CC BY
55
Оriginal article
0 КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 614.72:612.6.05.014.2-053.2
Сычева Л.П.1, Бударина О.В.1, Сабирова З.Ф.1, АхальцеваЛ.В.1, Росоловский А.П.2
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ СТАТУС ДЕТЕЙ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРНОГО ВОЗДУХА ВЕЩЕСТВАМИ, ОБЛАДАЮЩИМИ ЗАПАХОМ
1 ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава РФ, 119991, Москва;
2 Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Новгородской области, 173002, Великий Новгород
Впервые изучено влияние запаха выбросов предприятия по производству жевательной резинки на цитогене-тический статус детей из дошкольных учреждений, расположенных на расстоянии 0,9 и 6 км от источников. Специфический слабый мятно-фруктовый запах в атмосферном воздухе в районе размещения предприятия может быть связан с присутствием ментола, ментона, пиненов, лимонена, этилацетата и других соединений, содержащихся в выбросах. Не выявлено отличий по цитогенетическому статусу детей обеих групп (по частоте микроядер, протрузий, двуядерных клеток, апоптозу).
Ключевые слова: цитогенетический статус; микроядра; протрузии; двуядерные клетки; апоптоз; предприятие по производству жевательной резинки; запах.
Для цитирования: Сычева Л.П., Бударина О.В., Сабирова З.Ф., Ахальцева Л.В., Росоловский А.П. Цитогенетический статус детей при гигиенической оценке загрязнения атмосферного воздуха веществами, обладающими запахом. Гигиена и санитария. 2016; 95(8): 765-768. DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-765-768
Sycheva L.P.1, Budarina O.V.1, Sabirova Z.F.1, Akhaltseva L.V.1, Rosolovsky A.P.2
СYTOGENETIC STATUS OF CHILDREN IN THE HYGIENIC ASSESSMENT OF THE AIR POLLUTION BY ODOROUS SUBSTANCES
'A.N.Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, 119991, Russian Federation; 2Administration of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare in the Novgorod region, Veliky Novgorod, 173002, Russian Federation
For the first time the impact of odorous emissions from the enterprise for the production of chewing gum on the cytogenetic status of children, residing in the distance of 0,9 and 6 km, was studied. Specific weak mint and fruity odour in the air in the placement of the enterprise may be related to the presence of menthol, menthone, pinene, limonene, ethyl acetate and other compounds containing in the emissions. There were no differences in cytogenetic status of children in both groups (by frequency of micronuclei, protrusions, binucleated cells, apoptosis).
Keywords: cytogenetic status; micronuclei; protrusions; binucleated cells; apoptosis; enterprise for the production of chewing gum; odour.
For citation: Sycheva L.P., Budarina O.V., Sabirova Z.F., Akhaltseva L.V., Rosolovsky A.P. Cytogenetic status of children in the hygienic assessment of the air pollution by odorous substances. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(8): 765-768. (In Russ.). DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-765-768
For correspondence: Lyudmila P. Sycheva, MD, PhD, DSci., professor, Head of the Laboratoty of Genetic Monitoring of the A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, 119121, Russian Federation. E-mail: lpsycheva@mail.ru
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Funding. The study had no sponsorship. Received: 12 March 2016 Accepted: 14 April 2016
Введение
Работа предприятий различных отраслей промышленности, в том числе пищевых, может сопровождаться выбросами в атмосферный воздух сложных многокомпонентных смесей, имеющих специфический запах. Навязчивое действие любого запаха (приятного или неприятного) нередко вызывает жалобы населения, проживающего в районе размещения предприятий, в том числе на различные нарушения со стороны здоровья (эмоциональные и невротические расстройства, головная боль, кашель, одышка, раздражение слизистой верхних дыхательных путей и глаз, тошнота и т.д.) [1-3]. В связи с этим актуальной и очень важной задачей является объективная оценка
Для корреспонденции: Сычева Людмила Петровна, д-р биол. наук, проф., зав. лаб. генетического мониторинга, ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава РФ, 119992, Москва, E-mail: lpsycheva@mail.ru
здоровья населения, подверженного воздействию этого фактора, поиски методологии такой оценки.
