Свободная эмбриональная ДНК при самопроизвольных ранних потерях беременности у женщин с привычным выкидышем

Парсаданян Нанэ Геворковна; Шубина Екатерина Сергеевна; Тетруашвили Нана Картлосовна; Трофимов Дмитрий Юрьевич

19. Hitrova S., Slancheva B., Popivanova A., Vakrilova L., Pramatarova T., Emilova Z., Yarakova N. Osteopenia of prematurity -prophylaxis, diagnostics and treatment. Akush Ginekol (Sofiia), 2012, vol. 51, no. 7, pp. 24-30.

20. Mitchell S. M., Rogers S. P., Hicks P. D., Hawthorne K. M., Parker B. R., Abrams S. A. High frequencies of elevated alkaline phosphatase activity and rickets exist in extremely low birth weight infants despite current nutritional support. BMC Pediatr., 2009, vol. 9, p. 47.

21. Rack B., Lochmüller E. M., Janni W., Lipowsky G., Engelsberger I., Friese K., Küster H. Ultrasound for the assessment of bone quality in preterm and term infants. J. Perinatal., 2012, vol. 32, no. 3, pp. 218-226.

22. Mutlu G. Y., Kirmizibekmez H., Özsu E., Er I., Hatun S. Metabolic bone disease of prematurity: report of four cases. J. Clin. Res. Pediatr. Endocrinol. 2014, vol. 6, no. 2, pp. 111-115.

23. Moore, G. R., Lemyre B., Barrowman N., Daboval T. Neurodevelopmental outcomes at 4 to 8 years of children born at 22 to 25 weeks' gestational age. A Meta-analysis. JAMA Pediatrics, 2013, vol. 167, no. 10, pp. 967-974.

24. Tinnion R. J., Embleton N. D. How to use... alkaline phosphatase in neonatology. Arch. Dis. Child. Educ. Pract. Ed., 2012, vol. 97, pp. 4, pp. 157-163.

УДК 616-072.7: 618.14-006.36 Клиническая медицина

СВОБОДНАЯ ЭМБРИОНАЛЬНАЯ ДНК ПРИ САМОПРОИЗВОЛЬНЫХ РАННИХ ПОТЕРЯХ БЕРЕМЕННОСТИ У ЖЕНЩИН С ПРИВЫЧНЫМ ВЫКИДЫШЕМ

Парсаданян Нанэ Геворковна, аспирант, 2-е отделение акушерской патологии беременности, ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России, 117997, Россия, г. Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, тел.: 8-926-330-42-41, e-mail: nnnpars@mail.ru.

Шубина Екатерина Сергеевна, лаборант-исследователь лаборатории молекулярно-генетических методов, ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России, 117997, Россия, г. Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, тел.: 8-926-721-87-17, e-mail: e_shubina@oparina4.ru.

Тетруашвили Нана Картлосовна, доктор медицинских наук, заведующая 2-м отделением акушерской патологии беременности, ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинато-логии им. В.И. Кулакова» Минздрава России, 117997, Россия, г. Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, тел.: 8 (495) 438-14-77, e-mail: tetrauly@mail.ru.

Трофимов Дмитрий Юрьевич, доктор биологических наук, заведующий лабораторией моле-кулярно-генетических методов, ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России, 117997, Россия, г. Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, тел.: 8 (495) 438-49-51, e-mail: d_trofimov@oparina4.ru.

Определены уровни общей и свободной эмбриональной ДНК (сэ-ДНК) в динамике у женщин с угрожающим и привычным выкидышем, а также при самопроизвольном прерывании беременности в сроках до 22 недель. Оценка уровней общей и сэ-ДНК проводили с 2-недельным интервалом с 6 до 20 недели беременности, уровни ДНК сравнивались с аналогичными показателями у женщин с неосложненной беременностью. Выявлена взаимосвязь клинических проявлений угрожающего и начавшегося выкидыша с высокими уровнями общей и сэ-ДНК независимо от анамнеза пациентки. Выявлено, что у женщин с прервавшейся беременностью уровни общей и сэ-ДНК статистически значимо выше, чем у здоровых беременных, что может служить предиктором остановки развития плода.

Ключевые слова: свободная эмбриональная ДНК, привычный выкидыш, анеуплоидия.

