CC BY
59
гиена и санитария. 2016; 95(5)
DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431_
Оригинальная статья
15. Petunina N.A. Clinical features, diagnosis and treatment of autoimmune thyroiditis. Problemy endokrinologii. 2002; 48 (6): 16-21. (in Russian)
16. Mel'nichenko G.A. Comments on the guidelines for the diagnosis and treatment of autoimmune thyroiditis. Tironet. 2002; (56). Available at: http://thyronet.rusmedserv.com/spetsialistam/ zhurnal/archiv/2002g/5-6/ (in Russian)
17. Gorobets V.F. The incidence of thyroid disease among children in the south- western region of Kaluga region exposed in utero at various stages of gestation. Radiatsiya i risk (Byulleten' Natsional'nogo radiatsionno-epidemiologicheskogo registra). 2006; 15 (1-2): 49-58. (in Russian)
18. Geger' E.V. Development methodology of integrated pollution index to assess the state of the environment. Perspektivy nauki. 2012; (5): 190-3. (in Russian)
19. Orlov A.I. Applied Statistics [Prikladnaya statistika]. Moscow: Izdatel'stvo «Ekzamen»; 2006. (in Russian)
20. Gusarov V.M. Theory of Statistics. Textbook for High Schools [Teoriya statistiki. Uchebnoe posobie dlya vuzov]. Moscow; 1998. (in Russian)
21. Borovikov V.P. STATISTICA Program for Students and Engineers [Programma STATISTICA dlya studentov i inzhenerov]. 2nd ed. Moscow: Komp'yuter Press; 2001. (in Russian)
22. Methodical recommendations № 01-19/17-17. Comprehensive definition of anthropogenic impact on water bodies, soil, atmospheric air in residential areas development. Moscow; 1996. (in Russian).
23. Bushtueva K.A. Selection of monitoring areas in large industrial cities to identify the influence of air pollution on public health. Gigiena i sanitariya. 1985; (1): 4-6. (in Russian)
Поступила 05.02.15 Принята к печати 04.06.15
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
УДК 614.72:616.31-018.73-053.2-076.5:575.08
Ладнова Г.Г.1, Истомин А.В.2, Курочицкая М.Г.1, Силютина В.В.1
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ШКОЛЬНИКОВ, ПРОЖИВАЮЩИХ НА ТЕРРИТОРИЯХ С РАЗНЫМ УРОВНЕМ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРНОГО ВОЗДУХА
1ФГБОУ ВПО «Орловский государственный университет», 302026, Орел; 2ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрис-мана» Роспотребнадзора, 141000, Мытищи
В статье содержатся результаты исследования атмосферного воздуха областного центра, поселка городского типа и буккального эпителия 87 школьников 11-13 лет. Показано, что школьники, проживающие в областном центре, в большей степени подвержены воздействию содержащихся в атмосферном воздухе таких токсикантов, как оксид углерода, оксид азота, фтористый водород, хлор и его соединения, диоксид серы, формальдегид. В этой группе учащихся по сравнению со школьниками, проживающими в поселке, выявлены более выраженные цитогенетические нарушения в эпителиоцитах слизистой оболочки полости рта: достоверно чаще встречаются клетки с микроядрами, разными формами протрузии ядра, двуядерные клетки, кариокинез, апоптозные тела, что может говорить не только о цитогенетической нестабильности, но и степени ге-нотоксичности окружающей среды, в частности, атмосферного воздуха. Отмечена тенденция к повышению уровня цитогенетических нарушений и деструкции ядра в группах девочек по сравнению с мальчиками.
Ключевые слова: школьники; буккальный эпителий; микроядерный тест; атмосферный воздух; токсиканты.
