Структура микрофлоры производственной среды отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных Национального госпиталя педиатрии г. Ханой, СРВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ноябрь №11 (2QE) ЗНиСО

Q

УДК 616-093/-098

СТРУКТУРА МИКРОФЛОРЫ ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ СРЕДЫ ОТДЕЛЕНИЯ РЕАНИМАЦИИ И ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ НОВОРОЖДЕННЫХ НАЦИОНАЛЬНОГО ГОСПИТАЛЯ ПЕДИАТРИИ Г. ХАНОЙ, СРВ

Т.Ф. Степанова1, Л.В. Катаева1, А.П. Ребещенко1, Le Thanh Hai3, Khu Thi Khanh Dung3, О.В. Посоюзных1, А.Н.Кузнецов2, Le Thi Minh Huong3, Tran Thi Nhai2

1ФБУН Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии

Роспотребнадзора, Тюмень, Россия

2Совместный Российско-Вьетнамский тропический научно-исследовательский и технологический центр (Тропический центр), Ханой, Вьетнам

3Национальный госпиталь педиатрии, Ханой, Вьетнам

Представлены результаты исследований структуры микрофлоры, выделенной с объектов производственной среды отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных Национального госпиталя педиатрии, г. Ханой. Показано, что структура микрофлоры представлена широким спектром преимущественно грамотрицательных бактерий обладающими высокой поли-рестентностью, как в инфекционном, так и в неинфекционном блоках отделения. Ключевые слова: микрофлора, объекты производственной среды, смывы.

T.F. Stepanova, L.V. Kataeva, A.P. Rebeschenko, Le Thanh Hai, Khu Thi Khanh Dung, O.V. Posoiuz-nykh, A.N. Kuznetsov, Le Thi Minh Huong, Tran Thi Nhai □ STRUCTURE OF MICROFLORA OF PRODUCTION ENVIRONMENT OF REANIMATION AND INTENSIVE THERAPY OF NEWBORNS NATIONAL HOSPITAL PEDIATRICS HANOI, VIETNAM □ Tyumen Region Infection Pathology Research Institute Rospotrebnadzor, Tyumen, Russia; The Joint Russian-Vietnamese Tropical Research and Technology Centre (Tropical Centre), Hanoi, Vietnam; National hospital of pediatrics (NHP), Hanoi, Vietnam.

The results of studies of the structure of microflora isolated from the production environment of the Neonatal Intensive Care Unit of the National Pediatric Hospital in Hanoi are presented. It is shown that the structure of the microflora is represented by a wide spectrum of predominantly^ Gram-negative bacteria with high polyresistant, both in the infectious and non-infectious separation units. Key words: microflora, objects of industrial environment, washings.

Широкое распространение инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП), в медицинских организациях различного профиля, значительный ущерб здоровью населения, экономике и демографической ситуации в различных странах континента определяют актуальность их профилактики на современном этапе [4]. Приоритетным направлением профилактики ИСМП являются, прежде всего, своевременная лабораторная диагностика с изучением биологических свойств возбудителей инфекционно-воспалительного процесса, а также эпидемиологическая и гигиеническая оценка больничной среды и условий пребывания в учреждении здравоохранения пациентов и медицинских работников [6]. Эпидемиологический контроль является основой успешной профилактики и борьбы с ИСМП. Общеизвестно, что профилактика ИСМП у новорожденных является одной из актуальных проблем в неонатологии и эпидемиологии, поскольку уровень гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных до сих пор остается высоким [1]. ИСМП являются важнейшей составляющей проблемы обеспечения качества медицинской помощи и создания безопасной среды пребывания для пациентов и персонала в организациях, осуществляющих медицинскую деятельность [3, 7].

Микробиологический мониторинг циркулирующей в лечебной организации микрофлоры у пациентов и во внешней среде, а также мониторирование ее резистентности к антибактериальным препаратам, является важным эта-

пом в комплексе противоэпидемических мероприятий ИСМП.

В рамках реализации программы сотрудничества Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека с Министерством здравоохранения Социалистической Республики Вьетнам по оказанию помощи СРВ в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия населения в 2015-2017 гг. ФБУН ТНИИКИП Роспотреб-надзора проводил работу по внедрению микробиологического мониторинга и систем биологической безопасности медицинской помощи в лечебных организациях [8-10].

Исследование проведено на базе Научно-исследовательского института детского здоровья Национального педиатрического госпиталя г. Ханой, в соответствии с договором о научно-техническом сотрудничестве с Тюменским научно-исследовательским институтом краевой инфекционной патологии.