Как известно, первой мишенью действия факторов окружающей среды на организм являются пограничные эпителиальные ткани. Поэтому цитогенетические исследования клеток слизистых оболочек ротовой полости и носа людей, проживающих на разных расстояниях от источников воздействия, приобретает все большее значение при оценке загрязнения атмосферного воздуха различными веществами [4-6]. Мы предложили использовать этот подход для оценки влияния выбросов предприятий, обладающих запахом. Следует отметить, что при определении действия факторов окружающей среды на здоровье населения важно изучать наиболее уязвимые группы, в частности, детей. Это также полезно с той точки зрения, что дети дошкольного возраста в организованных группах (детсадах), как правило, живут в том же районе. Они лишены вредных привычек (курение, алкоголь), что снижает роль вмешивающихся факторов. Одним из требований к
гиена и санитария. 2016; 95(8)
РР1: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-765-768_
Оригинальная статья
проведению такого рода исследований является необходимость неинвазивного анализа. В связи с этим большие перспективы открываются при использовании инновационной клеточной технологии на эксфолиативных (слу-щивающихся) клетках, позволяющей анализировать ци-тогенетические и цитотоксические эффекты различных факторов. В основе метода лежит микроядерный тест на буккальных эпителиоцитах, который верифицирован в международном Проекте «НиМ№х», начатом в 2007 г. В настоящее время опубликованы данные об индукции микроядер в буккальных клетках детей при воздействии различных факторов, что подтверждает возможность использования этого подхода для оценки здоровья населения [7, 8].
Целью данной работы была оценка возможного влияния слабого, едва заметного запаха (силой не более 2 баллов) выбросов предприятия по производству жевательной резинки на здоровье детского населения, проживающего в районе его размещения, по показателям цитогенетиче-ского статуса.
Материал и методы
Проведено обследование детей 5 лет из детских дошкольных учреждений, одно из которых расположено в 0,9 км от источников выбросов производственного цеха предприятия (25 детей из группы воздействия), другое, значительно более удаленное (около 6 км), служило контролем (15 детей из группы сравнения). Для каждого ребенка получено информированное согласие родителей на проведение данного неинвазивного обследования и заполнена соответствующая анкета. В группе воздействия было 10 девочек и 15 мальчиков, в группе сравнения - 8 девочек и 7 мальчиков. Обе группы имели приблизительно одинаковые характеристики по социально-экономическому статусу семей, бытовым вредностям, включая пассивное курение. Оба детских сада расположены внутрикварталь-но и находятся в условиях приблизительно одинакового влияния выбросов автотранспорта.
Клетки слизистой оболочки щеки готовили и оценивали в соответствии с нашим подходом [9, 10] следующим образом: стерильным деревянным шпателем делали со-скоб с внутренней стороны щеки с двух сторон, наносили на предметные стекла, высушивали. Все препараты фиксировали этанолом и уксусной кислотой (3:1), окрашивали ацетоорсеином и светлым зеленым. Препараты шифровали, проводили микроскопический анализ 1200 клеток от каждого индивидуума отдельно и оценивали показатели цитогенетического и цитотоксического действия. Каждую клетку при микроскопическом анализе относили к одной из категорий: 1) клетки с цитогенетическими нарушениями (микроядрами, протрузиями, суммой цитогенетиче-ских нарушений, ядрами атипичной формы); 2) клетки с двумя ядрами (изолированными; сдвоенными, суммарно теми и другими), которые являются косвенными показателями пролиферации и в то же время пролиферации нарушенной; 3) клетки с деструкцией ядра (в апоптозе): конденсацией хроматина; началом кариолизиса; полным кариолизисом; суммарным показателем всех клеток в апоптозе.
Определяли индекс накопления цитогенетических нарушений (1ас), который рассчитывали по формуле I = (I . • I /I ) • 100, где в числителе суммарная доля
ас 4 суг рг арор' ' ^ г
клеток с цитогенетическими нарушениями (!су4) и суммарный показатель пролиферации (!рг), а в знаменателе -показатель деструкции ядра (!арор) [10]. Этот показатель позволяет одной цифрой охарактеризовать цитогенетиче-ский статус человека и в отличие от показателя «частота
клеток с микроядрами» учитывает соотношение между частотой цитогенетических нарушений и «интенсивностью» клеточной кинетики.
