CC BY
43
8. Low-level laser (light) therapy (LLLT) in skin: stimulating, healing, restoring / P. Avci et al. // Semin Cutan Med Surg. - 2013. - Mar; 32 (1). - P. 41-52.
9. Intra-articular adhesion reduction after knee surgery in rabbits by calcium channel blockers / Y. Li et al // Med Sci Monit. - 2014. - Vol. 20. - P. 2466-2471.
10. Role of verapamil in preventing and treating hypertrophic scars and keloids / R. Wang et al. // Int Wound J. - 2015; doi: 10.1111/iwj.12455.
11. Шараев, П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови / П.Н. Шараев // Лабораторное дело. - 1990. - № 5. - С. 283-285.
12. Шараев, П.Н. Определение гиалуронидазной активности в биологических жидкостях / П.Н. Шараев, Н.С. Стрелков, В.В. Гунчев // Клиническая лабораторная диагностика. - 1996. - № 3. - С. 21-22.
Скальский Сергей Викторович, кандидат мед. наук, доцент Омского государственного медицинского университета Минздрава России (ОмГМУ); Соколова Татьяна Федоровна, доктор мед. наук, ОмГМУ; Сычев Дмитрий Алексеевич, доктор мед. наук, профессор Первого Московского государственного медицинского университета имени И.М. Сеченова; Ананичева Елена Викторовна, ассистент, [email protected], ОмГМУ.
8. Low-level laser (light) therapy (LLLT) in skin: stimulating, healing, restoring / P. Avci et al. // Semin Cutan Med Surg. - 2013. - Mar; 32 (1). - P. 41-52.
9. Intra-articular adhesion reduction after knee surgery in rabbits by calcium channel blockers / Y. Li et al // Med Sci Monit. - 2014. - Vol. 20. - P. 2466-2471.
10. Role of verapamil in preventing and treating hypertrophic scars and keloids / R. Wang et al. // Int Wound J. - 2015; doi: 10.1111/iwj.12455.
11. Sharaev, P.N. Metod opredeleniya svobodnogo i svyazannogo oksiprolina v syivorotke krovi / P.N. Sharaev // Laboratornoe delo. - 1990. - № 5. - S. 283-285.
12. Sharaev, P.N. Opredelenie gialuronidaznoy ak-tivnosti v biologicheskih zhidkostyah / P.N. Sharaev, N.S. Strelkov, V.V. Gunchev // Klinicheskaya laborator-naya diagnostika. - 1996. - № 3. - S. 21-22.
Skalsky Sergey V., Prof. Assoc, MD, PhD, Omsk State Medical University, Ministry of Public Health, Russia (OmGMU); Sokolova Tatiana F., MD, PhD, OmGMU; Sychev Dmitriy A., Prof. Assos. MD, PhD, First I.M. Sechenov Moscow State Medical University; Ananiche-va Elena V., assistant, [email protected], OmGMU.
Статья поступила в редакцию 18 марта 2016 г.
УДК 616.091.8:612.82:616.8.-009.24 ГРНТИ 68.41.33
В.В. Семченко, Е.Ю. Соколов, Н.Е. Турок, С.С. Степанов
СУДОРОЖНАЯ ГОТОВНОСТЬ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ОТДЕЛОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА БЕЛЫХ КРЫС В ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОМ ПЕРИОДЕ
Представлены результаты изучения цито- и миелоархитектоники коры головного мозга, гиппо-кампа, таламуса, миндалевидного комплекса и гипоталамуса белых крыс (п = 70) после тяжелой сочетан-ной черепно-мозговой травмы (ТСЧМТ) по Ноблу-Коллипу в течение 30 сут. Работа выполнена в морфологической лаборатории Института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского ГАУ и в ЦНИЛ Омского государственного медицинского университета. В группу I входили животные (группа сравнения, п = 25) без приступов судорожных пароксизмов, в группу II - животные (основная группа, п = 25) с различными клиническими проявлениями снижения порога судорожной готовности мозга (СГМ). Установлено, что между сроками посттравматического периода, группами и изученными отделами головного мозга имелись статистически значимые различия. Низкий порог СГМ после травмы ассоциировался с высоким содержанием реактивно измененных нейронов, дефицитом численной плотности нейронов, увеличением плотности глиальных клеток (корреляционный анализ Спирмена, логистическая регрессия). Полученные данные свидетельствовали об особенностях реакции на ТСЧМТ нейронов различных отделов головного мозга и влиянии порога СГМ после травмы на структурно-функциональное состояние нейронов.