Для цитирования: Ладнова Г.Г., Истомин А.В., Курочицкая М.Г., Силютина В.В. Цитогенетические показатели буккального эпителия школьников, проживающих на территориях с разным уровнем загрязнения атмосферного воздуха. Гигиена и санитария. 2016; 95 (5): 428-431. DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431
Ladnova G.G.1, Istomin A.V.2, Kurochitskaya M.G.1, Silyutina V.V.1
CYTOGENETIC INDICES OF BUCCAL EPITHELIUM IN SCHOOLCHILDREN RESIDING IN TERRITORIES WITH DIFFERENT LEVELS OF THE AIR POLLUTION
Orel State University, Orel, 302026, Russian Federation; 2Federal Scientific Institution of Hygiene named after F. Erisman, Mytishchy, 141000, Russian Federation
In the article there are contained the results of the study of ambient air of the regional center, urban-type settlement, and buccal epithelium in 87 schoolchildren aged of 11-13 years. Schoolchildren residing in the regional center were shown to be more susceptible to the exposure to such toxicants as carbon monoxide, nitrogen oxide, fluorhydric acid, chlorine and its compounds, sulfur dioxide, formaldehyde contained in the ambient air. In this group of students if compared with students who live in the village, there were revealed more pronounced cytogenetic deteriorations in oral mucosal epitheliocytes: cells with micronuclei, different forms of protrusion of the core, dual-core cell mitosis, kariokynesis, apoptotic bodies significantly more common occur, that can speak about both not only of cytogenetic instability, but and the degree of environmental genotoxicity, in particular, ambient air. There was noted the tendency to increase the level of cytogenetic damage and destruction of the nucleus in the group of girls in comparison with boys.
Keywords: schoolchildren, buccal epithelium, micronucleus test, ambient air toxicants.
For citation: Ladnova G.G., Istomin A.V., Kurochitskaya M.G., Silyutina V.V. Cytogenetic indices of buccal epithelium in schoolchildren residing in territories with different levels of the air pollution . Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(5): 428-431. (In Russ.). DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431
For correspondence: Galina G. Ladnova, MD., PhD.,DSci., professor, head of the Department of Ecology And General
Biology. E-mail.ru: [email protected];
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. The study had no sponsorship.
Received 22 April 2015
Accepted 04 June 2015
Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(5)
DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431
Введение
Согласно данным отечественных и зарубежных исследователей, увеличение заболеваемости населения, особенно детского, связано с ростом загрязнения окружающей среды (ОС), с резким ухудшением экологической ситуации [1-7]. В связи с этим весьма актуальным вопросом является оценка устойчивости организма к воздействию неблагоприятных факторов ОС. Одним из значимых критериев такой оценки является изучение цитологического статуса, в частности, эпителиоцитов слизистых оболочек полости рта, который, по мнению ряда ученых, служит высокоинформативным показателем, отражающим реакцию организма на воздействие различных токсикантов [7-11].
Цель работы - цитогенетическое изучение состояния эпителиальных клеток слизистой оболочки полости рта у школьников, проживающих в районах с разным уровнем загрязнения атмосферного воздуха.
Материал и методы
Объектами исследования явились атмосферный воздух областного центра (Орел) и поселка городского типа и образцы буккального эпителия школьников. Для формирования групп были взяты школьники 11-13 лет, постоянно проживающие в районах школьного обучения не менее 5 лет, ведущие здоровый образ жизни (не курящие и занимающиеся спортом) и не имеющие хронических заболеваний, семьи которых равны по социальному статусу. Проведено цитогенетическое обследование 43 школьников областного центра (21 девочка, 22 мальчика) и 44 школьников, проживающих в поселке городского типа (20 девочек и 24 мальчика). Всего обследовано 87 школьников. От каждого обследованного было проанализировано не менее 1000 нормальных эпите-лиоцитов.
Мазки буккального эпителия готовили и анализировали в соответствии с методическими рекомендациями «Оценка цитологического и цитогенетиче-ского статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека» [12], кариологические показатели анализировали и классифицировали по Л.Н. Сычевой [7]. На препаратах учитывали цитогенетические показатели (клетки с микроядрами и протрузиями разных форм), показатели пролиферации (двумя и более ядрами, сдвоенным ядром), показатели ранней и поздней деструкции ядра, апоптозные тела.
Отбор атмосферного воздуха осуществляли на протяжении 5 лет, 4 раза в год в 3-кратной повтор-ности в соответствии с Методическими рекомендациями РФ № 01-19/17-17 от 26.02.1996 «Комплексное определение антропотехногенной нагрузки на вод-ные объекты, почву, атмосферный воздух в районах селитебного освоения». Загрязнение воздуха оценивали по показателям максимальных разовых и
Original article
среднесуточных концентраций (ГОСТ 17.2.3.01-86 «Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов») с расчетом кратности превышения ПДК изучаемых веществ, согласно списку «Предельно допустимые концентрации (ПДК) загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест (№ 3086-84)». Всего проанализировано 244 пробы.