FREE FETAL DNA IN SPONTANEOUS EARLY PREGNANCY LOSSES IN WOMEN WITH HABITUAL ABORTION

Parsadanyan Nane G., Post-graduate student, Department of Pregnancy Loss Prevention and Therapy, Research center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, 4 Acad. Oparin St., Moscow, 117997, Russia, tel: 8(926) 330-42-41, e-mail: nnnpars@mail.ru.

Shubina Ekaterina S., Assistant researcher, laboratory of molecular genetic methods, Research center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, 4 Acad. Oparin St., Moscow, 117997, Russia, tel: 8-926-721-87-17, e-mail: e_shubina@oparina4.ru.

Tetruashvili Nana K., Dr. Sci. (Med.), Head of the Department of Pregnancy Loss Prevention and Therapy, Research center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, 4 Acad. Oparin St., Moscow, 117997, Russia, tel: 8 (495) 438-14-77, e-mail: tetrauly@mail.ru.

Trophimov Dmitrii Y., Dr. Sci. (Biol.), Head of Laboratory of molecular genetic methods, Research center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, 4 Acad. Oparin St., Moscow, 117997, Russia, tel: 8 (495) 438-49-51, e-mail: d_trofimov@oparina4.ru.

We have identified the levels of total and cell-free fetal DNA in dynamics in women with threatening and habitual miscarriage, and in cases of spontaneous abortion up to 22 weeks. The identification of the levels of total and cellfree fetal DNA was carried out with a two-week interval beginning with the 6th and up to the 20th week of pregnancy. The levels of DNA were compared with those of women with uncomplicated pregnancy. We have found the correlation between clinical manifestations of a threatening miscarriage and a beginning abortion with high levels of total and cellfree fetal DNA regardless of the patient's anamnesis. It has also been found that in women with terminated pregnancy the levels of total and cell-free fetal DNA are statistically significantly higher than in healthy pregnant women. This may serve as a predictor of fetal development arrest.

Key words: cell-free fetal DNA, recurrent miscarriage, aneuploidy.

Введение. Привычный выкидыш является одной из сложных проблем современного акушерства [1, 4]. Реализация репродуктивной функции в более старшем возрасте, полиэтиологичность данной патологии [2, 3], усугубление нарушений с увеличением числа неудач создают предпосылки к формированию синдрома привычной потери плода, который встречается у 3-5 % супружеских пар. Поиск неинвазивных предикторов успешного развития беременности у данной категории пациенток является актуальной задачей.

В последние годы внедрение методов, основанных на выделении общей и эмбриональной ДНК, открыло новую эру в неинвазивной пренатальной диагностике как в исследовательском, так и в практическом направлении [7, 9, 16, 17]. Известно, что ДНК плазмы является маркером клеточной гибели, поэтому очевидно, что повышенный уровень свободной эмбриональной ДНК может быть результатом некроза и апоптоза клеток плаценты [11, 19]. Основным лимитирующим фактором в подобных исследованиях является сложность идентификации сэ-ДНК, отличие эмбриональной ДНК от материнской.

Обозначенная проблема решаема у женщин, вынашивающих плод мужского пола, в связи с наличием в кровотоке беременной маркеров Y хромосомы - SRY и DYS-14 [5]. Большинство предыдущих исследований, посвященных прогнозированию неблагоприятных исходов беременностей по высоким уровням сэ-ДНК, касались именно беременных, вынашивающих плод мужского пола [6, 8, 10]. Определение уровня сэ-ДНК в периферической крови матери независимо от пола плода является актуальной задачей, направленной на поиск предикторов успешного развития беременности [12, 13,

14].

Цель: сравнительный анализ уровней сэ-ДНК в периферической крови женщин с самопроизвольным выкидышем и успешным исходом беременности в сроках до 22 недель.

Материалы и методы исследования. Проведено проспективное когортное исследование 57 беременных женщин. Основную группу составили 33 женщины с привычным выкидышем, контрольную - 24 беременные с неотягощенным акушерским и гинекологическим анамнезом.

Пациенток основной и контрольной групп включали в исследование в сроках 6 недель беременности от первого дня последней менструации.