Ключевые слова: крыса, черепно-мозговая травма, судорожная готовность мозга, цитоархитек-тоника.
©. Семченко В.В, Соколов Е.Ю., Турок Н.Е., Степанов С.С., 2016
V.V. Semchenko, E.Yu. Sokolov, N.E. Turok, S.S. Stepanov
CONVULSIVE READINESS AND STRUCTURAL-FUNCTIONAL CHANGES IN DIFFERENT PARTS OF THE BRAINS OF WHITE RATS IN THE POSTTRAUMATIC PERIOD
This article presents the results of a study of white rats (n = 70) cyto- and myeloarchitectonics of their cerebral cortex, hippocampus, thalamus, amygdaloid complex and hypothalamus after severe craniocerebral trauma (SCCT) in Noble and Collip drum in the course of 30 days. The research was conducted in a morphological laboratory of Institute of Veterinarian Medicine and Biotechnologies of Omsk SAU and in Central Research Laboratory of Omsk State Medical University. Group I consisted of the animals (control group, n = 25) without epileptic convulsion attacks, group II - of the animals (main group, n = 25) with different clinical manifestations of reduction in the threshold of CRB. It was revealed that between the timings of the post-traumatic periods, groups and the studied sections of the brain there were statistically significant differences. The low threshold of the CRB after injury was associated with a high content of reactive modified neurons, TNDN deficit, the increase in the density of glial cells (Spearman correlation analysis, logistic regression). The obtained data testified the characteristics of responses at SCCT of neurons in different parts of the brain and the impact of the CRB level in the post-traumatic period on neuron's structural and functional state.
Keywords: rat, traumatic brain injury, convulsive readiness of the brain, cytoarchitectonics.
Введение
Изучение структурных механизмов повреждения и восстановления клетки, ткани, органа и организма в целом является необходимой составляющей регенеративной биологии и медицины. В разных органах существуют особенности реализации механизмов деструкции ткани и репаративного гистогенеза, которые требуют дальнейшего исследования [1]. Исход повреждения в нервной ткани (неполный дифферон) зависит от числа сохранившихся нейронов и их выхода из патологического состояния [1, 2]. Черепно-мозговая травма остается основной причиной необратимой неврологической инвалидизации пострадавших [2-4]. При ТСЧМТ существуют механизмы первичного и вторичного повреждения мозга [5, 6]. В зонах вторичного ишемического повреждения в посттравматическом периоде развиваются диффузно-очаговые нарушения перфузии мозга и гибели клеток [7]. При этом выявление «мозаики» структурно-функциональных изменений имеет большое значение для определения закономерностей посттравматического повреждения и восстановления головного мозга, в том числе при низком пороге активации поврежденных нейронов.
Целью настоящей работы являлось сравнительное изучение цитоархитектоники различных отделов головного мозга белых крыс, отличающихся порогом судорожной готовности мозга после ТСЧМТ.
Объекты и методы
Основу работы составили результаты острых и хронических экспериментов, выполненных на лабораторных белых крысах-самцах массой 200-240 г. Животные содержались в обычных условиях вивария, регламентируемых приказом МЗ СССР № 1179 от 10.10.1983 г. Опыты проводили в соответствии с приказами МЗ СССР № 755 от 12.08.77 и № 701 от 27.07.78 об обеспечении принципов гуманного обращения с экспериментальными животными.
