CC BY
41
Vlizlo, V. V. (2012) Laboratorni metodv doslidzhen u biologivi, tvarv'nnv'cztvi ta veterv'narnii medv'cv'ni : dovidnvk / V. V. Vlizlo, R. S. Fedoruk, I. B. Ratych ta in.; za red. V. V. Vlizla. L'viv : Spolom, 764 (in Ukrainian). Ershov V. S. (1985). Problemv immuniteta i allergii pri gel'mintodozah / Probl. vet. immunologii.
- M. Agropromizdat, 17-22. (in Russian). Lucenko, L. I., Mvhajlova, S. A., Pavlenko, S. V. (2003). Kompleksne zastosuvannja antvgel'mintvka Prazepitynu v pojednanni z imunostvmuljatoramv za degel'mintvzacii' sobak / Zb. nauk prac' Lugans'kogo nac.. agr.. un-tu. 31/43, 349 - 352. (in Ukrainian). Caprilova, S. V., Rodinova, R. A. (2008). Rastoropsha pjatnistaja - himicheskij sostav, standartizacija, primenenie / Vestnik farmacii. 3. 41, 42-104. (in Russian).
Стаття надшшла до редакци 30.04.2016
УДК 619 : 618. 11-(075.8)
Стравський Я. С., д. вет. н. ([email protected]) ©
Тернотльська дослгдна станщя 1нституту ветеринарног медицины НААН Украгни Стефаник В. Ю., д. вет. н., професор Льегеський нащональний университет еетеринарног медицини та бготехнологш iмет С. З. Гжицького Нижник О. В., астрант 1нститут еетеринарног медицини НААН Украгни. Резшченко Л. С., к. б. н., 1нститут бюкологдног хгмИ iм. Ф. Д. Овчаренка НААН Украгни Джуланов М. Н., зав, кафедрою xipyprii', акушерства та бютехнологп ввдтворення
тварин
Казахський нацюнальний аграрний утверситет
СУПОЗИТОРП 13 ВМ1СТОМ НАНЧАСТИНОК КУПРУМУ В ПРОФ1ЛАКТИЦ1 ШСЛЮТЕЛЬНО! ПАТОЛОГП КОР1В
Створено експериментальну субстанцт i3 вмгстом наночастинок Купруму яку було введено у супозиторп на полiетиленоксиднiй основi. Виготовлеш супозиторп задано коровам внутрШньоматково тсля вiдходження по^ду. Встановлено, що тсля застосування коровам супозиторив з наночастинками Купруму в гх органiзмi тдвищуеться вмют iмуноглобулiнiв классу А в 5,4 рази (р<0,001), вмют iмуноглобулiнiв класу G в 2.1 рази (р<0,001) та вiдбуваeться зниження вмюту iмуноглобулiнiв класу Мв 2рази (р<0,01), що позитивно впливае на перебiг тсляотельного перiоду та сприяе скороченю сервсперюду до 62,5 ± 2,1 дiб при тдекс оиментня 1,5.
Ключов1 слова: корова, отел, супозиторп, наночастинки Купруму, iмуноглобулiни, сервiс-перiод.
УДК 619: 618. 11-(075.8)
Стравський Я. С., д. вет. н.
Тернопольская опытная станция Института ветеринарной медицины НААН Украины
Стефанык В. Ю., д. вет. н., профессор Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С. З. Гжицкого Нижник А. В., аспирант Институт ветеринарной медицины НААН Украины. Резниченко Л. С., к. б. н., Институт биоколлоидной химии им. Ф. Д. Овчаренко НААН Украины Джуланов М. Н., зав, кафедрой хирургии, акушерства и биотехнологии воспроизводства животных Казахский национальный аграрный университет
© Стравський Я. С., Стефаник В. Ю., Нижник О. В., Резшченко Л. С., Джуланов М. Н., 2016
230
СУППОЗИТОРИИ С СОДЕРЖАНИЕМ НАНОЧАСТИЦ КУПРУМА В ПРОФИЛАКТИКЕ ПОСЛЕРОДОВОЙ ПАТОЛОГИИ КОРОВ
Создано експериментальную субстанцию с содержанием наночастиц Купрума которую ввели в состав суппозиториев на полиетиленоксидной основе. Коровам, после отхождения последа, ввели суппозитории с содержанием наночастиц Купрума. Установлено, что после введения коровам в матку суппозиториев с содержанием наночастиц Купрума в их организме повышается содержание иммуноглобулинов класса А в 5,4 раза (р<0,001), содержание иммуноглобулинов класса G в 2,1 раза (р<0,001) и снижается содержание иммуноглобулинов классаМв 2раза (р<0,01), что положительно влияет на течение послеродового периода и способствует сокращению сервис-периода до 62,5 ± 2,1 суток при индексе осеменения 1,5.
