CC BY
30
определяет степень выраженности клинической картины.
Диагностический алгоритм при аллергической энтеропатии с выраженным гепатопривным синдромом у собак должен осуществляться с учётом корреляции морфофункциональных нарушений гастроинтестинальной и иммунной систем и степенью расстройств редокс-гомеостаза, опираясь на результаты биохимических исследований крови, данные иммунологического и ну-тритивного статусов. Именно такая сочетанность диагностических критериев позволяет получить более целостное представление не только о характере поражения органов-мишеней и систем, но и о степени метаболических расстройств, а также прогнозировать динамику развития заболевания и контролировать эффективность фармакокоррекции.
Литература
1. Байматов В.Н. Морфофункциональная диагностика заболеваний печени у животных // Современные вопросы ветеринарной медицины и биологии. 2000. С. 23 - 25.
2. Причины возникновения пищевой аллергии и пути её снижения / Т.Н. Головач, А.А. Иванов, Н.Н. Яцков [и др.] // Педиатрия. № 2. 2010. С. 132 - 137.
3. Кувшинников Д.А. Диагностика и терапия аллергических энтеропатий у собак: автореф. дис. ... канд. ветеринар. наук. Персиановский, 2009. 16 с.
4. Митрофанова Е.В. Основные причины возникновения пищевых аллергий домашних животных в условиях урбанизированных территорий // Евразийский союз учёных. 2016. № 5 - 4 (26). С. 99 - 100.
5. Пампура А.Н., Хавкин А.И. Классификация и клинические проявления пищевой аллергии // Русский медицинский журнал. 2003. Т.11. № 20. 56 с.
6. Ушакова Т.М., Дерезина Т.Н. Алгоритм комплексной фармакокоррекции расстройств редокс-гомеостаза на фоне коморбидного состояния при бабезиозе и дирофиляриозе у собак // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 3 (89). С. 220 - 226.
7. Ушакова Т.М. Корреляция редокс-гомеостаза и морфофункциональных расстройств гепаторенальной и кардиопульмональной систем при микстинвазии ба-без-диозирофиляриоз у собак // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 3 (89). С. 227 - 232.
8. Василевская С.А., Мараховский Ю.Х., Калачик
B.П. Мальнутриция: верификация, антропометрические и лабораторные характеристики // Проблемы здоровья и экологии. 2009. № 2 (20). С. 66 -74.
9. Александрович Ю.С. Александрович И.В., Пше-ниснов К.В. Скрининговые методы оценки нутритивного риска у госпитализированных детей // Вестник интенсивной терапии. 2015. № 3. С. 25 - 30.
10. Ушакова Т.М., Дерезина Т.Н. Корреляция маль-нутриции и гепатопривного синдрома при аллергической энтеропатии у собак // Ивестия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 3 (83).
C. 236 - 240.
Татьяна Михайловна Ушакова, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет». Россия, 346493, Ростовская область, Октябрьский р-н, пос. Персиановский, ул. Кривошлыкова, 24, tanja_0802@mail.ru
Tatiana M. Ushakova, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Don State Agrarian University. 24,
Krivoshlykova St., Persianovsky, Oktyabrsky District, Rostov Region, 346493, Russia, tanja_0802@mail.ru
-♦-
Научная статья
УДК 619:616.5-006:611.018
doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-246-251
Цитологическая и гистологическая диагностика плоскоклеточной карциномы кожи у кота
Виктор Валентинович Гречко, Дмитрий Константинович Овчинников
Омский государственный аграрный университет
Аннотация. В статье описан случай комплексного морфологического исследования (цитологическое и гистологическое) для дифференцировки и постановки диагноза, лечения плоскоклеточной карциномы у пациента. Материалом цитологического исследования послужил тонкоигольный аспирационный материал, полученный из новообразования ушной раковины домашнего кота и сама ушная раковина, где были выявлены анизоцитоз, анизокариоз, различное ядерно-цитоплазматическое соотношение, ядерный молдинг. По результатам гистологического исследования дерма над ушным хрящом инфильтрирована клетками воспаления, ушной хрящ не изменился. Данная морфологическая структура характерна для плоскоклеточной карциномы кожи. Методом лечения выбрано широкое хирургическое иссечение, позволяющее продлить и обеспечить качество жизни пациента.