В основе работы лежит исследование в параллельных группах, которое является наиболее объективным для выявления эффекта воздействия какого-либо независимого фактора и точным в формулировании выводов [8]. ТСЧМТ моделировалась у белых крыс по способу Нобла-Коллипа [9] под нембуталовым наркозом (внутрибрюшинно 30 мг/кг). Животные получали множественные ушибы, переломы, сопровождающиеся выраженной психоневрологической симптоматикой черепно-мозговой травмы. Летальность составила 55,2 %. У части выживших крыс в течение первого часа развивались генерализованные тонико-клонические судороги. Выжившие животные разделены на две группы. В группу I входили животные (группа сравнения, n = 25) без судорожного синдрома, в группу II - животные (основная группа, n = 25) с различными клиническими проявлениями снижения порога СГМ: спонтанное двигательное возбуждение, судорожные пароксизмы. Контролем служили животные (n = 20) без ТСЧМТ.
Для изучения ориентировочно-исследовательского поведения и эмоционально-психических реакций крыс после ТСЧМТ использовали тест «открытое поле» [10]. Регистрировали
следующие показатели: латентный период, горизонтальную и вертикальную двигательную активность, обнюхивание отверстий, груминг, количество дефекаций.
Забор материала для морфологического исследования осуществляли через 1, 3, 7, 14, 30 сут после травмы (по 4-5 животных на срок). Эвтаназию осуществляли под эфирным наркозом путем обескровливания. Головной мозг животных фиксировали в смеси 4 %-ного раствора параформальдегида, 1 %-ного раствора глютарового альдегида, 5 %-ного раствора сахарозы на 0,1 М фосфатном буфере (рН = 7,4), заключали в парафин, готовили фронтальные серийные срезы толщиной 4-5 и 7-10 мкм, окрашивали гематоксилином-эозином и по Нисслю. На цифровых изображениях серийных фронтальных срезов головного мозга (по 5 полей зрения на отдел) изучали цито- и миелоархитектонику коры головного мозга, гиппокампа, таламуса, миндалевидного комплекса и гипоталамуса. Определяли площадь изучаемых отделов головного мозга, площадь серого и белого вещества, тел нейронов, общую численную плотность нейронов (ОЧПН) на 1 мм2, абсолютное и относительное (%) содержание нормохромных, гиперхромных несморщенных, пикноморфных, гипохромных нейронов и клеток-теней, содержание глиальных клеток, ядерно-цитоплазматическое и нейро-глиальное отношение. Морфометрическое исследование проводили с помощью программы ImageJ 1.46. Проверку статистических гипотез проводили с помощью программы Statistica 8.0. Для проверки статистических гипотез применяли методы ранговой статистики (ANOVA Фридмана, Краскела-Уоллиса, критерий Вилкоксона, Манна-Уитни, корреляционный анализ Спирмена, логистическую регрессию). Нулевая гипотеза отвергалась, а альтернативная принималась при уровне значимости р < 0,05, что вполне достаточно для медико-биологических исследований [11].
Результаты исследований
Через сутки после моделировании ТСЧМТ крысы обеих групп были заторможены, малоподвижны, горизонтальная и вертикальная двигательная активность были резко снижены, длительность латентного периода увеличена. Интенсивность и продолжительность эмоциональной составляющей поведения - груминга превышала контрольные значения (табл. 1).
