CC BY
12
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XIV, № 4, 2018
цитов «ADAM-rWBC» (NanoEn Tek Inc, Корея). Статистический анализ проводился с помощью пакета статистических программ Microsoft Excel 2007. Рассчитывались статистические характеристики (средняя арифметическая, ошибка средней арифметической) и оценка значимости отличий.
Результаты. Содержание остаточных лейкоцитов в образцах ЭВ в камере «Nageotte» составило 0,16 ± 0,04х106/ед. и на аппарате «ADAM-rWBC» 0,29 ± 0,05х106/ед., p < 0,05; в образцах плазмы в гемоцитометре 0,08 ± 0,02х106/ ед., на аппарате «ADAM-rWBC» 0,15 ± 0,06х106/ ед., p < 0,05; в ТК количество лейкоцитов в камере «Nageotte» составило 0,12 ± 0,02х106/ед,, на аппарате «ADAM-rWBC» 0,32 ± 0,06х106/ед., p < 0,05. Следует отметить, что из 30 обследованных ЭВ в 10 образцах в камере «Nageotte» остаточные лейкоциты не обнаружены (33,3 %). Из 24 образцов плазмы, исследованных в камере «Nageotte», в 6 компонентах остаточные
лейкоциты не определялись (25 %). В 13 образцах ТК при исследовании с помощью гемоцито-метра остаточные лейкоциты не обнаружены (28 %). На аппарате «ЛЭЛМ-гШВС» остаточные лейкоциты выявлены во всех исследованных образцах. Аппарат для оптического подсчета остаточных лейкоцитов позволяет стандартизировать подсчет остаточных лейкоцитов в обедненных лейкоцитами компонентах крови, снижает риск ошибки во время процедуры тестирования (диапазон измерений 0-100 кле-ток/мкл), увеличивает производительность труда сотрудников лаборатории контроля качества (2,5-3 мин/тест).
Выводы. Подсчет остаточных лейкоцитов в компонентах крови с помощью аппарата для оптического подсчета обеспечивает возможность быстрого получения достоверных результатов в широком диапазоне измерений и пригоден для исследования большинства лейкоредуцированных компонентов крови.
Кветная А. С., Железова Л. И., Гончар Н. В.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ СОВРЕМЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ CLOSTRIDIUM DIFFICILE-АССОЦИИРОВАННОЙ ИНФЕКЦИИ
Введение. Распространенность Clostridium difficile (C. difficile) — ассоциированной инфекции среди детей и взрослых, особенно среди пациентов лечебных учреждений, в том числе гематологического профиля, постоянная тенденция к росту, биологические особенности C. difficile и способность возбудителя к развитию разнообразного по характеру течения инфекционного процесса (от стертых бессимптомных до тяжелых специфических псевдомембраноз-ных колитов с летальным исходом в 54-70 % случаев), свидетельствует о том, что ведущую роль в установлении и подтверждении диагноза C. difficile-инфекции играют специфические лабораторные методы исследования по обнаружению самого возбудителя и его токсинов. В настоящее время методы лабораторной диагностики C. difficile-инфекции основаны на следующих основных принципах: выделении возбудителя и идентификации штамма C. difficile на специализированном оборудовании, а также индикации токсинов C. difficile в содержимом просвете толстой кишки. Однако диа-
гностика Clostridium difficile-ассоциированной инфекции в нашей стране на сегодняшний день представляет определенные трудности ввиду отсутствия отечественных диагностических питательных сред для выделения C. difficile и стандартных тест-систем для определения его токсинов. Высокая стоимость зарубежных питательных сред для выделения C. difficile и стандартных тест-систем для определения токсинов возбудителя также являются одной из причин «низкой» частоты регистрации этой инфекции в России. Именно эти обстоятельства и обуславливают необходимость оценки эффективности современных методов лабораторной диагностики C. difficile-ассоциированной инфекции.
Цель. Провести сравнительный анализ эффективности современных методов диагностики C. difficile-ассоциированной инфекции.
