХ КНЦ УрО РАН) по теме: «Изучение биологической активности и определение фармакологической перспективы синтетических херальных и полифункциональных производных изопреноидов и порфиринов» по Госконтракту 02512120011 нами был испытан алкилированный ве-ратровый диамин (далее вещество) как возможный цитостатик с противоопухолевой активностью. Для определения действующей дозы вещества были взяты концентрации 1; 2; 3; 4 мкг/мл. Работы проведены на культуре карциномы гортани Нер-2 в строго стерильных условиях в боксированного помещения под защитой ламинарбокса ЛБГ-1 с горизонтальным потоком стерильного воздуха по общим принципам работы с клеточными культурами. Для постановки эксперимента культуру выращивали в индивидуальных пенициллиновых тест-флаконах на покровных стеклах размером 9x18 мм и толщиной 0,17 мм. по методу летающих стекол в растворе состоящем из среды Игла МЕМ, сыворотки крови эмбрионов коровы до концентрации 5% и стандартной смеси антибиотиков (пенициллин G 50ЕД/мл и стрептомицин 50 мкг/мл, ООО «БиолоТ»). В каждый флакон вносили по 1 мл готовой клеточной суспензии (40 000 клеток в мл) и индивидуальную дозу разведения вещества
с учетом его концентрации в культуральной жидкости (микропипеткой ). Препараты готовили через 48 и 72 часа после начала эксперимента, для чего стекло с монослоем фиксировали 10 минут в жидкости Кар-нуа. После этого клетки окрашивали железным гематоксилином Вейгарта и заключали в синтетическую смолу «Маунт-экспресс водный». При исследовании учитывались следующие характеристики: митотическая активность клеток (МИ- митотический индекс в промиле, и МПИ- метафазно-профазный индекс) с учетом числа патологических форм делений (ДПМ-доля патологических митозов в %).
В результате эксперимента было выявлено, что при дозировке в 1 мкг/мл на 48 часов по сравнению с контролем возрастают: МИ с 48,19 до 50,32; МПИ с 6,17 до 8,3; ДПМ с 26,59 до 51,43. Возрастание МИ обусловлено задержками митозов в метафазе, а увеличение ДПМ - токсическим действием вещества на митотический аппарат клеток. Увеличение МПИ подтверждает гипотезу о задержке митоза в метафазе. На срок 72 часа МИ уменьшается с 52,27 до 38; МПИ с 6,337 до 5,0, зато увеличивается ДПМ с 20,25 до 86,67. Таким образом начинает проявляться мембранотоксическое действие вещества, обусловленное химическим строением. Однако, широта терапевтического действия данного препарата невелика. Действие вещества начинается с концентрации 1 мкг/мл, характеризуется нарушением межклеточных контактов, снижением митотической активности, увеличением патологических форм деления. В более высоких концентрациях указанные изменения резко возрастают вплоть до полной дезорганизации клеточного пласта и полного отсутствия митотической активности в дозе 4 мкг/мл, что подтверждает цитотоксический и противоопухолевый эффект.