Критериями включения в основную группу являлись: нормальный кариотип партнеров, привычный выкидыш (наличие в анамнезе 3 и более потерь беременности до 22 недель от одного и того же партнера или 2 и более потерь, если в каждом случае был подтвержден нормальный кариотип плода), информированное согласие женщины на проведение исследования. Критерии исключения: многоплодная беременность, наличие генетических факторов привычных потерь беременности, анатомические причины привычного выкидыша, наличие хронических инфекционных, онкологических, системных аутоиммунных заболеваний, ожирение (индекс массы тела (ИМТ) более 30).

Контрольную группу составили подписавшие информированное согласие на проведение исследования женщины с физиологическим течением беременности на момент обследования, не отягощенным акушерским и гинекологическим анамнезом. Критериями исключения явились: многоплод-

ная беременность, наличие хронических инфекционно-воспалительных, онкологических, системных аутоиммунных заболеваний, тяжелые экстрагенитальные заболевания, ожирение (ИМТ более 30).

Подобные критерии исключения продиктованы ограничениями метода определения сэ-ДНК, к которым относятся:

• ожирение беременной, когда фракция сэ-ДНК является крайне низкой;

• исследование при дихориальной двойне, когда интерпретация данных затруднена, так как уровни сэ-ДНК значимо выше и несопоставимы с уровнем при одноплодной беременности;

• материнские факторы, например, онкологическое заболевание, сопровождающееся массивным выбросом опухолевой ДНК.

Исследование проводили у пациенток основной и контрольной групп, начиная со срока 6 недель беременности с интервалом 2 недели до 22 недель беременности.

Определение сэ-ДНК независимо от пола плода осуществляли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (real time PCR). В качестве «мишени» выбирали участки генома, содержащие делеционные полиморфизмы, что позволяло отличить геном плода от генома беременной женщины на основании отцовских полиморфизмов.

Полученные данные обработаны с помощью компьютерной программы Statistica 8.0 (Stat Soft, Inc., США). Для всех количественных показателей определены: среднее значение (M), стандартное отклонение (5), ошибка среднего (m), медиана (Ме), интерквартильный размах, а для номинальных значений рассчитаны частоты (%).

Результаты исследования проверены на соответствие нормальному распределению с помощью критерия Шапиро-Уилка. Поскольку данные не были распределены нормально, то при сравнении средних значений между группами применяли непараметрический аналог t-критерия Стьюдента -U-критерий Манна-Уитни. Различия считались статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение. Самым частым осложнением в I триместре у женщин основной группы стал угрожающий и начавшийся выкидыш, подтвержденный данными опроса, осмотра, эхографического исследования. Диагноз «угрожающий выкидыш» выставляли только в случае наличия кровянистых выделений из половых путей, что свидетельствовало о начавшейся отслойке хориона формирующейся плаценты.

Во всех случаях угрожающего/начавшегося выкидыша проводили госпитализацию пациенток в ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России. Во 2-м отделении акушерской патологии беременности назначали терапию, направленную на пролонгирование беременности и включающую в себя гормональные, гемостатические и спазмолитические препараты.

При обработке всех полученных данных выявлено, что у пациенток с привычным и начавшимся выкидышем уровень общей ДНК был несколько выше в сроке 12 недель и составил 47,0 х 103 (25,8-81,6) копий/мл по сравнению с 18,4 х 103 (11,8-57,6) копий/мл (p = 0,0774), что может отражать общие апоптотические процессы в организме в представленном сроке беременности.

С другой стороны, при неосложненном течении первой половины беременности у женщин с привычным выкидышем и здоровых беременных получены достоверные различия в уровнях сэ-ДНК.

При отсутствии клинической картины угрожающего выкидыша, тем не менее, уровни сэ-ДНК пациенток с неоднократными потерями беременностей значительно превышают аналогичный показатель здоровых беременных женщин в сроках 12 и 14 недель (табл. 1).