Таблица 1
Ориентировочно-исследовательская деятельность крыс групп 1 и 2-й в посттравматическом периоде (М ± m)
Показатель Контроль Время после травмы (сутки)
1 7 14 30
Группа /
Горизонтальная активность 57,2 ± 1,3 39,8 ± 1,7* 52,3 ± 2,6 53,3 ± 1,8 54,3 ± 2,5
Вертикальная активность 11,5 ± 0,6 5,3 ± 0,2* 10,9 ± 1,3 9,9 ± 0,9 8,9 ± 1,1
Норки 4,9 ± 0,4 5,1 ± 0,6 4,8 ± 0,3 3,6 ± 0,7 4,2 ± 0,1
Груминг 6,5 ± 1,1 19,8 ± 2,1* 20,6 ± 3,0* 11,9 ± 0,4* 16,9 ± 1,0*
Дефекации 1,5 ± 0,07 1,0 ± 0,05* 2,0 ± 0,01* 2,4 ± 0,06* 2,2 ± 0,02*
Латентный период 13,7 ± 0,8 25,9 ± 1,3* 14,1 ± 0,9 11,9 ± 1,2 12,9 ± 1,1
Группа //
Горизонтальная активность 27,3 ± 1,4 13,8 ± 1,0*Л 16,1 ± 1,1*Л 17,7 ± 0,6*Л 11,0 ± 0,7*Л
Вертикальная активность 7,3 ± 0,4 4,0 ± 0,5* 3,5 ± 0,2*Л 5,0 ± 0,3* 3,1 ± 0,2*Л
Норки 2,3 ± 0,1 3,6 ± 0,1* 2,3 ± 0,1 2,4 ± 0,3 2,1 ± 0,1Л
Груминг 7,8 ± 0,4 13,3 ± 0,9* 29,2 ± 2,1* 7,3 ± 0,8Л 29,3 ± 0,9*Л
Дефекации 2,4 ± 0,07 0,9 ± 0,06* 2,2 ± 0,03 1,7 ± 0,09* 1,4 ± 0,1*Л
Латентный период 16,2 ± 0,9 39,1 ± 3,4*Л 26,7 ± 2,2*Л 17,8 ± 1,3 26,9 ± 1,9*Л
*Различия в сравнении с контролем были статистически значимы прир < 0,05; Л различия между группами статистически значимы при р < 0,05 (1 - критерий Стьюдента для независимых выборок).
Через 7-14 сут после травмы происходило частичное восстановление показателей, характеризующих поведение животных. Ориентировочно-исследовательские показатели у крыс I группы нормализовались, у крыс II группы горизонтальная и вертикальная активность оставалась низкой, продолжительность латентного периода была выше, чем в контроле. При этом в обеих группах сохранялся высокий уровень эмоциональной напряженности - продолжительность и интенсивность груминга возросли, увеличилось число дефекаций. Через 1 месяц после перенесенной травмы между группами сохранялись значимые различия по всем изученным показателям (см. табл. 1). Все это свидетельствовало о существовании особенностей восстановле-
ния ориентировочно-исследовательского поведения и эмоционально-психических реакций животных групп I и II, отличающихся уровнем СГМ после ТСЧМТ. Процессы восстановления функций высших отделов мозга более интенсивно протекали у крыс группы I.
Анатомические морфометрические показатели (площадь серого и белого вещества, площадь изученных отделов мозга на серийных срезах) по центральным тенденциям статистически значимо не различались. Различия касались только индивидуальной пространственной локализации очагов ушибов и кровоизлияний головного мозга. При этом анатомические последствия травмы были типичными для ТСЧМТ - мелкие, средние и крупные очаги геморрагического повреждения мозговой ткани.
Гистологическое исследование показало, что после ТСЧМТ развивались типичные очаговые и диффузно-очаговые ишемические повреждения головного мозга. В первые 3 сут преобладали острые гиперхромные дегидратационные, хроматолитические, отечные изменения нейронов и набухание астроглии. В более отдаленном периоде (7, 14 сут) увеличивалось содержание пикноморфных и гипертрофированных нормохромных нейронов.
