Цитологическое изучение лиственницы сибирской в антропогенно нарушенных районах г. Красноярска и его окрестностей Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

УДК 582.475.2+576.08

Е. Н. Муратова, Т. В. Карпюк, О. С. Владимирова,

О. А. Сизых, О. В. Квитко

ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ В АНТРОПОГЕННО НАРУШЕННЫХ РАЙОНАХ г. КРАСНОЯРСКА И ЕГО ОКРЕСТНОСТЕЙ1

Представлены материалы по цитологическому изучению лиственницы сибирской в антропогенно нарушенных районах г. Красноярска и его окрестностей. Выявлен ряд цитологических нарушений, но установлено, что в целом лиственница сибирская довольно устойчива к антропогенным нагрузкам и может быть с успехом использована в озеленении городов.

Лиственница сибирская, кариотип, митоз, хромосомы, кариограммы, антропогенный фактор, атмосферное загрязнение, радиационное загрязнение, городские насаждения, Средняя Сибирь.

Лиственница сибирская (Larix sibirica Ledeb.) имеет обширный ареал в Восточном Казахстане и по всей Сибири, произрастая на севере до низовьев Енисея, на юге — по всему Алтаю, на востоке — до Южного Забайкалья. За пределами России и Казахстана данный вид встречается на северо-западе Монголии и на востоке Джунгарии [Бобров, 1978]. Интерес к лиственнице сибирской определяется тем, что она является одним из основных лесообразующих видов Сибири. Кроме того, она имеет декоративную крону и широко применяется в озеленении городов.

Цитологические исследования лиственницы сибирской проводились и ранее [Simak, 1964; Круклис, 1974; Круклис, Милютин, 1977; Бударагин, 1980; Zhang et al., 1985; Муратова, 1991; Hizume et al., 1993; Седельникова, Пименов, 2005; Сизых и др., 2006], но они не охватывают всего обширного ареала вида. Кроме того, необходимы данные по цитологическим и кариологическим особенностям этого вида в условиях антропогенного стресса. Подобные исследования для данного вида единичны и включают только лиственницу сибирскую в Норильском промышленном районе [Седельникова, Пименов, 2007].

Материал и методика исследований

Объектами настоящего исследования послужили насаждения лиственницы сибирской в Советском районе г. Красноярска (микрорайон «Зеленая роща») и окрестностях г. Красноярска (п. Атаманово, ниже по течению р. Енисей). В микрорайоне «Зеленая роща» расположен КРАЗ — Красноярский алюминиевый завод, на котором получают металлический алюминий из глинозема с помощью электролиза. При этом выделяется огромное количество вредных газов: окись углерода, токсичный фтористый водород, а также смолистые вещества, обладающие канцерогенным эффектом. Материалом послужили семена, собранные в этом микрорайоне в 2006 г. с 15 деревьев. Кроме того, в качестве материала для работы использовалась молодая хвоя

1

Работа выполнена при финансовом поддержке грантов РФФИ (проект № 08-04-00034), РФФИ — «Енисей» (проект № 07-04-96823), индивидуальных грантов ККФН № 180106 и 180107.

лиственницы сибирской, собранная с 10 деревьев в 2007 г. в п. Атаманово (88 км от Красноярска).

Акватория р. Енисей, береговая зона и острова в окрестностях г. Красноярска испытывают влияние широкого спектра загрязняющих веществ. Ниже Красноярска по течению Енисея находится Горно-химический комбинат (ГХК, г. Железногорск Красноярского края), который производит оружейный плутоний. Вода Енисея используется для охлаждения реактора и снова сбрасывается обратно. Начиная от п. Атаманово и далее вниз по течению в водах Енисея обнаруживаются радиоактивные вещества [Болсуновский и др., 1999]. В качестве контроля использовались объекты, расположенные вне зоны влияния КРАЗа и ГХК (с. Частоостровское). Все исследованные растения имеют нормальный фенотип и в целом находятся в хорошем состоянии.

Для цитологических исследований использовались меристематические ткани кончиков корешков проросших семян или оснований молодой хвои. Исследования проводили на временных давленых препаратах по общепринятым методикам [Правдин и др., 1972; Муратова, 1995а] с модификациями применительно к объекту. Семена для кариологического анализа проращивали при температуре 24-26 °С.

