CC BY
91
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
УДК 611-018.46:616-006.6-08
V I. Chissov1, N. S. Sergeeva1, I. K. Sviridova1,I. I. Pelevina2
THE STEM (CLONOGENIC) CELLS OF CANCER: RETURNING TO
THE EARLIER RECEIVED DATA
1Moskow Herzen Research Oncological Institute, Moscow 2Institute of chemical physics RAS, Moscow
ABSTRACT
The represented in this article data on cloning some of human malignant neoplasms was received about 20 years ago by authors and a variety of scientific groups. The results of research are discussing in view of contemporary opinions on the biology of tissue stem cells and pathogenetic therapy, directed on the effective tumor stem cells sterilization.
Key words: clonogenic (stem) tumor cells, tissue stem cells, pathogenetic therapy of cancer.
В. И. Чиссов1, Н. С. Сергеева1, И. К. Свиридова1, И. И. Пелевина2
СТВОЛОВЫЕ (КЛОНОГЕННЫЕ) КЛЕТКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ: ВОЗВРАЩАЯСЬ К ПОЛУЧЕННЫМ ДАННЫМ
1ФГУ МНИОИ им. П. А. Герцена, Москва 2Институт химической физики им. Н. Н. Семенова РАН, Москва
РЕЗЮМЕ
В работе представлены данные по клонированию ряда злокачественных новообразований человека, полученные авторами и различными научными группами около 20 лет назад. Результаты исследования обсуждаются в свете современных представлений о биологии стволовых тканевых клеток и патогенетической терапии, направленной на эффективную стерилизацию стволовых клеток опухоли.
Ключевые слова: клоногенные (стволовые) клетки опухоли, стволовые тканевые клетки, патогенетическая терапия рака.
В 1971 г. A. Hamburger и S. Salmon [21] описали метод культивирования опухолевых клеток в полужидком агаре. С помощью него в карциномах человека удалось выявить по крайне мере 3 популяции опухолевых клеток, различающихся по пролиферативным потенциям и, вероятно, по своему значению для развития опухолевого процесса и исхода лечения:
1) «минорную» популяцию стволовых (клоноген-ных) клеток с неограниченным пролиферативным потенциалом, образующих в полужидком агаре колонии, содержащие более 50 (т. е. >25) клеток;
2) субклоногенные (коммитированные) опухолевые клетки с ограниченным пролиферативным потенциалом, образующие в полужидком агаре кластеры, содержащие < 50 (т. е. <25) клеток;
3) неделящиеся («зрелые») опухолевые клетки (см. рисунок).
Стволовые (клоногенные) опухолевые клетки (СОК)
0,1-0,01%
Субклоногенные (кластерообра-зующие) клетки(СКК) I 0,1-0,5% I
«Зрелые»
опухолевые
клетки
® ® ® ®® ®
Иерархическая модель организации клеток опухоли в отношении способности к пролиферации
8 ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
>- Было высказано предположение о том, что стволо- in vitro из фазы покоя (Go), а также с длительным клевые (клоногенные) опухолевые клетки способны к асим- точным циклом. Эти предположения не лишены осно-метричному делению, при котором дочерние клетки ваний, так как образование кластеров при клонирова-отличаются друг от друга своей судьбой: одна остает- нии клеток доброкачественных опухолей часто все-та-ся стволовой, а другая переходит в разряд коммитиро- ки наблюдалось. Но если учесть вышесказанное, то не ванных [37]. Не исключалась также возможность деле- исключено, что сам факт клонируемости опухоли мо-ния стволовой клетки на 2, т. к. их количество в опухо- жет стать критерием злокачественности (в частности, ли с развитием опухолевого процесса возрастает [37; для пограничных и высокодифференцированных опу-41], равно как и возрастает их гетерогенность вслед- холей) [11; 20]. ствие генетической нестабильности, что показано Стволовые (клоногенные ) опухолевые клетки, ве-в последние годы [15; 33]. роятно, представляют собой «глубокий резерв» опухо-По данным ряда авторов, эффективность колоние- ли в состоянии покоя (Go) и как следствие являются образования (ЭКО) у большинства злокачественных наиболее радио- и химиорезистентной клеточной по-новообразований не превосходит в среднем 0,1 % [11; пуляцией. Следовательно, эффективность любого про-18; 29], т. е. лишь 1 из нескольких тысяч опухолевых тивоопухолевого воздействия определяется тем, до-клеток является клоногенной. Сразу следует заметить, стигнута ли с помощью него полная стерилизация что после ряда пассажей в полужидком агаре ЭКО стволовых опухолевых клеток, т. к. именно они обес-опухолевых