Стратификация плазмы по содержанию лейкоцитов Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

Стратификация плазмы по содержанию лейкоцитов

67

М. В. Зарубин, О. Е. Саратова, Л. Н. Веревкина, Е. Б. Жибурт

Стратификация плазмы по содержанию лейкоцитов

ГБУЗ «Иркутская областная станция переливания крови»

ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр имени Н. И. Пирогова»

Минздрава России

В настоящее время в России плазма может быть получена из д озы крови, методом дискретного плазмафереза (ПА) и методом аппаратного ПА. С целью повышения безопасности компонентов крови может применяться лейкоредукция - удаление лейкоцитов из крови и ее компонентов, а также инактивация патогенов.

Контроль количества остаточных лейкоцитов в компонентах крови является важным элементом системы контроля качества. В соответствии с Техническим регламентом о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии, утвержденным постановлением Правительства РФ от 26 января 2010 года №29 (далее технический регламент), содержание лейкоцитов в свежезамороженной плазме (СЗП) должно быть меньше 0,1х109/л. Однако, в техническом регламенте не прописаны требования к лейкоредуцированной плазме. В соответствии с требованиями Совета Европы при удалении лейкоцитов компонент должен содержать менее 1х106 лейкоцитов.

В настоящее время имеется возможность автоматического подсчета остаточных лейкоцитов в компонентах крови путем использования проточной цитометрии или аппарата для оптического подсчета остаточных лейкоцитов. С 2014 году в практике контроля качества государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Иркутская областная станция переливания крови» (ГБУЗ ИОСПК) применяется аппарат для оптического подсчета остаточных лейкоцитов в компонентах крови ADAM-rWBC

68

Вопросы экспериментальной, производственной и клинической ...

(NanoEnTek Inc, Корея). Анализ результатов применения контроля содержания лейкоцитов в различных типах плазмы автоматическим способом представляет несомненный интерес.

Цель исследования. На основании результатов исследования количества лейкоцитов стратифицировать виды плазмы, получаемые в ГБУЗ ИОСПК по содержанию лейкоцитов.

Материал и методы. Проведен подсчет количества остаточных лейкоцитов в следующих видах плазмы, производимых ГБУЗ ИОСПК:

1) плазма, полученная из дозы крови с использованием ручного плазмоэкстрактора (ПЭ);

2) плазма, полученная из дозы крови с использованием фракционатора NOVOmatic (LMB Technologie GMBH, Германия);

3) плазма, полученная методом ПА на аппарате PCS2 (Hae-monetics, США) с использованием HS (высокосепарационного) колокола;

4) плазма, полученная при проведении афереза тромбоцитов (АТ) на аппарате Trima Accel (CaridianBCT Inc, США);

5) плазма, полученная при проведении АТ на аппарате MCS+ (Haemonetics, США);

6) плазма, полученная из дозы крови лейкоредуцированная с использованием системы с интегрированным лейкофильтром LST (DLE 6500 LQ) (Macopharma, Франция);

7) плазма, полученная методом дискретного ПА;

8) плазма до и после инактивации патогенов на аппарате MACOTRONIC (Macopharma, Франция);

9) плазма до и после инактивации патогенов на аппарате MirasolPRT (CaridianBCT Inc, США).

Обследовано по10 образцов каждого типа плазмы.

Результаты и их обсуждение. Результаты исследования остаточных лейкоцитов в плазме представлены в таблице 1.

В результате проведенных исследований установлено, что требованиям Технического регламента соответствуют все образцы плазмы, требованиям Совета Европы для лейкоредуцированных компонентов соответствует плазма, полученная методом аппаратного ПА на аппарате PCS2; полученная на аппарате Trima Accel при проведении АТ; полученная из дозы крови лейкоредуцированная; после инактивации патогенов на аппарате MACOTRONIC.

Различия содержания остаточных лейкоцитов в плазме, полученной из дозы крови при помощи ручного ПЭ и фракционатора, а также полученной путем дискретного ПА не имели статистической значимости (р>0,05).

Стратификация плазмы по содержанию лейкоцитов

69

Таблица 1 - Содержание остаточных лейкоцитов в различных типах плазмы, х106/л___________________________________

Тип плазмы Среднее Медиа- на Ниж. кварт. Верх. кварт. Макс. Мин. Ст. откл.

Полученная из дозы крови с использованием ручного ПЭ 10,5 5,0 3,0 11,0 38,0 1,0 12,8

Полученная из дозы крови с использованием фракционатора 14,1 9,0 4,0 15,0 49,0 2,0 14,9

Полученная методом аппаратного ПА (PCS2) 1,1 0,7 0,4 1,0 4,0 0,3 1,1

Полученная на аппарате Trima Accel 1,0 0,8 0,6 1,0 2,0 0,3 0,6

Полученная на аппарате MCS+ 2,1 2,0 1,0 3,0 4,0 0,9 1,2

Полученная из дозы крови лейкоредуцированная 0,4 0,4 0,2 0,4 1,0 0,0 0,3

Полученная методом дискретного ПА 8,1 6,0 5,0 11,0 18,0 2,000 5,2

До инактивации патогенов на аппарате MACOTRONIC 18,2 15,0 12,5 24,5 44,0 05,0 10,1

После инактивации патогенов на аппарате MACOTRONIC 0,6 0,5 0,2 0,7 2,0 0,0 0,5

До инактивации патогенов на аппарате MirasolPRT 16,2 7,5 5,0 24,0 50,0 2,0 17,2

После инактивации патогенов MirasolPRT 15,5 7,0 6,0 23,0 45,0 2,0 16,3

Плазма, полученная методом ПА на аппарате PCS2, содержала лейкоцитов в 8,6 раза меньше по сравнению с плазмой, полученной дискретным ПА; в 7,1 раза меньше плазмы, полученной из дозы крови с использованием ручного ПЭ; в 12,9 раза меньше плазмы, полученной из дозы крови с использованием фракционатора; в 2,9 раз меньше по сравнению с плазмой, полученной при проведении АТ на аппарате MCS+ (р<0,05). Различия содержания лейкоцитов в плазме, полученной методом ПА на аппарате PCS2 и в плазме, полученной при проведении АТ на аппарате Trima Accel, не имели статистической значимости (p>0,05). Плазма, полученная на аппарате Trima Accel, при проведении

70

Вопросы экспериментальной, производственной и клинической ...

АТ содержала лейкоцитов в 2,5 раза меньше по сравнению с плазмой, полученной при проведении АТ на аппарате MCS+ (p<0,05).

Лейкоредуцированная плазма, полученная из дозы крови, достоверно содержала меньше лейкоцитов по сравнению со всеми типами плазмы (p<0,05).

Проведение инактивации патогенов путем обработки метиленовым синим с облучением видимым светом, приводило к снижению содержания лейкоцитов в 30 раз (p<0,05) и было сопоставимо с содержанием лейкоцитов в лейкоредуцированной плазме (p>0,05). Снижение уровня остаточных лейкоцитов обусловлено их фильтрацией при проведении вирусинактивации.

Проведение инактивации патогенов путем обработки рибофлавином с ультрафиолетовым облучением не приводило к изменению содержания лейкоцитов в плазме (p>0,05).

Заключение. Установлено, что все образцы плазмы, производимые в ГБУЗ ИОСПК, соответствуют требованиям технического регламента для свежезамороженной плазмы. Требованиям Совета Европы для лейкоредуцированных компонентов соответствует плазма, полученная методом ПА на аппарате PCS2; полученная при проведении АТ на аппарате Trima Accel; из дозы крови лейкоредуцированная; после инактивации патогенов на аппарате MACOTRONIC.