Предварительная обработка кончиков корешков производилась 1 % водным раствором колхицина в течение 4-6 ч. В качестве фиксатора использовали уксуснокислый этанол (3 части 96 % этилового спирта и 1 часть ледяной уксусной кислоты). Для изучения митозов использовали пучки молодых хвоинок, которые освобождали от покровных чешуй и фиксировали. Материал окрашивали 1 % ацетогематоксилином (1 г гематоксилина на 100 мл 45 % уксусной кислоты). Перед окрашиванием проростки и пучки хвои протравливали 4 % железоаммонийными квасцами в течение 10-20 мин, затем помещали в ацетогематоксилин. Иногда для ускорения окрашивания материал помещали в термостат при температуре 50-60 °С или нагревали над пламенем спиртовки. Для анализа ядрышек материал окрашивали 50 % азотнокислым серебром при температуре 40-60 °С в течение 3-6 ч [Муратова, 1995б]. Для усиления контраста материал раздавливали в капле 2 % ацетокармина.

После окрашивания готовили препараты. Для этого проростки или хвоинки помещали на предметное стекло в каплю насыщенного раствора хлоралгидрата, отрезали кончики корешков размером 1.0-1.5 мм, где находятся ме-ристематические клетки; у хвоинок отрезали основания. Затем препарат накрывали покровным стеклом и раздавливали обратной стороной препаровальной иглы до равномерного распределения клеток. После этого спрессовывали покровное стекло с предметным плоским концом пинцета, одновременно удаляя излишек жидкости через фильтровальную бумагу. Временный препарат просматривался с помощью микроскопа МИБ-9 сразу после его приготовления. Для хранения препарата на более длительный срок края покровного стекла обводили клеем («БФ», «Уран»).

Для характеристики кариотипа изучали хромосомы на стадии метафазы митоза после обработки материала колхицином, частоту встречаемости и спектр патологий митоза определяли на стадиях метафазы и анателофазы митоза без обработки колхицином. Наилучшие метафазные пластинки с хорошим разбросом и окраской хромосом фотографировали в иммерсионной системе при большом увеличении (объектив х90) на пленку «Микрат». Отпечатки выполняли на нормальной черно-белой фотобумаге «Унибром 160». Морфометрический анализ хромосом проводили на фотографиях. Для характеристики кариотипа использовали следующие признаки: соматическое число

хромосом (2n); абсолютную длину хромосом (La, мкм); суммарную длину хромосом набора (XLa, мкм); относительную длину хромосом (Lr, % — отношение абсолютной длины хромосомы к суммарной длине набора); центромерный индекс (f, % — отношение абсолютной длины короткого плеча к длине всей хромосомы); локализацию вторичной перетяжки (sc, % — отношение расстояния от центромеры до перетяжки к длине плеча). Классификацию хромосом по центромерному индексу производили в соответствии с рекомендациями В. Г. Грифа и Н. Д. Агаповой [1986]. Идиограмма строилась по средним данным абсолютной длины и центромерного индекса с расположением хромосом в порядке уменьшения длины.

Используемые реактивы: колхицин (MERCK, Германия), гематоксилин (Hopkin & Williams LTD, Англия), азотнокислое серебро («Реахим», Россия), железоаммонийное серебро («Реахим», Россия), хлоралгидрат («Реахим», Россия).

Результаты и обсуждение

Во всех изученных образцах диплоидный набор лиственницы сибирской включал 24 хромосомы (2n = 24), что типично для данного вида [Simak, 1964; Круклис, 1974; Круклис, Милютин, 1977; Бударагин, 1980; Zhang et al., 1985; сводка: Муратова, Круклис, 1988; Муратова, 1991; Hizume et al., 1993; Се-дельникова, Пименов, 2005, 2007; Сизых и др., 2006]. Метафазная пластинка лиственницы сибирской представлена на рис. 1. Вид является диплоидом с основным числом хромосом х = 12.

Рис. 1. Метафазная пластинка лиственницы сибирской из г. Красноярска. 2п = 24.