Ключевые слова: корова, отел, суппозитории с наночастицами Купрума, иммуноглобулины, сервис-период.
UDC 619: 618. 11-(075.8)
Stravskyy Y. S., DVM ([email protected]) 1 © Ternopil Experimental Station of the Institute of Veterinary Medicine NAAS Ukraine
Stefanik V. Y., DVM, Professor, Head Department of Obstetrics, Gynecology and Biotechnology of animal reproduction named after G.V. Zvereva Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S. Z. Gzhytsky Nyzhnyk O. V., postgraduate student Institute of Veterinary Medicine of NAAS Ukraine Reznichenko L. S., PhD,
Institute of Biocolloidal Chemistry named after F.D. Ovcharenko NAAS Ukraine Dzhulanov M. N., Head, Department of Surgery, Obstetrics and Biotechnology of animal
reproduction Kazakh National Agrarian University
PREVENTION OF POSTPARTUM COWS BY SUPPOSITORIES WITH COPPER
NANOPARTICLES
There has been made experimental substance containing copper nanoparticles, suppositories based on polyethylene oxide. Suppositories were injected intrauterine to cows after calving. Findings obtained that after using suppositories with copper nanoparticles there were increase of immunoglobulin class A in 5,4 (р<0,001), increase of immunoglobulin G in 2,1 (р<0,001), and a decrease of immunoglobulin M 2 (р<0,01), that have positive affect in the postpartum period and reduce service period to 62,5 ± 2,1 days at insemination index 1,5.
Key words: cow, suppositories with nanoparticles Cuprum, immunoglobulins, service
period.
О^мкий розвиток нанотехнологш nproBiB до i'x широкого застосування в pi3HHx галузях науки i техшки. Застосування наночасток обумовлене, в основному, i'x фiзико-xiMi4HM^ властивостями, представленими об'ектами pозмipом 1-100 нм.
Встановлено [1, 2], що наночастинки деяких металiв (золото, сpiбло) можуть легко пpоxодити плазматичш мембpани кттин, iншi (AI2O3, TiO2 i Fe2O4), навпаки, накопичуються на i'x повеpxнi [3, 4], а деяк з них володтоть бага^ю- i цитотоксичною дieю [2, 3].
Застосування класу комплексних сполук-наноаквахелати в лшувальнш ^акти^ е альтеpнативою викоpистання антибютишв у теpапii' пpодуктивниx тваpин, що попеpеджуe prom виникнення антибютикообумовлених патологш у споживачiв тваpинноi' пpодукцii' [5].
На вiдмiну ввд антибютишв i фтоpxiнолонiв у 91 % випадшв збудники маститу коpiв були чутливими до комплексу наноаквахелапв металiв [6]. ^и лiкуваннi коpiв, xвоpиx на мастит, наноаквахелатами металiв пеpеxiд запалення у пpиxовану фоpму
231
вiдмiчали тшьки у 14,8 % випадшв, а застосування ïx з профшактичною метою попереджувало виникнення маститу в 93-95 % випадшв, при затриманнi по^ду знижувало заxворюванiсть корiв ендометритом на 30 %, тривалють iнволюцiï матки скорочувалася на 4,6 доби, а сервю-перюд на 15,2 доби [6, 7].
Отже, розробка засобiв, де наночастинки металiв володiють широким спектром дп, високою бiологiчною активнiстю та низькою токсичнiстю е актуальною.