Цель нашего исследования - изучение структуры микрофлоры, циркулирующей на объектах производственной среды отделения реанимации и интенсивной терапии Национального госпиталя педиатрии г. Ханой Социалистической Республики Вьетнам.

Материалы и методы. Материалом для исследования послужили смывы с объектов производственной среды в отделении реанимации и интенсивной терапии новорожденных (ОРИТ): по 40 смывов в палатах новорожденных с инфекционными («грязное») и неинфекционными («чистое») заболеваниями, 20 смы-

54

ЗНиСО ноябрь Ml (2QE)

вов в комнатах для приготовления молочной смеси и хранения стерильных растворов. Смывы отбирались в зонах наибольшего риска скопления микроорганизмов во время реализации лечебно-диагностического процесса: с поверхности медицинского оборудования (кювезы для новорожденных, контейнер вакуумного электроотсоса, кнопки реанимационных приборов и др.), мебели, водопроводных кранов и раковин для мытья рук, рук и спецодежды персонала, дверных ручек. Всего выделено и идентифицировано 228 штаммов бактерий.

Видовую идентификацию бактерий осуществляли по прямому белковому профилированию с помощью времяпролетной масс-спектро-метрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией (масс-спектрометр MALDI TOF MS серии Microflex LT) с использованием программного обеспечения Maldi BioTyper 3,0. Уровень достоверности идентификации выше 2,0 свидетельствовал о точной видовой идентификации.

Резистентность бактерий к антибиотикам определялась диско-диффузионным методом на среде Мюллер-Хинтон (HiMedia, Индия) в соответствии с действующими методическими указаниями [2, 5]. Бактерии рода Staphylococcus исследовались на чувствительность к бензил-пенициллину, оксациллину, гентамицину, оф-локсацину, ципрофлоксацину, тетрациклину, эритромицину. У штаммов бактерии рода En-terococcus определялась чувствительность к ампициллину, бензилпенициллину, имипенему, ципрофлоксацину, левофлоксацину, гентами-цину, стрептомицину, ванкомицину, тетрациклину. Изоляты неферментирующих грамотри-цательных бактерий (НГОБ) и бактерий семейства Enterobacteriaceae - к ампициллину, ген-тамицину, тетрациклину, офлоксацину, цефу-роксиму, цефалексиму, цефтриаксону, меропе-нему, имипенему, хлорамфениколу. В данном исследовании использовались диски антибиотиков производства Biorad (США).

Статистическая обработка данных осуществлялась лицензионным программным обеспечением SPSS версия 22.0, предназначенным для выполнения научных исследований, отвечающих всем требованиям медицины, основанной на доказательствах.

Результаты и обсуждение. Установлено, что из всех смывов с объектов производственной среды ОРИТ рост микроорганизмов отмечен в 82 % проб. Структура выделенных и

прочие помещения "грязный11 блок

"чистый" блок

0,00 10,00 ■ грамположительные бактерии

идентифицированных микроорганизмов отлича- ^^ лась большим разнообразием и представлена 10 = семействами, 22 родами и 52 видами бактерий. еэ

Выделенные бактерии условно распределе- о ны на группы: грамположительные; бактерии семейства Enterobacteriaceae; неферментирую-щие грамотрицательные бактерии (НГОБ) и грибы рода Candida. В группу грамположи-тельных вошли бактерии родов Staphylococcus (S. saprophyticus, S. hominis, S. epidermidis, S. hae-

molyticus, S. xylosus, S. sciuri), Enterococcus

(E. faecalis, E. faecium, E. casseliflavus), Bacillus (B. megaterium, B. pumilus), Aerococcus viridans.

В группе бактерий семейства Enterobacteriaceae идентифицированы микроорганизмы родов Escherichia (E. hermannii, E. vulveris), Klebsiella (K. pneumoniae, K. oxytoca), Serratia (S. mar-cescens), Cedecea, Citrobacter (C. braaki), Enterobacter (E. cloacae, E. aerogenes, E. kobei, E. As-buriae, E. ludwigii, E. hirae, E. amnigenus), Pan-toea (P. agglomerans, P. calida, P. septica, P. dispersa), Serratia (S. marcescens), Leclercia (L. ade-carboxylata), Cronobacter (C. sakazakii), Kluyvera (K. cryocrescens) и Raoultella (R. ornithinolytica).

