CC BY
41
9. Пурхани, Т.А. Влияние экологических условий на черепные пазухи буйволов / Т.А. Пурхани // Ветеринарная медицина. - 2010. - № 3-4. - С. 94-95.
Мелешков Сергей Федорович, доктор вет. наук, доцент, Омский ГАУ, [email protected]; [email protected]; Хонина Галина Васильевна,
кандидат вет. наук, доцент, Омский ГАУ, anatom.kaf@omgau. org.
9. Purhani Т.А. Vliyanie ekologicheskih usloviy na cherepnye pazuhi buyvolov / Т.А. Purhani // Veterinamaya meditsina. - 2010. - № 3-4. - S. 94-95.
Meleshkov Sergey Fedorovich, Doctor of Veterinarian Sciences, Associate Professor, Omsk SAU, [email protected]; [email protected]; Khonina Galina Vasilyevna, Candidate of Veterinarian Sciences, Associate Professor, Omsk SAU, [email protected].
Статья поступила в редакцию 18 марта 2016 г.
УДК 612.751.3+611.018.18+616.381-007 ГРНТИ 68.41.47 С.В. Скальский, Т. Ф. Соколова, Д.А. Сычев, Е.В. Ананичева
ИЗМЕНЕНИЕ КОМПОНЕНТОВ МЕЖКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ СПАЕЧНОМ ПРОЦЕССЕ БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ НА ФОНЕ ДЕЙСТВИЯ ВЕРАПАМИЛА
Представлены результаты исследования особенностей течения спаечного процесса у крыс и кроликов при моделировании асептического воспаления в брюшной полости с оценкой патогенетической значимости изменений межклеточного матрикса соединительной ткани - коллагена (по его маркеру -оксипролину) и гиалуроновой кислоты - и действия блокатора медленных кальциевых каналов (БМКК) верапамила на синтез фибробластами данных веществ. Исследованы особенности формирования спаек, обнаружена идентичность их макро- и микроскопических характеристик, локализации при моделировании гемоперитонеума у крыс и кроликов. Выявлено увеличение количества оксипролина и гиалуроновой кислоты в целостном организме и в культуре клеток при формировании спаек. Обнаружен выраженный модулирующий эффект БМКК верапамила на процессы спайкообразования, его регулирующее действие на функциональную активность фибробластов, темпы синтеза ими оксипролина и гиалуроновой кислоты in vivo и in vitro.
Ключевые слова: спаечный процесс, оксипролин, гиалуроновая кислота, верапамил. S. V. Skalsky, T.F. Sokolova, D.A. Sychev, E. V. Ananicheva
MODIFICATION OF INTERCELLULAR MATRIX COMPONENTS OF CONNECTIVE TISSUE IN EXPERIMENTAL ADHESIVE PROCESS OF THE ABDOMINAL CAVITY DURING
THE EFFECT OF VERAPAMIL
This article represents the studies results of adhesive process features in rats and rabbits at modeling aseptic inflammation in the abdominal cavity with an assessment of pathogenetic significance of changes in the intercellular matrix of connective tissue: collagen (its marker is hydroxyproline) and hyaluronic acid and the effect of a calcium channel blocker (CCB) verapamil on fibroblastic synthesis of these substances. The study of the features of the adhesions formation discovered the identity of their macro- and microscopic characteristics, localization during modeling of haemoperitoneum in rats and rabbits. There was revealed an increase of the amount of hyaluronic acid and hydroxyproline in the entire organism and in cell culture during the formation of adhesions. There was discovered expressed CCB modulating effect of verapamil on the processes of adhesion and its regulatory effect on the fibroblasts functional activity, the rate of synthesis of hydroxyproline and hyaluronic acid in vivo and in vitro.
Keywords: adhesive process, hydroxyproline, hyaluronic acid, verapamil.
