Сравнительный анализ клеток с тканевыми общими маркерами, участвующими в регуляции апоптоза и пролиферации, их диагностическая эффективность у больных фолликулярными аденомами щитовидной железы Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ КЛЕТОК С ТКАНЕВЫМИ ОБЩИМИ МАРКЕРАМИ, УЧАСТВУЮЩИМИ В РЕГУЛЯЦИИ АПОПТОЗА И ПРОЛИФЕРАЦИИ, ИХ ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ У БОЛЬНЫХ ФОЛЛИКУЛЯРНЫМИ АДЕНОМАМИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Казаков С.П.1, Заботина Т.Н.2, Кушлинский Н.Е.2 УДК: 616.441.55-092.18:545

1 Главный военный клинический госпиталь им. Н.Н. Бурденко МО РФ

2 Российский онкологический научный центр им. А.А. Блохина РАМН

Резюме

В статье представлены новые данные по исследованию, методом проточной цитометрии фенотипов клеток, в тканях фолликулярных аденом щитовидной железы, (АЩЖ) общих маркеров СЭ95, СЭ95Ь, р53 (р53ЬМдИ, р53®т), Ьс1-2 (Ьс1-2ЬМдИ, Ьс1-2Шт), К1-67, участвующих в регуляции апоптоза и пролиферации, а также экспрессии мембранных и внутриклеточных белков/рецепторов в/на клетках ткани ШЖ, их диагностическая эффективность.

Ключевые слова: аденома, щитовидная железа, апоптоз, пролиферация, CD95, CD95L, p53, ЬЫ-2, Ю-67.

COMPARATIVE ANALYSIS OF CELLS WITH HISTIC GENERAL MARKERS INVOLVED IN REGULATION OF APOPTOSIS AND PROLIFERATION, THEIR DIAGNOSTIC EFFECTIVENESS IN PATIENTS WITH FOLLICULAR ADENOMA OF THYROID GLAND

Kazakov S.P., Zabotina T.N., Kushlinskiy N.E.

The article presents new data on the study of common markers CD95, CD95L, p53 (p53b,ighl, p53dim), bcl-2 (bd-2b'ighl, bcl-2dim), Ki-67, that are involved in the regulation of ap-optosis and proliferation, and expression of membrane and intracellular proteins / receptors / on the THG tissue cells, their diagnostic efficacy, using the method of cells phenotype flow cytometry in the tissues of follicular thyroid adenomas (ATHG- thyroid gland).

Keywords: adenoma, thyroid gland, apoptosis, proliferation, CD95, CD95L, p53, bcl-2, Ki-67.

Исследованию маркеров апоптоза и пролиферации и их вклада в развитие опухолевого процесса у больных доброкачественными и злокачественными новообразованиями щитовидной железы (ЩЖ) в последние годы уделяют все большее внимание [3, 6, 10, 11, 12]. В то же время отсутствие достаточного количества знаний о процессах бластомогенеза, прежде всего о патогенетических механизмах нарушения апоптоза и пролиферации у больных с онкологическими заболеваниями ЩЖ, сдерживает развитие высокоинформативных методов диагностики и мониторинга за лечением этих нозологий [4, 5, 7, 13, 14]. До сих пор у врачей-онкологов, врачей-патоморфологов, иммунологов возникают трудности с диагностикой разных форм новообразований ЩЖ, поэтому большое количество исследований посвящено этому вопросу [1, 15].

Было проведено исследование у 31 больных фолликулярными аденомами ЩЖ (АЩЖ), подтвержденными морфологически. Среди больных было 25 (80,65%) женщины и 6 (19,35%) мужчин (средний возраст 57± 14 лет).

Образцы тканей ЩЖ забирались во время операции с последующим приготовлением суспезии клеток общепринятыми методами (0,25% раствор трипсина и ЭДТА 1 ммоль в ФСБ), доведением до конечной концентрации

1-2 106 клеток в мкл и окрашиванием мембранных и внутриклеточных рецепторов (белков) моноклональными антителами фирмы «CALTAG» (Австрия): Вс1-2^Г^, CD95-PE-Cy5, CD95L-PE-Cy5 и фирм <^АКО» (Дания) и «BD» (США) - p53-FITS, К-67-РЕ. Полученную су-