клеток увеличивается [18]. Последнее, печивают репопуляцию после завершения химио / лу-с одной стороны, свидетельствует о том, что стволо- чевой терапии и как следствие рецидивирование и ге-вые опухолевые клетки способны к симметричному нерализацию опухолевого процесса [1; 28; 37; 39; 41]. делению, а, с другой, что при культивировании идет Так исследование кривых доза-эффект радиационной отбор в сторону наиболее агрессивных опухолевых гибели клоногенных клеток позволило предположить, популяций. что для некоторых типов опухолей время безрецидив-Около 20 лет назад, когда были опубликованы эти ного лечения после лучевой терапии коррелирует с ра-данные, не было описано ни цитологических, ни био- диочувствительностью клоногенных клеток, а вероят-химических, ни иммунологических маркеров стволо- ность полного локального контроля определяется их вых опухолевых клеток, поэтому их существование исходной долей в опухоли [39]. Поэтому оценка доли, достаточно долго подвергалось сомнению. Поскольку степени радио- и химиочувствительности стволовых единственной отличительной чертой этих клеток явля- клоногенных клеток опухоли — один из реальных пу-лась неограниченная пролиферация, то наиболее ин- тей индивидуализации радио- и химиотерапии. Иссле-формативным методом их выявления было клонирова- дования в этом направлении были выполнены ние в полужидком агаре. Кстати, необходимо заме- в 1980-90-е гг. [31; 27] и возобновлены на новом «вит-тить, что этот метод культивирования стволовых ке» в настоящее время [13; 17 ]. опухолевых клеток остается основным и сегодня [38]. Первая проблема, с которой столкнулись исследо-В настоящее время при лавинообразном количестве ватели, — выделение достаточного (для клонирования работ, посвященных стволовым тканевым клеткам, и дальнейшего определения чувствительности к воз-высказываются предположения о происхождении действиям) количества опухолевых клеток. Использо-стволовых опухолевых клеток от нормальных стволо- ванием разных подходов к механической дезагрегации вых (камбиальных) клеток той или иной ткани. Основ- в сочетании с энзиматическими коктейлями [9; 19; 32] ным аргументом в пользу этого предположения явля- давало возможность получать 5,0х106-1,0х107 живых ется то, что, поскольку стволовые тканевые (камбиаль- опухолевых клеток из 1 г опухолевой ткани. ные) нормальные клетки являются долгоживущими, Большое количество работ было посвящено разра-вероятность накопления в них мутаций сравнительно ботке условий клонирования с целью повышения эф-высока, что в конечном итоге может привести к фор- фективности последнего. При клонировании in vitro, мированию у них злокачественного фенотипа. Такие кроме аминокислот и витаминов, использовали гормо-клетки при симметричном и асимметричном делении нальные добавки [14; 30], липиды сои, холестерин, обеспечивают развитие опухоли [33; 12; 42; 26; 8]. смесь микроэлементов [14], эпидермальный фактор Около 20 лет назад Steel G. G. и Stephens T. C. роста [10]. В отсутствии в то время многих других ци-(1983 г.) высказали и обосновали предположение токинов повышения ЭКО удавалось достигнуть при о том, что метастазы формируются при отсеве из опу- использовании (в качестве фидерного слоя) фибробла-холи именно стволовых опухолевых клеток, в то время стов и ФГА-стимулированных лейкоцитов [10]. ЭКО как персистирующие субклоногенные и неклоноген- учитывали на 14-21-й дни культивирования, исключая ные опухолевые клетки не играют существенной роли из общего числа колоний конгломераты клеток, учет в генерализации опухолевого процесса вследствие ог- количества которых осуществляли на 2-е сут. раниченного или исчерпанного пролиферативного по- Учитывая технические и методические сложности тенциала [36]. Интересно, что в большинстве доброка- выделения достаточного количества клеток для клони-чественных опухолей не удавалось выявить клоноген- рования, невозможность сформировать подходящий ных клеток, что может быть связано как с их малым коктейль из факторов роста (для культивирования) содержанием, так и с невозможностью «вывести» их и истинно низкую клоногенную способность ряда со- ч
№3/том4/2005 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
лидных опухолей, стволовые клоногенные клетки удавалось выявлять лишь в 60-85 % солидных новообразований.