Метою роботи. Розробка способу отримання наночастинок металiв для створення супозиторiïв iз вмiстом нанометалiв i дослiдження ïx впливу на гуморальну ланку iмунноï системи органiзму корiв та перебпг пiсляотельного перiоду.
Матерiали i методи дослщжень: Дослiдження проведено на коровах украшсько1' молочно1' чорно-рябо1' породи належних ТОВ «АгроПродсервю 1нвест» Терноп1льсько1' обласп.
На першому етапi роботи було створено експерементальну субстанщю наночастинок Купруму. Синтез наночасток Купруму (CuNP) проведено методом xiмiчноï конденсацiï у водному середовищi за оригiнальним протоколом, розробленим в 1нституп бiоколодноï xiмiï iм. Ф. Д. Овчаренка НАН Украши.
Розмiр i форму наночастинок Купруму визначали методом трансмiсiйноï електронно1' мшроскопи( трансмiсiйний електроний мiкроскоп JEM-1230, «JEOI LTD») Японiя. Хiмiчний склад наночастинок Купруму аналiзували шляхом рентгеноструктурного мiкроаналiзу методом енергодисперсiйноï рентгенiвськоï спектроскопiï (енергодисперайний спектрометр 1ЕТЕМ 250 з детектором-х-Мах 80, Oxford instrument Analitical, Великобританыя для трансмiсiйного електроного мiкроскопа IEM-1230 «JEOL LTD», Японiя).
Субстанцл наночастинок Купруму було введено у супозиторп основою яких були полiетиленоксид - 400 i 1500.
На другому етат роботи було проведено клшчне дослвдження розроблених нами супозиторiïв iз наночастинками Купруму. На цьому етат роботи було сформовано дослвдну i контрольну групи корiв (п=10). Коровам дослвдно1' групи внутрiшньоматково, тсля ввдходження послiду, ведено два супозиторiï iз вмiстом наноаквахелату Си, а коровам контрольно!' групи препарати не застосовували.
Для проведення iмунологiчниx дослiджень у корiв дослiдноï i контрольноï груп вiдбирали кров з яремноï вени до та тсля застосування препарату. Вмют iмуноглобулiнiв класiв А, М, G визначали методом дискретного осадження, циркулюючих iмунниx комплексiв—методом преципiтацiï в 4 % розчиш полiетиленглiколю [12, 13].
У корiв дослiдноï та контрольноï групи слвдкували за перебiгом тсляродового перюду, визначали тривалiсть сервiс-перiоду i шдекс осiменiння [14].
Отриманi результати опрацьовано статистично з використанням програм Microsoft Excel i Statistika 99 Edition, дат вважалися вiрогiдними при р<0,05; р<0,01 та р<0,00115].
Результати дослщжень та ïx обговорення. Фiзико-xiмiчна характеристика експериментальноï субстанцiï наночастинок Купруму (визначення розмiру i форми частинок), проведена методом трансмiсiйноï електронноï мiкроскопiï, засвiдчила, що наночастинки мали сферичну форму та середнш розмiр 20 нм (рис.1).
При перебiгу iнфекцiйниx та запальних процесiв в живому органiзмi надзвичайно унiверсальною е гуморальна ввдповвдь яка не залежить вiд природи етiологiчного фактору та завершуеться утворенням плазматичних клiтин i синтезом специфiчниx антипл. З даних наведених у таблищ 2 видно, що тсля застосування супозиторпв з наночастинками Купруму в органiзмi корiв вмiст iмуноглобулiнiв классу А п1двищуеться в 5,4 рази (р<0,001), а вмiст iмуноглобулiнiв класу G в 2.1 рази (р<0,001). В цей же час ввдбувалося зниження вмiсту iмуноглобулiнiв класу М в 2 рази (р<0,01).
232
Ф
•1
Рис. 1. Електронно-мжроскошчне зображення експериментальноТ субстанцп наночастинок Купруму (CuNP).
Отже отриманi нами дат дають пiдставу стверджувати, що пiсля застосування супозиторпв з наночастинками Купруму в органiзмi корiв формуеться третя фаза гуморально1 iмунноl ввдповш, що позитивно впливае на шволюцл статево! системи, перебiг пiсляродового перюду та свiдчить про вiдсутнiсть запального процесу.