Статистический анализ данных проводили с помощью компьютерных программ Excel и Statistica for Windows. Сравнение данных по группам проводили с помощью /-критерия Стьюдента. Различия считали значимыми при р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Результаты исследования представлены в таблице.
Цитогенетические показатели. У каждого из обследуемых детей в обеих группах количество клеток с микроядрами варьировало от 0 до 2 (на 1000 анализированных клеток), протрузий и суммы цитогенетических нарушений от 0 до 4 - в группе воздействия и немного выше - от 0 до 7 - в группе сравнения. Средние частоты клеток с микроядрами, протрузиями и суммой цитогенетических нарушений в группе сравнения были немного выше (0,53; 1,96 и 2,4%о), чем в группе воздействия (0,32; 0,96 и 1,24%о), но эти отличия статистически недостоверны.
Показатели пролиферации. Доля клеток с изолированными и сдвоенными ядрами, а также сумма этих клеток на 1000 была приблизительно одинакова в обеих группах: 2; 1,27 и 3,26% в группе контроля и 2,08; 1,4 и 3,48% в группе воздействия.
Показатели деструкции ядра клеток. Апоптотиче-ский индекс, суммирующий все стадии гибели ядра, оказался приблизительно одинаковым в обеих группах и составил 34,4 и 36,3%, что соответствует ориентировочным нормативным величинам.
Оценивая возможное влияние запаха на здоровье населения, следует учитывать обусловливающий его химический состав компонентов. На границе санитар-но-защитной зоны (СЗЗ) содержание в атмосферном воздухе отдельных летучих органических соединений -компонентов выбросов предприятия, в соответствии с расчетами и инструментальными замерами, не превышает ПДКм.р., тем не менее специфический запах производства (мятный с примесью фруктов) может распространяться на значительные расстояния [11]. В работе М.А. Пинигина, О.В. Будариной и соавт. [12] разработана система нормирования и оценки запаха в атмосферном воздухе, основанная на недопустимости появления «навязчивого» (по определению В.А. Рязанова) или «раздражающего» (по зарубежной терминологии) запаха в районе размещения предприятий-источников. По пятибалльной системе оценки запаха такое ощущение может возникать при силе запаха 3 балла с вероятностью его ощущения выше 5% [13].
Ольфакто-одориметрическими исследованиями (вероятности ощущения запаха разной силы) установлено, что в районе размещения предприятия по производству жевательной резинки специфический запах в атмосферном воздухе может распространяться под факелом выбросов до 1 км от источников, причем вероятность обнаружения интенсивного запаха с увеличением расстояния уменьшается, а вероятность слабого - возрастает. При этом на расстоянии 0,9 км, где расположено первое дошкольное учреждение, вероятность слабого запаха (силой 1-2 балла) составляет не более 20-25%, а на удалении от источников в 6 км, где расположено второе дошкольное учреждение, запах вообще не обнаруживается. Следует отметить, что за пределами промплощадки предприятия, в том числе на границе СЗЗ (0,3 км от источников), запаха, способного вызвать чувство «раздражения», «досады» (т.е. силой 3 балла), не ощущалось.