Таблица 1

Сравнительный анализ уровней общей и сэ-ДНК в группах женщин без угрожающего выкидыша

Недели Уровни общей ДНК Уровни сэ-ДНК

Привычный выкидыш (n = 12) копии/мл X 103 Quartik Контрольная группа (n = 11) копии/мл X 103 Quartile P критерий Манна-Уитни Привычный выкидыш (n = 12) копии/мл X 103 Quartile Контрольная группа (n = 11) копии/мл X 103 Quartile P критерий Манна-Уитни

6 13,9 (5,4-22,2) 5,4 (4,1-11,8) 0,1407 0,43 (0,18-1,03) 0,16 (0,08-0,39) 0,7751

8 17,8 (13,8-20,4) 10,6 (8,6-11,3) 0,0472 0,17 (0,04-0,36) 0,12 (0,06-0,23) 0,6242

10 22,8 (20,3-25,5) 10,3 (6,3-12,0) 0,0209 0,42 (0,24-0,60) 0,10 (0,07-0,16) 0,1742

12 11,5 (10,3-13,6) 10,0 (7,1-15,4) 0,4168 0,34 (0,23-0,53) 0,13 (0,07-0,37) 0,0416

14 28,6 (19,4-30,6) 6,6 (2,8-9,3) 0,0062 0,34 (0,21-0,45) 0,09 (0,07-0,14) 0,0098

В ходе работы проанализированы исходы беременностей у женщин исследуемых групп, выяв-

лено 7 самопроизвольных потерь (все пациентки с привычным выкидышем из основной группы). Прерываний беременностей по медицинским показаниям в группах не было.

В 5 (15,2 %) наблюдениях отмечены самопроизвольные выкидыши до 12 недель, во всех случаях по типу неразвивающихся беременностей. При этом проведено инструментальное удаление неразвивающегося плодного яйца с дальнейшим кариотипированием абортуса. Ниже указаны результаты кариотипирования и уровни общей и сэ-ДНК (табл. 2).

Как следует из представленных данных, в 4 из 5 случаев неразвивающихся беременностей отмечены хромосомные нарушения - анеуплоидии - трисомия 18, трисомия 16 и трисомия 21, а также в одном наблюдении - триплоидия (кариотип абортуса 69,ХХУ). У 2 (9,0 %) пациенток отмечены потери беременности в 16-17 недель. В одном случае беременность осложнилась хориоамнионитом, вследствие чего произошло излитие околоплодных вод, в другом случае - в сроке 17 недель случилось излитие околоплодных вод без предшествующих клинических проявлений. В обоих наблюдениях провести кариотипирование не удалось.

Таблица 2

Уровни общей и сэ-ДНК у женщин с привычным выкидышем и прервавшейся беременностью

Код пациентки Срок беременности при заборе периферической крови Общая ДНК (копий/мл) Сэ-ДНК (копий/мл) Исход беременности Кариотип абортуса

Е 6 недель 8 недель 10 недель 30523 138855 36154 2033,0 257,69 Неразвивающаяся беременность 9-10 недель, размеры эмбриона 7-8 недель 69, ХХУ

И 6 недель 8 недель 10 недель 10000 7127,5 6017,44 163,92 42,08 109,32 Неразвивающаяся беременность в 9-10 недель, размеры эмбриона 7 недель 47, ХУ+16

Ж 6 недель 15852 168,68 Неразвивающаяся беременность в 6 недель 46, ХУ

К 6 недель 158525 292 Неразвивающаяся беременность в 7 недель 47, ХУ, +18

З 6 недель 27617 192 Неразвивающаяся беременность в 7 недель 47, ХХ+21

Отдельно проанализированы уровни общей ДНК у 7 женщин с потерями беременностей и у 7 женщин контрольной группы с самопроизвольными родами (рис.).

Копий/мл 45000 40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 0

10

12

14 Недели

6

8

■ Неразвивающаяся беременность □ Контрольная группа

Рис. Сравнительный анализ средних показателей уровней общей ДНК в динамике у женщин с потерями на ранних сроках и женщин контрольной группы

Осуществление сравнительного анализа позволило сделать вывод о том, что уровни общей ДНК достоверно отличались у женщин с неразвивающимися беременностями от пациенток, беременность которых была пролонгирована до срока своевременных родов. Возможно, дальнейшие исследования в данной области позволят предложить уровни общей и сэ-ДНК как возможный прогностический критерий пролонгирования беременности у женщин с привычным выкидышем.

Высокие значения уровней сэ-ДНК в I триместре беременности являются неблагоприятным прогностическим фактором ранних гестационных осложнений (самопроизвольного прерывания беременности, начавшегося выкидыша, анеуплоидии) [15, 18, 20] и должны служить основанием для расширенного клинико-лабораторного обследования, углубленного мониторинга и подбора терапии.