По данным морфометрического исследования, между изученными отделами головного мозга (внутри групп) и сроками посттравматического периода (1, 3, 7, 14 и 30 сут), а также между группами (по срокам) с различным порогом СГМ имелись статистически значимые различия по всем изученным гистологическим показателям (табл. 2). При этом у животных с низким порогом СГМ было статистически значимо выше содержание реактивно измененных нейронов (1, 3 и 7 сут) и дефицит ОЧПН (особенно через 14 и 30 сут).
По данным корреляционного анализа Спирмена и логистической регрессии, низкий порог СГМ после травмы ассоциировался с высоким содержанием реактивно измененных нейронов (г = 0,65; p < 0,05), дефицитом ОЧПН (г = 0,57; p < 0,05) и увеличением численной плотности глиальных клеток (г = 0,45; p < 0,05).
Таблица 2
Результаты сравнительного изучения цитоархитектоники головного мозга белых крыс групп I и II в посттравматическом периоде
Отделы головного мозга Проверка статистических гипотез
По срокам внутри группы I (ANOVA Фридмана) По срокам внутри группы II (ANOVA Фридмана) Между группами (критерий Манна-Уитни)
Кора головного мозга
ОЧПН + + + (7, 14, 30 сут)
содержание НН + + + (1, 3, 7, 14, 30 сут)
содержание РИН + + + (1, 3, 7, 14, 30 сут)
содержание ГК + + + (7, 14)
НГО + + + (7, 14)
ЯЦО + + + (3, 7, 14 сут)
Гиппокамп
ОЧПН + + + (3, 7, 14, 30 сут)
содержание НН + + + (3, 7, 14, 30 сут)
содержание РИН + + + (1, 3, 7, 14, 30 сут)
содержание ГК + + + (7, 14)
НГО + + + (7, 14)
ЯЦО + + + (3, 7, 14 сут)
Таламус
ОЧПН + + + (7, 14, 30 сут)
содержание НН + + +(3,7 сут)
содержание РИН + + +(3,7 сут)
содержание ГК + + -
НГО + + -
ЯЦО + + -
Окончание табл. 2
Отделы головного мозга Проверка статистических гипотез
По срокам внутри группы I (ANOVA Фридмана) По срокам внутри группы II (ANOVA Фридмана) Между группами (критерий Манна-Уитни)
Миндалевидный комплекс
ОЧПН - + + (7, 14, 30 сут)
содержание НН + + + (3, 7 сут)
содержание РИН + + + (3, 7 сут)
содержание ГК + + -
НГО + + -
ЯЦО + + -
Гипоталамус
ОЧПН - + -
содержание НН + + + (1 сут)
содержание РИН + + + (1 сут)
содержание ГК + + -
НГО + + -
ЯЦО + + -
Примечание: «+» - подтверждение альтернативной гипотезы при р < 0,05; ГК - глиальные клетки; ОЧПН -общая численная плотность нейронов; НГО - нейро-глиальное отношение, НН - нормохромные нейроны; РИН -реактивно измененные нейроны; ЯЦО - ядерно-цитоплазматическое отношение в нормохромных нейронах.
Выводы
Таким образом, полученные данные свидетельствуют об особенностях реакции на ТСЧМТ нейронов различных отделов головного мозга в зависимости от уровня порога СГМ в посттравматическом периоде. Установлено, что процессы структурно-функционального восстановления высших отделов мозга более интенсивно протекают у крыс с нормальным порогом СГМ. У крыс с низким порогом СГМ выявлен более выраженный дефицит нейронов. Вероятно, активация нейронов, вовлеченных в реализацию судорожных пароксизмов у животных с низким порогом СГМ, сопровождается усиленной гибелью нервных клеток. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости использования в посттравматическом периоде различных методов нейропротекции.
Список литературы
1. Регенеративная биология и медицина. Книга 1. Генные технологии и клонирование / В.В. Семченко [и др.] ; под общ. ред. В.П. Пузырева, К.Н. Ярыгина, В.Н. Ярыгина. - Омск, 2012. - 296 с.
