CC BY
15
Таблица 1
Характер возрастной динамики количественных показателей ЛТ аппендикса
Таблица 3
Количественные диагностические критерии аномалий ЛТ аппендикса
Показатель п г S t Р Форма
Влу, мкм 30 -0,541 -3,406 0,002 Нелинейная
Млу, число/срез 30 -0,639 -4,398 0,0001 Нелинейная
Тлт, мкм 30 -0,538 -3,379 0,002 Нелинейная
VT40>°/° 30 -0,645 -4,471 0,0001 Нелинейная
Модель Выраженность зависимости Гетероскедастичность
г t Р F Р
(1) -0,860 -8,913 1,145х10-9 2,735 0,064
(2) -0,703 -5,236 1,456х10-5 2,896 0,054
Примечание. Олу и Ылу - диаметр и плотность расположения ЛУ соответственно; Тлт - толщина ЛТ; Тлт/Тчо - отношение толщины ЛТ к толщине стенки ЧО.
Вышеизложенное позволило разработать набор объективных критериев определения патологии ЛТ аппендикса, обнаружение при гистологическом исследовании конкретного ЧО хотя бы одного из которых позволяет
Таблица 2
Показатели качества созданных регрессионных диагностических моделей
№ Реактивная гиперплазия Преждевременная инволюция
1 Наличие ГЦ после 50 лет Отсутствие ГЦ в возрасте 3-10 лет
2 D /Т > Р ^ЛУ 1 ^ВСМО ^ -'0,975 D /Т < Р ^ЛУ 1 ^ВСМО ^ 10,025
3 ^ЛУ > ^0,975 ^ЛУ < ^0,025
Примечание. Р0 975 и Р0 025 - верхняя и нижняя границы двусторонних 95% доверительных интервалов, рассчитываемые с помощью уравнений (1)и (2).
выбросами и не подвергшихся регрессионному анализу. При этом в двух наблюдениях была диагностирована гиперплазия, а в одном - преждевременная инволюция ЛТ аппендикса. Одно наблюдение с признаками атрофии ЛТ отростка не было расценено как патология.
Таким образом, разработанные количественные критерии позволяют объективно диагностировать такие патологические состояния, как реактивная гиперплазия и преждевременная инволюция аппендикулярной ЛТ при исследовании любых фрагментов ЧО независимо от способа их фиксации и методики изготовления гистологических срезов. Полученные данные представляются важными как для патологоанатомической и судебно-медицинской экспертной практики, так и для изучения проблем возрастной морфологии.
диагностировать наличие гиперплазии или преждевременной инволюции ЛТ отростка (табл. 3).
Проверка указанных диагностических критериев была осуществлена на 4-х наблюдениях, признанными Литература:
1. Бараев Т.М. //Арх. nam. - 2000. -№4,- С. 57-59.
2. Дубров A.M., Мхитарян B.C., Трошин Л.И. Многомерные статистические методы: Учебник. - М.: Финансы и статистика, 2000. - С. 285-308.
3. Закс. Л. Статистическое оценивание: Пер. с нем. - М.: Статистика, 1976. - С. 255-258.
4. Недугов Г.В. // Актуальные проблемы науки в России: Материалы всероссийской научно-практической конференции: ВЗт,- Кузнецк: КИИУТ, 2005. - Вып. З.-Т. З.-С. 38-40.
5. Пермяков Н.К. //Хирургия. - 1992. - № 9-10. - С. 68-70.
6. Салманов О.Н. Математическая экономика с применением Mathcad и Excel. - СПб.: БХВ - Петербург, 2003. - С. 249-254.
7. Федорина Т.А., Недугов Г.В. Комплексный подход к оценке погрешностей, возникающих при использованииметодов количественного анализа в гистологических исследованиях: Учебное пособие. - Самара: ООО «Содружество Плюс», ГОУВПО «СамГМУ», 2004. - 48 с.
© ЕЛ. Исаева, Ю.С. Исаев, 2006 УДК340.64.577.2
Е.Н. Исаева, Ю.С. Исаев СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКИЕ АСПЕКТЫ ОСОБЕННОСТЕЙ ПОЛИМОРФИЗМА МИКРОСАТЕЛЛИТНЫХЛОКУСОВ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ
Кафедра судебноймедицины (зав. кафедрой - проф. Ю.С. Исаев) Иркутскогомедицинскогоуниверситета В статье изложены проблемные вопросы морфологических особенностей микросателлитных локусов при проведении молекулярно-генетического анализа биологических объектов в судебно-медицинской практике. Убедительно показана необходимость формирования банка данных, касающихся особенностей полиморфизма аллелей различных популяционных групп, в частности групп бурятской национальности, проживающей на территории Восточной Сибири.
Ключевыеслова: аллельный полиморфизм, идентификацияличности, популяционные исследования.
FORENSIC-LEGALASPECTS OF POLYMORPHISM FEATURES OF MICROSATELLITE LOCI IN BIOLOGICAL OBJECTS
E.N. Isaeva, J.S. Isaev
Problem questions of morphological features ofmicrosatellite loci developed on the base of genetic analysis of biological objects are presented in the article. Necessity of formation of the databank, concerning features of alleles polymorphism of various population groups, in particulargroups ofthe Buryat nationality living in territory ofEast Siberia, is convincingly shown. Key words: polymorphism ofalleles, identification of the person, population researches.