© Скальский С.В., Соколова Т.Ф., Сычев ДА., Ананичева Е.В., 2016
Введение
Несмотря на прогресс в медицинской науке, до настоящего времени профилактика послеоперационного спаечного процесса брюшной полости остается одной из актуальных проблем общей хирургии. Биологически целесообразная реакция, направленная на локализацию патологического процесса, часто становится причиной болезни и грозных осложнений [1-4]. Основой патогенеза избыточного спайкообразования после операций на органах брюшной полости считается прорастание соединительнотканными волокнами выпавшего из перитонеаль-ного выпота фибрина, который «склеивает» поверхности органов [5, 6]. Внеклеточный матрикс с находящимися в нем клетками определенного типа, такими как фибробласты, макрофаги, тучные клетки, не только скрепляет клетки и ткани, но и влияет на развитие, полярность и поведение контактирующих с ним клеток. Основными клетками - продуцентами межклеточного вещества - являются фибробласты. Они синтезируют как основные волокнистые структуры, в том числе коллаген, специфической маркерной меткой которого является оксипролин, так и основные компоненты аморфного вещества, в том числе гликозаминогликаны.
Очевидно, что чрезмерному росту соединительной ткани способствует интенсификации выработки фибробластами коллагена и гликозаминогликанов. В научных источниках имеются единичные сообщения о влиянии повышенной продукции оксипролина и гидроксипролина на гиперпродукцию соединительной ткани [7]. Для обоснования возможностей фармакологической регуляции формирования соединительнотканных перитонеальных спаек представляется необходимым исследовать содержание белоксвязанного оксипролина и гиалуроновой кислоты в перитонеальной жидкости разных видов экспериментальных животных с асептическим воспалением брюшины и с помощью лекарственной регуляции кальциевого обмена блокаторами медленных кальциевых каналов (БМКК) нормализовать коллагенсинтетическую функцию фибробластов, снизить повышенную продукцию ими гиалуроновой кислоты. Правомочность использования БМКК для регуляции процессов спайкообразования основывается на немногочисленных данных, свидетельствующих о наличии у БМКК фармакологических эффектов, реализуемых модификацией функциональной активности фибробластов и образующейся соединительной ткани [8-10].
Целью данной работы было исследование особенностей течения спаечного процесса у крыс и кроликов с обоснованием значимости возможных патогенетических факторов спайко-образования, коллагенсинтетической функции фибробластов и наработки ими гиалуроновой кислоты при асептическом воспалении брюшины путем целенаправленного применения БМКК верапамила.
Объекты и методы
Эксперименты проводились на 68 беспородных белых крысах-самцах с массой тела 210-230 г и 24 половозрелых кроликах-самцах породы Шиншилла массой тела 2500-3200 г из питомника Института цитологии и генетики СО РАН (г. Новосибирск). До и в период эксперимента контрольные и опытные животные содержались в виварии в одинаковых условиях: в стандартных пластиковых клетках с мелкой древесной стружкой, на стандартном рационе, в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (г. Страсбург, Франция, 1986 г.). Все исследования проводили в одно и то же время суток (утром). Спаечный процесс моделировался однократным инъекционным внутрибрюшинным введением экспериментальным животным (кролики, белые крысы) стерильной аутокрови из расчета 1% массы тела (патент на изобретение № 2260854 по заявке № 2003134120 от 24.11.2003 г.).
Для профилактики образования соединительнотканных спаек верапамил (водный раствор верапамила 0,25 % концентрации в ампулах по 2 мл производства ОАО «Биосинтез», г. Пенза, серия № 10203) вводили одновременно с повреждающим фактором (аутокровью) однократно инъекционно внутрибрюшинно в дозе 1 мг/кг массы тела. Эффективность изучаемого метода профилактики спайкообразования оценивалась через 7-10 суток после внутрибрюшинного введения аутокрови. Эвтаназия животных проводилась под эфирным наркозом: крыс - путем де-капитации, кроликов - эмболизацией легочной артерии атмосферным воздухом.