Таблиця 2
Вмiст iмуноглобулiнiв у кров1 кор1в до i пiсля застосування супозиторпв iз вмiстом _наночастинок Купруму , п = 10, М ± т_
Показники Групи корiв
1 група (супозиторп iз наночастинками Купруму) конрольна
1 и о-™ « 5 ч и А 0,1±0,01 0,54±0,02*** 0,07±0,01 0,08±0,01
М 1,86±0,02 0,9±0,01** 1,06±0,04 1,07±0,05
G 3,94±0,04 8,34±0,08*** 4,83±0,08 5,01±0,09
Примтка: чисельник - до введення, знаменник - тсля введення; ** р<0,01 ; *** - р<0,001; поргвняно до введення
Сервю-перюд е показником переб^ шволюцл матки та ввдновлення ввдтворно1 функци корiв пiсля отелення. З даних, наведених у таблицi 2, видно, що тсля застосування коровам супозиторпв iз вмiстом наночастинок Купруму тривалiсть сервю-перiоду скоротилась в 1,9 раза (р<0,05) при iндексi осiменiння 1,5 порiвняно до корiв контрольно1 групи.
Таблиця 2
Показники вщтворнот функцп кор1в шсля застосування супозиторпв iз _вмктом наночастинок Купруму; п = 10, М ± т_
Групи корiв Сервiс-перiод (дiб) 1ндекс осiменiння Захворювання корiв на мастит
1 група 62,5±2,1* 1,5
Контрольна 102,3±5,6 1,8
Примтка: *р<0,05; пор1вняно з контролем
233
Застосування коpовам, тсля вiдxодження по^ду, супозитоpiiв iз вмiстом наночастинок Купpуму позитивно впливае на активiзацiю гумоpальноi' ланки iмунноi' системи ix оpганiзму та ствоpюе пеpедумови до вiдновлення вiдтвоpноi' функци пiсля pодiв.
Висновки.
1. Шсля застосування коpовам супозитоpiiв з наночастинками Купpуму в i'x оpганiзмi тдвищуеться вмiст iмуноглобулiнiв классу А в 5,4 pази (p<0,001), вмiст iмуноглобулiнiв класу G в 2.1 pази (p<0,001) та ввдбуваеться зниження вмiсту iмуноглобулiнiв класу М в 2 pази (p<0,01).
2. Шсля застосування коpовам супозитоpiiв з наночастинками Купpуму тpивалiсть сеpвiс-пеpiоду скоpотилась в 1,9 pаза (p<0,05) даи iндексi осiменiння 1,5 у поpiвняннi до коpiв контpольноi гpупи.
Лггература
1. Connor E. E. Gold nanoparticles are taken up by human cells but do not cause acute cytotoxicity / E. E. Connor, J. Mwamuka, A. Gole, C. J. Murphy, M. D. Wyatt // Small. - 2005. -№ 1. - Р. 325-327.
2. Morones J. R. The bactericidal effect of silver nanoparticles / J. R. Morones, J. L. Elechiguerra, A. Camacho, K. Holt, J. B. Kouri, J. T. Ramirez, M. J. Yacaman // Nanotechnology. - 2005. - № 16 (10). - Р. 2346 - 2353.
3. Lin W. Cytotoxicity and cell membrane depolarization induced by aluminum oxide nanoparticles in human lung epithelial cells A549 / W. Lin, I. Stayton, Yu-W. Huang, X.-D. Zhou, Y. Ma // Toxicological & Environmental Chemistry. September-October 2008. - Vol. 90, № 5. -Р. 983 - 996.
4. Ankamwar B. Biocompatibility of Fe3O4nanoparticles evaluated by in vitro cytotoxicity assays using normal, glia and breast cancer cells / B. Ankamwar, T. C. Lai, J. H. Huang, R. S. Liu, M. Hsiao, C. H. Chen, Y. K. Hwu // Nanotechnology. - 2010. - № 21(7). - Р. 075102.
5. Нанотехнологи у ветеpинаpнiй медициш / В. Б. Боpисевич, Б. В. Боpисевич, В. Г. Каплуненко та in. - К.: ТОВ Наноматеpiали i нанотехнологи, 2009. - 232 с., ш.