Заключение. Результаты проведенного исследования подчеркивают важность изучения уровней общей и сэ-ДНК в скрининговые сроки 12 и 20 недель для прогнозирования акушерских осложнений у групп беременных высокого риска. Высокие уровни сэ-ДНК у женщин с привычным выкидышем и отсутствием клинических проявлений угрозы прерывания беременности ассоциированы с последующим развитием плацента-ассоциированных осложнений (плацентарной недостаточности, элективного досрочного родоразрешения, преэклампсии).

Требуются дальнейшие исследования в данной области для определения возможностей клинического применения описанных методов для диагностики поздних гестационных осложнений и возможностей их применения в клинической практике.

Список литературы

1. Акушерство : национальное руководство / под ред. Э. К. Айламазяна, В. И. Кулакова,

B. Е. Радзинского, Г. М. Савельевой. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 1218 с.

2. Зайнолова, С. А. Плацентарная недостаточность - вопросы этиопатогенеза, диагностики, клиники и терапии / С. А. Зайналова, С. П. Синчихин, Л. В. Степанян // Астраханский медицинский журнал. - 2014. - Т. 9, № 2. - С. 15-23.

3. Макаров, О. В. Оценка цитокинового профиля при химиосенсибилизированной фотомодификации крови у пациенток с привычным невынашиванием беременности вирусного генеза в анамнезе / О. В. Макаров,

A. З. Хашукоева, О. А. Свитич, Э. А. Маркова, С. А. Хлынова // Акушерство и гинекология. - 2014. - № 8. -

C. 19-26.

4. Сидельникова, В. М. Невынашивание беременности / В. М. Сидельникова, Г. Т. Сухих. - М. : Медицинское информационное агенство, 2010. - 536 с.

5. Федорова, Н. И. Свободная эмбриональная ДНК в плазме крови как предиктор самопроизвольных потерь беременности у женщин с привычным выкидышем / Н. И. Федорова, Н. К. Тетруашвили, Л. З. Файзуллин,

B. Н. Карнаухов // Акушерство и гинекология. - 2012. - № 6. - С. 4-8.

6. Chitty, L. Prospective register of outcomes of free fetal DNA testing (PROOF) - results of the first year's audit / L. Chitty, G. Daniels, K. Finning // J. Med. Genetic. - 2007. - Vol. 44. - P. 28.

7. Chiu, R. W. Non-invasive prenatal assessment of trisomy 21 by multiplexed maternal plasma DNA sequencing: large scale validity study / R. W. Chiu, R. Akolekar, Y. W. Zheng, T. Y. Leung, H. Sun, K. C. Chan, F. M. Lun, A. T. Go, E. T. Lau, W. W. To, W. C. Leung, R. Y. Tang, S. K. Au-Yeung, H. Lam, Y. Y. Kung, X. Zhang, J. M. van Vugt, R. Minekawa, M. H. Tang, J. Wang, C. B. Oudejans, T. K. Lau, K. H. Nicolaides, Y. M. Lo // BMJ. - 2011. -Vol. 342. - P. 7401.

8. Fernández-Martínez, F. J. Non-invasive fetal sex determination in maternal plasma : a prospective feasibility study / F. J. Fernández-Martínez, A. Galindo, A. Garcia-Burguillo, C. Vargas-Gallego, N. Nogués, M. Moreno-García, A. Moreno-Izquierdo // Genetic Medicine. - 2012. - Vol. 14, № 1. - P. 101-106.

9. Gil, M. Implementation of maternal blood cell-free DNA testing in early screening for aneuploidies / M. Gil, M. S. Quezada, B. Bregant, M. Ferraro, K. H. Nicolaides // Ultrasound Obstet Gynecol. - 2013. - Vol. 42, № 1. -P. 34-40.

10. Hill, M. Incremental cost of non-invasive prenatal diagnosis versus invasive prenatal diagnosis of fetal sex in England / M. Hill, S. Taffinder, L. S. Chitty, S. Morris // Prenatal. Diagnostic. - 2011. - Vol. 31, № 3. - P. 267-273.