Математическая обработка проведена методом вариационной статистики с расчетом среднего значения (М), ошибки средней (m) и определением достоверности различий по ¿-критерию Стьюдента. Достоверными считали отличия при р < 0,05. Статистический анализ полученных результатов выполняли с использованием программы Microsoft Ехсе1 и пакета прикладных программ Statistiсa 6.0.
Результаты
Результаты исследования показали, что за последние 5 лет на территории города (и в целом по области), с одной стороны, отмечается увеличение количества проб атмосферного воздуха с превышением ПДК по содержанию окислов азота, оксида углерода, что по-видимому связано с увеличением автомобильного парка и его воздействием на окружающую среду; с другой стороны, прослеживается тенденция к снижению загрязненности воздуха по таким показателям как фтористый водород, хлор и его соединения. По другим группам основных загрязнителей, таких как фенол, формальдегид, ситуация за последние 5 лет была стабильной и характеризовалась лишь незначительным увеличением количества проб, превышающих ПДК.
Кроме этого, отмечается загрязненность атмосферного воздуха города металлами, такими как свинец и марганец, концентрации которых выросли в среднем на 3 и 8% соответственно и в 17 и 30% проб превышали ПДК. Наметилась тенденция роста содержания ртути в атмосферном воздухе на 7%. Содержание никеля, напротив, имеет тенденцию к стабилизации, и его концентрация не превышала гигиенических нормативов.
Таблица 1
Средние показатели доли проб атмосферного воздуха с превышением ПДК областного центра и поселка городского типа по отдельным загрязнителям
Загрязнитель
Областной центр,
%, М ± m
Поселок городского типа, %, М ± m
Для корреспонденции: Ладнова Галина Георгиевна, д-р биол. наук, проф., зав. каф. экологии и общей биологии ФГБОУ ВПО «Орловский государственный университет», 302026, Орел, E-mail: [email protected].
Взвешенные вещества 12,3 ± 2,4** (п = 21) 4,4 ± 0,3 (п = 22)
Оксид азота 4,4 ± 1,2*** (п = 12) 0,4 ± 0,07 (п = 13)
Фтористый водород 3,9 ± 0,7** (п = 17) 1,4 ± 0,3 (п = 14)
Хлор и его соединения 7,8 ± 1,4** (п = 20) 2,4 ± 0,6 (п = 11)
Оксид углерода 5,9 ± 1,2*** (п = 15) 1,6 ± 0,3 (п = 15)
Диоксид серы 2,9 ± 0,7* (п = 12) 0,8 ± 0,08 (п = 14)
Фенол 2,3 ± 0,6 (п = 13) 0,9 ± 0,7 (п = 13)
Формальдегид 1,5 ± 0,3* (п = 15) 0,4 ± 0,05 (п = 17)
Примечание. Различия с показателями поселка городского
типа достоверны при *р < 0,05, **р < 0,01, *** р < 0,001
дигиена и санитария. 2016; 95(5)
DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431
Оригинальная статья
Таблица 2
Цитогенетические и кариологические показатели буккальных эпителиоцитов у школьников, проживающих в областном центре и поселке городского типа (на 1000 клеток), М ± m, (min - max)
Показатель
Школьники, проживающие в областном центре
мальчики, n = 21
девочки, n = 22
Школьники, проживающие в поселке городского типа
мальчики, n = 20
девочки, n = 24
Цитогенетические нарушения:
клетки
с микроядрами
протрузии ядра разных форм