спензию анализировали в трехцветных протоколах на проточном цитофлуориметре COULTER EPICS XL-MCL фирмы «Beckman Coulter» (США) с подсчетом не менее 100 000 событий в зоне гейтирования (12 000 клеток). Полученные цифровые данные в виде файлов (LMD) анализировались в специальной аналитической программе CXP ver.2.2 со снятием результатов проведенных исследований. Определяли относительное количество клеток с общими маркерами CD95, CD95L, p53 (р53Ьг«й, р53<Иш), bcl-2 (bd-2bnght, bcl-2dim), Ki-67, а также плотность экспрессии мембранных (внутриклеточных) рецепторов (белков) в этих клетках. Плотность экспрессии мембранных (внутриклеточных) рецепторов (белков) оценивали в условных единицах по средней интенсивности свечения флуоресценции (MFI), пропорциональной номеру канала, измеренного в логарифмическом режиме.

Статистическую обработку данных проводили с использованием непараметрических методов по Манну

- Уитни. Различия считались достоверными при уровне значимости p<0,05. Для расчета диагностической эффективности (величины порогового значения, показателей чувствительности, специфичности) применяли ROC-анализ.

Были исследованы образцы тканей фолликулярных аденом ЩЖ в целях сравнительного анализа общих маркеров, регулирующих апоптоз и пролиферацию, и их оценке их диагностической эффективности.

При анализе белков, регулирующих апоптоз и пролиферацию, выявлено, что в 19,35% наблюдений определяется иной фенотип аденомы, обозначенный

нами как аденома ГГ типа. Основным фенотипическим отличительным признаком аденомы ГГ типа было наличие большого количества клеток в тканях ЩЖ, экспрессирующих маркер FAS-L (CD95L).

Результаты сравнительного исследования общих маркеров, регулирующих апоптоз и пролиферацию в тканях ЩЖ у больных с разными вариантами АЩЖ, представлены в табл. 1.

Изучены показатели количества CD95-клеток в тканях ЩЖ с разными вариантами доброкачественных новообразований (аденом) ЩЖ. Большое количество CD95-клеток выявлено у пациентов с аденомами ГГ типа (3,22±1,08%), минимальное - у больных с основным видом АЩЖ (2,17±1,68%).

Анализ количества CD95L-клеток, содержащихся в суспензии, приготовленной из АЩЖ, показал, что число CD178+-клеток было очень высоким (рис. 1) у больных аденомой ГГ типа и составило 54,54±12,84%, статистически достоверно отличаясь (р=0,002) от этого показателя у больных аденомой Г типа, где этот показатель был равен 5,96±2,15%. Показатель плотности распределения рецептора CD95L имел тенденцию к 3-кратному снижению в аденомах ГГ типа (3,82±0,46), а в группе пациентов с основным типом АЩЖ это значение было равно 9,86±5,69. В дифференциальной диагностике аденом разных типов нами предлагается использовать показатель количества CD95L-клеток более 28,76%, превышение значения которого свидетельствовало о наличии АЩЖ ГГ типа при

Табл. 1. Общие показатели клеток, содержащих белки, участвующие в регуляции апоптоза и пролиферации в тканях аденомщитовидной железы

Показатель Группы пациентов

I (с аденомами I типа) n=25 II (с аденомами II типа) n=6

Количество клеток CD95, % 2,17±1,68 3,22±1,08

Плотность рецепторов CD95 10,17±5,85 7,36±2,92

Количество клеток CD95L, % 5,96±2,15 54,54±12,84*

Плотность рецепторов CD95L 9,86±5,69 3,82±0,46

Общее количество клеток р53, % 64,72±15,2 93,74±4,98*

Плотность белка р53 (общая) 4,79±2,09 13,56±3,08*

Количество клеток р53 йт, % 38,73±16,22 8,5±2,67*

Плотность белка р53 йт 1,55±0,08 1,77±0,07*

Количество клеток р53 Ь"9М, % 21,82±19,84 83,25±9,8*

Плотность белка р53 11119111 10,93±2,21 14,84±1,34*

Количество клеток Кь67, % 1,45±0,77 60,12±18,1*

Плотность белка Кь67 3,26±3,68 4,83±0,73

Общее количество клеток Ьс1-2, % 71,47±10,36 95,47±4,2*

Плотность белка Ьс1-2 (общая) 4,51±1,65 16,22±2,23*

Количество клеток Ьс1-2 "|т, % 48,47±12,83 5,24±3,32*

Плотность белка Ьс1-2 "|т 1,51±0,1 1,73±0,06*

Количество клеток Ьс1-2 Ь|19М, % 18,12±15,29 89,85±8,44*

Плотность белка Ьс1-2 11119111 13,66±2,79 16,67±0,93

Примечание: * - Статистическая достоверность между группами II и I (р<0,05).