2. Семченко, В.В. Синаптическая пластичность головного мозга (фундаментальные и прикладные аспекты) / В.В. Семченко, С.С. Степанов, Н.Н. Боголе-пов. - М., 2014. (2-е изд.). - 499 с.
3. Пошатаев, К.Е. Эпидемиологические и клинические аспекты черепно-мозговой травмы / К.Е. Пошатаев // Дальневосточный медицинский журнал. - 2010. - № 4. - С. 125-128.
4. Хлуновский, А.Н. Концепция болезни поврежденного мозга. Методологические основы / А.Н. Хлуновский, А.А. Старченко ; под ред. В.А. Хиль-ко. - СПб. : Лань, 1999. - 256 с.
5. Gaetz, M. The neurophysiology of brain injury / M. Gaetz // Clin Neurophysiol.- 2004.- Vol. 115.- № 1.-P. 4-18.
6. Коновалов, А.Н. Клиническое руководство по черепно-мозговой травме. - Т. 1 / под ред. А.Н. Коновалова. - М. : Антидор, 1998. - 550 с.
7. Moreno-Flores, M.T. Polymorphonuclear leukocytes in brain parenchyma after injury and their interaction with purified astrocytes in culture / M.T. Moreno-Flores, P. Bovolenta, M. Nieto-Sampedro // Glia. - 1993. - V. 7. - no. 2. - P. 146-157.
References
1. Regenerativnaya biologiya i meditsina. Kniga 1. Gennyie tehnologii i klonirovanie / V.V. Semchenko at al; pod obschey redaktsiey V.P. Puzyireva, K.N. Yaryigina, V.N. Yaryigina. - Omsk, 2012. - 296 s.
2. Semchenko, V.V. Sinapticheskaya plastichnost golovnogo mozga (fundamentalnyie i prikladnyie aspektyi) / V.V. Semchenko, S.S. Stepanov, N.N. Bogolepov. - M., 2014. (2-e izd.). - 499 s.
3. Poshataev K.E. Epidemiologicheskie i klinicheskie aspektyi cherepno-mozgovoy travmyi / K.E. Poshataev // Dalnevostochnyiy med. zhurn. - 2010. -no 4. - S. 125-128.
4. Hlunovskiy, A.N. Kontseptsiya bolezni pov-rezhdennogo mozga. Metodologicheskie osnovyi / A.N. Hlunovskiy, A.A. Starchenko ; pod redaktsiey V.A. Hilko. - SPb.: Lan, 1999. - 256 s.
5. Gaetz, M. The neurophysiology of brain injury / M. Gaetz // Clin Neurophysiol. - 2004. - Vol. 115 no 1. -P. 4-18.
6. Konovalov, A.N. Klinicheskoe rukovodstvo po cherepno-mozgovoy travme. - T. 1 / pod red. A.N. Kono-valova. - M. : Antidor, 1998. - 550 s.
7. Moreno-Flores, M.T. Polymorphonuclear leukocytes in brain parenchyma after injury and their interaction with purified astrocytes in culture / M.T. Moreno-Flores, P. Bovolenta, M. Nieto-Sampedro // Glia. - 1993. V. 7, no 2. - P. 146-157.
8. Флетчер, Р. Клиническая эпидемиология: Основы доказательной медицины / Р. Флетчер, С. Флетчер, Э. Вагнер. - М. : Медиа Сфера, 1998. - 352 с.
9. Кулагин, В.К. Патологическая физиология травмы и шока / В.К. Кулагин. - Л. : Медицина, 1978. - 340 с.
10. Буреш, Я. Методика и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д. Хьюстон ; пер. с англ. - М. : Высшая школа, 1991. - 399 с.
11. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STAT1STГСA / О.Ю. Реброва. - М. : Ме-диаСфера, 2002. - 312 с.
