CC BY
8
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 11 (56), 2018 также с участками покосов (17,0 ос. на км2), пойменные березово-сосновые леса с пихтой, тополем, прилегающие к отстойникам (12 ос. на км2), пойменные березово-пихтовые леса с елью, тополем и развитым подлеском (10 ос. на км2),
Как упоминалось ранее многими авторами, что буроголовые гаички во время гнездового периода населяют практически все лесные биотопы, однако их распространение повсюду весьма неравномерно [3]. Высокая численность буроголовой гаички в данных биотопах объясняется тем, что территории обильны запасами кормовых ресурсов, ведь в летний период '/2 рациона занимает животная пища, богатая белком. Взрослые особи в большом количестве поедают мелких жуков (особенно долгоносиков), пауков и бабочек, на всех стадиях их развития. Кормятся в среднем ярусе леса, в том числе среди подлеска и низкорастущей кустарниковой растительности, однако на землю спускаются крайне редко. Зимой разыскивают уснувших насекомых в укромных местах стволов деревьев, а также в хвое.Молодняк выкармливают исключительно членистоногими: насекомыми, гусеницами бабочек и пауками, с небольшим добавлением растительных кормов [3].
Обычен этот вид в населенных пунктах малоэтажной каменной и деревянной застройки (8 ос.на км2), заболоченных и частично заболоченных отстойниках с облесенными и закустаренными дамбами (7,3 ос. на км2), в пойменных предгорных кед-рово-пихтовых, пихтово-еловых лесах с развитым подлеском и лугами (5,3 ос. на км2), в мозаичных по облесенности и закустаренности территориях с частично заболоченными водоемами, прилегающими к золоотвалам (3,6 ос.на км2).
Таким образом, пространственное распределение буроголовой гаички в первой половине лета
определяется, в первую очередь, наличием мест для гнездования, которые в свою очередь в большей степени представлены на облесенных территориях.
Список литературы:
1. Богородский Ю.В. Птицы Южного Прибайкалья. /Ю.В. Богородский- Иркутск: Изд-во ИГУ, 1989.-208 с.
2. Васильченко А.А. Птицы Хамар-Дабана. / А.А. Васильченко. - Новосибирск: Наука, 1987.
3. Елаев Э.Н. Экология симпатрических популяций синиц (на примере бассейна озера Байкал). / Э.Н. Елаев. - Издательство Бурятского госуниверситета, Улан-Удэ, 1997. - С.83-100
4. Измайлов И.В. Птицы Юго-Западного Забайкалья. / И.В. Измайлов, Г.К. Боровицкая- Владимир, 1973.-315 с.
5. Кузякин А.П. Зоогеография СССР. / А.П. Ку-зякин// Учен.зап.Моск. обл. пед. ин- та им. Н.К. Крупской. 1962. Т. 109. С. 3-182.
6. Равкин Ю.С. Опыт количественного учета птиц в лесных ландшафтах в зимний и весенний периоды / Ю. С Равкин // -- Вопросы организации и методы учета ресурсов фауны наземных позвоночных. - М., 1961. - С. 128-131.
7. Равкин Ю.С. К методике учета птиц в лесных ландшафтах / Ю. С Равкин // При- рода очагов клещевого энцефалита на Алтае. Новосибирск: Наука, 1967. С. 66-75.
8. Рябицев В.К Птицы Сибири: справочник-определитель в 2 т. / В.К. Рябицев. - Москва; Екатеринбург: Кабинетный ученый, 2014. Т.1. - С. 357.
9. Саловаров В.О. Птицы техногенных ландшафтов Южного Прибайкалья /В.О. Саловаров, Д.В. Кузнецова // - Иркутск: Изд-во Иркутского государственного университета 2005. - С. 215-319.
УДК 579.6:577.15_
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ КОЛЛАГЕНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ _МИКРОМИЦЕТОВ_
Никитина З.К.,
д-р биол. наук, профессор, гл. научн. сотрудник ФГБНУ ВИЛАР,
г. Москва, Гордонова И.К.,
канд. биол. наук, ведущий научн. сотрудник ФГБНУ ВИЛАР,
г. Москва,
DOI: 10.31618/ESU.2413-9335.2018.1.56.9-12
АННОТАЦИЯ
Целью настоящего исследования являлось сравнительное изучение коллагенолитической активности микромицетов, относящимся к двум родам: Penicillium и.Aspergillus. Показано, что все исследованные виды мицелиальных грибов можно рассматривать в качестве потенциальных продуцентов коллагеназ. Представители рода Penicillium обладают более высоким адаптационным потенциалом по сравнению с аспергиллами при росте на среде с коллагеном.
