CC BY
17
- М. : Медицина, 1977. - С. 66-68.
7. Стефани, Д. В. Клеточные мембраны при иммунном ответе / Д. В. Стефани, И. И. Зернов // Проблемы мембранной патологии в педиатрии / сост. Д. В. Стефани, И. И. Зернов. - М. : Медицина, 1984.- С. 151-161.
8. Теплый, Д. Л. Особенности морфологической картины сыворотки крови мышей разных возрастных групп при экспериментальном стрессе / Д. Л. Теплый, Н. А. Аюпова // Естественные науки : журнал фундаментальных и прикладных исследований. - 2005. - № 10. - С. 47-50.
9. Ohkawa, H. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction / H. Ohkawa, N. Ohishi, K. Yagi // Anal. Biochem. - 1979. - Vol. 95, № 2. - P. 351-358.
Рожкова Ирина Семеновна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: [email protected].
Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и морфологии человека и животных, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет» России, Россия, 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, д. 20а, тел.: (8512) 25-17-09, е-mail: [email protected].
Фельдман Бронислав Владимирович, доктор биологических наук, заведующий кафедрой ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, е-mail: [email protected].
УДК 612.82:599.323.4
© А.А. Самоделкина, Л.Г. Сентюрова, В.А. Шаталин, 2012
А.А. Самоделкина, Л.Г. Сентюрова, В.А. Шаталин
СТРУКТУРНО-ВРЕМЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ХОРИОЭПИТЕЛИОЦИТОВ СОСУДИСТОГО СПЛЕТЕНИЯ БОКОВЫХ ЖЕЛУДОЧКОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА
НОВОРОЖДЕННЫХ КРЫС
ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России
Проведен анализ околосуточного ритма синтеза общего белка в цитоплазме хориоэпителиоцитов сосудистого сплетения боковых желудочков головного мозга новорожденных крыс с параллельной оценкой динамики объема цитоплазмы. Показано, что в течение суток регистрируется двукратное увеличение массы общего белка, что подтверждается морфометрически.
Ключевые слова: хориоэпителиоциты, головной мозг, крысы, околосуточный ритм, белок.
A.A. Samodelkina, L.G. Sentyurova, V.A. Shatalin
THE STRUCTURE-TEMPORAL ORGANISATION OF CHORIOEPITHELIOCYTES
OF VASCULAR PLEXUS LATERAL VENTRICLES IN NEONATE RAT BRAIN
The analesis of merely day rhythm of syntesis in general protein of cytoplasm chorioepitheliocytes of vascular plexus of lateral ventricles in neonate rat brain with parallel estimation of the dynamics amount of cytoplasm was made. It showed the double increasing of the mass of general protein, that was proved corroborated morphometrically.
Key words: chorioepitheliocytes, brain, rats, diurnal, protein.
Введение. Сосудистые сплетения головного мозга (ССГМ) представляют собой активный физиологический барьер между кровью и тканью головного мозга (ГМ), задачей которого является не только регуляция избирательной проницаемости ряда веществ, но и обеспечение сложных метаболических процессов в клетках центральной нервной системы [1, 2, 4, 5, 6]. Так как ССГМ, в частности, сосудистое сплетение боковых желудочков (ССБЖ) ГМ, играют ведущую роль в секреции и резорбции цереброспинальной жидкости, важно определить, как меняется функциональная активность хо-
риоэпителиоцитов (ХЭ) во временном аспекте. Одним из основных показателей степени напряженности метаболических процессов в клетке считают динамику накопления в них общего белка (ОБ) [3]. Однако если в литературе имеются сведения о структурной организации ССБЖ ГМ, то вопрос временной организации метаболических процессов, подкрепленный морфологической базой данной структуры, остается не изученным.
Цель: изучить околосуточную динамику синтеза ОБ в ХЭ ССБЖ ГМ новорожденных крыс с параллельным анализом кинетики объема цитоплазмы.
Материалы и методы. В качестве объекта исследования выбраны новорожденные беспородные крысы обоего пола, средним весом 3-6 г. Животных забивали быстрой декапитацией через каждые 4 часа по 3 особи на временную точку в течение 3 суток.
Для выявления общего белка и морфометрического анализа ХЭ аутопсийный материал фиксировали в жидкости Карнуа, заливали в парафин, готовили серийные срезы толщиной 7-10 мкм. Депа-рафинированные срезы окрашивали по M. Alfert, I. Geschwind (1953) 0,1 % раствором прочного зеленого на 1 % уксусной кислоте (рН 2,2).
Готовые гистологические препараты подвергались количественной морфометрии на автоматизированном комплексе «Морфолог». В каждом случае морфометрические параметры и количество ОБ оценивались в 100 клетках. Полученные результаты проанализированы с помощью критерия Стьюден-та (t). Статистический и графический анализ проводился с применением программ Statistica 6.0, Microsoft Office Excel. Отличия между группами считали статистически значимыми при р < 0,05. При морфометрическом исследовании ХЭ ССБЖ ГМ оценивали объем цитоплазмы (V_Cyt) и массу ОБ (М_белка).
Результаты и их обсуждение. Количественный метод исследования показал, что у новорожденных крыс в ХЭ ССБЖ ГМ объем цитоплазмы претерпевает околосуточные динамические изменения (табл., рис.).