Ключевые слова: цитология, гистология, диагностика, хирургия, плоскоклеточная карцинома.
Для цитирования: Гречко В.В., Овчинников Д.К. Цитологическая и гистологическая диагностика плоскоклеточной карциномы кожи у кота // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 6 (92). С. 246 - 251. doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-246-251.
Original article
Cytological and histological diagnosis of squamous cell carcinoma of the skin in a cat
Viktor V. Grechko, Dmitry K. Ovchinnikov
Omsk State Agrarian University
Abstract. The article describes a case of a complex morphological study (cytological and histological) for the differentiation and diagnosis, treatment of squamous cell carcinoma in a patient. The material of the cytological study was a fine-needle aspiration material obtained from a neoplasm of the auricle of a domestic cat and the auricle itself, where anisocytosis, anisocariosis, a different nuclear-cytoplasmic ratio, and nuclear molding were detected. According to the results of histological examination, the dermis above the ear cartilage is infiltrated by inflammatory cells, the ear cartilage is unchanged. This morphological structure is characteristic of squamous cell carcinoma of the skin. The method of treatment is a wide surgical excision, which allows to prolong and ensure the quality of life of the patient.
Keywords: cytology, histology, diagnostics, surgery, squamous cell carcinoma.
For citation: Grechko V.V., Ovchinnikov D.K. Cytological and histological diagnosis of squamous cell carcinoma of the skin in a cat. Izvestia Orenburg State Agrarian University. 2021; 92(6): 246 -251. (In Russ.). doi: 10.37670/2073-0853-2021 -92-6-246-251.
Опухоль (неоплазма, новообразование) - это группа размножающихся клеток, вышедших из-под контроля нормальных гомеостатических механизмов [1 - 4].
Цитологическое исследование - это морфологический метод анализа клеточного состава патологических процессов (опухолевых и неопухолевых), при котором объектом исследования служат отдельные клетки и их комплексы, без учёта архитектоники ткани, из которой они были получены [5, 6]. В последнее время метод активно используют в клинической ветеринарной онкологии. Целями его являются: диагностика патологических процессов при первичном поступлении животного (это позволяет быстро поставить морфологический диагноз перед назначением терапии), срочная интраоперационная диагностика; оценка динамики онкологических процессов и выявление рецидивов. Активно цитологический анализ используют не только в ветеринарной онкологии, но и, например, в ветеринарной репродуктологии - для определения овариального цикла у собак [7, 8].
Цитологическое исследование также имеет преимущество перед гистологическим исследованием при оценке процессов в случае инфицирования бактериальными и микотическими агентами, а также при оценке костного мозга и диагностике лимфом у собак, поскольку позволяет более детально рассмотреть отдельные структуры клеток, что в последнем случае делает его лидирующим методом диагностики заболевания среди специалистов-онкологов [9 - 11].
Роль морфологических исследований в диагностике опухолей неуклонно растёт в связи с расширением круга хирургических вмешательств и усовершенствованием методов биопсий. Только детальная морфологическая характеристика новообразования может дать возможность более обоснованно выбрать метод лечения (хирургическое, лучевое, химиотерапевтическое и их
комбинации), поскольку опухоли различного строения, происхождения и степени атипии клеток по-разному реагируют на терапевтическое воздействие. Таким образом, полноценный онкологический диагноз всегда является морфологическим с детальной характеристикой структуры опухоли [12 - 14].
Плоскоклеточный рак - злокачественная опухоль, развивающаяся из клеток плоского эпителия. Имеет три степени дифференцировки: низкую - без признаков ороговения, умеренную и высокую - с признаками ороговения. Макроскопически представляет собой солитарный узел или язву с приподнятыми кратерообразными краями. Имеет широкое основание, плотную консистенцию, малоподвижен.