ABSTRACT
The aim of this study was a comparative study of the collagenolytic activity of micromycetes belonging to two genera: Penicillium andAspergillus. It is shown that all studied types of mycelial fungi can be considered as potential producers of collagenases. Representatives of the genus Penicillium have a higher adaptive potential compared to Aspergillus during the growth on the medium with collagen.
Ключевые слова: микромицеты, коллаген, коллагеназа, поверхностной культивирование
Keywords: micromycetes, collagen, collagenase, surface cultivation
Различные ферментов давно и достаточно широко используются в медицинской практике для эн-зимодиагностики, энзимотерапии, в медицинских технологиях и промышленности. Микробиологический синтез ферментов имеет ряд преимуществ, таких как неограниченность источников получения БАВ, возможность экзогенной регуляции, отсутствие прионов. Среди протеолитических ферментов особое внимание привлекает коллагеназа - эн-допептидаза, расщепляющая тройную спираль молекулы нерастворимого природного белка коллагена [1]. Коллагеназа может найти широкое применение во многих областях медицины [2-6]: в хирургии, терапии, гинекологии, стоматологии, а также в косметологии (антивозрастные средства). В связи с этим поиск новых продуцентов остается достаточно актуальной задачей. Целью настоящего исследования являлось изучение коллагенолитиче-ской активности микромицетов из биоколлекции ФГБНУ ВИЛАР.
Материалы и методы В работе использовали следующие коллекционные штаммы: Aspergillus niger F-51, A. sydowii F-25, A. terreus F-59, Penicillium claviforme F-32, P. crustosum F-46, P. hirsutum F-29, P. malinovobranova F-3. Культуры микромицетов выращивали на скошенной поверхности агаризованной среды Чапека следующего состава (%): NaNO3 - 0,2; KH2PO4 - 0,1;
Все изученные виды рода Aspergillus образовывали заметные колонии и зоны лизиса на агари-зованных средах с заменой сахарозы на коллаген уже на начальных этапах культивирования. A. niger F-51 имел наименьшие диаметры колоний на 3 и 4 сутки культивирования, однако к 7 суткам диаметры колоний у трех аспергилл были практически равны. Все представители рода Penicillium росли и образовывали зоны лизиса на модифицированных средах, однако, активность роста и образования зон лизиса у различных видов заметно отличалась. Наиболее активно на начальных этапах культивирования росли два микромицета: P. hirsutum F-29 и P. malinovobranova F-3. Однако к 7 суткам наиболь-
^я8с41"7и2о^о,о5ГКсГ^о,о5;ре8о4х7и2о--
0,001; СаСОз - 0,3; сахароза - 2; агар - 2, (рН 6,8) в течение 7-ми суток при 260С. Для проведения поверхностного культивирования использовали ага-ризованные среды, содержащие солевой фон среды Чапека с заменой сахарозы на 2% коллагена. Про-теолитическую активность микроорганизма оценивали по скорости роста после посева микромицета на модифицированную агаризованную среду. Периодически осуществляли замер диаметра колоний и зон лизиса в двух перпендикулярных направлениях. Активность биосинтеза ферментов оценивали по индексу лизиса субстратов, определяемому соотношением площади лизиса к площади колонии по следующей формуле: I лиз = Б2л /Б2к, где Б л -диаметр зоны лизиса, Бк - диаметр колонии.
Результаты и обсуждение Известно, что рост микроорганизмов на субстратах, содержащих белки в качестве единственного источника углерода, позволяет судить об их потенциальной протеолитической активности. Появление зон лизиса белков вокруг колоний является показателем секреции ферментов в окружающую среду. В связи с этим на первом этапе исследования фиксировались диаметры колоний и диаметры зон лизиса при культивировании микромицетов на средах с заменой сахарозы на коллаген (табл. 1).
Таблица 1.
шие диаметры колоний зафиксированы для P. clav-iforme F-32, для него же отмечены наибольшие зоны лизиса к этому времени. Необходимо отметить, что на всех этапах культивирования микро-мицетов при наличии визуального роста колоний обнаруживались отчетливо видимые зоны лизиса коллагена. При этом в процессе роста колоний отмечалось увеличение диаметров зон лизиса.
Важным показателем для оценки способности микроорганизмов утилизировать трудно гидроли-зуемые субстраты является их скорость роста на соответствующих средах. Анализ радиальных скоростей роста культур свидетельствует о различиях их адаптационных потенциалов (табл., рис. 1).