Таблица
Показатели хориоэпителиоцитов сосудистого сплетения боковых желудочков головного мозга
новорожденных крыс во временном аспекте (M ± m, n = 9)
Параметры Время суток, ч
4 (контроль) 8 12 16 20 24 4
V Cyt, мкм3 12,14 ± 0,9 9,64 ± 0,5* 7,47 ± 0,9** 12,64 ± 0,6 9,85 ± 0,1* 15,1 ± 0,8* 14,32 ± 0,8
Масса белка, усл.ед. 2632,1 ± 144,3 1972,4± 115,1** 1892,0 ± 117,3** 2550,5 ± 79,4 2330,6 ± 145,9 3209,1 ± 152,3* 2835,2 ± 135,6
Примечание: * -р < 0,05, ** -р < 0,01, *** -р < 0,001 в сравнении с «4 ч»
4000 "S 3500 5 3000
ъ
и 2500
5
о 2000
Îh
И 1500 ю о
S 1000
о й
s 500 0
-♦-М_белка ■'■'■'■'■'■'■'О-™'-'-' V_Cyt
Рис. Околосуточная динамика морфофункциональных показателей хориоэпителиоцитов сосудистого сплетения боковых желудочков головного мозга новорожденных крыс
12 16 20 время суток (ч)
24
4
8
4
В течение исследуемого времени объем цитоплазмы статистически достоверно уменьшается дважды. Первое уменьшение зафиксировано в 12 часов на 38,5 % (р < 0,01) (оно же является минимальным в ряду полученных данных), второе - в 20 часов на 18,9 % (р < 0,05) по отношению к контролю. Каждое снижение показателей объема цитоплазмы сопровождается его дальнейшим увеличением - на 69,2 % в 16 часов относительно минимума и на 53,3 % в 24 часа относительно значения предыдущей точки. Следует отметить, что средние показатели 16-часовой точки приближены к таковым точки контроля, тогда как в 24 часа объем ядра статистически достоверно выше на 24,3 % (р < 0,05) по отношению к исходному показателю.
Анализируя околосуточный ритм синтеза ОБ в ХЭ ССБЖ ГМ новорожденных крыс следует отметить, что к 8 часам масса ОБ статистически достоверно снижается на 25 % (р < 0,01) относительно показателя 4-часовой точки, принятой за контроль. К 12 часам отмечается дальнейшее, но уже не значительное снижение массы ОБ относительно 8 часов, которое остается статистически достоверным по отношению к исходному значению. Средний показатель параметра в 12 часов является минимальным. В 16 часов масса ОБ возрастает на 34,8 % по отношению к 12 часам, приближаясь к среднему показателю 4-часовой точке. Это говорит о нарастании синтетического процесса. К 20 часам количество белка уменьшается незначительно как по отношению к 16 часам, так и относительно контроля. В течение 20-24 часов количество ОБ увеличивается повторно: возрастая к 24 часам на 37,7 % относительно предыдущей (20-часовой) точки и на 21,9 % (р < 0,05) относительно контроля. Средний показатель массы ОБ в 24 часа является максимальным. Таким образом, именно на эту временную точку у новорожденных крыс приходится пик синтетических процессов. Изучаемый параметр на протяжении 24-4 часов остается относительно стабильным.
Заключение. Кинетическая кривая, характеризующая околосуточный ритм синтеза ОБ в ХЭ ССБЖ ГМ новорожденных, характеризуется двумя фазами снижения параметра, которые соответствуют 12 и 20 часам, каждая из них в дальнейшем сопровождается увеличением массы ОБ в 16 и
24 часа, соответственно, что подтверждается морфометрически.
Список литературы
1. Автандилов, Г. Г. Сосудистые сплетения головного мозга (морфология, функция, патология) / Г. Г. Автандилов. - Нальчик : Кабардино-Балкарское книжное издательство, 1962. - 144 с.
2. Бабик, Т. М. Ворсинки сосудистых сплетений желудочков головного мозга человека / Т. М. Бабик // Морфология. - 2002. - Т. 121, № 2-3. - С. 16.
3. Комаров, Ф. И. Хронобиология и хрономедицина / Ф. И. Комаров, С. И. Рапопорт. - М. : Триада-Х, 2000. - 488 с.
4. Коржевский, Д. Э. Тканевая организация и развитие сосудистого сплетения головного мозга человека / Д. Э. Коржевский // Морфология. - 1998. - Т. 133, № 2. - С. 105-114.
5. Сентюрова, Л. Г. Гистофизиология сосудистых сплетений головного мозга у позвоночных в фило- и онтогенезе / Л. Г. Сентюрова, Ю. А. Романов, А. Н. Бекчанов. - Астрахань : АГМА, 2001. -
25 с.
6. Adami, M. Scanning electron microscopy of the choroid plexus of the lateral ventricle of the horse / M. Adami, M. M. Faria, A. E. Almeida et al. // Anat. Histol. Embryol. - 2005. - Vol. 34, № 6. - P. 379-382.
Самоделкина Анна Александровна, ассистент кафедры медицинской биологии с курсом экологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медецинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-25, е-таП: [email protected].
Сентюрова Людмила Георгиевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой медицинской биологии с курсом экологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медецинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-25, е-mail: [email protected].
Шаталин Виктор Анатолиевич, ассистент кафедры медицинской биологии с курсом экологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медецинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-25, е-mail: [email protected].