Большой раздел исследований клоногенных опухолевых клеток в 1980-90-е гг. был посвящен изучению возможностей их использования для определения и прогнозирования индивидуальной чувствительности опухолей к различным консервативным воздействиям: радио-, иммуно- и в значительной мере — к химиотерапии. Описанные выше ограничения сужали круг опухолей, для которых можно определить индивидуальную реакцию на химиопрепараты. Дополнительным ограничением стало также и то, что достоверное представление об эффективности того или иного агента можно получить лишь при наличии в контроле не менее 30 колоний.
Тем не менее в ряде работ была подтверждена адекватность метода для индивидуального прогнозирования химиочувствительности и подбора на этой основе рациональных схем химиотерапии. Так, во-первых, наблюдалась вариабельность в реакции клоногенных клеток разных новообразований на химиопрепараты; во-вторых, доля новообразований разных локализаций и гистологических типов к тем или иным препаратам совпадала с общеклиническими представлениями о сравнительной чувствительности к химиотерапии этих опухолей в клинике; и, в-третьих, клоногенные клетки опухолей от больных, ранее получавших химиотерапию, были менее чувствительными к цитостатикам [7; 25].
Клиническая прогностическая сила индивидуального подбора препаратов по реакции клоногенных клеток на цитостатики оказалась сравнительно велика, особенно для выявления случаев индивидуальной резистентности (см. таблицу). Последний факт имеет объяснение: если клетки устойчивы к препаратам in vitro, то они с большой вероятностью будут резистентны к ним и в организме больного (имеются в виду препараты прямого действия, не требующие метаболической активации), т. к. in vitro снимается ряд ограничений для развития цитотоксического эффекта (в частности, нет ограничений для доступа препаратов к опухолевым клеткам). В то же время микроокружение опухолевых клеток in vitro отличается от такового в организме больного, поэтому прогноз чувствительности удается в меньшем проценте случаев.
В отдельных исследованиях было показано, что противоопухолевая химиотерапия с учетом данных об индивидуальной химиочувствительности существенно улучшает результаты лечения [23; 24; 40]. Кроме того, следует ожидать, что исключение из схем лечения конкретных больных препаратов, к которым данная опухоль резистентна, позволит, с одной стороны, отдалить развитие перекрестной химиорезистентнос-ти, а, с другой, избавит больного от бесполезных (в плане противоопухолевого действия), но не безразличных для организма (в плане иммунодепрессивного действия) средств.
Все вышесказанное явилось обоснованием для выполнения собственных исследований в этом направ-
Результаты клинической апробации метода клонирования индивидуальной реакции опухолей человека на цитостатики
Тип опухоли Количество наблюдений Процент случаев с правильно предсказанной реакцией на цитостатики № источника информации
По чувствительности По резистентности
Рак молочной железы 75 70 63 АО
Рак легкого 168 60 90 25
Рак яичников 48 20 73 23
Рак мочевого пузыря 160 57 100 24
лении, которые были опубликованы в 90-е годы [2; 3; 6]. В качестве модели для апробации был выбран рак легкого человека. Исследовано 115 карцином легкого различных гистологических типов.
Для получения опухолевых клеток были разработаны 5 методов дезагрегации опухолевой ткани, включающих различные варианты сочетания механической и многоэтапной ферментной обработки, что давало возможность получать не менее 6,0х106 одиночных жизнеспособных опухолевых клеток из 1 г ткани.