Важнейшая задача судебно-медицинской экспертизы био- том, чтобы по следовому количеству объекта получить данные логических объектов вещественных доказательств состоит в дляпредельнополныхиконкретныхэкспертныхвыводов.
Однако используемые в экспертной практике особенности полиморфизма белковых систем не позволяют делать однозначным вывод для установления личности человека, установления кровного родства и т.д. Несмотря на сложность проведения эритроцитарных, сывороточных и ферментных исследований биологического материала, получаемые результаты не всегда удовлетворяют следствие и суды из-за их достаточно низкого доказательного значения.
Одним из методов, который позволяет проводить убедительную судебно-медицинскую идентификацию при исследовании вещественных доказательств, является молекулярно-генетический анализ.
Метод «геномной» дактилоскопии незаменим так же при установлении кровного родства в экспертизах спорного отцовства, детоубийств, подмены или хищении детей, в других случаях, особенно при исследовании гнилостно-измененных отдельных фрагментов трупов, когда идентификация личности не может быть проведена другими методами. Геном человека содержит большое число полиморфных локусов, значительная часть из которых представлена тандемными повторами с изменяющимся числом копий. Вследствие высокого уровня полиморфизма, локусы этого типа широко применяются в качестве генетических маркеров при изучении генома человека.
Частоты встречаемости аллельных вариантов для каждого локуса устанавливаются путем популяционных исследований референтной выборки населения. В настоящее время в связи с отсутствием баз данных по частотам встречаемости аллелей микросателлитных 8ТК.-локусов для популяции бурят отечественным молекулярно-гене-тическим лабораториям в своей работе приходится ссылаться на данные для европеоидного населения России, что снижет доказательственное значение результатов экспертизы.
Микросателлитные локусы во множестве представлены в геноме человека; их аллели характеризуются выраженным полиморфизмом длины. Это делает их высокоэффективными маркерами для молекулярно-генетической индивидуализации человека. Вариант анализа микросателлитных локусов хромосомной ДНК, в основе которого лежит феномен полиморфизма длины амплифицирован-ных фрагментов ДНК, в настоящее время является основным методом судебно-медицинского молекулярно-гене-тического исследования вещественных доказательств. Метод отличается высокой дифференцирующей способностью - благодаря использованию в качестве маркерных элементов высокополиморфных генетических локусов и чрезвычайно высокой чувствительностью - благодаря применению процесса энзиматической амплификации ДНК. Микросателлитные локусы наиболее широко используют в судебно-медицинской практике для идентификации личности и установления биологического родства.
Учитывая потребности правоохранительных систем и гражданского судопроизводства в исследовании методом молекулярно-генетического анализа, необходимо проводить популяционно-генетические исследования регионов, обслуживаемых территориальными бюро. Поскольку объективизация исследований по идентификации личности будет наиболее эффективной, если она базируется на данных по частотам аллелей и генотипов населе-
ния того региона, в котором проживают проходящие по делу лица. Результаты сравнительного анализа генетической вариабельности идентификационных локусов у неродственных индивидуумов, проживающих на различных территориях, свидетельствуют о достоверных различиях даже у представителей одной национальности. Поэтому использование судебно-медицинскими лабораториями в практической работе данных для европеоидного населения России является некорректным и снижает доказательное значение результатов проведенного исследования.
В настоящее время важным направлением развития судебно-медицинского аспекта технологии молекуляр-но-генетического типирования является создание национальных баз данных полиморфизма ДНК, помогающих наиболее объективно регламентировать интерпретационную часть молекулярно-генетических экспертных исследований.
В связи с этим для повышения качества судебно-медицинских молекулярно-генетических экспертиз возникает необходимость исследования полиморфизма идентификационных локусов генома различных популяций населяющих территорию Восточной Сибири с целью выявления региональных особенностей распределения аллельных частот.
Исследования полиморфизма вносят существенный вклад в изучение происхождения и «генетического родства» различных этнических групп и являются составной частью программы международных исследований «Генома человека».
Территорию России населяют многочисленные этнические группы. Одна из таких групп - популяция бурят, проживающая как на территориях Иркутской и Читинской областей, так и в самой Республики Бурятия. Буряты являются характерными представителями центрально-азиатского типа континентальных монголоидов, которые делятся на западных (прибайкальских) и восточных (забайкальских).
Целью нашей работы является изучение полиморфизма специфичностей генов популяции бурят, населяющих Восточную Сибирь на примере жителей Бурятского автономного округа Иркутской области, Агинского автономного округа Читинской области и Республики Бурятия.
В ходе исследования нами устанавливаются аллель-ные частоты 8ТК.-локусов, их соответствие равновесию Харди-Вайнберга, проверяется равновесие по сцеплению, сравнение распределения аллельных частот с европеоидными популяциями и расчет статистических показателей, что позволило бы использовать установленные частотные характеристики микросателлитных 8ТК.-локусов в качестве опорных параметров для стандартных вероятностных расчетов при ДНК- идентификации.
Полученные результаты могут быть использованы в создании региональной популяционной базы данных, что в свою очередь, повысит достоверность судебно-медицинских выводов. Сведения, полученные в результате изучения полиморфизма различных локусов, создадут основу для идентификации личности, установления кровного родства, выявят возможные отличия молеку-лярно-генетической конституции жителей изучаемых популяционных групп на новом молекулярно-генетиче-ском уровне.