Иссеченные соединительнотканные спайки подвергались макро- и микроскопическому анализу с использованием морфологических стандартных методик. Срезы окрашивали
гематоксилином и эозином (обзорная микроскопия с изучением общего плана строения ткани) и пикрофуксином по ван Гизону (выявление коллагеновых волокон). В перитонеальной жидкости кроликов после ее фракционирования центрифугированием и в культуральной жидкости активированных in vivo перитонеальных фибробластов крыс определяли содержание оксипро-лина [11] и гиалуроновой кислоты по карбазольной реакции Дише в модификации [12].
Перитонеальные фибробласты крыс получали через прокол в каудальной трети белой линии живота путем промывания брюшной полости 10 мл среды RPMI-1640 с антибиотиками и 10 %-ный раствором гепарина. Образцы перитонеальных смывов центрифугировали при 800-1000 об/мин в течение 10 мин для осаждения клеточных элементов, которые затем трижды отмывали средой RPMI-1640 («Sigma») с добавлением 10 % эмбриональной телячьей сыворотки, 2 % глутамина, 100 ЕД/мл пенициллина и 100 ЕД/мл стрептомицина. Затем суспензию, содержащую 2 х 106 перитонеальных клеток в 1 мл питательной среды, делили на два одинаковых пула и помещали в чашки Петри диаметром 40 мм, внутренняя поверхность которых была покрыта по-ли^-лизином. Клетки культивировали в среде RPMI-1640 с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки, глутамина, пенициллина и стрептомицина. Первая группа клеток культивировалась в среде RPMI-1640 без добавления лекарственных средств. К суспензии клеток 2-й группы добавляли раствор верапамила (ОАО «Биосинтез», г. Пенза) в концентрации 0,1 мг/мл.
Контролем служили клеточные культуры неактивированных фибробластов, полученные от интактных крыс. Клетки инкубировали 24 ч при 37 оС и в атмосфере 5 % СО2. Степень стимуляции коллагеногенеза оценивали по количеству белковосвязанного оксипролина, определяемого в супернатантах клеточных культур по разности содержания свободного и суммарного оксипролина [11]. О синтезе гликозаминогликанов фибробластами судили по концентрации гиалуроновой кислоты [12]. Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с использованием пакетов «Statistica 6,0 for Windows». Характер распределения полученных данных анализировали построением гистограмм с последующей проверкой на нормальность по критерию Шапиро-Уилка. Средние выборочные значения количественных признаков приведены в тексте в виде M ± m, где M - среднее выборочное, m - стандартная ошибка среднего. Для сравнения двух групп данных использовался t-тест (Стьюдента). Корреляционный анализ проводили по Спирмену. Критический уровень значимости при проверке нулевых гипотез был принят на уровне р < 0,05.
Результаты исследования
Как показали исследования, моделирование гемоперитонеума приводило к образованию в брюшной полости экспериментальных животных множественных соединительнотканных спаек, количество которых было сопоставимо в экспериментальных группах крыс и кроликов (табл. 1). Спайки преимущественно локализовались в нижнем (каудальном) этаже брюшной полости и были представлены висцерально-париетальными (с вовлечением брюшной стенки) и висцеро-висце-ральными спайками. Макроскопически спайки могли быть разделены на тяжевые, плоскостные, пленчатые, паутинные и смешанные.