Микроскопически опухоль состоит из комплексов и пластов атипичных клеток плоского эпителия с инвазией в глубокие слои дермы, а часто и подлежащие ткани.
Степень клеточной атипии может быть различной и характеризуется изменениями размеров и формы клеток, их ядер, наличием патологических митозов и изменением ядерно-цитоплазматического соотношения. При высо-кодифференцированных формах выявляются признаки избыточной кератинизации, что сопровождается появлением так называемых жемчужин - очагов гиперкератоза округлой формы. При низкодифференцированной форме границы клеток определяются с трудом, признаков кера-тинизации нет. В ткани опухоли могут выявляться очаги некроза, всегда выражены признаки вторичного воспаления, носящего диффузный характер [15 - 19].
Материал и методы. Материалом цитологического исследования послужил тонкоигольный аспирационный материал, полученный из новообразования ушной раковины домашнего кота 7 лет по кличке Кефир (рис. 1.) Для гистологического исследования послужил тот же патологический
материал, полученный после проведённого хирургического лечения.
При проведении тонкоигольной аспирацион-ной биопсии (ТИАБ) опухоль фиксируют пальцами левой руки, правой рукой перпендикулярно к коже вводят стерильную иглу с подсоединённым шприцем, поршень которого должен быть опущен. Локализацию иглы в патологическом очаге контролируют левой рукой (проверить правильность положения иглы можно, слегка перемещая патологический очаг; игла должна при этом двигаться вместе с очагом). Убедившись, что игла находится в патологическом очаге, совершают два-три насасывательных движения, усилием большого и указательного пальцев правой руки поднимая поршень, создавая отрицательное давление, при котором клетки из ткани будут устремляться в иглу. После каждого подъёма поршня шприц снимают с иглы, выдувая воздух. Каждый раз подсоединяют к игле шприц с опущенным поршнем. После появления крови в игле пункцию прекращают. В ином случае дальнейшая аспирация приведёт к ещё большей контаминации препарата кровью из повреждённых в ходе процедуры сосудов. Иглу вынимают из очага, при этом поршень шприца должен быть опущен. Место пункции обрабатывают салфеткой, смоченной спиртом; при наличии кровотечения салфетку прижимают к месту пункции и оставляют на несколько минут. Затем шприц наполняют 3 мл воздуха, снова прикрепляют к игле и выдавливают аспириро-
1
Рис. 1 - Кот Кефир, 7 лет:
1 - новообразование ушной раковины; воспалённый участок покрыт коркой; отмечается кровотечение при любом механическом воздействии
ванное содержимое на предметное стекло. После этого фиксация производилась с использованием раствора Май - Грюнвальда по общепринятой методике, окраска мазков проводилась Азур-Эозином по Романовскому, экспозиция 25 мин. Цитологические препараты изучали с помощью светового биологического микроскопа Альтами БНО 1Т [1].
Результаты исследования. При проведении общего осмотра образования выявлено: на ушной раковине локализуется образование, имеющее длину 26 мм, ширину - 14 мм и толщину - 6 мм. Образование неподвижное, болезненное, при любом механическом воздействии кровоточит, снаружи почти по всей поверхности покрыто коркой, имеет тенденцию к росту. Лечение в сторонней клинике - без результатов.
Рекомендованные обследования: цитологическое исследование (ТИАБ), гистологическое исследование, а также общие методы исследования состояния животного (биохимический анализ крови, общий анализ крови, ультрасонография брюшной полости).
По УЗИ изменений не выявлено, результаты общего и биохимического исследования - также без особенностей (табл. 1 и 2).