11. Hromadnikova, I. Quantification of fetal and total circulatory DNA in maternal plasma samples before and after size fractionation by agarose gel electrophoresis / I. Hromadnikova, L. Zejskova, J. Doucha, D. Codl // DNA Cell Biology. - 2006. - Vol. 25, № 11. - P. 635-640.

12. Jakobsen, T. R. High levels of fetal DNA are associated with increased risk of spontaneous preterm delivery / T. R. Jakobsen, F. B. Clausen, L. Rode, M. H. Dziegiel, A. Tabor // Prenat. Diagn. - 2012. - Vol. 32, № 9. -P. 840-845.

13. Lim, J. H. Cell-free fetal DNA and cell-free total DNA levels in spontaneous abortion with fetal chromosomal aneuploidy / J. H. Lim, M. H. Kim, Y. J. Han, E. Lee da, S. Y. Park, J. Y. Han, M. Y. Kim, H. M. Ryu// PLoS One. - 2013. - Vol. 8, № 2 - Р. e56787.

14. Martin, A. Can the quantity of cell-free fetal DNA predict preeclampsia : asystematic review / A. Martin, I. Krishna, B. Martina ., A. Samuel // Prenatal Diagnostic. - 2014. - Vol. 34, № 7. - P. 685-691.

15. Miura, K. Cell-free DNA is more sensitive than cell-free mRNA as a marker for evaluation of fetal-maternal hemorrhage / K. Miura, K. Yoshiura, S. Miura, K. Yamasaki, D. Nakayama, T. Ishimaru, J. Wagstaff, N. Niikawa, H. Masuzaki // Clin. Chem. - 2006. - Vol. 52, № 11. - P. 2121-2123.

16. Palomaki, G. E. DNA sequencing of maternal plasma reliably identifies trisomy 18 and trisomy 13 as well as Down syndrome : an international collaborative study / G. E. Palomaki, C. Deciu, E. M. Kloza, G. M. Lambert-Messerlian, J. E. Haddow, L. M. Neveux, M. Ehrich, D. van den Boom, A. T. Bombard, W. W. Grody, S. F. Nelson, J. A. Canick // Genet Med. - 2012. - Vol. 14, № 3. - P. 296-305.

17. Porter, T. F. Evidence-based care of recurrent miscarriage / T. F. Porter, J. R. Scott // Best Practice Res Clinal Obstetrics Gynaecology. - 2005. - Vol. 19, №. 1. - P. 85-101.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

18. Sekizawa, A. Increased cell-free fetal DNA in plasma of two women with invasive placenta / A. Sekizawa, M. Jimbo, H. Saito, M. Iwasaki, Y. Sugito, Y. Yukimoto, J. Otsuka, T. Okai // Clin. Chem. - 2002. - Vol. 48, № 2. -P. 353-354.

19. Wang, S. J. Value of detection of cell-free fetal DNA in maternal plasma in the prenatal diagnosis of chromosomal abnormalities / S. J. Wang, Z. Y. Gao, Y. P. Lu, Y. L. Li, Y. Q. You, L. W. Zhang, L. X. Wang, H. Xu // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. - 2012. - Vol. 47, № 11. - P. 808-812.

20. Zeybek, Y. G. Clinical evaluations of cell-free fetal DNA quantities in preeclamptic pregnancies / Y. G. Zeybek, T. Gunel, A. Benian, K. Aydinli, S. Kaleli // J. Obstet. Gynaecol. Res. - 2013. - Vol. 39, № 3. -P. 632-640.

References

1. Akusherstvo : natsional'noe rukovodstvo [Obstetrics. National leadership]. Ed. E. K. Aylamazyan, V. I. Kulakov, V. E. Radzinskii, G. M. Saveleva. Moscow, GEOTAR-Media, 2009, 1218 p.

2. Zaynolova S. A., Sinichikhin S. P., Stepanyan L. V. Platsentarnaya nedostatochnost' - voprosy etiopato-geneza, diagnostiki, kliniki i terapii [Placental insufficiency - problems of etiopathogenesis, diagnosis, clinic and treatment]. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal [Astrakhan Medical Journal], 2014, vol. 9, no. 2, pp. 15-23.