Микроскопически спайки были представлены волокнистой соединительной тканью. На седь-
Таблица 1
Характеристика спаек в брюшной полости животных при моделировании гемоперитонеума (М ± т)
Показатель Животное Достоверность различии между группами животных (р)
Крысы Кролики
Количество 8,2 ± 1,8 8,6 ± 2,3 > 0,05
Рыхлые 4,2 ± 0,2 4,5 ± 0,3 > 0,05
Паутинные 1,5 ± 0,1 1,4 ± 0,3 > 0,05
Смешанные 2,4 ± 0,4 2,9 ± 0,2 > 0,05
Верхний отдел 2,7 ± 0,2 3,2 ± 0,4 > 0,05
Нижний отдел 5,3 ± 0,3 5,6 ± 0,8 > 0,05
С брюшной стенкой 2,0 ± 0,2 2,4 ± 0,4 > 0,05
С сальником 1,2 ± 0,4 1,7 ± 0,3 > 0,05
С печенью 0,4 ± 0,08 0,6 ± 0,06 > 0,05
С селезенкой 0,7 ± 0,07 0,7 ± 0,09 > 0,05
С кишкой 3,8 ± 0,7 3,1 ± 0,4 > 0,05
С мочевым пузырем 0,04 ± 0,02 0,03 ± 0,05 > 0,05
Плоскостные 0,6 ± 0,1 1,0 ± 0,4 > 0,05
Тяжелые 1,5 ± 0,1 1,8 ± 0,3 > 0,05
Пленчатые 3,6 ± 0,7 3,5 ± 0,2 > 0,05
Паутинные 0,4 ± 0,07 0,6 ± 0,09 > 0,05
Смешанные 2,2 ± 0,5 2,2 ± 0,4 > 0,05
мые сутки наблюдения они характеризовались как молодая волокнистая соединительная ткань с хорошо выраженным межклеточным веществом и упорядоченным расположением коллагеновых волокон. Клеточный состав был представлен фиброцитами, фибробластами, встречались единичные плазматические клетки, тучные клетки и многоядерные клетки типа гигантских клеток инородных тел. На десятые сутки формировалась зрелая рубцовая соединительная ткань с упорядоченным расположением коллагеновых волокон, где присутствовали гомогенные участки и волокнистые структуры.
Как видно из табл. 1 и 2, при внутрибрюшинном введении верапа-мила одновременно с моделированием гемоперитонеума у животных снижалось общее количество спаек (до 0,20 ± 0,04 у крыс и 0,23 ± 0,02 у кроликов, р < 0,05) с явным преобладанием спаек висцеро-париетальной локализации. Сформированная спайка к этому времени была тоньше, нежнее и с меньшим количеством клеточных элементов при сравнении с аналогичной в группе без медикаментозного воздействия.
Исследование коллагенсинтетической функции фибробластов, заключающееся в определении в культуральной среде белковосвязанного оксипролина - маркера коллагена, показало, что после моделирования гемоперитонеума крысам в культуре активированных фибробластов наблюдалась стимуляция образования белковосвязанного оксипролина по сравнению с показателями интактных животных (26,7 ± 1,7 мкмоль/л против 6,5 ± 0,4 мкмоль/л, р < 0,05 в контроле). Инкубация перитонеальных фибробластов крыс в среде с верапамилом сопровождалась снижением интенсивности наработки белковосвязанного оксипролина (табл. 3). Профилактическое внутрибрюшинное введение верапамила кроликам также определяло достоверное снижение его содержания в перитонеальной жидкости к 10-м суткам после моделирования гемоперитонеума. Была установлена прямая и тесная корреляционная связь между содержанием исследуемого биохимического субстрата в перитонеальной жидкости и количеством спаек. Плотность этой корреляции прослеживалась как в группе кроликов без медикаментозного воздействия (количество спаек - оксипролин г = 0,95, р < 0,05), так и в группе животных с введением верапамила (количество спаек - оксипролин г = 0,75, р < 0,05).
Таблица 3
Содержание белковосвязанного оксипролина и гиалуроновой кислоты в перитонеальной жидкости кроликов и супернатантах клеточных культур перитонеальных фибробластов крыс с гемоперитонеумом (М ± m)
Показатели Кролики Крысы
Без введения лекарственных средств Введение верапамила Без введения лекарственных средств Введение верапамила
Оксипролин (мкмоль/л) 7,6 ± 0,3 6,6 ± 0,1* 26,7 ± 1,7 8,9 ± 0,2*
Гиалуроновая кислота (ммоль/л) 1,0 ± 0,04 0,8 ± 0,02* 1,6 ± 0,1 0,98 ± 0,05*
*Достоверность различий показателей в группах без введения лекарственных средств и с введением верапамила, р < 0,05.