диагностической эффективности 99,9% по параметрам чувствительности, специфичности и точности.

В диагностике аденом разных типов могли помочь и показатели количества клеток с белком р53 и плотности распределения белка р53 в исследуемой группе р53-по-зитивных клеток. Значимыми оказались показатели количества р53-клеток, которые были наиболее высокими (93,74±4,98%) в аденомах ГГ типа, достоверно отличаясь (р=0,002) от этого показателя в аденомах Г типа (64,72±15,2%). Значение плотности экспрессии белка р53 в этой группе клеток было наибольшим (13,56±3,08) в аденомах

ГГ типа, статистически отличаясь (р=0,002) от этого показателя (4,79±2,09) в аденомах Г типа. В дифференциальной диагностике АЩЖ разных типов достаточно высока вероятность выявления АЩЖ ГГ типа при показателях количества р53-клеток более 88,82% и значении плотности экспрессии р53-белка более 11,02 (чувствительность и специфичность метода составляли 99,9%).

Наибольшее количество р53<Иш-клеток клеток отмечено в аденомах Г типа - 38,73±16,22%, в аденомах ГГ типа - 8,5±2,67% (р=0,002) (рис. 1). Плотность распределения белка р53 в р53<йш-позитивных клетках изучаемых групп больных была достоверно большей в аденомах ГГ типа (1,77±0,07), статистически достоверно отличаясь (р=0,005) от значения этого же показателя (1,55±0,08) в аденомах Г типа.

В диагностике АЩЖ разных типов с высокими показателями чувствительности и специфичности метода 99,9% можно также использовать значение количества р53<йш-клеток менее 11,91%, а также величину плотности р53-белка в р53<йш-позитивных клетках более 1,68 при чувствительности метода 99,9%, специфичности 93,7% и точности метода 96,8%, которые следует считать критическими значениями при выявлении АЩЖ ГГ типа.

Подобные достоверные различия (р=0,002) выявлены и при сравнении количества р53Ьгч;1“-клеток (см. рис. 1), которое было значительно повышено у больных с аденомой ГГ типа (83,25±9,8%), в то время как у больных с аденомой Г типа было намного ниже (21,82±19,84%). Обнаружены также статистически значимые различия (р=0,011) в величинах плотностей распределения белка р53 в р53Ьгщ1“-клетках у больных с аденомой Г типа (10,93±2,21) в сравнении с аденомами ГГ типа (14,84±1,34).

Обнаружение количества р53Ьгщ1“-клеток при значениях более 75,21% и величине плотности экспрессии белка р53 в р53Ьп^“-позитивных клетках более 12,8 позволило предполагать наличие АЩЖ ГГ типа. При этом чувствительность данных методов составила 99,9%, специфичность - 99,9 и 81,2%, а точность метода - 99,9 и 82,8% соответственно.

Выявлено статистически значимое (р=0,002) более чем 40-кратное повышение количества клеток, экспрессирующих маркер К1-67 (рис. 2), в группе пациентов с аденомой ГГ типа - до 60,12±18,1% по сравнению с аде-

Ї(F1 )[А] Z0006674.LMD : FL2 ...

..................------------/■---'-л-............

’ ib°...........ib1.........ЇЬ2 ‘ ’ * і#

CD 95L-PE

1)(A] 20006654.LMD : FL1 LOG

L Р63 IJ

II : Р63*" ||| .40-3%! Iі Ж pgjbright

|У ЇЖ її HHflBk

10" 10' • ті..., . 10

] Z0006655.LMD : FL1 LOG

Рис. 1. Гистограммы общего количества клеток с маркерами, регулирующими апоптоз CD95L, р53, р53Лт, р53Ь"9М, Ьоі-2, Ьоі-23"|т, Ьс!-2Ьг19П1 у больных с разными типами аденомы щитовидной железы: А - аденома I типа; Б - аденома II типа

. (F1 )[А] Z0006662.LMD : FL2 LOG (Г](Г

(F1)[A] Z0006658.LMD : FL2 LOG

A

Б

Рис. 2. Гистограммы общего количества клеток с маркером, регулирующим пролиферацию (К1-67), у больных аденомами I (А) и II (Б) типа щитовидной железы