6. Наноматеpиалы и нанотехнологии в ветеpинаpной пpактике / В. Б. Боpисевич, В. Г. Каплуненко, Н. В. Косинов [и да.] под pед. В. Б. Боpисевича, В. Г. Каплуненко. - К.: Авщена, 2012. - 512 с.
7. Жиxаpев И. В. Нанотехнологии в мдае и Удааине: даоблемы и пеpспективы / И. В. Жиxаpев, В. И. Ляшенко // Економiчний вюник Донбасу. - 2007. - № 1. - С. 117 - 145.
8. Лабоpатоpные методики для изучения состояния антиоксидантной системы оpганизма и уpовня пеpекисного окисления липидов: методические pекомендации для доктоpантов, аспиpантов, магистров, исполнителей НИР / [Сост. Н. Г. Ш^бань, Т. В. ^бач, Н. Р. Гусева и да.]. - Хаpьков: ХГМУ, 2004. - 36 с.
9. Методы ветеpинаpной клинической лабоpатоpной диагностики / [Кондpаxин И. П., Аpxипов А. В., Левченко В. И. и да.]: под pед. И. П. Кондаахина. - М.: КолосС, 2004. - 520, [4] с.
10. Методические pекомендации по даименению иммунохимических, цитологических и гистомоpфологическиx тестов для оценки иммунобиологического статуса у даупного pогатого скота / Хаpьков, 1985. - 31с.
11. Габpиелян Н. И. Одаеделение содеpжания сpеднемолекуляpныx пептидов даови даи острых фоpмаx ишемической болезни сеpдца / Н. И. Габpиеляи, В. И. Липатова // Лабоpатоpное дело. - 1984. - № 3. - С. 138-140.
12. ^иневич Ю. А. Одаеделение иммунных комплексов в даови онкологических больных / Ю. А. ^иневич, А. М. Алфеpов // Лабоpатоpиое дело. - 1981. - № 8. - С. 493- 495.
13. Методичш pекомендацii для оцшки та контролю iмунного статусу тваpии: визначення фактоpiв иеспецифiчиоi pезистеитиостi, клiтииииx i гумоpальииx меxанiзмiв iмуиiтету пpоти iифекцiйииx заxвоpювань / [Маслянко Р. П., Олексюк I. I., Падовський А. I. та т.]. - Львiв: Львiвська деpжавиа академiя ветеpииаpиоi медицини iм. С. З. Гжицького. -Львiв: ЛДАВМ iм. С. З. Гжицького, 2001. - 86, [1] с.
14. Методика акушеpской и гинекологической диспансеpизации коpов и телок / [Звеpева Г. В., Хомин С. П., Олескив В. Н. и да.]. - Львов: Львовский зовет ин-т, 1989. - 39 с.
15. Лакин Г. Ф. Биометрия / Лакин Г. Ф. - М.: Высшая школа, 1990. - 351. [1] с.
References
Connor, E. E. Mwamuka, J., Gole, A., Murphy, C. J., Wyatt, M. D. (2005). Gold nanoparticles
are taken up by human cells but do not cause acute cytotoxicity / Small. 1, 325-327.
234
Morones, J. R., Elechiguerra, J. L. , Camacho, A., Holt, K., Kouri, J. B., Ramirez, J. T., Yacaman, M. J. (2005). The bactericidal effect of silver nanoparticles / Nanotechnology. -16 (10), 2346 - 2353.
Lin, W., Stayton, I., Huang, Yu-W., Zhou, X.-D., Ma, Y. (2008). Cytotoxicity and cell membrane depolarization induced by aluminum oxide nanoparticles in human lung epithelial cells A549 / Toxicological & Environmental Chemistry. 90, 5, 983-996.
Ankamwar, B., Lai, T. C., Huang, J. H., Liu, R. S., Hsiao, M., Chen, C. H., Hwu, Y. K. (2010). Biocompatibility of Fe3O4 nanoparticles evaluated by in vitro cytotoxicity assays using normal, glia and breast cancer cells / Nanotechnology. 21(7), 075102.