Показатели пролиферации:
двуядерные клетки
трехядерные клетки
клетки со сдвоенным ядром
Показатели деструкции ядра:
1,87 ± 0,33* (1,36-2,28)
0,77 ± 0,15* (0,58-1,03)
2,14 ± 0,35*** (1,72-2,56)
0,06 ± 0,03 (0,12-0,02)
0,46 ± 0,08*** (0,34-0,58)
1,96 ± 0,38* (1,16-3,06)
1,18 ± 0,21* (0,82-1,54)
2,22 ± 0,41** (1,65-2.82)
0,04 ± 0,03 (0,01-0,08)
0,34 ± 0,07** (0,19-0,52)
перинуклеарная 3,48 ± 1,56 2,29 ± 0,92
вакуоль (1,85-5,16) (1,29-3,36)
вакуолизация 9,27 ± 2,14 12,41 ± 3,26
ядра (6,88-11,8) (7,72-17,30)
конденсация 26,71 ± 10,2 18,57 ± 6,23
хроматина (14,47-38,51) (11,20-26,61)
кариокинез 10,15 ± 1,85** 12,42 ± 2,51*
(7,78-12,38) (8,25-16,84)
кариорексис 0,62 ± 0,12 0,72 ± 0,08
(0,46-0.81) (0,48-0,96)
кариолизис 9,66 ± 2,32 18,21 ± 3,15**
(6,34-13,04) (13,42-23,10)
апоптозные 4,75 ± 0,88** 5,58 ± 0,92**
тела (2,75-6,85) (3,24-7,95)
0,42 ± 0,08 (0,26-1,08)
0,36 ± 0,06 (0,24-0,53)
0,74 ± 0,14 (0,46-1,12)
00
0,14 ± 0,03 (0,05-0,20)
3,15 ± 1,70 (1,35-5,26)
11,38 ± 1,8 (8,31-14,42)
36,85 ± 7,81 (21,05-52,60)
4,18 ± 0,96 (2,02-6,44)
0,48 ± 0,09 (0,24-0,72)
7,32 ± 1,46 (2,93-11,92)
0,82 ± 0,16 (0,28-1,38)
0,52 ± 0,12 (0,22-0,84)
0,45 ± 0,07 (0,28-0,62)
0,93 ± 0,15 (0,63-1,24)
0,07 ± 0,05 (0,02-0,14)
0,11 ± 0,02 (0,05-0,18)
5,25 ± 1,31 (2,96-7,45)
11,25 ± 2,07 (6,82-15,84)
24,05 ± 4,80 (10,15-38,04)
4,98 ± 1,01 (3,12-7,05)
0,68 ± 0,14 (0,37-0,98)
8,07 ± 1,63 (2,92-13,24)
1,05 ± 0,21 (0,29-1,84)
Примечание. Различия в показателях между школьниками, проживающими в областном центре и поселке городского типа, достоверны при *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001.
Результаты цитогенетических и кариоло-гических исследований буккальных эпите-лиоцитов в сравниваемых группах школьников представлены в табл. 2. Установлено, что у мальчиков и девочек, проживающих в областном центре, по сравнению со школьниками, проживающими в поселке, достоверно чаще встречаются клетки с микроядрами, разными формами протрузии ядра, из них «ядерная почка» (1-й тип протрузии) составляла 48,2% у мальчиков и 24,9% у девочек, «разбитое яйцо» (2-й тип) - 14,3 и 20,1%, «язык» (3-й тип) - 19,5 и 21,6%, «хвостатое ядро» (4-й тип) - 7,8 и 5,5%, и ядро атипичной формы - 10,2 и 27,9% соответственно); клетки с двумя ядрами, сдвоенным ядром.
На уровне ранней деструкции ядра между обследуемыми группами достоверных различий мы не наблюдали, кроме тенденции к повышению уровня конденсации хроматина у мальчиков, проживающих в поселке.
У школьников областного центра по сравнению со школьниками, проживающими в поселке, достоверно выше были показатели поздней деструкции ядра - кариокинез в обеих группах и кариолизис в группе девочек. В эпителиоцитах школьников обеих групп, проживающих в областном центре, достоверно увеличено количество апоптоз-ных тел по сравнению со школьниками, проживающими в поселке.
Хотя достоверных гендерных различий нами не выявлено, следует отметить тенденцию к повышению уровня цитоге-нетических нарушений и деструкции ядра в группах девочек по сравнению с мальчиками.