номой Г типа, где этот показатель составил 1,45±0,77%. При этом если показатель превышал 26,35% для значений количества К1-67-клеток, то имело место АЩЖ ГГ типа с показателями диагностической информативности метода 99,9%. Высокий показатель плотности распределения белка К1-67 обнаружен в аденомах ГГ типа (4,83+0,73) против 3,26+3,68 в аденомах Г типа без достоверно значимых различий. Число Ьс1-2-клеток в аденомах ГГ типа было

значительно достоверно выше (р=0,002) (95,47+4,2%) по сравнению с аденомами Г типа (71,47+10,36%). Обнаружены статистически значимые различия (р=0,002) по величинам плотности распределения белка Ьс1-2 в Ьс1-2-позитивных клетках между аденомами ГГ типа (16,22+2,23) и Г типа (4,51+1,65). Диагностическая эффективность показателей количества Ьс1-2-клеток и плотности его (Ьс1-2-белка) распределения достаточно

высока и составила по чувствительности и специфичности методов 99,9%. Показатель количества Ьс1-2-клеток более 88,28% и величина плотности распределения белка Ьс1-2 более 11,64 считались критическими значениями, которые с высокой достоверностью позволяют выявить АЩЖ ГГ типа.

Показатели количества Ьс1-2й1ш-клеток (см. рис. 1) также достоверно (р=0,002) повышены (48,47+12,83%) в аденомах Г типа и значительно снижены в аденомах ГГ типа (5,24+3,32%). Величина плотности распределения Ьс1-2-белка в исследуемой группе Ьс1-2й1ш-клеток была повышена в аденомах ГГ типа и составила 1,73+0,06, достоверно отличаясь (р=0,006) от этого показателя при аденомах ГГ типа, где он был достоверно ниже и составил

1,51+0,1. Высокую дифференциально-диагностическую эффективность, достигающую по показателям чувствительности 99,9%, специфичности 99,9 и 93,7% и точности метода 99,9 и 96,8%, выявили значения количества Ьс1-2<иш-клеток и плотность распределения Ьс1-2-белка на этих клетках. Так, значения количества Ьс1-2Дш-клеток менее 17,43% и показателя плотности экспрессии белка Ьс1-2 на Ьс1-2й1ш-клетках более 1,65 подтверждали наличие АЩЖ ГГ типа.

Иная динамика отмечена при сравнительном анализе показателей количества Ьс1-2Ьп^“-клеток в группах сравнения (см. рис. 1). Количество Ьс1-2Ьп^“-клеток было значительно достоверно (р=0,002) выше в аденомах ГГ типа (89,85+8,44%), чем в аденомах Г типа (18,12+15,29%). Дополнительным диагностическим критерием с высокой эффективностью в 99,9% может использоваться этот показатель (количества Ьс1-2Ьг1®1‘-клеток), при значении более 63,33% которого выявляли аденому ГГ типа.

Согласно литературным данным [2, 8, 9], повышенная экспрессия на опухолевых клетках FAS-L, во-первых, создает условия для избегания опухолевыми клетками цитотоксического действия Т-лимфоцитов (CD8+-лим-фоцитов) и натуральных киллерных клеток, а также индукции в них процесса апоптоза, что создает бреши в Т-клеточном репертуаре, убивая любые активные Т-хелперы, в том числе способные распознать опухолевые антигены. Во-вторых, экспрессия FAS-L на опухолевых клетках за счет дефектов в путях апоптозной сигнальной трансдукции блокирует аутокринный путь апоптоза между опухолевыми клетками. В-третьих, повышенная экспрессия FAS-L может быть основным способом мигрирующих опухолевых клеток расчистить себе путь от нормальных клеток, отправляя их в апоптоз в процессе инвазии и метастазирования.

Повышенная экспрессия FAS-L в АЩЖ может служить фактором плохого прогноза опухоли с возможным ее быстрым ростом и способностью трансформироваться в злокачественную опухоль. Поэтому выделение АЩЖ с повышенной экспрессией FAS-L в отдельную группу и изучение фенотипа этих новообразований представляет определенную научную, практическую и прогностическую значимость.

Сравнительный анализ разных типов АЩЖ выявил повышение почти в 10 раз количества клеток в изучаемой нами суспензии ткани ЩЖ с маркером СD95L в АЩЖ ГГ типа по сравнению с АЩЖ Г типа. Также отмечено 3-кратное снижение плотности экспрессии СD95L-ре-цепторов в СD95L-положительных клетках в группе аденом ГГ типа.