Материалы и методы. Обследовано 473 ребенка в возрасте от 2-х мес. до 16 лет, поступивших в клинику острых кишечных инфекций ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России, с диагнозом
Vвсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
«острая кишечная инфекция», подозрение на C. dffcile-ассоциированную инфекцию (анти-биотикоассоциированную диарею — ААД, антибиотикоассоциированный колит — ААК, псевдомембранозный колит — ПМК).
Результаты и выводы. Оценка эффективности современных методов — выделения и идентификации выделенных штаммов возбудителя на основе определения белковых спектров с помощью MALDI-TOF масс-спектрометрии, выявления ДНК токсигенных штаммов C. difficile в фекалиях на основе ПЦР и индикации токсинов C. difficile в пробах кала с использованием методов определения цитотоксического действия токсинов на культуре ткани, имму-нохроматографии, иммуноферментного анализа, фермент-связанного флюоресцентного анализа на анализаторе «VIDAS» и реакции латекс-агглютинации свидетельствует о том, что на сегодняшний день оптимальным является использование комбинации двух лабораторных тестов, позволяющих достичь максимально высокой чувствительности и специфичности исследования. При тяжелых формах диареи и фибринозно-некроти-ческом колите целесообразно использовать
Санкт-Петербург 29-30 ноября 2018 г.
только экспресс-методы индикации токсинов А&В C. difficile в фекалиях. Как показали результаты проведенных исследований в ФГБУ ДНКЦИБ (Санкт-Петербург), полимеразная цепная реакция, масс-спектрометрия и фермент-связанный флуоресцентный анализ могут рассматриваться как эффективные и весьма перспективные методы ранней диагностики C. difficile-ассоциированной инфекции. Результаты бактериологическое обследование показали, что у 80 (16,9 ± 1,54 %) из 473 обследованных детей с диареей, из содержимого кишечника на среде Вильсона-Блер выделены клостридии, у которых в 60,0 ± 1,1 % (48 больных) случаев в фекалиях выявлен экзотоксины А/В C. difficile. Достоверно чаще экзотоксины А/В C. difficile обнаруживались у детей (62 ± 1,54%) младшего возраста: у детей до 1 года — в 34,5 ± 1, 4% случаев, от 1 года до 3-х лет — 27,5 ± 1,9%, р < 0,05. У половины больных (52 ± 1,3 %) с затяжной водянистой диареей, сопровождающейся отсутствием эффекта от проводимой традиционной стартовой терапии и развитием декомпенсированных форм дисбактериоза кишечника (III степени), обнаруживались экзотоксины А/В C. difficile в фекалиях.
Киселева Е. А., Чечеткин А. В., Касьянов А. Д., Гришина Г. В.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
СОВРЕМЕННЫЕ ЛАБОРАТОРНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ КОНЦЕНТРАТА ТРОМБОЦИТОВ
Введение. Измерение уровня рН в тром-боцитном концентрате (ТК) является одним из обязательных тестов контроля качества этого компонента крови. Уровень рН ТК может служить показателем жизнеспособности тромбоцитов и является косвенным индикатором бактериальной контаминации. В последние годы разработаны специальные контейнеры и устройства, позволяющие измерять рН без нарушения герметичности контейнера с ТК.
Цель. Изучение возможностей неинвазив-ного исследования рН для контроля качества тромбоцитного концентрата в процессе хранения.
Материалы и методы. Объектом исследования являлся ТК, полученный методом афереза с использованием аппарата для цитафереза «Наешопейсз МСБ+». Готовый ТК помещали
в перемешиватель для тромбоцитов АР-48 L и хранили при температуре от +20° С до +24° С в течение 5-7 суток. Измерение уровня рН проводили в 1-е сутки после приготовления ТК, 3-е и 5-е сутки хранения. Исследования осуществляли с использованием анализатора кислотно-щелочного и газового состава крови ABL 800 FLEX «Radiometer Medical ApS», рН-метра (рН-121) и системы для неинвазивно-го измерения рН тромбоцитного концентрата BCSI pH1000 (Blood Cell Storage Inc., США). Для осуществления измерений на приборе BCSI pH1000 ТК однократно переводился в стерильный контейнер с оптическим портом с помощью устройства для стерильного соединения трубок и запаивателя пластиковых магистралей. Всего было исследовано 12 образцов ТК. Статистическую обработку материала прово-