3. Makarov O. V., Khashukoeva A. Z., Svitich O. A., Markova E. A., Khlynova S. A. Otsenka tsitokinovogo profilya pri khimiosensibilizirovannoy fotomodifikatsii krovi u patsientok s privychnym nevynashivaniem beremennos-ti virusnogo geneza v anamneze [Evaluation of cytokine profile in chemosensitizing blood photomodification uses in women with recurrent pregnancy loss pregnancy viral origins in history]. Akusherstvo i ginekologiya [Obstetrics and gynecology], 2014, no. 8, pp. 19-26.

4. Sidel'nikova V. M., Sukhikh G. T. Nevynashivanie beremennosti [Recurrent miscarriage]. Moscow, Med-itsinskoe Informatsionnoe Agentstvo [Medical Information Agency], 2010, 536 p.

5. Fedorova N. I., Tetruashvili N. K., Fayzullin L. Z., Karnaukh V. N. Svobodnaya embrional'naya DNK v plazme krovi kak prediktor samoproizvol'nykh poter' beremennosti u zhenshchin s privychnym vykidyshem [Determination of free embryonic DNA in the plasma of pregnant women for noninvasive prenatal genetic diagnosis] Akusherstvo i ginekologiya [Obstetrics and Gynecology], 2012, no. 6, pp. 4-8.

6. Chitty L., Daniels G., Finning K. Prospective register of outcomes of free fetal DNA testing (PROOF) - results of the first year's audit. J. Med. Genetic, 2007, vol. 44, pp. 28.

7. Chiu R. W., Akolekar R., Zheng Y. W., Leung T. Y., Sun H., Chan K. C., Lun F. M., Go A. T., Lau E. T., To W. W., Leung W. C., Tang R. Y., Au-Yeung S. K., Lam H., Kung Y. Y., Zhang X., van Vugt J. M., Minekawa R., Tang M. H., Wang J., Oudejans C. B., Lau T. K., Nicolaides K. H., Lo Y. M. Non-invasive prenatal assessment of trisomy 21 by multiplexed maternal plasma DNA sequencing: large scale validity study. BMJ, 2011, vol. 342, pp. 7401.

8. Fernández-Martínez F. J., Galindo A., Garcia-Burguillo A., Vargas-Gallego C., Nogués N., Moreno-García M., Moreno-Izquierdo A. Non-invasive fetal sex determination in maternal plasma: a prospective feasibility study. Genetic Medicine, 2012, vol. 14, no. 1, pp. 101-106.

9. Gil M., Quezada M. S., Bregant B., Ferraro M., Nicolaides K. H. Implementation of maternal blood cell-free DNA testing in early screening for aneuploidies. Ultrasound Obstet Gynecol., 2013, vol. 42, no. 1, pp. 34-40.

10. Hill M., Taffinder S., Chitty L. S., Morris S. Incremental cost of non-invasive prenatal diagnosis versus invasive prenatal diagnosis of fetal sex in England. Prenatal. Diagnostic., 2011, vol. 31, no. 3, pp. 267-273.

11. Hromadnikova I., Zejskova L., Doucha J., Codl D. Quantification of fetal and total circulatory DNA in maternal plasma samples before and after size fractionation by agarose gel electrophoresis. DNA Cell Biology. - 2006, vol. 25, no. 11, pp. 635-640.

12. Jakobsen T. R., Clausen F. B., Rode L., Dziegiel M. H., Tabor A. High levels of fetal DNA are associated with increased risk of spontaneous preterm delivery. Prenat. Diagn., 2012, vol. 32, no. 9, pp. 840-845.

13. Lim J. H., Kim M. H., Han Y. J., Lee da E., Park S. Y., Han J. Y., Kim M. Y., Ryu H. M. Cell-free fetal DNA and cell-free total DNA levels in spontaneous abortion with fetal chromosomal aneuploidy. PLoS One., 2013, vol. 8, no. 2, pp. e56787.

14. Martin A., Krishna I., Martina B., Samuel A. Can the quantity of cell-free fetal DNA predict preeclampsia: asystematic review. Prenatal Diagnostic, 2014, vol. 34, no. 7, pp. 685-691.