Выявленное значительное повышение количества FAS-L в аденомах ГГ типа может быть плохим прогностическим признаком при проведении химиотерапии, так как считается, что в некоторых типах опухолевых клеток цитостатики индуцируют апоптоз, усиливая экспрессию лигандов и рецепторов семейства ТОТ. Следовательно, изначально повышенное количество СD95L-положи-тельных клеток в аденомах ГГ типа на фоне химиотерапии может приводить к еще большей концентрации FAS-L на изначально резистентных к сигналам рецепторов смерти аденоматозных клетках, содержащих химиорезистентный невосприимчивый фенотип [2].

В АЩЖ ГГ типа выявлено резкое повышение почти до максимального уровня количества клеток, содержащих белок р53, а также 3-кратное увеличение плотности экспрессии этого белка в р53-позитивных клетках. Исследованиями структуры повышенного содержания р53-положительных клеток доказано, что такое увеличение связано как с 4-кратным ростом субпопуляции р53Ьгщ1“-клеток, так и с повышенной экспрессией белка р53 в р53Ьп^“-позитивных клетках на фоне характерного снижения выработки этого белка в р53<Мш-положительных клетках.

Аналогичные изменения обнаружены при исследовании количества клеток с ингибирующим апоптоз белком Ьс1-2 в аденомах ГГ типа. Отмечено повышенное количество клеток с белком Ьс1-2, почти 4-кратное увеличение экспрессии этого белка на Ьс1-2-позитивных клетках прежде всего за счет увеличенного содержания количества Ьс1-2Ьг1®1‘-клеток и повышенной экспрессии Ьс1-2 белка в Ьс1-2Ьп^“-позитивных клетках на фоне снижения количества Ьс1-2й1ш-клеток.

Для АЩЖ ГГ типа характерна повышенная пролиферативная активность суспензии исследуемых клеток по всей ткани аденомы, что подтверждается значительным 40-кратным увеличением количества клеток с внутриклеточным пролиферативным белком К1-67 и незначительным повышением плотности экспрессии этого белка в К-67-позитивных клетках. Такое сочетание значительного повышения количества К1-67-позитивных клеток с почти 2-кратным повышением плотности распределения этого маркера по К-67-позитивным клеткам, нехарактерное для злокачественных и доброкачественных новообразований ЩЖ, которые в основном отличаются невысокой и сниженной пролиферацией, может быть начальным этапом трансформации доброкачественного процесса в злокачественный, например в фолликулярный РЩЖ, обладающий сходными фенотипическими особенностями. Именно поэтому для аденом ГГ типа может

быть характерен неблагоприятный прогноз развития за счет использования механизмов повышенного роста в измененных аденоматозных клетках и выраженной апоп-тозной агрессивности, что требует ее систематического динамического наблюдения.

Согласно литературным данным морфологическая граница между фолликулярной аденомой и карциномой ЩЖ нечеткая и возможно выявленная аденома ГГ типа является карциномой ЩЖ. Нами не проводилось сравнительных исследований карцином и выявленных нами аденом ГГ типа в связи с трудностями дополнительных морфологических исследований, однако данное исследование было бы достаточно интересным и позволило бы охарактеризовать выявленную нами аденому ГГ типа.

Так же изучены диагностическая информативность и пороговые значения показателей маркеров, регулирующих апоптоз и пролиферацию, в дифференциальной диагностике аденом Г и ГГ типов. Выявлены критические значения по всем исследуемым параметрам белков, регулирующих апоптоз и пролиферацию, с очень хорошими и отличными параметрами диагностической эффективности значений количеств клеток ЩЖ и большинства показателей плотности распределения рецепторов и белков в/на клетках ЩЖ. Среди них отметим лишь группы клеток общих тканевых маркеров, регулирующих апоптоз и пролиферацию, с отличными показателями диагностической эффективности: CD95L, р53, р53Дш, р53Ьгщ1“, К-67, Ьс1-2, Ьс1-2^ш, Ьс1-2Ьг1^‘.

Вывод. В процессе исследования выявлено два типа АЩЖ, различающихся по фенотипу. Основным отличием от основной группы доброкачественных опухолей (аденомы Г типа) аденом ГГ типа явилось наличие повышенного количества клеток с мембранным рецептором FAS-L. По данным настоящего исследования, частота выявления аденом ГГ типа составила около 19,35%.