Были исследованы 4 подхода к клонированию опухолевых клеток в полужидком агаре: in vivo — в диффузионных камерах, помещаемых в брюшную полость иммунодепрессированных животных, и 3 in vitro — в ч. Петри и капиллярах. В зависимости от количества выделенных клеток клонирование осуществляли одним или несколькими методами.
По величине выявленной ЭКО опухоли различались в 1000 раз. Максимальная ЭКО составляла 0,1 %, средняя для всей совокупности карцином — 0,01 %, т. е. в среднем 1 из 10000 клеток демонстрировала неограниченный пролиферативный потенциал.
Показано, что из всех апробированных in vitro и in vivo подходов к клонированию наиболее выгодно клонирование в капиллярах, т. к. требует на порядок меньше опухолевых клеток и позволяет выявить в среднем в 3,5 раза больше клоногенных. Кроме того, при этом типе клонирования чаще удается подавить изначальную бактериальную и грибковую контаминацию опухолевого материала. Сам факт существенно большего ЭКО новообразований при клонировании в капиллярах представляется чрезвычайно важным. Во-первых, он является прямым доказательством того, что с помощью использованных подходов к клонированию удается выявить лишь часть стволовых опухолевых клеток. Следовательно, величина ЭКО не может являться абсолютной биологической характеристикой опухоли. В то же время наблюдалась тенденция к увеличению ЭКО с уменьшением степени дифференцировки опухолей. Так в ряду высоко- умеренно- низкодифферен-цированные раки ЭКО составляло 0,0085-0,034-0,02 %
10 ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
>- (хотя в каждой из групп были опухоли с низким и вы- ставление результатов показало высокую и сходную соким ЭКО). Более того, нельзя было не отметить, что специфичность обоих подходов для выявления случа-максимальные значения ЭКО (до 0,1 %) наблюдались ев индивидуальной химиорезистености к тем или все-таки в группе мелкоклеточных раков легкого, кли- иным цитостатикам. Кроме того, было показано, что нически наиболее агрессивных. профиль чувствительности клоногенных и кластеро-Кроме того, мы обратили внимание на «неклони- образующих клеток опухоли в состоянии пролифера-руемость» большинства карциноидов легкого, многие ции часто сходен [5]. из которых характеризуются доброкачественным те- Возрождение интереса к стволовым (клоноген-чением. Анализ полученных результатов в сопостав- ным) опухолевым клеткам в последние годы имеет как лении с клиническими данными лег в основу способа теоретическую подоплеку, так и практическую на-уточняющей диагностики: опухолевые клетки истин- правленность. Прежде всего, описание тканевых (кам-ных карциноидов с доброкачественным течением биальных) стволовых клеток укрепило гипотезу о воз-в описанных условиях колоний не образуют [4]. Сам можном происхождении стволовых опухолевых кле-факт клонируемости свидетельствует о злокачествен- ток от соответствующих тканевых предшественников. ном характере карциноида, диморфности новообразо- Действительно, последние являются долгоживущими, вания или низкодифференцированной опухоли друго- могут многократно делиться, и как следствие аккуму-го гистологического типа, что подтверждалось окон- лировать в течение жизни мутации, которые (в соот-чательным патоморфологическим заключением. В то ветствующим сочетании) могут привести к формиро-же время мы не считаем, что истинные карциноиды ванию их злокачественного фенотипа. Более общим с доброкачественным течением не содержат клоно- теоретическим обоснованием интереса к стволовым генных клеток. Одной из причин их «нулевой ЭКО» клеткам в онкологии является то, что процессы, лежа-может быть большая длительность клеточного цикла щие в основе эмбриогенеза, сходны с таковыми при или «законсервированность» (во) стволовых клеток