Сравнительный количественный анализ гиалуроновой кислоты, секретируемой активированными перитонеальными фибробластами in vivo, выявил статистически значимое увеличе-
Таблица 2
Характеристика спаек при профилактическом действии верапамила (M ± m)
Показатель Животное Достоверность различий между группами животных (р)
Крысы Кролики
Количество 0,20 ± 0,04 0,23 ± 0,02 > 0,05
Рыхлые 0,02 ± 0,04 0 > 0,05
Паутинные 0,2 ± 0,06 0,22 ± 0,03 > 0,05
Смешанные 0,02 ± 0,02 0 > 0,05
Верхний отдел 0,02 ± 0,01 0 > 0,05
Нижний отдел 0,22 ± 0,03 0,14 ± 0,02 > 0,05
С брюшной стенкой 0,10 ± 0,01 0,09 ± 0,01 > 0,05
С сальником 0 0,04 ± 0,02 > 0,05
С печенью 0 0 > 0,05
С селезенкой 0 0 > 0,05
С кишкой 0 0,09 ± 0,01 > 0,05
С мочевым пузырем 0 0 > 0,05
Плоскостные 0 0 > 0,05
Тяжелые 0 0 > 0,05
Пленчатые 0,04 ± 0,01 0 > 0,05
Паутинные 0,16 ± 0,02 0,22 ± 0,01 > 0,05
Смешанные 0,04 ± 0,03 0 > 0,05
ние ее содержания на 10-е сутки после моделирования гемоперитонеума как в перитонеальной жидкости кроликов, так и в культурах активированных клеток крыс по сравнению с показателями интактных животных (у кроликов 1,0 ± 0,04 ммоль/л против 0,3 ± 0,01, р < 0,05 в контроле; у крыс 1,6 ± 0,1 ммоль/л против 0,5 ± 0,03, р < 0,05 в контроле). Сопоставление уровней ги-алуроновой кислоты в перитонеальной жидкости кроликов с гемоперитонеумом без введения верапамила и в группе животных, получивших данное лекарственное средство одновременно с моделированием асептического воспаления брюшины, выявило снижение ее уровня в результате действия верапамила (р < 0,05; см. табл. 3).
Добавление верапамила к культуре активированных in vivo перитонеальных фибробла-стов крыс также предотвращало усиленный синтез гиалуроновой кислоты, останавливая ее наработку на уровне 61,3% от показателей в культуре активированных фибробластов без добавления лекарственных средств (р < 0,05).
Выводы
Таким образом, экспериментальное моделирование спаечного процесса в брюшной полости животных путем введения аутокрови вызывало к 10-м суткам поствоспалительного периода формирование спаек. Уровень спайкообразования, локализация спаек, их микроскопические характеристики в экспериментах на крысах и кроликах не разнились. Спаечный процесс сопровождался увеличением количества оксипролина и гиалуроновой кислоты в целостном организме, усилением темпов синтеза компонентов межклеточного матрикса фибробластами в культуре клеток. Введение верапамила оказывало выраженный модулирующий эффект на процессы спайкообразования, тормозя избыточное разрастание соединительной ткани путем снижения активности фибробластов: их коллагенсинтетической функции, продукции ими гиалуроновой кислоты.
Идентичность действия верапамила на темпы синтеза перитонеальными фибробластами компонентов межклеточного матрикса (коллагена и гиалуроновой кислоты) как в целостном организме, так и в культуре клеток; воспроизводимость на разных видах животных свидетельствуют об универсальности выявленного фармакологического эффекта по нормализации процессов спайкообразования у препарата, традиционно используемого в кардиологии, - БМКК верапамила.
Список литературы
1. Аникин, С.С. Этиопатогенез трубной беременности и ее влияние на репродуктивное здоровье женщин / С.С. Аникин, И.В. Лившиц, А.Н. Рыбалка // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. -2012. - Т. 2, № 3-4 (7-8). - С. 4-9.