Для врачей клиницистов (хирургов, онкологов, эндокринологов) важным является знание и умение использовать маркеры апоптоза и пролиферации в дополнительной диагностике аденом щитовидной железы, а при выявлении аденом ГГ типа более внимательное наблюдение за этими пациентами и при неблагоприятном прогнозе, перерождении доброкачественного процесса в злокачественный выполнение оперативного вмешательства по показаниям.

Результаты исследования показывают, что необходимо совместно с морфологами более подробно изучить выявленную нами аденому ГГ типа ЩЖ и провести более глубокий морфологический анализ на предмет выявления карцином ЩЖ или иного типа фолликулярной аденомы.

Представленные результаты по изучению фенотипа АЩЖ ГГ типа и более подробного морфологического их изучения могут быть полезны при разработке новых препаратов для таргетной терапии, но с иными механизмами запуска в этих опухолевых клетках процессов апоптоза.

Литература

1. Дедов И.И., Балаболкин М.И., Марова Е.И. Болезни органов эндокринной системы: Руководство для врачей. М.: Медицина, 2000. 568 с.

2. Князкин И.В., Цыган В.Н. Апоптоз в онкоурологии. СПб: Наука, 2007. 240 с.

3. Кушлинский Н.Е., Трапезников Н.Н. Современные возможности клинической биохимии в онкологии. Последние факты и новые концепции // Клин. лаб. диагн. - 2000. № 9. - С. 3-5.

4. Лукьянова Н.Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и Ьс1-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей // Вопр. онкол. - 2000. Т. 46, № 2.

- С. 121-128.

5. Марченко И.А. Исследование диагностической значимости теломеразы и других маркеров злокачественной трансформации при новообразованиях щитовидной железы человека: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. М., - 2009. 24 с.

6. Соколова О.В. Дифференциально-диагностические критерии фолликулярных опухолей щитовидной железы разной степени злокачественности: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб, - 2009. 22 с.

7. Соколова О.В. Особенности экспрессии галектина-3 в фолликулярных опухолях щитовидной железы разной степени злокачественности // Современные проблемы клинической цитоморфологии: Тез. всерос. конф. с межд. участ., науч. чтения, посвящ. памяти чл.-корр. РАМН, з.д.н. РФ проф. О.К. Хмельницкого и 25-летию курса цитол. каф. патол. анат. СПб: МАПО, - 2007. - С. 104-105.

8. Цыган В.Н. Актуальные проблемы иммунологии. СПб: Гуманистика, 2004. 47 с.

9. Basolo F., Fiore L., Baldanzi A. et al. Suppression of Fas expression and down-regulation of Fas ligand in highly aggressive human thyroid carcinoma // Lab. Invest.

- 2000. Vol. 80, N 9. - P. 1413-1419.

10. Erdogan M., Karadeniz M., Berdeli A. et al. Fas/Fas ligand gene polymorphism in patients with papillary thyroid cancer in the Turkish population // J. Endocrinol. Invest. - 2007. Vol. 30, N 5. - P. 411-416.

11. Kotomecki K., Maciaszczyk P., Stepien H. et al. Evaluation of p53 and soluble Fas ligand (sFas-L) serum level concentration as indicators of apoptosis in serum of patients with benign and malignant primary follicular thyroid tumors // Endokrynol. Pol. - 2006. Vol. 57, N 4. - P. 320-325.

12. Mitsiades C.S., Poulaki V., Fanourakis G. Fas signaling in thyroid carcinomas is diverted from apoptosis to proliferation // Clin. Cancer Res. - 2006. Vol. 12, N 12.

- P. 3705-3712.

13. Rzeszutko M., Rzeszutko W., Dziegiel P. et al. Expression of FAS/APO 1/CD 95 in thyroid tumors // Folia Histochem. Cytobiol. - 2007. Vol. 45, N 2. - Р. 87-91.

14. Segev D.L., Umbricht C., Zeiger M.A. Molecular pathogenesis of thyroid cancer // Surg. Oncol. - 2003. Vol. 12, N 2. - P. 69-90.

15. Suster S. Thyroid tumors with a follicular growth pattern: problems in differential diagnosis // Arch. Pathol. Lab. Med. - 2006. Vol. 130, N 7. - P. 984-988.

Контактная информация

Казаков Сергей Петрович

Главный военный клинический госпиталь им. Н.Н. Бурденко МО РФ 105229, г. Москва, Госпитальная пл. д. 3 Тел.: +7 (499) 263-08-39 e-mail: [email protected]