15. Miura K., Yoshiura K., Miura S., Yamasaki K., Nakayama D., Ishimaru T., Wagstaff J., Niikawa N., Masu-zaki H. Cell-free DNA is more sensitive than cell-free mRNA as a marker for evaluation of fetal-maternal hemorrhage. Clin. Chem., 2006, vol. 52, no. 11, рр. 2121-2123.

16. Palomaki G. E., Deciu C., Kloza E. M., Lambert-Messerlian G. M., Haddow J. E., Neveux L. M., Ehrich M., van den Boom D., Bombard A. T., Grody W. W., Nelson S. F., Canick J. A. DNA sequencing of maternal plasma reliably identifies trisomy 18 and trisomy 13 as well as Down syndrome: an international collaborative study. Genet Med., 2012, vol. 14, no. 3, рр. 296-305.

17. Porter T. F., Scott J. R. Evidence-based care of recurrent miscarriage. Best Practice Res Clinal Obstetrics Gynaecology, 2005, vol. 19, no. 1, рр. 85-101

18. Sekizawa A., Jimbo M., Saito H., Iwasaki M., Sugito Y., Yukimoto Y., Otsuka J., Okai T. Increased cellfree fetal DNA in plasma of two women with invasive placenta. Clin. Chem, 2002, vol. 48, no. 2, рр. 353-354.

19. Wang S. J., Gao Z. Y., Lu Y. P., Li Y. L., You Y. Q Zhang L. W., Wang L. X., Xu H. Value of detection of cell-free fetal DNA in maternal plasma in the prenatal diagnosis of chromosomal abnormalities. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi, 2012, vol. 47, no. 11, рр. 808-812.

20. Zeybek Y. G., Günel T., Benian A., Aydinli K., Kaleli S. Clinical evaluations of cell-free fetal DNA quantities in preeclamptic pregnancies. J. Obstet. Gynaecol. Res., 2013, vol. 39, no. 3, рр. 632-640.

УДК 616.126-002-07-08-089 Медико-биологические науки

РЕФЕРЕНТНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ АНТИТРОМБИНА III ПРИ ПРИМЕНЕНИИ АВТОМАТИЧЕСКОГО КОАГУЛОМЕТРА «ACL 9000»

Петрова Ольга Владимировна, кандидат медицинских наук, заведующая клинико-диагностической лабораторией, ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 31-11-38, e-mail: students_asma@mail.ru.

Уртаева Зарина Амурхановна, кандидат медицинских наук, врач клинической лабораторной диагностики, клинико-диагностическая лаборатория, ФГБУ «Федеральный центр сердечнососудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 31-11-38, e-mail: fcssh@astra-cardio.ru.

Шашин Сергей Александрович, доктор медицинских наук, сердечно-сосудистый хирург, ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 31-10-00, e-mail: fcssh@astra-cardio.ru; профессор кафедры сердечно-сосудистой хирургии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 44-35-18, e-mail: agma@astranet.ru.

Панова Елена Владимировна, врач клинической лабораторной диагностики, клинико-диагностическая лаборатория, ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 49-58-34, e-mail: fcssh@astra-cardio.ru.

Гордеева Ольга Борисовна, кандидат медицинских наук, врач-педиатр, старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной иммунологии и вирусологии, ФГБУ «Научный центр здоровья детей» РАМН, НИИ педиатрии, Россия, 119991, г. Москва, Ломоносовский проспект, д. 2/62, тел.: (499) 134-03-59, е-mail: obr@yandex.ru.

Кадыкова Антонина Валерьевна, заместитель главного врача по лечебной части, ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 49-58-34, e-mail: fcssh@astra-cardio.ru.

Тарасов Дмитрий Георгиевич, кандидат медицинских наук, главный врач, ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России, Россия, 414011, г. Астрахань, ул. Покровская роща, д. 4, тел.: (8512) 49-58-34, e-mail: fcssh@astra-cardio.ru.

Зарубежные и отечественные профессиональные сообщества специалистов по лабораторной диагностике рекомендуют каждой лаборатории разработать или подтвердить имеющиеся в литературе референтные интервалы для каждого лабораторного показателя. Учитывая важное значение антитромбина III в антикоагулянтной

Free fetal DNA in spontaneous early pregnancy losses in women with habitual abortion

Текст научной работы на тему «Свободная эмбриональная ДНК при самопроизвольных ранних потерях беременности у женщин с привычным выкидышем»