Кариологические показатели буккальных эпителиоцитов у детей 5-7 лет в изучаемых районах, хср ± m (95% ДИ)
Доля клеток с исследуемыми
показателями в %о
Показатель Группа сравнения (контроля, n = 15) Группа воздействия (П =25)
Доля клеток с микроядрами Доля клеток с протрузиями
Цитогенетические показатели
0,53 ± 0,17 (0,18,0,89)
1,93 ± 0,61 (0,62,3,25)
Суммарная доля клеток 2,40 ± 0,63
с цитогенетическими нарушениями (1,05,3,75)
0,80 ± 0,20 (0,37,1,23)
Показатели пролиферации
Доля клеток с ядром атипичной формы
Доля клеток с двумя ядрами
Доля клеток со сдвоенными ядрами
Суммарный показатель пролиферации
2,00 ± 0,59 (0,74,3,26)
1,27 ± 0,42 (0,37,2,17)
3,26 ± 0,83 (1,48,5,05)
Показатели деструкции ядра
Доля клеток с конденсацией 220 ± 28,6
хроматина (158,4,281,0)
Доля клеток с началом кариолизиса 75,9 ± 20,1
(32,6,119,1)
Доля клеток с завершенным 16,1 ± 5,85
кариолизисом (3,52,28,6)
Апоптотический индекс 344,2 ± 24,0
(все стадии деструкции ядра) (292,7,395,7)
Доля клеток с апоптотическими 1,13 ± 0,48
телами (0,11,2,15)
Индекс накопления цитогенетических 2,95±1,0 повреждений (0,81,5,10)
0,32 ± 0,13 (0,06,0,58)
0,96 ± 0,23 (0,49,1,43)
1,24 ± 0,23 (0,77,1,70)
1,20 ± 0,25 (0,68,1,72)
2,08 ± 0,31 (1,45,2,71)
1,40 ± 0,27 (0,84,1,96)
3,48 ± 0,38 (2,70,4,26)
192 ± 15,9 (158,9,224,5)
73,2 ± 15,3 (41,72,104,8)
16,1 ± 3,50 (8,86,23,3)
363,4 ± 21,7 (318,5,408,2)
0,92 ± 0,22 (0,48,1,36)
1,75±0,30 (1,13,2,36)
Примечание: * - различия статистически значимы при сравнении группы воздействия с контролем по критерию Манна-Уитни при р < 0,005.
Хромато-масс-спектрометрическими исследованиями в выбросах и в атмосферном воздухе в пределах СЗЗ предприятия идентифицировано около 90 веществ, относящихся к различным химическим группам: насыщенным, ненасыщенным, терпеновым, циклическим углеводородам; кислородсодержащим соединениям, в том числе спиртам, альдегидам, кетонам, простым и сложным эфи-рам и др. Среди них присутствуют вещества, которые могут определять запах: ментол, ментон, пинены, лимонен, этилацетат, этилбутират, изоамилацетат и др. При этом на расстоянии 300 м от источника (на границе СЗЗ предприятия) все имеющие установленные гигиенические нормативы в атмосферном воздухе вещества находятся в концентрациях, не превышающих ПДКм.р. или ОБУВ.
Многие химические вещества, определяющие слабый запах вблизи предприятия, исследованы в отношении их мутагенной активности. Ряд химических соединений, относящихся к терпенам и интересующих нас с точки зрения выбросов предприятия по производству жевательной резинки, определен в составе масла чайного дерева. Изучение образцов масла, основными компонентами которого являются терпинен-4-ол (43%), у-терпинен (20%),
Оriginal article
p-цимен (10%) и а-терпинен (8%), показало отсутствие мутагенной активности в микроядерном тесте на культуре лимфоцитов человека [14].
Основные компоненты эссенциальных масел, моно-терпеноиды, такие как альдегиды цитраль и цитронел-лаль, кетон камфора и спирты ментол, оксид 1,8-цинеол (эвкалиптол), не проявили мутагенные свойства в тесте Эймса на Salmonella typhimurium как с метаболической активацией, так и без нее. И только на одном из четырех штаммов получена дозозависимая активность терпинеола [15]. Еще один из терпенов (а-пинен) повышал частоту микроядер и многоядерных клеток на культуре клеток китайского хомячка V79-Cl3 при воздействии в концентрациях 25 и 50 мкМ [16].
В обобщающем докладе по изучению широко применяющегося в косметологии масла мяты перечной, важными компонентами которого являются ментол и ментон, указано, что оно не проявило мутагенной активности в тестах Эймса, на клетках мышиной лимфомы и в микроядерном тесте на мышах [17]. Более того, выявлена антимутагенная активность водного и метанольного экстрактов мяты длиннолистой в тесте Эймса и на двух линиях клеток млекопитающих [18], мяты перечной и мяты садовой в микроядерном тесте на мышах [19, 20], что может быть связано с присутствием в этом растении веществ-антимутагенов - аскорбиновой кислоты, каротина, рутина, бетаина, флавоноидов.
Эти исследования указывают на отсутствие мутагенности основных компонентов выбросов предприятия по производству жевательной резинки, обладающих специфическим запахом, и подтверждают полученные нами данные о приблизительно одинаковом цитогенетическом статусе детей, проживающих вблизи и на значительном удалении от предприятия.