Однако анализ результатов исследования качества атмосферного воздуха областного центра и поселка городского типа выявил значительные различия между ними (табл. 1): процент проб, превышающих ПДК, в областном центре по сравнению с поселком городского типа достоверно был выше по взвешенным веществам в 3,5 раза, оксиду азота -в 9,8, фтористому водороду - в 2,9, по хлору и его соединениям в 3,4, оксиду углерода - в 3,8, диоксиду серы - в 3,5, по формальдегиду - в 3,2 раза. Различия по фенолу между областным центром и поселком городского типа были недостоверны.
Таким образом, вредному воздействию загрязняющих атмосферу химических веществ в большей степени подвержены жители областного центра, что обусловлено как более интенсивной транспортной нагрузкой, так и концентрацией в городе предприятий почти всех отраслей промышленности.
Обсуждение
Проведенные исследования показали, что у школьников, проживающих в районе с большей химической загрязненностью атмосферного воздуха, достоверно чаще отмечаются цитогенетические нарушения, уровни пролиферации и другие кариоло-гические аномалии в клетках буккального эпителия, что, по мнению ряда ученых [8-11], может говорить не только о генетической нестабильности, сдвиге клеточной кинетики, но и о степени генотоксично-сти окружающей среды - в частности, атмосферного воздуха.
Отмеченная тенденция в различиях между мальчиками и девочками по показателям цитогенетиче-ских нарушений (т.е. девочки более чувствительны к негативным факторам среды), согласуется с описанными в литературе гендерными различиями в уровне цитогенетических аномалий [9, 10].
Следовательно, наиболее выраженные цитоге-нетические нарушения в буккальном эпителии у школьников, проживающих в областном центре,
по сравнению со школьниками, проживающими в поселке городского типа, могут говорить о снижении защитных свойств организма в ответ на воздействие более высокого содержания токсикантов в атмосферном воздухе. Поэтому изучение и выявление связи цитогенетических показателей в соматических клетках с факторами окружающей среды может способствовать не только более раннему выявлению ухудшения экологической ситуации, но и проведению профилактических мероприятий, направленных на повышение качества жизни и сохранение здоровья населения - прежде всего, подрастающего поколения.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Литература (п. 13 см. References)
1. Баранов А.А., Кучма В.Р., Текшева Л.М. Чтение, компьютер и здоровье. Вопросы современной педиатрии. 2008; 7 (1): 21-5.
2. Кучма В.Р., Рапопорт И.К. Стратегия ВОЗ и обзор международного опыта профилактики болезней и укрепления здоровья детей и подростков в образовательных учреждениях. Общественное здоровье и профилактика заболеваний. 2008; (1): 40-5.
3. Ладнова Г.Г., Гладских М.Н., Тюрикова Ю.Б., Курочицкая М.Г. Экологические показатели окружающей среды и здоровья населения в региональном аспекте. Проблемы региональной экологии. 2009; (3): 187-90.
4. Онищенко Г.Г. О санитарно-эпидемиологическом состоянии окружающей среды. Гигиена и санитария. 2013; (2): 4-10.
5. Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И. Окружающая среда и здоровье: приоритеты профилактической медицины. Гигиена и санитария. 2014; (5): 5-10.
6. Суржиков В.Д., Суржиков Д.В., Голиков Р.А. Загрязнение атмосферного воздуха промышленного города как фактор неканцерогенного риска для здоровья населения. Гигиена и санитария. 2013; (1): 47-9.
7. Сычева Л.П. Биологическое значение, критерии определения и пределы варьирования полного спектра кариологических показателей при оценке цитогенетического статуса человека. Медицинская генетика. 2007; 11 (6): 3-11.
8. Беляева Н.Н., Пономарева О.Ю., Александрова В.П., Олеси-нов А.А., Бударина О.В., Гасимова З.М. Использование не-инвазивной оценки цитологического статуса слизистой оболочки носа и рта в социально-гигиеническом мониторинге. Гигиена и санитария. 2009; (6): 74-8.
9. Волкова А.Т., Викторова Т.В. Сравнительный анализ цито-генетической нестабильности клеток буккального эпителия у городских и сельских жителей республики Башкортостан. Гигиена и санитария. 2011; (5): 40-2.