1. Биохимический анализ крови пациента
Показатель Референтные Результат
значения исследования
АЛТ, мкмоль/л 6 - 76 39
АСТ, мкмоль/л 10 -48 20
Щелочная фосфотаза 81 - 85 173
Глюказа 3,4 - 6,1 5,8
Общий билирубин 5,0 - 21,0 7,1
Общий белок 50,0 - 85,0 58,1
Альбумин 22,0 - 39,0 29,9
Мочевина 2,1- 12,2 9,7
Креатинин 40,0 - 140,0 112,5
Кальций 2,00 - 3,30 2,67
Фосфор 1,10 - 3,00 1,4
2. Клинический анализ крови пациента
Вид Референтные Результат
исследования значения исследования
RBC, x1012/L 5,5 - 8,5 7,92
HGB, g/L 110 - 190 185
HCT, % 39,0 - 56,0 49,4
MCV, FL 62,0 - 72,0 65,5
MCH, pg 20,0 -25,0 22,5
PLT, xl03/uL 117 - 460 391
WBC, x109/L 6,0 - 17,0 12,2
Lymph, x109/L 0,8 - 5,1 4,0
Mon, x109/L 0,0 - 1,8 1,3
Gran, x109/L 4,0 - 12,6 6,6
Lymph, % 12,0 - 30,0 15,3
Mon, % 2,0 - 9,0 6,7
Gran, % 60,0 - 83,0 78,9
По результатам полученного при анализе цитологического материала отмечали следующее: препарат низкого и умеренного цитоза; клетки располагаются как в группах, так и поодиночке, имеют различное ядерно-цитоплазмотическое соотношение (от высокого до низкого). Ядра клеток округлые, с выраженным ядерным молдингом, плотные, яркоокрашенные, как правило, имеют по одному ядрышку; цитоплазма скудная и в большинстве случаев вакуолизирована. Встречаются голоядерные клетки с единичными ядрышками. Клетки, имеющие мелкие ядра, расположенные эксцентрично, содержат большое количество тёмной цитоплазмы. Выражена контаминация эритроцитами и клетками воспаления, в том числе макрофагами (рис. 2 - 4).
Рис. 2 - ТИАБ новообразования ушной раковины у кота; окраска Азур-Эозином по Романовскому, ок. 10, об. 100:
1 - эритроцит, 2 - дегенеративный нейтрофил, 3 - остатки ядерного хроматина нейтрофильных лейкоцитов, 4 - одноядерная клетка с ядрышком, 5 - вакуолизация цитоплазмы
Рис. 3 - ТИАБ новообразования ушной раковины у кота; окраска Азур-Эозином по Романовскому, ок. 10, об. 100:
1 - анизокариоз, 2 - безъядерные клетки
Рис. 4 - ТИАБ новообразования ушной раковины у кота; окраска Азур-Эозином по Романовскому, ок. 10, об. 100:
1 - эритроцит, 2 - дегенеративный нейтрофил, 3 - выраженная вакуолизация цитоплазмы, 4 -голоядерные клетки, 5 - безъядерные клетки
Критериями злокачественности являются: анизоцитоз, анизокариоз, различное ядерно-цитоплазматическое соотношение, ядерный молдинг.
Данная морфологическая структура может быть характерна для плоскоклеточной карциномы.
Хозяин проинформирован, что результат цитологического диагноза не является окончательным, и получил рекомендации для дальнейшего исследования: контроль Х-ray, иммуноцитохимия, иммуногистохимия, CELL-BLOCK, гистологическое исследование. Даны общие комментарии по цитологическому заключению: плоскоклеточная карцинома местно инвазивна, склонна к изъязвлению, встречается, как правило, у кошек старше 10 лет, метастазирует лимфогенным путём, чаще в регионарные лимфатические узлы. Чаще поражает кончики ушей, когтевое ложе; такое расположение у пациента характерно для данной опухоли.
Методом лечения является широкое хирургическое иссечение. Прогнозы при широкой хирургии довольно неплохие, медиана выживаемости от 400 дней.
Проведено широкое хирургическое иссечение опухоли с краем резекции 1 см от новообразования (рис. 5).