регенерации тканей. А при развитии злокачественной в карциноидах. На это указывает выраженное класте- опухоли в клетках реактивируется ряд эмбриональных рообразование опухолевыми клетками карциноидов механизмов, обеспечивающих ее рост, установление в полужидком агаре и переход «отдельных кластеров кровотока, распространение [22; 16; 34]. в разряд колоний» при удлинении времени культиви- Общими чертами нормальных тканевых и опухо-рования. Дальнейшее изучение кластеро/колониеоб- левых стволовых клеток является их способность разования, вероятно, с одной стороны, позволит под- к полуконсервативному делению. Показана и актива-вести биологический фундамент под тезис клиницис- ция в нормальных и опухолевых стволовых клетках тов о том, что каждый карциноид несет в себе сходных сигнальных путей [33; 35]. Поэтому изучение потенциал злокачественности, а, с другой стороны, механизмов активации генов при пролиферации выявить патофизиологические условия, которые при- и дифференцировке нормальных стволовых клеток, водят к стимуляции размножения стволовых клеток регулирующая роль цитокинов, гормонов и других в организме больного. биологически активных молекул — один их выходов Определенные результаты, касающиеся регуля- на патогенетическую терапию рака, мишенью которой ции пролиферации клоногенных клеток, были полу- являются стволовые опухолевые клетки; она должна чены и нами. Так, в частности, мы установили, что основываться на молекулярной и генетической класси-ЭКО одних и тех же опухолей в несколько раз выше фикациях опухолей. в капиллярах, чем в ч. Петри. Мы предположили, что В то же время сегодня пока не решен ряд фунда-это может быть связано с нарастанием в них гипоксии ментальных вопросов, в частности: в процессе культивирования, т. к. диффузия газов че- — действительно ли потомки стволовых опухоле-рез торцовые поверхности капилляров очень мала. вых клеток теряют «стволовость» (субклоногенные Это предположение в какой-то мере подтвердилось и «зрелые» опухолевые клетки); при клонировании в полузаполненных герметически — существует ли в опухоли иерархичность клеток закрытых капиллярах: ЭКО возрастала еще на по пролиферативным потенциям, и какие клеточные 50-300 %. Поэтому нельзя исключить, что степень ги- механизмы за нее ответственны? поксии в опухоли больного может быть фенотипичес- Если станут ясны механизмы, обеспечивающие ким регулятором пролиферации стволовых опухоле- переход стволовой клоногенной опухолевой клетки вых клеток. в коммитированную (субклоногенную), то активация В целом же исследование ЭКО, количества класте- этих механизмов могла бы обеспечить гибель всей ров, соотношения колоний и кластеров, их величины опухоли. и морфологии, а теперь и иммунофенотип, в том чис- Заключая, хотим отметить, что целью настоящей ле при разных воздействиях, — адекватный путь из- публикации было ознакомить коллег с данными, ка-учения регуляции пролиферации стволовых клеток. сающимися стволовых опухолевых клеток, получен-Мы осуществили и апробацию различных подхо- ными нами и различными научными группами око-дов к клонированию для оценки индивидуальной чув- ло 20 лет назад, что, может быть, будет полезным ствительности опухолей к цитостатикам, сравнив ее при анализе современной литературы, посвященной результаты с подкапсульным тестом. Прямое сопо- этой теме. ч
№2/том5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1
1
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ 11