Ацетогематоксилин. Об. 90х, ок. 10х

Наряду с клетками, имеющими стандартный набор хромосом, встречались единичные случаи удвоения числа хромосом (2п = 48). Наличие отдельных анеуплоидных, триплоидных и полиплоидных клеток (явление миксо-плоидии) при преобладающем числе 2п = 24 ранее отмечалось для лиственницы сибирской и другими авторами [Муратова, 1991; Седельникова, Пименов, 2005, 2007; Сизых и др., 2006]. Миксоплоидия неспециализированных тканей является важным фактором эволюции хромосом древесных растений [Буторина, 1989]. Часто она может наблюдаться при изменении и особенно резком ухудшении условий произрастания [Кунах, 1980]. Как правило, случаи миксоплоидии у лиственницы, как и у других хвойных, выявлены в популяциях, находящихся в стрессовых условиях обитания (граница ареала, заболо-

ченность почвы). В данном случае, возможно, она связана с повышенной антропогенной нагрузкой. У лиственницы сибирской описано два случая нахождения добавочных, или В-хромосом [Сизых и др., 2006; Седельникова, Пименов, 2007], но при данном исследовании они не наблюдались.

Для изучения морфометрических параметров хромосом использовались образцы из микрорайона «Зеленая роща» г. Красноярска. С этой целью были получены фотографии 24 метафазных пластинок, суммарная длина хромосом на которых варьируется от 188,4 до 301,6 мкм. Для создания более однородной выборки было выбрано 20 метафазных пластинок с общей длиной набора в интервале спирализации от 190,0 до 255,0 мкм (рис. 2). Группы хромосом были выделены на основе анализа поликариограммы. У лиственницы сибирской в изучаемом районе было выделено три группы хромосом (рис. 3).

Первую группу составляют метацентрические хромосомы 1-У! пары, характеризуемые следующими параметрами: Ц3 = 11.1 ± 0.08 мкм, Ц = 5.0 ± 0.03 %, Iе = 46.8 ± 0.13 %. Вторую группу образуют хромосомы субметацентрического типа (V!!!-X!! пары); они имеют следующие параметры: Ц3 = 7.2 ± 0.06 мкм, Ц = 3.2 ± 0.02 %, !с=32.0 ± 0.21 %. Отдельно выделяется V!! пара интерцентрических хромосом, занимающая промежуточное положение по длине между двумя группами: Ц3 = 8.3 ± 0.14 мкм, Ц = 3.7 ± 0.04 %, Iе = 27.1 ± 0.32 %. Морфометрические параметры хромосом лиственницы сибирской из микрорайона «Зеленая роща» г. Красноярска представлены в табл. Средняя суммарная длина диплоидного набора хромосом составляет 222,5 ± 3,83 мкм.

О

ГО

Ц

С

X

_0

го

-&

го

о

ц

о

Общая длина диплоидного набора (ЭЬа), мкм

Рис. 2. Вариация степени спирализации хромосом у лиственницы сибирской.

Штриховой линией ограничен интервал пластинок, отобранных для поликариограммы

Такие же группы хромосом были выделены в кариотипе лиственницы сибирской из Хакасии и Томской обл. [Седельникова, Пименов, 2005; Сизых и др., 2006]. При изучении лиственницы сибирской из Восточного Казахстана В. А. Бу-дарагин [1980] различал шесть пар гомологов и две гомеоморфные группы. Другие авторы идентифицировали у этого вида две группы хромосом — шесть пар более длинных метацентриков и шесть пар коротких субметацентриков [Круклис, Милютин, 1977; Муратова, 1991].

с;

д

к

го

с;

<и

о

о

О 18 22 26 30 34 38 42

Центромерный индекс (Ic), %

46 50

Рис. 3. Поликариограмма лиственницы сибирской: I-VI, VII, VIII-XII — номера хромосом

Морфометрическая характеристика хромосом лиственницы сибирской

Номера хромосом Абсолютная длина (La), мкм Относительная длина (Lr), % Центромерный индекс (Iе), % Локализация вторичной перетяжки (sc), %