Таким образом, впервые изучено влияние запаха выбросов предприятия по производству жевательной резинки на цитогенетический статус детей из дошкольных учреждений, расположенных на расстоянии 0,9 и 6 км от предприятия. Не выявлено отличий по цитогенетическо-му статусу детей обеих групп при изучении эпителиальных клеток слизистой оболочки щеки с учетом широкого спектра кариологических показателей (микроядер, про-трузий, двуядерных клеток, апоптоза).
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Литер атур а (п.п. 2, 7-8, 14-20 см. References)
1. Рязанов В.А. Основные принципы гигиенического нормирования атмосферных загрязнений. Гигиена и санитария. 1949; (5): 3-9.
3. Штайнхайдер Б., Бот Р., Виннеке Г. Полевые исследования промышленных запахов, вызывающих раздражение, а также симптомы желудочного и общего недомогания. В кн.: Сборник докладов. Международная конференция «Актуальные вопросы оценки и регулирования запаха». М.: ЗАО «Лиггетт-Дукат»; 2006: 225-54.
4. Сычева Л.П., Иванов С.И., Коваленко М.А., Журков В.С., Беляева Н.Н., Анциферов Б.М. Цитогенетический статус детей, проживающих вблизи целлюлозно-бумажного комбината. Гигиена и санитария. 2010; (1): 7-10.
5. Бяхова М.М., Сычева Л.П., Журков В.С., Гельштейн В.С., Сухарева И.В., Шишкина Л.И. и др. Кариологические и иммунологические показатели у детей в условиях различного загрязнения атмосферного воздуха. Гигиена и санитария. 2010; (3): 9-11.
6. Молочаева Л.Г., Джамбетова П.М., Сычева Л.П. Генетический
гиена и санитария. 2016; 95(8)
DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-765-768_
Оригинальная статья
мониторинг детского населения в условиях нефтезагрязне-ния. Монография. LAP Lambert Academic Publishing; 2014.
9. Сычева Л.П. Биологическое значение, критерии определения и пределы варьирования полного спектра кариологических показателей при оценке цитогенетического статуса человека. Медицинская генетика. 2007; 6(11): 3-11.
10. Сычева Л.П. Цитогенетический мониторинг для оценки безопасности среды обитания человека. Гигиена и санитария. 2012; (6): 68-72.
11. Пинигин М.А., Тепикина Л.А., Бударина О.В., Сафиулин А.А., Малышева А.Г. Этапы гигиенического регламентирования летучих компонентов ароматизаторов при производстве жевательной резинки. Токсикологический вестник. 2011; (2): 5-10.
12. Пинигин М.А., Бударина О.В., Сафиулин А.А. Развитие основ нормирования и контроля запахов в атмосферном воздухе и пути гармонизации в этой области. Гигиена и санитария. 2012; (5): 72-5.
13. ВОЗ. Рекомендации по качеству воздуха в Европе. 2-е издание. М.: Издательство «Весь мир»; 2004.
References
1. Ryazanov V.A. Basic principles of hygienic standardization of air pollution. Gigiena i sanitariya. 1949; (5): 3-9. (in Russian) 2. Winneke G., Sucker K., Both R. Population odour annoyance is influenced by the hedonic quality of industrial odours. In: Environmental Odour Management, International Conference 17-19 November. Cologne; 2004: 9-12.
3. Shtaynkhayder B., Bot R., Vinneke G. Field studies on environmental odours inducing annoyance as well as gastric and general health-related symptoms. In: The Collection of Reports. International Conference «Actual Problems of the Assessment and Management of Smell». [Sbornik dokladov. Mezhdunarod-naya konferentsiya «Aktual'nye voprosy otsenki i regulirovaniya zapakha»]. Moscow: ZAO «Liggett-Dukat»; 2006: 225-54. (in Russian)
4. Sycheva L.P., Ivanov S.I., Kovalenko M.A., Zhurkov V.S., Be-lyaeva N.N., Antsiferov B.M. The cytogenetic status of children living in the vicinity of a pulp-and-paper mill. Gigiena i sani-tariya. 2010; (1): 7-10. (in Russian)
5. Byakhova M.M., Sycheva L.P., Zhurkov V.S., Gel'shteyn V.S., Sukhareva I.V., Shishkina L.I. et al. Karyological and immuno-logical parameters in children under conditions of varying ambient air pollution. Gigiena i sanitariya. 2010; (3): 9-11. (in Russian)
6. Molochaeva L.G., Dzhambetova P.M., Sycheva L.P. Genetic Monitoring of the Child Population in the Conditions of Oil Pollution. Monograph [Geneticheskiy monitoring detskogo nasele-niya v usloviyakh neftezagryazneniya. Monografiya]. LAP Lambert Academic Publishing; 2014. (in Russian)
7. Fenech M., Holland N., Zeiger E., Chang W.P., Burgaz S., Thom-
as P. et al. The HUMN and HUMNxL international collaboration projects on human micronucleus assays in lymphocytes and buccal cells - past, present and future. Mutagenesis. 2011; 26(1): 239-45.