Бактерии родов Acinetobacter (A. baumannii, A. pittii, A. junii, A. johnsonii, A. lwoffii, A. baylyi, A. ursingii), Pseudomonas (P. aeruginosa, P. mon-teilii, P. putida, P. luteola, P. oryzihabitans), Ste-notrophomonas (S. maltophilia), Burkholderia (B. fungorum), Aeromonas (A. caviae, A. hydro-phila) составили группу НГОБ.

Среди грибов рода Candida определены виды: C. albicans, C. guilliermendii.

По вышеуказанным группам вся микрофлора, выделенная из смывов, распределилась следующим образом: 44,1 % штаммов отнесено к семейству Enterobacteriaceae; 27,1 % составили НГОБ; грамположительные кокки и грибы рода Candida соответственно - 22,3 и 0,9 %; прочие бактерии (родов Bacillus, Aerococcus, Lacto-coccus) составили 5,6 %.

Сравнительный анализ структуры микрофлоры, выделенной с объектов производственной среды (рис. 1) по помещениям, свидетельствует об отсутствии статистически значимых различий. Среди бактерий семейства Enterobac-teriaceae, занимающих в структуре микрофлоры почти половину всех циркулирующих бактерий: 36,64 % штаммов составили представители рода Enterobacter и 26,73 % - рода Pantoea. Следующими по частоте обнаружения были Leclercia adecarboxylata (9,9 %), бактерии рода Klebsiella (8,9 %) и Serratia marcescens (7,9 %).

2 0,00 30,00 40,00 50,00

НГОБ ■ бактерии семейства Enterobacteriaceae

Рис. 1. Структура микрофлоры, циркулирующей на объектах производственной среды

в различных помещениях ОРИТ (%)

ноябрь №1 (2QE) ЗНиСО

55

^^ Структура грамположительных кокков |— представлена родами Staphylococcus (58,8 %) и ° Enterococcus (41,2 %). Среди неферментирую-щих грамотрицательных бактерий более чем в '^Е. половине случаев идентифицировались бакте-^ij рии Acinetobacter (56,5 %). Чуть реже высевались Aeromonas (20,97 %) и Pseudomonas (16,1 %).

Анализ антибиотикорезистентности бактерий рода Enterococcus (рис. 2А), выделенных с объектов производственной среды в помещениях ОРИТ, свидетельствует о том, что почти половина циркулирующих штаммов обладают резистентностью к бензилпенициллину, ими-пенему и тетрациклину. Также у изолятов энтерококков (около 60 % штаммов) выявлена резистентность высокого уровня к гентамицину и другим аминогликозидам (за исключением стрептомицина). Другую половину штаммов энтерококков можно отнести к «дикому типу» с природной резистентностью к гентамицину низкого уровня. Высокий уровень резистентности к стрептомицину определен у 60 % штаммов оода Enterococcus. Изоляты. относящиеся к

Тетрациклин Ванкомицин Стрептомицин Гентамицин Левофлоксацин Ципрофлоксацин Имипенем Б ензилпешщшшин Ампициллин

«дикому типу» с природной резистентностью к стрептомицину низкого уровня, составляют соответственно 40 %.

Характеризуя антибиотикорезистентность бактерий рода Staphylococcus (рис. 2Б), выделенных с объектов производственной среды в помещениях ОРИТ, важно подчеркнуть высокую резистентность штаммов (почти в 60 % случаев) к оксациллину (известно, что штаммы, устойчивые к оксациллину рассматриваются как устойчивые ко всем бета-лактамам) и эритромицину. Половина выделенных штаммов стафилококков проявляла резистентность к це-фокситину, что расценивается как резистентность к цефалоспоринам (за исключением цеф-тазидима, цефиксима и цефтибутена). Антибиотикорезистентность НГОБ (рис. 3А), свидетельствует о том, что в среднем половина выделенных штаммов этой группы устойчивы к пенициллинам, цефалоспоринам и карбопене-мам, а также к тетрациклинам. Штаммы бактерий семейства Enterobacteriaceae (рис. 3Б) также проявляли резистентность к пенициллинам, цефалоспоринам и карбопенемам.

Эршромицин Клищщмпц. Гентамицин Офпоксацин Левофпокс, Цшфофлок. Цефокситин Оксицилин

0

20

40

60

80

Рис. 2. Характеристика антибиотикорезистентности бактерий рода Enterococcus (А) и Staphylococcus (Б), выделенных с объектов производственной среды в помещениях ОРИТ

80,00 70,00 60,00 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00

Я

it

I

О)

J

го

О.