Семченко Валерий Васильевич, доктор мед. наук профессор, Институт ветеринарной медицины Омского ГАУ; Соколов Евгений Юрьевич, заведующий отделением клиники «Ультрамед», г. Санкт-Петербург, [email protected]; Турок Надежда Ефимовна, кандидат биол.наук, [email protected], Омский ГАУ; Степанов Сергей Степанович, доктор мед. наук, Омский государственный медицинский университет.
8. Fletcher, R. Klinicheskaya epidemiologiya: Osnovyi dokazatelnoy meditsinyi / R. Fletcher, S. Fletcher, E. Vagner. - M.: Media Sfera, 1998. - 352 s.
9. Kulagin, V.K. Patologicheskaya fiziologiya travmyi i shoka / V.K. Kulagin. - L.: Meditsina, 1978.- 340 s.
10. Buresh, Ya. Metodika i osnovnyie eksperi-mentyi po izucheniyu mozga i povedeniya / Ya. Buresh, O. Bureshova, D. Hyuston; per. s angl. - M.: Vyisshaya shkola, 1991. - 399 s.
11. Rebrova, O.Yu. Statisticheskiy analiz med-itsinskih dannyih. Primenenie paketa prikladnyih programm STAHSTICA / O.Yu. Rebrova. - M.: MediaSfera, 2002. - 312 s.
Semchenko Valery Vasilyevich, Doctor of Medical Sciences, Professor, Institute of Veterinarian Medicine of OmskSAU, Sokolov Evgeny Yuryevich, Head of Department of "Ultramed" Clinics, St. Petersburg, [email protected], Turok Nadezhda Efimovna, Candidate of Biological Sciences, [email protected], Omsk State Medical University; Stepanov Sergey Stepanovich, Doctor of Medical Sciences, Omsk State Medical University.
Статья поступила в редакцию 15марта 2016 г.
УДК 591.11:598.261.7:577.33 ГРНТИ 68.41.47
Е.Г. Турицына, Г.В. Макарская, С.В. Тарских, П.Ю. Царев
ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ КЛЕТОК КРОВИ ПЕРЕПЕЛОВ
Исследования проведены на кафедре анатомии, патологической анатомии и хирургии Красноярского государственного аграрного университета и на базе Международного научного центра исследований экстремальных состояний организма при Президиуме Красноярского научного центра СО РАН в 2015-2016 гг. Впервые изучены возрастные особенности течения свободнорадикальных процессов в клетках цельной крови японских перепелов микрометодом спонтанной и активированной in vitro латексом люцигенин- и люминолусиленной хемилюминесценции. Определены максимальная интенсивность хемилюминесцентной реакции, время достижения максимума хемилюминесценции, суммарные объемы генерации активных форм кислорода, общее содержание лейкоцитов, фагоцитарная активность лейкоцитов, индекс активации, удельная продукция антигениндуцированных радикалов лейкоцитами и фагоцитами крови. Результаты статистически обработаны методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента. Различия возрастных показателей считали достоверными при Р < 0,05. Установлено преобладание генерации люцигенинзависимых кислородных радикалов клетками цельной крови как в спонтанном, так и в антигенактивированном состоянии. Минимальная суммарная продукция всех форм свободных радикалов отмечена у перепелов суточного и 240-суточного возраста. Максимальные значения светосуммы антигениндуцированных люцигенинзависимых радикалов зарегистрированы у птицы двухнедельного возраста, люминолзависимых АФК - у двухмесячных перепелов. Антигенная стимуляция фагоцитов крови частицами латекса сокращает время достижения максимума хемилюминес-ценции в 5-7 раз. Полученные данные дополняют сведения о механизмах неспецифической резистентности организма перепелов и имеют теоретическое и прикладное значение в биологии и ветеринарии.
Ключевые слова: клетки крови, хемилюминесценция, активные формы кислорода, фагоцитоз, перепела.
© Турицына Е.Г., Макарская Г.В., Тарских С.В., Царев П.Ю., 2016