10. Маймулов В.Г., Ромашов А.Г., Чернякина Г.С., Якубова И.Ш., Суворова А.В., Блинова Л.Г. и др. Выявление цитоге-нетических нарушений в эпителиоцитах слизистой оболочки полости рта у детей и подростков, проживающих в районах с различной степенью химического загрязнения окружающей среды. Гигиена и санитария. 2011; (5): 36-9.
Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(5)
_DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-5-428-431
Original article
11. Полиорганный микроядерный тест в эколого-гигиенических исследованиях. Под редакцией Рахманина Ю.А. и Сычевой Л.П. М.: Гениус; 2007.
12. Беляева Н.Н, Сычева Л.П., Шамарин А.А., Коваленко М.А., Гасимова З.М., Нейман-заде И.К. и др. Оценка цитологического и цитогенетического статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека. Методические рекомендации. М.; 2013.
References
1. Baranov A.A., Kuchma V.R., Teksheva L.M. Reading, computer and health. Voprosy sovremennoy pediatrii. 2008; 7 (1): 21-5. (in Russian)
2. Kuchma V.R., Rapoport I.K. WHO's strategy and review of the international experience of disease prevention and health promotion of children and adolescents in educational establishments. Obshchestvennoe zdorov'e iprofilaktika zabolevaniy. 2008; (1): 40-5. (in Russian)
3. Ladnova G.G., Gladskikh M.N., Tyurikova Yu.B., Kurochitskaya M.G. Environmental indicators of the environment and public health in a regional context. Problemy regional'noy ekologii. 2009; (3): 187-90. (in Russian)
4. Onishchenko G.G. On the sanitary-epidemiological status of the environment Gigiena i sanitariya. 2013; (2): 4-10. (in Russian)
5. Rakhmanin Yu.A., Mikhaylova R.I. Environment and health: priorities of preventive medicine. Gigiena i sanitariya. 2014; (5): 5-10. (in Russian)
6. Surzhikov V.D., Surzhikov D.V., Golikov R.A. Ambient air pollution industrial city as a factor of non-cancer health risk. Gigiena i sanitariya. 2013; (1): 47-9. (in Russian)
7. Sycheva L.P. Biological significance, the criteria for determining the limits of variation and the full range of indicators in assessing karyological cytogenetic status. Meditsinskaya genetika. 2007; 11 (6): 3-11 (in Russian)
8. Belyaeva N.N., Ponomareva O.Yu., Aleksandrova V.P., Olesinov A.A., Budarina O.V., Gasimova Z.M. Using non-invasive assessment of cytological status of the mucous membrane of the nose and mouth in public health monitoring. Gigiena i sanitariya. 2009; (6): 74-8. (in Russian)
9. Volkova A.T., Viktorova T.V. A comparative analysis of cytoge-netic instability buccal epithelial cells in both urban and rural residents of the Republic of Bashkortostan. Gigiena i sanitariya. 2011; (5): 40-2. (in Russian)
10. Maymulov V.G., Romashov A.G., Chernyakina G.S., Yakubova I.Sh., SuvorovaA. V., Blinova L.G. et al. Identification of cytogenetic damage in the epithelial cells of the oral mucosa in children and adolescents living in areas with different degrees of chemical pollution. Gigiena i sanitariya. 2011; (5): 36-9. (in Russian)
11. Multiorgan Micronucleus Test in Ecological and Hygienic Studies [Poliorgannyy mikroyadernyy test v ekologo-gigienicheskikh issledovaniyakh]. (ed by Rakhmanin Yu.A. and Sycheva L.P.) Moscow: Genius; 2007. (in Russian)
12. Belyaeva N.N, Sycheva L.P., Shamarin A.A., Kovalenko M.A., Gasimova Z.M., Neyman-zade I.K. et al. Evaluation of Cytological and Cytogenetic Status of the Mucous Membranes of the Nose and Mouth in Humans. Guidelines [Otsenka tsitologicheskogo i tsitoge-neticheskogo statusa slizistykh obolochek polosti nosa i rta u che-loveka. Metodicheskie rekomendatsii]. Moscow; 2013. (in Russian)
13. Burney P. Air pollution and astma: the dog that doesn't always bark. Lancet. 1999; 353 (9156): 859-60.
Поступила 22.04.15 Принята к печати 04.06.15