X ± Sx с, % X ± Sx с, % X ± Sx с, % X ± Sx с, %

I 11.1 ± 0.08 0.78 5.0 ± 0.03 9.5 46.8 ± 0.13 4.6 34.1 ± 1.93 17.94

II 11.1 ± 0.08 0.78 5.0 ± 0.03 9.5 46.8 ± 0.13 4.6 55.6 ± 0.85 7.46

III 11.1 ± 0.08 0.78 5.0 ± 0.03 9.5 46.8 ± 0.13 4.6

IV-V 11.1 ± 0.08 0.78 5.0 ± 0.03 9.5 46.8 ± 0.13 4.6 65.0 ± 0.69 7.54

VI 11.1 ± 0.08 0.78 5.0 ± 0.03 9.5 46.8 ± 0.13 4.6

VII 8.3 ± 0.14 10.8 3.7 ± 0.04 7.7 27.1 ± 0.32 7.6

VIII 7.2 ± 0.06 11.6 3.2 ± 0.02 9.3 32.0 ± 0.21 9,2

IX 7.2 ± 0.06 11.6 3.2 ± 0.02 9.3 32.0 ± 0.21 9,2 54.7±1.43 7.41

X-XI 7.2 ± 0.06 11.6 3.2 ± 0.02 9.3 32.0 ± 0.21 9,2

XII 7.2 ± 0.06 11.6 3.2 ± 0.02 9.3 32.0 ± 0.21 9,2 69.1 ±1.40 8.59

Основные различия в кариотипах лиственниц, как и других хвойных, заключаются в числе и локализации вторичных перетяжек — неокрашенных районов хромосом, которые получили это название в отличие от центромеры (первичной перетяжки). Район вторичной перетяжки является очень важным в функциональном отношении локусом хромосом. Экспериментально методами флуоресцентной гибридизации установлено, что у хвойных в этих локусах расположены гены 18S и 25-26S рибосомной РНК и формирования рибосом [Brown et al., 1993; Brown, Carlson, 1997].

У лиственницы сибирской в микрорайоне «Зеленая роща» постоянные вторичные перетяжки отмечены у 6 пар хромосом. В группе метацентриков вторичная перетяжка имеется в проксимальной зоне самой длинной хромосомы набора (I пара). В этой же группе хромосом вторичная перетяжка отмечена в медиальной зоне II пары хромосом. Кроме того, вторичные перетяжки есть у двух пар метацентрических хромосом (IV и V) с одинаковой локализацией в дистальном положении. В группе субметацентрических хромосом имеются вторичные перетяжки на длинных плечах в медиальной зоне IX пары

и в дистальной зоне XII пары. Кроме этих перетяжек, встречающихся с высокой частотой, есть непостоянные, эпизодически встречающиеся, иногда по две на одном плече, или перетяжки на разных плечах. На рис. 4 представлена идиограмма, построенная по абсолютной длине хромосом; морфометрические параметры хромосом даны в табл.

I II III ІУ-У VI VII VIII IX X XI XII

Рис. 4. Идиограмма лиственницы сибирской из г. Красноярска

Морфологически активность генов рРНК проявляется в образовании ядрышек в телофазе митоза. По результатам более ранних исследований [Муратова, 1991] в интерфазных ядрах I. вЬюса установлено в среднем 2,3-2,7 ядрышка, а их максимальное количество — 4. В последних работах по лиственнице сибирской отмечается наличие 5-8 ядрышек в интерфазных ядрах [Седельникова, Пименов, 2005; Сизых и др., 2006]. Настоящее исследование показало, что в интерфазных ядрах имеется от 1 до 7 ядрышек (среднее — 2,4 ± 0,04); по-видимому, это связано с изучением данного вида в стрессовых условиях произрастания (рис. 5, 6).

Рис. 5. Разное число ядрышек в интерфазных ядрах лиственницы сибирской

о

2

ф

го

т

ф

15

со

го

н

о

I—

о

го

т

Рис. 6. Частота встречаемости ядрышек в интерфазных ядрах лиственницы сибирской в районе КРАЗа (г. Красноярск)

Рис. 7. Остаточное ядрышко (показано стрелкой) в метафазе лиственницы сибирской в районе КРАЗа (г. Красноярск)

При проведении кариологических исследований лиственницы сибирской в районе влияния КРАЗа (микрорайон «Зеленая роща») была отмечена фрагментация хромосом, а также остаточное ядрышко в метафазе митоза (рис. 7). Остаточные ядрышки образуются в результате ослабления конденсации хроматина на разных стадиях митоза и пуфинга рибосомных генов, что приводит к синтезу белков, обеспечивающих существование клетки в стрессовых условиях. Такой тип нарушения клеточного метаболизма у древесных растений в работах исследователей из г. Воронежа [Буторина и др., 2002; Ар-

тюхов и др., 2004; Вострикова, Буторина, 2006]. Остаточные ядрышки недавно были обнаружены у лиственницы сибирской, произрастающей в зоне влияния аэрозольных эмиссий металлургических предприятий окр. г. Норильска [Седельникова, Пименов, 2007].