8. Bolognesi C., Knasmueller S., Nersesyan A., Thomas P., Fenech M. The HUMNxl scoring criteria for different cell types and nuclear anomalies in the buccal micronucleus cytome assay - an update and expanded photogallery. Mutat. Res. 2013; 753(2): 100-13.
9. Sycheva L.P. Biological value, scoring criteria and limits of a variation of a full spectrum karyological indexes of exfoliated cells for estimation of human cytogenetic status. Meditsinskaya genetika. 2007; 6(11): 3-11. (in Russian)
10. Sycheva L.P. Cytogenetic monitoring for assessment of safety of environmental health. Gigiena i sanitariya. 2012; (6): 68-72. (in Russian)
11. Pinigin M.A., Tepikina L.A., Budarina O.V., Safiulin A.A., Maly-sheva A.G. Stages of hygienic regulation of flavorings airborne ingredients in the manufacture of chewing gum. Toksikologiches-kiy vestnik. 2011; (2): 5-10. (in Russian)
12. Pinigin M.A., Budarina O.V., Safiulin A.A. The development of hygienic basis of odour regulation and control in ambient air and ways of harmonization in this field. Gigiena i sanitariya. 2012; (5): 72-5. (in Russian)
13. WHO. Air Quality Guidelines for Europe. 2nd ed. WHO regional publications, European series, № 91; 2000.
14. Pereira T.S., de Sant'anna J.R., Silva E.L., Pinheiro A.L., de Castro-Prado M.A. In vitro genotoxicity of Melaleuca alternifolia essential oil in human lymphocytes. J. Ethnopharmacol. 2014; 151 (2): 852-7.
15. Gomes-Carneiro M.R., Felzenszwalb I., Paumgartten F.J. Mutagenicity testing (+/-)-camphor, 1,8-cineole, citral, citronellal, (-)-menthol and terpineol with the Salmonella/microsome assay. Mutat Res. 1998; 416 (1-2): 129-36.
16. Catanzaro I., Caradonna F., Barbata G., Saverini M., Mauro M., Sciandrello G. Genomic instability induced by a-pinene in Chinese hamster cell line. Mutagenesis. 2012; 27(4): 463-9.
17. Nair B. Final report on the safety assessment of Mentha Piperita (Peppermint) Oil, Mentha Piperita (Peppermint) Leaf Extract, Mentha Piperita (Peppermint) Leaf, and Mentha Piperita (Peppermint) Leaf Water. Int. J. Toxicol. 2001; 20(Suppl.3): 61-73.
18. Al-Ali K., Abdelrazik M., Alghaithy A., Diab A., El-Beshbishy H., Baghdadi H. Antimutagenic and anticancer activity of Al Ma-dinah Alhasawy mint (Mentha longifolia) leaves extract. Pak. J. Biol. Sci. 2014; 17(12): 1231-6.
19. Samarth R.M. Protection against radiation induced hematopoi-etic damage in bone marrow of Swiss albino mice by Mentha piperita (Linn). J. Radiat. Res. 2007; 48(6): 523-8.
20. Arumugam P., Ramesh A. Antigenotoxic and antioxidant potential of aqueous fraction of ethanol extract of Mentha spicata (L.) against 4-nitroquinoline-1-oxide-induced chromosome damage in mice. Drug Chem. Toxicol. 2009; 32(4): 411-6.
Поступила 12.03.16 Принята к печати 14.04.16