Были выявлены следующие результаты гистологического исследования: дерма над ушным хрящом инфильтрированна клетками воспаления, ушной хрящ без изменений; микроскопически опухоль состоит из комплексов и пластов атипичных клеток плоского эпителия с инвазией в глубокие слои дермы, а часто и подлежащие ткани.
Тяжи многослойного плоского эпителия проникают глубоко в дерму в виде широких полос различной формы (с признаками тканевой ати-
Рис. 6 - Гистологический препарат операционного материала, новообразования ушной раковины; окраска Гематоксилин - Эозином по Романовскому, ок. 10, об. 10: 1 - дерма инфильтрированная клетками воспаления; 2 - многослойный плоский эпителий; 3 - «раковые жемчужины» -клетки с признаками ороговевания; 4 -ушной хрящ
них. Также отмечаются участки в окружении плоского эпителия, в котором только начинаются процессы ороговевания (рис. 7). Данное строение с формированием «раковых жемчужин», характерно для высокодифференцированного плоскоклеточного рака.
Рис. 5 - Кот Кефир, 7 лет; внешний вид после проведённого хирургического лечения
пии). Опухолевые клетки и их ядра полиморфны, обнаруживаются фигуры многочисленных митозов, ядра гипохромные. Формирование «раковых жемчужин», когда клетки опухоли формируют комплексы, в центре которых клетки более зрелые, с признаками ороговения (рис. 6). «Жемчужины» имеют как округлую и овальную форму, так и отмечаются в виде крупных бесформенных масс, внутри которых также образуются комплексы «раковых жемчужин» круглой формы, как в окружении эпителиальных клеток с различными признаками атипии, так и без
Рис. 7 - Гистологический препарат операционного материала, новообразования ушной раковины, окраска Гематоксилин - Эозином по Романовскому, ок. 10, об. 40: 1 - бесформенное расположение ороговевшей ткани; 2 - сформированные «раковые жемчужины» в окружении многослойного эпителия; 3 - многослойный плоский эпителий; 4 - «раковые жемчужины», окружённые ороговевшей тканью; 5 -формирующаяся, в стадии ороговевания «раковая жемчужина»
Вывод. Комплекс морфологических методов исследования (ТИАБ и гистология) в сочетании с физикальным осмотром - единственный метод постановки окончательного диагноза неопластического процесса. Цитология в данном клиническом случае являлась достаточно точной для диагностики и лечения плоскоклеточной карциномы у пациента. Но она не позволяла определить степень дифференцировки опухолевого процесса для прогнозирования продолжительности жизни и вероятности рецидива. Но в целом цитологический метод исследования позволяет дифференцировать доброкачественные (включая воспалительные) и злокачественные процессы, а в достаточно большом ряде случаев даёт возможность поставить точный морфологический диагноз. Накопленный к данному моменту опыт цитологического анализа различных образований и процессов в ветеринарной онкологии расширил возможности метода и позволяет отнести его к самостоятельному методу морфологической диагностики патологических процессов у мелких домашних животных.
Литература
1. Гречко В.В., Бодрова Л.Ф., Овчинников Д.К. Клинический случай множественной злокачественной масто-цитомы у кота (плеоморфный низкодифференцированный вариант) // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 1 (81). С. 144 - 150.
2. Патогистологическая диагностика тубулярно-солидной карциномы молочной железы у кошки / М.А. Богданова, С.Н. Хохлова, И.И. Богданов [и др.] // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 6 (86). С. 219 - 224.
3. Шульга Е.С. Внутриглазная лимфома и её проявления у мелких домашних животных // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2019. № 1 (75). С. 131 - 132.
4. Патогистологическая диагностика лейомиосарко-мы мошонки у кобеля / М.А. Богданова, С.Н. Хохлова, И.И. Богданов [и др.] // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2019. № 6(80). С. 216 - 219.
5. Морозова В.Т., Луговская С.А. Лимфатические узлы. Цитологическая диагностика. М., 2008. 70 с.