2. Современное состояние вопроса острой спаечной кишечной непроходимости / В.В. Бойко [и др.] // Харьквська х1рурпчна школа. - 2014. - № 1 (64). -С. 87-90.
3. Патогенез, осложнения и контроль пери-тонеального спаечного процесса в гинекологии и хирургии / А.И. Дронов, К.О. Задорожная, В.Л. Дронова, М.И. Насташенко // Хирургия. Восточная Европа. -2015. - № 2 (14). - С. 124-129.
4. Лаврешин, П.М. Прогнозирование и профилактика развития внутрибрюшных спаек / П.М. Лаврешин, В.В. Гобеджишвили, И.Г. Келасов. - Saarbrucken, 2012. - 148 с.
5. Спаечная кишечная непроходимость: тактика, лечение, профилактика рецидивов / О.И. Дубровщик [и др.] // Журн. Гродненского гос. мед. ун-та. - 2012. -№ 2. - C. 20-23.
6. Спаечная болезнь: профилактика и лечение / Б.П. Филенко, В.П. Земляной, И.И. Борсак, А.С. Иванов. -СПб., 2013. - 171 с.
7. A safety and efficacy study of a resorbable hy-drogel for reduction of post-operative adhesions following myomectomy / L. Mettler et al. // Hum. Reprod. - 2008. -Vol. 23. - P. 1093-1100.
References
1. Anikin, S.S. Etiopatogenez trabnoy beremennosti i ee vliyanie na reproduktivnoe zdorove zhenschin / S.S. Anikin, I.V. Livshits, A.N. Ryibalka // Kryimskiy zhurnal eksperimentalnoy i klinicheskoy meditsinyi. - 2012. - T. 2. - № 3-4 (7-8). - S. 4-9.
2. Sovremennoe sostoyanie voprosa ostroy spaechnoy kishechnoy neprohodimosti / V.V. Boyko [i dr.] // Harkivska xirurgichna shkola. - 2014. - № 1 (64). -S. 87-90.
3. Patogenez, oslozhneniya i kontrol peritonealnogo spaechnogo protsessa v ginekologii i hirurgii / A.I. Dronov, K.O. Zadorozhnaya, V.L. Dronova, M.I. Nastashenko // Hirurgiya. Vostochnaya Evropa. -2015. - № 2 (14). - S. 124-129.
4. Lavreshin, P.M. Prognozirovanie i profilaktika razvitiya vnutribryushnyih spaek / P.M. Lavreshin, V.V. Gobedzhishvili, I.G. Kelasov. - Saarbrucken, 2012. -148 s.
5. Spaechnaya kishechnaya neprohodimost: taktika, lechenie, profilaktika retsidivov / O.I. Dubrovschik [i dr.] // Zhurn. Grodnenskogo gos. med. Un-ta. - 2012. - № 2. -C. 20-23.
6. Spaechnaya bolezn: profilaktika i lechenie / B.P. Filenko, V.P. Zemlyanoy, I.I. Borsak, A.S. Ivanov. -SPb., 2013. - 171 s.
7. A safety and efficacy study of a resorbable hy-drogel for reduction of post-operative adhesions following myomectomy / L. Mettler et al. // Hum. Reprod. - 2008. -Vol. 23. - P. 1093-1100.
8. Low-level laser (light) therapy (LLLT) in skin: stimulating, healing, restoring / P. Avci et al. // Semin Cutan Med Surg. - 2013. - Mar; 32 (1). - P. 41-52.
9. Intra-articular adhesion reduction after knee surgery in rabbits by calcium channel blockers / Y. Li et al // Med Sci Monit. - 2014. - Vol. 20. - P. 2466-2471.
10. Role of verapamil in preventing and treating hypertrophic scars and keloids / R. Wang et al. // Int Wound J. - 2015; doi: 10.1111/iwj.12455.
11. Шараев, П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови / П.Н. Шараев // Лабораторное дело. - 1990. - № 5. - С. 283-285.