ГО

о £

О

о

CL

£

О)

О)

•е-

О)

I О

и эс го

-е-

О)

(V X (U

с

0

Q.

01

ш

X

ш с

г о х

X X О) -в-

го

CL

о

X

Рис. 3. Характеристика антибиотикорезистентности НГОБ (А) и бактерий семейства ЕгиегоЬасГепасеае (Б), выделенных с объектов производственной среды в помещениях ОРИТ

ЕС

ЗНиСО ноябрь №11 (29С)

Одним из главных показателей принадлежности бактерий к нозокомиальным штаммов является их резистентность к антибиотикам. Резистентность к 5-10 антибактериальным препаратам выявлена у 90 % исследованных штаммов, то есть большая часть циркулирующих на объектах окружающей среды бактерий обладали выраженной полирезистентностью.

Заключение. Установленные ранее значительные нарушения микробиоценоза детей, пациентов ОРИТ, а также результаты настоящего исследования, указывающие на высокую обсе-мененность объектов окружающей среды, рук и спецодежды персонала, доказывают низкую эффективность системы биологической безопасности при оказании медицинской помощи. Кроме того, полученные результаты - широкий спектр условно-патогенных бактерий и их полирезистентность к антибактериальным препаратам - свидетельствуют о том, что в ОРИТ новорожденных существуют предпосылки для формирования субпопуляций бактерий с преимуществами выживания в агрессивной больничной среде. Таким образом, микробиологический мониторинг объектов производственной среды, персонала и пациентов в лечебной организации, включающий мониторирование резистентности микрофлоры к антибактериальным препаратам, является важным этапом в комплексе профилактических мероприятий ИСМП.

ЛИТЕРАТУРА

1. Верещагин Д.И. и др. Эффективность применения информационных технологий в системе профилактики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, у новорожденных и родильниц / Д.И. Верещагин, Т.М. Обухова, М.А. Вайтович // Медицинский альманах. 2016. № 3(43). С. 50-52.

2. Клинические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам». (Утв. на расширенном совещании Межрегиональной ассоциации по клинической микробиологии и антимикробной химиотерапии (Москва, 22.05.2015 г.). Версия-2015-02. 162 с.

3. Князева Т.Г. и др. Производственный контроль - мера профилактики ИСМП / Т.Г. Князева, А.С. Верхотурцева // Дезинфекционное дело. 2017. №1 (99). С.49.

4. Коза Н.М. Инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи. Эпидемиология и профилактика (Обзорная лекция) // Пермский медицинский журнал. 2013. N° 3. Т. XXX. С. 135-143.

5. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания МУК 4.2.1890-04. М. Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России. 2004. 91 с.

6. Покровский В.И. и др. Пути совершенствования лабораторной диагностики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи / В.И. Покровский, В.Г. Акимкин, Н.И. Брико [и др.] // Медицинский альманах. 2012. N° 2 (21). С. 12-16.

7. Попова А.Ю. и др. Надзор за соблюдением санитарно-эпидемиологического законодательства при оказании медицинской помощи в целях обеспечения ее качества и безопасности / А.Ю. Попова, Е.Б. Ежлова, Е.П. Игонина [и др.] // Вестник Росздравнадзора. 2016. №»1. С. 74-80.

8. Степанова Т.Ф. и др. Предварительные результаты исследования фекалий жителей г. Ханой СРВ на носительство возбудителей паразитарных, вирусных и бактериальных инфекций / Т.Ф. Степанова, Л.В. Катаева, А.Н. Кузнецов, [и др.] // Здоровье населения и среда обитания-ЗНиСО. 2016. № 11 (294). С. 41-43.

9. Степанова Т. Ф. и др. Структура микробиоценоза грудных детей - пациентов Национального госпиталя педиатрии г. Ханой, СРВ / Т.Ф. Степанова, Л.В. Катаева, А.П. Ребе-

щенко [и др.] // Здоровье населения и среда обитания-ЗНиСО. 2017. № 3 (299). С. 54-56.

10. Степанова Т.Ф. и др. Характеристика антибиотикорези-стентности бактерий, выделенных от грудных детей - пациентов Национального госпиталя педиатрии г. Ханой, СРВ / Т.Ф. Степанова, Л.В. Катаева, А.П. Ребещенко [и др.] // Здоровье населения и среда обитания-ЗНиСО. 2017. № 5 (290). С. 51-53.