6. Нейштадт Э.Л., Маркочев А.Б. Опухоли и опухо-леподобные заболевания костей. М., 2007. 344 с.
7. Ghisleni G., Roccabianca P., Ceruti R., et al. Correlation between fine-needle aspirationcytology and histopathol-ogy in theevaluation of cutaneous and subcutaneous masses from dogs and cats // Vet. Clin.Pathol. 2006; 35(1): 24 - 30.
8. MacNeill A.L. Cytology of canine and feline cutaneous and subcutaneous lesions and lymph nodes // Top Companion Anim. Med. 2011; 26(2): 62 - 76.
9. Олисова О.Ю., Потекаев Н.С. Псевдолимфомы кожи. М., 2013. 116 с.
10. Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по им-муногистохимической диагностике опухолей человека. М., 2000. 456 с.
11. Dempsey S.M., Ewing P. J. A review of the pathophysiology, classification, and analysis of canine and feline cavitary effusions // J. Am. Anim. Hosp. Assoc. 2011; 47(1): 1 - 11.
12. Краевский Н.А., Смольянинникова А.В., Сарки-сова Д.С. Патологоанатомическая диагностика опухолей человека. М., 1993. 560 с.
13. Мяделец О.Д., Адаскевич В.П. Морфофункцио-нальная дерматология. М., 2006. 752 с.
14. Клинико-морфологическая диагностика и принципы лечения кожных болезней // М.А. Пальцев, Н.Н. Потекаев, И.А. Казанцева [и др.]. М., 2010. 512 с.
15. Родионов А.Н., Барбинов В.В., Казаков Д.В. Гистологическая диагностика лимфом кожи // Журнал дерматовенерологии и косметологи. 1997. № 1. С. 12 - 24.
16. Цветкова Г.М., Мордовцева В.В., Вавилов А.М. Патоморфология болезней кожи. М., 2003. 496 с.
17. Hirschberger J., DeNicola D.B., Hermanns W. et al. Sensitivity and specificityof cytologic evaluation in the diagnosisof neoplasia in body fluids from dogs and cats // Vet. Clin.Pathol. 1999; 28(4): 142 - 146.
18. Raskin R.E. Skin and Subcutaneous Tissues. In:Raskin R.E., Meyer D.J. Canine and Feline Cytology. A color atlas and interpretationguide. 3 ed. Elsevier, 2016.
19. Кудряшов А.А., Балабанова В.И. Патологоана-томическая диагностика болезней собак и кошек. М., 2011. 188 с.
Виктор Валентинович Гречко, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 644007, г. Омск, ул. Институтская площадь, 1, vg_1988@mail.ru
Дмитрий Константинович Овчинников, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 644007, г. Омск, ул. Институтская площадь, 1, biolog-ivm@mail.ru
Viktor V. Grechko, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Institutskaya square, Omsk, 644007, Russia, vg_1988@mail.ru
Dmitry K. Ovchinnikov, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Institutskaya square, Omsk, 644007, Russia, biolog-ivm@mail.ru
-Ф-
Научная статья
УДК:619:615.371:616-084:616.981.42:636.22/.28 doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-251-255
Испытание гидроксиапатита в качестве адъюванта на лабораторных животных
Степан Юрьевич Веселовский
Саратовский государственный аграрный университет
Аннотация. В настоящее время применение инактивированных вакцин не обеспечивает достаточно продолжительного гуморального иммунного ответа, что связано с целым рядом различных факторов. С целью продления иммуногенности вакцин на организм животных рекомендуется применять различные адъюванты. В результате исследования установлено, что применение сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза с 2%-ным раствором гидроксиапатита кальция у лабораторных крыс не вызывает болевого синдрома, не оказывает токсического влияния, хорошо рассасывается и эффективно используется при подкожном депонировании. Применение сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза животных с 15%о-ным раствором гидроксиапатита кальция внутримышечно вызывает неадекватное поведение животных, интоксикацию, наблюдаются дистрофические изменения в области инокуляции препарата.