>- ЛИТЕРАТУРА human mesenchymal stem cells // Cancer Res. — 2005. — 1. Киселева Е. Г. Гетерогенность опухоли и меха- Vol. 65, № 8. — P. 3126-3135. низмы естественной резистентности при метастазиро- 16. Cheng T. Cell cycle inhibitors in normal and tumor вании // Экспер. Онкология. — 1988. — Т. 10, № 1. — stem cells // Oncogene. — 2004. — Vol. 23, № 43. — P. C. 5-8. 7256-7266. 2. Свиридова И. К., Мороз И. А., Сергеева 17. DeanM., Fojo T., Bates S. Tumour stem cells and H. С. Сравнительная оценка двух способов клонирова- drug resistance // Nat. Rev. Cancer. — 2005. — Vol. 5, ния опухолей легкого // Мед. радиол. — 1991. — № 11. № 4. — P. 275-284. — С. 22-24. 18. Elprana D., Schwachofer J., Kujpers W. et al. In 3. Сергеева H. С., Свиридова И. К., Мороз И. А. vitro chemosensitivity testing of squamous cell carcinoma Методические подходы к получению опухолевых кле- of the head and neck, a preliminary report // Acta otolaryn-ток рака легкого с целью дальнейшего клонирования go. — 1987. — Vol. 103, № 5-6. — P. 529-536. в полужидком агаре // Лаб. Дело. — 1991. — № 2. — 19. Engelholm S. A., Thomen S. M., Brunner N. et al. C. 28-30. Disaggregation of human solid tumors by combined 4. Сергеева H. С., Чиссов В. И., Свиридова И. К. mechanical and enzymatic methods // Br. J. Cancer. — и др. Способ уточняющей дифференциальной диагно- 1985. — Vol. 51. — P. 93-98. стики карциноидов легкого. — Изобрет. Патент 20. Findby H. W., Stenber C. P., Krischer J. P. et al. N2033423, 1995. Pediatric oncology group study of in vitro clonal growth 5. Сергеева H. С. Прогнозирование индивидуаль- patterns of leukemic cells in children acute non- lympho-ной реакции злокачественных опухолей человека на cytic leukemia as a predictor of induction response // лучевую и лекарственную терапию (эксперименталь- Cancer Res. — 1987. — Vol. 47. — P. 4225-4228. ные исследования): Автореф. дис. ... д. биол. наук. 21. Hamburger A. W., Salmon S. E. Primary bioassay Москва, 1991. of human tumor stem cells // Sci. — 1977. — Vol. 197. — 6. Чиссов В. И., Мороз И. А., Сергеева H. С., Сви- P. 461-469. ридова И. К. Клоногенная способность опухолевых 22. Hirschmann-Jax C., Foster A. E., Wulf G.G. et al. клеток рака легкого человека // Экспер. онкол. — 1990. A distinct "side population " of cells with high drug efflux — Т. 12, № 5. — C. 56-59. capacity in human tumor cells // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 7. Albrecht M., Simon W. E., Holrel F Individual in — 2004. — Vol. 101, № 39. — P. 14228-14233. vitro chemosensitivity of human mammary and ovarian 23. Inoue K. Division of clinical chemotherapy: carcinoma cells // Aspekte Klin. Oncol. — 1984. — № 4. chemosensitivite testing for human ovarian cancer on in — P. 597. vitro colony assay // Gan-no-Rinabo. — 1984. — № 30, 8. Al-Hajj M., Clarke M. F Self -renewal and solid (suppl. 9). — P. 1146-1151. tumor stem cells // Oncogene. — 2004. — Vol. 23, № 43. 24. Kanomaru H., Hashimura T., Kakehi V et al. — P. 7274-7282. Cloning ability tumor cells. Evaluation of chemosensitivi- 9. Allalunis-Turner I. I., Siemann D. F. Recovery of ty to drugs in vitro by means of cloning ability of tumor cell subpopulations from human tumor xenografts follow- cells // Acta Urol. Jap. — 1988. — Vol. 34, № 11. — P. ing dissociation with different enzymes // Brit J.Cancer. — 1917-1921. 1986. — Vol. 54, № 14. — P. 615-622. 25. Kanzawa F., Matsushima Y., Ishihara J. L. et al. In 10. Ali-Osman F., Belts P. A. Optimization and charac- vitro chemosensitivity patterns of carcinoma of the lung in terization of the capillary human clonogenic cell assay // human tumor clonogenic assay // J.Pharmacobiol. Dyn. — Cancer Res. — 1988. — Vol. 48, № 3. — P. 715-724. 1986. — Vol. 9, № 9. — P. 715-721. 