REFERENCES

1. Vereshchagin D.I., Obukhova T.M., Vaitovich M.A. Effektiv-nost' primeneniya informatsionnych technologij v sisteme pro-filaktiki infektsij, svjazannych s okazaniem meditsinskoj po-moshchi u novorozhdennych i rodil'nits [Effective use of information technologies in the system of prevention of healthcare-associated infections of newborns and puerperas]. Med-itsinskiy al'manakh, 2016, no. 3 (43), pp. 50-52. (In Russian)

2. Klinicheskie rekomendatsii «Opredelenie chuvstvitel'nosti mik-roorganizmov k antimikrobnym preparatam» [Clinical recommendations «Determination of the sensitivity of micro-organisms to antimicrobial drugs»]. (Utv. na rasshirennom soveshchanii Mezhregionalnoy assotsiatsii po klinicheskoy mikrobiologii i an-timikrobnoy khimioterapii (Moskva. 22.05.2015 g.). Versiya-2015-02. 162 s. (In Russian) (In Russian)

3. Knyazeva T.G., Verkhoturtseva A.S. Proizvodstvennyi kon-trol' - mera profilaktiki ISMP [Production control - healthcare-associated infections preventive measures] Dezinfektsion-noe delo, 2017, no. 1 (99), pp. 49. (In Russian)

4. Koza N.M. Infektsii, svjazannye s okazaniem meditsinskoj pomoshchi [Healthcare-associated infections]. Epidemiologija i profilaktika (Obzornaya lektsiya). Permskij meditsinskij zhur-nal, 2013, no. 3, vol. XXX, pp. 135-143. (In Russian)

5. Opredeleniye chuvstvitelnosti mikroorganizmov k antibakterial-nym preparatam: Metodicheskiye ukazaniya MUK 4.2.1890-04 [Determination of the sensitivity of micro-organisms to antibacterial drugs: Study guide 4.2.1890-04]. Moscow. Federalnyy tsentr gossanepidnadzora Minzdrava Rossii. 2004. 91 p. (In Russian).

6. Pokrovskiy V.I., Akimkin V.G., Briko N.I. [et al.] Puti sover-shenstvovaniya laboratornoj diagnostiki infektsij, svyazannych s okazaniem meditsinskoj pomoshchi [Ways to improve the laboratory diagnosis of healthcare-associated infections]. Meditsin-skij al'manah, 2012, no. 2 (21), pp. 12-16. (In Russian)

7. Popova A.Yu., Ezhlova E.B., Igonina E.P. [et al.] Nadzor za sobljudeniem sanitarno-epidemiologicheskogo zakonodatel'st-va pri okazanii meditsinskoj pomoshchi v tseljach obe-spechenija ee kachestva i bezopasnosti [Supervision over observance of sanitary and epidemiological legislation in the provision of health care to ensure its quality and safety] Vest-nikRoszdravnadzora, 2016, no. 1, pp. 74-80. (In Russian)

8. Stepanova T.F., Kataeva L.V., Kuznetsov A.N. [et al.] Pred-varitel'nye rezul'taty issledovanija fekalij zhitelej g. Hanoj SRV na nositel'stvo vozbuditelej parazitarnyh, virusnyh i bak-terial'nyh infektsij [Preliminary research results of feces of the population of Hanoi SRV for the presence of parasitic, viral and bacterial infections]. Zdorovye naseleniya i sreda obi-taniya, 2016, no. 11 (294), pp. 41-43. (In Russian)

9. Stepanova T.F, Kataeva L.V., Rebeshchenko A.P. [et al.] Struktura mikrobiotsenoza grudnych detej - patsientov Natsional'nogo gospitalja pediatrii g. Hanoj, SRV [Microbio-cenosis structure of infants-patients of the National Pediatric Hospital of Hanoi, SRV]. Zdorovye naseleniya i sreda obi-taniya, 2017, no. 3(299), pp. 54-56. (In Russian)

10. Stepanova T.F., Kataeva L.V., Rebeshchenko A.P. [et al.] Harakteristika antibiotikorezistentnosti bakterij, vydelennyh ot grudnyh detej - patsientov Natsional'nogo gospitalja pediatrii g. Hanoj, SRV [Description of antibiotic resistance of bacteria, provided from the infants - patients of the National Pediatric Hospital, Hanoi, SRV]. Zdorovye naseleniya i sreda obitaniya, 2017, no. 5(290), pp. 51-53. (In Russian)

Контактная информация:

Катаева Любовь Владимировна, тел.: +7 (3452) 28-99-92,

e-mail: [email protected]

Contact information: Kataeva Lubov, phone: +7 (3452) 28-99-92, e-mail: [email protected]