12. Шараев, П.Н. Определение гиалуронидазной активности в биологических жидкостях / П.Н. Шараев, Н.С. Стрелков, В.В. Гунчев // Клиническая лабораторная диагностика. - 1996. - № 3. - С. 21-22.
Скальский Сергей Викторович, кандидат мед. наук, доцент Омского государственного медицинского университета Минздрава России (ОмГМУ); Соколова Татьяна Федоровна, доктор мед. наук, ОмГМУ; Сычев Дмитрий Алексеевич, доктор мед. наук, профессор Первого Московского государственного медицинского университета имени И.М. Сеченова; Ананичева Елена Викторовна, ассистент, [email protected], ОмГМУ.
8. Low-level laser (light) therapy (LLLT) in skin: stimulating, healing, restoring / P. Avci et al. // Semin Cutan Med Surg. - 2013. - Mar; 32 (1). - P. 41-52.
9. Intra-articular adhesion reduction after knee surgery in rabbits by calcium channel blockers / Y. Li et al // Med Sci Monit. - 2014. - Vol. 20. - P. 2466-2471.
10. Role of verapamil in preventing and treating hypertrophic scars and keloids / R. Wang et al. // Int Wound J. - 2015; doi: 10.1111/iwj.12455.
11. Sharaev, P.N. Metod opredeleniya svobodnogo i svyazannogo oksiprolina v syivorotke krovi / P.N. Sharaev // Laboratornoe delo. - 1990. - № 5. - S. 283-285.
12. Sharaev, P.N. Opredelenie gialuronidaznoy ak-tivnosti v biologicheskih zhidkostyah / P.N. Sharaev, N.S. Strelkov, V.V. Gunchev // Klinicheskaya laborator-naya diagnostika. - 1996. - № 3. - S. 21-22.
Skalsky Sergey V., Prof. Assoc, MD, PhD, Omsk State Medical University, Ministry of Public Health, Russia (OmGMU); Sokolova Tatiana F., MD, PhD, OmGMU; Sychev Dmitriy A., Prof. Assos. MD, PhD, First I.M. Sechenov Moscow State Medical University; Ananiche-va Elena V., assistant, [email protected], OmGMU.
Статья поступила в редакцию 18 марта 2016 г.
УДК 616.091.8:612.82:616.8.-009.24 ГРНТИ 68.41.33
В.В. Семченко, Е.Ю. Соколов, Н.Е. Турок, С.С. Степанов
СУДОРОЖНАЯ ГОТОВНОСТЬ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ОТДЕЛОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА БЕЛЫХ КРЫС В ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОМ ПЕРИОДЕ
Представлены результаты изучения цито- и миелоархитектоники коры головного мозга, гиппо-кампа, таламуса, миндалевидного комплекса и гипоталамуса белых крыс (п = 70) после тяжелой сочетан-ной черепно-мозговой травмы (ТСЧМТ) по Ноблу-Коллипу в течение 30 сут. Работа выполнена в морфологической лаборатории Института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского ГАУ и в ЦНИЛ Омского государственного медицинского университета. В группу I входили животные (группа сравнения, п = 25) без приступов судорожных пароксизмов, в группу II - животные (основная группа, п = 25) с различными клиническими проявлениями снижения порога судорожной готовности мозга (СГМ). Установлено, что между сроками посттравматического периода, группами и изученными отделами головного мозга имелись статистически значимые различия. Низкий порог СГМ после травмы ассоциировался с высоким содержанием реактивно измененных нейронов, дефицитом численной плотности нейронов, увеличением плотности глиальных клеток (корреляционный анализ Спирмена, логистическая регрессия). Полученные данные свидетельствовали об особенностях реакции на ТСЧМТ нейронов различных отделов головного мозга и влиянии порога СГМ после травмы на структурно-функциональное состояние нейронов.
Ключевые слова: крыса, черепно-мозговая травма, судорожная готовность мозга, цитоархитек-тоника.
©. Семченко В.В, Соколов Е.Ю., Турок Н.Е., Степанов С.С., 2016