11. Aogauchi R., Tsubota N., Ischil N. et al. The eval- 26. Kopper L., Hajdu M. Tumor stem cells // Pathol. uation the drug sensitivity of lung cancer by colony forma- Oncol. Res. — 2004. — Vol. 10, № 2. — P. 69-73. tion test // Lung Cancer. — 1987. — Vol. 27, №17. — P. 27. Kubota T., Kawamura E., Kurihara H. et al. 679-686. Clinical study of clonogenic assays with reference to adju- 12. Bapat S. A., Mali A. M., Koppicar C. B. et al. Stem vant cancer chemotherapy after operation // Nippon Geka-and progenitor -like cells contribute to the aggressive Gakkai Zasshi. — 1988. — Vol. 87, №2. — P. 154-161. behavior of human epithelial ovarian cancer // Cancer Res. 28. Marie J-P., Thevanin D., Littoun R. In vitro sensi- — 2005. — Vol. 65, № 8. — P. 3025-3029. tivity of normal and leukemic myeloid clonogenic cells to 13. BehbodF., Rosen J. M. Will cancer stem cells pro- hyperthermia: absence of selective effect // Exp.Hematol. vide new therapeutic targets? // Carcinogenesis. — 2005. — 1989. — Vol. 17, № 17. — P. 809-811. — Vol. 26, № 4. — P. 703-711. 29. Mattox D. E., von HoffD. D., Clar G. M. et al. 14. Bernabel P. A., Santini V., Dal Nozzo O. et al. Factors that influence growth of head and neck squamoses Clonogenic growth of acute non-lymphocytic leukemia carcinoma in the soft agar cloning assay // Cancer. — cells in serum-free medium // Experientia. — 1988. — 1984. — Vol. 53. — P. 1736-1741. Vol. 44, №10. — P. 903-906. 30.Offestad L., Tveit K. M., Mifolt H. K. et al. 15. Burns J. S, Abdallah B. M., Guldberg P. et al. Cultivation ofbreast carcinoma in soft agar. Experience Tumorigenic heterogeneity in cancer stem cells evolved with 237 fresh tumor specimen // Br. J. Cancer. — 1988. from long-term cultures of telomerase immortalized — Vol. 58, № 1. — P. 8-12. ч
№2/том5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
I
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
31. Ohinosti T., Hiraki S. In vitro drug -sensitivity test using human tumor clonogenic assay in lung cancer patients // Jap. J.Cancer. — 1985. — Vol. 12, № 8. — P. 1582-1587.
32. Pavelic Z. P., Slocum H., Rustum J. et al. Colony growth in soft agar of human melanoma, sarcoma, lung carcinoma cells disaggregated by mechanical and enzymatic methods // Cancer Res. — 1980. — Vol. 40. — P. 2160-2164.
33. Reya T, Morrison S. J., Clarke M. F. et al. Stem cells, cancer, and cancer cells // Nature. — 2001. — Vol. 414. — P. 105-111.
34. Sell S. Stem cell origin of cancer and differentiation therapy // Crit. Rev. Oncol. Hematol. — 2004. — Vol. 51, № 1. — P. 1-28.
35. Singh S. K., Clarke I. D., Hide T., Dirks P. B. Cancer stem cells in nervous system tumors // Oncogene. — 2004. — Vol. 23, № 43. — P. 7267-7273.
36. Steel G. G., Stephens T. C. Stem cells in tumors // In: Stem cells, Ed. C.S.Potten, Edinburg — London-New-York, 1983. — P. 271.
37. Stem cells in neoplasia // Lancet. — 1989. — Vol.1, № 8640. — P. 701-702.
38. Tam K. F., Ng Ty, Liu S. S. et al. Potential application of the ATP cell viability assay in the measurement of intrinsic radiosensitivity in cervical cancer // Gynecol.Oncol. — 2005. — Vol. 96, № 3. — P. 755-770.
39. Tucker S. L., Thames H. D. The effect of patient-to-patient on the accuracy of predictive assays of tumor response to radiotherapy: a theoretical evaluation // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. — 1989. — Vol. 17, № 1. — P. 145-157.
40. Werner A., Knopp C., Schulz B.et al. First experiences with the human tumor stem cell assay culturing gynaecological and abdominal carcinomas // Aspekte Klin Oncol. — 1984. — P. 723.
41. Wheldon M. E., Michalowski A. S. Alternative models for the proliferative structure of normal tissue and their response to irradiation // Brit. J.of Cancer. — 1986. — Vol. 6, Suppl.7. — P. 382-384.
42. Yuan X., Curtin J., Xiong Y. et al. Isolation of cancer stem cells from adult glioblastoma multiforme // Oncogene. — 2004. — Vol. 23, № 58. — P. 9392-9400.
Поступила 23.01.2006.
>-
4