При изучении характера прохождения митоза и степени его сбалансированности в районе влияния Горно-химического комбината в клетках меристемы хвои лиственницы сибирской установлено, что в большинстве случаев деление клеток проходит нормально с правильным расхождением хромосом к полюсам. Тем не менее на стадии метафазы единичные нарушения наблюдались в 55,1 % исследованных меристем из загрязненного района и в 37,9 % меристем из контрольного участка. Основным типом аномалий являлся выброс отдельных хромосом или их групп за пределы метафазной пластинки. Средняя частота встречаемости аномалий на стадии метафазы в загрязненном районе составила 2,1 ± 0,64 %, контрольном — 0,53 ± 0,27 %.

На стадии анателофазы нарушения отмечены в 65,5 и 23,2 % исследованных меристем соответственно. Наблюдались следующие аномалии: забегание и выброс хромосом, одиночные мосты и трехполюсный митоз. Средняя частота встречаемости аномалий на стадии анателофазы: 3,02 ± 1,05 и 1,5 ± 0,45 соответственно. Таким образом, в результате исследований было установлено некоторое повышение частоты встречаемости патологических митозов у лиственницы сибирской в зоне влияния Горно-химического комбината. Примеры нарушений митоза приведены на рис. 8.

Рис. 8. Нарушения митоза у лиственницы сибирской в зоне антропогенного влияния: а, б — выбросы за пределы метафазной пластинки; в — мосты и отставание; г — мосты

Антропогенное загрязнение окружающей среды может привести к нарушению нормального хода митоза и мейоза, хромосомным мутациям, изменениям кариотипа, ядрышковых характеристик, появлению микроядер и др. Результаты кариологического анализа и изучения патологий митоза показали, что в целом лиственница сибирская довольно устойчива к антропогенным нагрузкам и может быть с успехом использована в озеленении городов. Это согласуется с результатами изучения жизненного состояния лиственничных насаждений в озеленительных посадках г. Красноярска и состояния вегетативных и генеративных органов лиственницы сибирской [Романова, 2005].

ЛИТЕРАТУРА

Артюхов В. Г., Калаев В. Н., Сенькевич Е. В. и др. Цитогенетические показатели семенного потомства лиственных древесных растений в 1-километровой зоне Нововоронежской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. Т. 44, № 4. С. 445457.

Бобров Е. Г. Лесообразующие хвойные СССР. Л.: Наука, 1978. 188 с.

Болсуновский А. Я., Атурова В. П., Бургер М. и др. Радиоактивное загрязнение территории населенных пунктов Красноярского края в регионе размещения Горно-химического комбината // Радиохимия. 1999. Т. 41, Вып. 6. С. 563-568.

Бударагин В. А. Кариотипы основных хвойных видов Казахстана // Тр. КазНИИЛХ. Алма-Ата: Кайнар, 1980. Т. 2: Защитное лесоразведение и вопросы селекции в Северном Казахстане. С. 116-122.

Буторина А. К. Факторы эволюции кариотипов древесных // Успехи соврем. биологии. 1989. Т. 108, вып. 3 (6). С. 342-357.

Буторина А. К., Калаев В. Н., Карпова С. С. Особенности протекания митоза и ядрышковые характеристики семенного потомства березы повислой в условиях антропогенного загрязнения // Цитология. 2002. Т. 44, № 4. С. 392-399.

Вострикова Т. В., Буторина А. К. Цитогенетические реакции березы повислой на действие стрессовых факторов // Изв. рАн. Сер. биол. 2006. № 2. С. 232-238.

Гриф В. Г., Агапова Н. Д. К методике описания кариотипов растений // Ботан. жур-н. 1986. Т. 71, № 4. С. 550-553.