Borysevych, V. B. (2009). Nanotehnologii' u veterynarnij medycyni / V. B. Boiysevych, B. V. Borysevych, V. G. Kaplunenko ta in. - K.: TOV Nanomaterialy i nanotehnologii', 232. (in Ukrainian).
Borisevich, V. B. (2012). Nanomaterialy i nanotehnologii v veterinarnoj praktike / V. B. Borisevich, V. G. Kaplunenko, N. V. Kosinov [i dr.] pod red. V. B. Borisevicha, V. G. Kaplunenko. - K.: Avicena, 512. (in Russian).
Zhiharev, I. V., Ljashenko, V. I. (2007). Nanotehnologii v mire i Ukraine: problemy i perspektivy / I. V. Zhiharev, // Ekonomichnij visnik Donbasu. 1, 117-145. (in Russian).
Shherban', N. G. (2004). Laboratornye metodiki dlja izuchenija sostojanija antioksidantnoj sistemy organizma i urovnja perekisnogo okislenija lipidov: metodicheskie rekomendacii dlja doktorantov, aspirantov, magistrov, ispolnitelej NIR / [Sost. N. G. Shherban', T. V. Gorbach, N. R. Guseva i dr.]. - Har'kov: HGMU, 36. (in Russian).
Kondrahin, I. P. (2004). Metody veterinarnoj klinicheskoj laboratornoj diagnostiki / [Kondrahin I. P., Arhipov A. V., Levchenko V. I. i dr.]: pod red. I. P. Kondrahina. - M.: KolosS, 520. (in Russian).
Metodicheskie rekomendacii po primeneniju immunohimicheskih, citologicheskih i gistomorfologicheskih testov dlja ocenki immunobiologicheskogo statusa u krupnogo rogatogo skota / Har'kov, 1985. 31. (in Russian).
Gabrieljan, N. I., Lipatova, V. I. (1984). Opredelenie soderzhanija srednemolekuljarnyh peptidov krovi pri ostryh formah ishemicheskoj bolezni serdca / Laboratornoe delo. 3, 138-140. (in Russian).
Grinevich, Ju. A., Alferov, A. M. (1981). Opredelenie immunnyh kompleksov v krovi onkologicheskih bol'nyh / Ju. A. Grinevich, // Laboratornoe delo. 8, 493- 495. (in Russian).
Masljanko, R. P. (2001). Metodychni rekomendacii' dlja ocinky ta kontrolju imunnogo statusu tvaryn: vyznachennja faktoriv nespecyfichnoi' rezystentnosti, klitynnyh i gumoral'nyh mehanizmiv imunitetu proty infekcijnyh zahvorjuvan' / [Masljanko R. P., Oleksjuk I. I., Padovs'kyj A. I. ta in.]. - L'viv: L'vivs'ka derzhavna akademija veterynarnoi' medycyny im. S. Z. Gzhyckogo. - L'viv: LDAVM im. S. Z. Gzhyc'kogo, 86. (in Ukrainian).
Zvereva, G. V. (1989). Metodika akusherskoj i ginekologicheskoj dispanserizacii korov i telok / [Zvereva G. V., Homin S. P., Oleskiv V. N. i dr.]. - L'vov: L'vovskij zovet in-t, 39. (in Russian).
Lakin, G. F. (1990). Biometrija / M.: Vysshaja shkola, 351. (in Russian).
Cmammn uaöiümna do peda^i'i 30.04.2016
UDC 577.12: 611.018.51
Gutyj B., Doc. of vet. science, professor ([email protected]) Hufrii D., Doc. of vet. science, professor, Hunchak V., Doc. of vet. science, professor, Vasiv R., PhD of vet.science, associate professor Khomyk R., PhD of vet.science, associate professor Binkevych V., PhD of vet.science, associate professor, Binkevych O., senior lecture
Vishchur V., cand.of agr.sc © Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S. Z. Gzhytskyj
MONITORING OF RATS WEIGHT AND GROWTH AFTER PROLONGED
CADMIUM TOXICOSIS
© Gutyj B., Hufrii D., Hunchak V., Vasiv R., Khomyk R., Binkevych V., Binkevych O., Vishchur V., 2016
235