Круклис М. В. Кариологические особенности лиственницы Чекановского (I.апх сгекапом/эки Э2.) // Изменчивость древесных растений Сибири. Красноярск, 1974. С. 11-19.

Круклис М. В., Милютин Л. И. Лиственница Чекановского. М.: Наука, 1977. 211 с.

Кунах В. А. Геномная изменчивость соматических клеток растений и факторы, регулирующие этот процесс // Цитология и генетика. 1980. Т. 14, № 1. С. 73-81.

Муратова Е. Н. Кариологическое исследование 1апх э/Ыпса (Р1пасеае) в различных частях ареала // Ботан. журн. 1991. Т. 76, № 11. С. 1586-1595.

Муратова Е. Н. Кариосистематика семейства Ртасеае ЫпсН. Сибири и Дальнего Востока: Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Новосибирск, 1995а. 32 с.

Муратова Е. Н. Методики окрашивания ядрышек для кариологического анализа хвойных // Ботан. журн. 1995б. Т. 80, № 2. С. 82-86.

Муратова Е. Н., Круклис М. В. Хромосомные числа голосеменных растений. Новосибирск: Наука, 1988. 117 с.

Правдин Л. Ф., Бударагин В. А., Круклис М. В., Шершукова О. П. Методика кариологического изучения хвойных пород // Лесоведение. 1972. № 2. С. 67-75.

Романова Л. И. Структурно-функциональные особенности лиственницы сибирской в зеленых насаждения г. Красноярска и его окрестностей: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. Красноярск, 2005. 24 с.

Седельникова Т. С., Пименов А. В. Кариологическое изучение болотной и суходольной популяций 1апх э/Ыпса (Р1пасеае) из Западной Сибири // Ботан. журн. 2005. Т. 90, № 4. С. 582-593.

Седельникова Т. С., Пименов А. В. Хромосомные мутации у лиственницы сибирской (I.апх э/Ыпса 1_еСеЬ.) на Таймыре // Изв. РАН. Сер. биол. 2007. № 2. С. 244-247.

Сизых О. А, Квитко О. В., Муратова Е. Н., Тихонова И. В. Формовое разнообразие и кариологические особенности лиственницы сибирской (Larix sibirica Ledeb.) юга Сибири // Хвойные бореальной зоны. 2006. Т. 23, № 2. С. 202-210.

Brown G. R., Amarasinghe V., Kiss G., Carlson J. B. Preliminary karyotype and chromosomal localization of ribosomal DNA sites in White spruce using fluorescence in situ hybridization // Genome. 1993. Vol. 36, N 2. P. 261-267.

Brown G. R., Carlson J. E. Molecular cytogenetics of the genes encoding 18s-5.8-26s rDNA and 5s rRNA in two species of spruce (Picea) // Theoretical and Applied Genetics. 1997. Vol. 95. N 1-2. P. 1-9.

Hizume M., Tominaga K., Kondo K., Gu Z., Yue Z. Fluorescent chromosome banding in six taxa of Eurasian Larix, Pinaceae // Kromosomo. 1993. II. N. 69. P. 2342-2354.

Simak M. Karyotype analysis of Siberian larch (Larix sibirica Ldb. and Larix sukaczewii Dyl.) // Studia Forestalia Suesica. 1964. N 17. 15 p.

Zhang X. F., Zhuo L. N., Li M. X. A study of karyotypes of 5 species in Larix // Heredi-tas. 1985. Vol. 5, N 3. P. 9-11.

Институт леса им. В. Н. Сукачева СО РАН,

г. Красноярск

ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Ye. N. Muratova, T. V. Karpyuk, O. S. Vladimirova, O. A. Sizykh, O. V. Kvitko

A CYTOLOGICAL STUDY OF SIBERIAN LARCH IN ANTHROPOGENICALLY DISTURBED AREAS OF THE CITY OF KRASNOYARSK AND ITS VICINITY

The article presents data on a cytological study of Siberian larch in anthropogenically disturbed areas of the City of Krasnoyarsk and its vicinity. Subject to identification being a number of cytological disorders, though found that on the whole Siberian larch remains quite resistant to anthropogenic loads and could be successfully used in urban landscaping.

Siberian larch, karyotype, mitosis, chromosomes, karyograms, anthropogenic factor, atmosphere pollution, radiation contamination, urban plantations, Middle Siberia.