Параметры роста микромицетов на средах с заменой сахарозы на коллаген
№ штамма
Ок,
мм
Ол, мм
Время культивирования, сутки
Ок,
мм
Ол, мм
5
Ок,
мм
Ол, мм
Ок,
мм
Ол, мм
Ок,
мм
Ол, мм
51
2,4
7,0
5,8
16,7
7,4
22,3
23,3
32,0
26,0
34,5
25
3,8
7,3
11,8
19,0
17,8
28,7
25,0
36,5
26,2
43,2
59
6,5
8,7
6,8
9,7
7,6
13,3
19,6
27,6
25,7
43,2
32
9,8
21,6
14,8
26,6
20,3
30,5
26,2
40,5
30,5
46,3
46
6,2
14,2
11,2
19,2
16,8
21,3
21,3
26,8
23,8
32,5
29
12,2
20,5
17,2
25,5
22,0
34,4
26,8
39,2
27,8
40,0
11,2
22,7
16,2
26,7
18,2
28,8
19,8
31,3
22,8
34,3
3
4
6
7
3
Таблица 2.
Радиальная скорость роста микромицетов на агаризованной _среде с заменой сахарозы на коллаген (мм/сутки)_
№ штамма Время культивирования, сутки
3 4 5 6 7
51 0,80 1,45 1,48 3,88 3,71
25 1,27 2,95 3,56 4,17 3,74
59 2,17 1,70 1,52 3,27 3,67
32 3,27 3,70 4,06 4,37 4,36
46 2,07 2,80 3,36 3,55 3,40
29 4,07 4,30 4,40 4,47 3,97
3 3,73 4,05 3,64 3,30 3,26
Скорость роста A. niger F-51 и A. sydowii F-25 в процессе культивирования постепенно увеличивалась, достигая максимальных значений к 6 - 7 суткам, что свидетельствует об адаптации культур к использованию трудно утилизируемых субстратов. Адаптация A. terreus F-59 носила более сложный характер: сначала фиксировалось снижение скорости роста и только в конце культивирования проис-
ходило ее увеличение. У P. hirsutum F-29 и P. mali-novobranova F-3 отмечены наибольшие начальные скорости роста, которые незначительно менялись в процессе культивирования, свидетельствуя о высоком и стабильном коллагенолитическом потенциале культур. Максимальные скорости роста у P. claviforme F-32 и P. crustosum F-46 наблюдались на 5 - 6 сутки культивирования, затем они не менялись или незначительно снижались crustosum F-46).
Рис. 1. Средняя скорость роста микромицетов на средах с заменой сахарозы на коллаген.
Сравнение средних за все время культивирования скоростей радиального роста свидетельствует, что этот показатель больше у представителей рода PeniciШum. Наибольшая способность к адаптации отмечена для P. hirsutum F-29 и P. claviforme F-32, для которых зарегистрированы самые высокие скорости роста.
Наряду с такими параметрами роста микроорганизмов, как диаметр колоний и скорость роста важным показателем является индекс лизиса. Индекс лизиса определяется соотношением площади колонии и площади зоны лизиса и характеризует удельную протеолитическую активность культуры, так как площадь колонии пропорциональна ее биомассе, а площадь зоны лизиса - активности секре-тируемых протеиназ. В связи с этим на следующем
этапе исследования были рассчитаны индексы лизиса микромицетов при росте на средах, содержащих коллаген (табл. 3).
Из всех представителей рода Aspergillus наибольшие индексы лизиса зафиксированы у A. niger F-51ra 3 - 5 сутки культивирования, к 7 суткам они резко снижались и становились меньше, чем у двух других аспергилл. A. sydowii F-25 характеризовался относительной стабильностью указанного показателя, который менялся в процессе культивирования в небольшом диапазоне. Изменение индекса лизиса у A. terries было волнообразным: сначала отмечался рост показателя, а затем его снижение.
Таблица 3.
Индексы лизиса микромицетов на средах с заменой сахарозы на коллаген
№ штамма Время культивирования, сутки
3 4 5 6 7
51 8,51 8,29 9,08 1,89 1,76
25 3,69 2,59 2,59 2,13 2,72
59 1,79 2,04 3,06 1,98 2,83
32 4,86 3,23 2,26 2,39 2,30
46 5,25 2,94 1,61 1,58 1,87
29 2,82 2,20 2,45 2,14 2,07
3 4,11 2,72 2,50 2,50 2,26
У всех видов рода Pénicillium изменение индексов лизиса в процессе культивирования носит подобный характер: максимальный показатель фиксируется на начальных этапах, а затем происходит его постепенное снижение. Возможно, обнаруженный факт свидетельствует об интенсивной секреции протеиназ на первых этапах культивирования, необходимой для адаптации культуры к трудно утилизируемому субстрату. Средние индексы лизиса, рассчитанные за все время наблюдения, менялись в следующем ряду A. niger F-51 > P.claviforme F-32> P. malinovobranova F-3 > A. syd-owii F-25 > P. crustosum F-46 > P. hirsutum F-29 > A. terreus F-59.
Выводы
1.Все исследованные виды микромицетов можно рассматривать в качестве потенциальных продуцентов коллагеназ.
2.Изученные представители рода Penicillium обладают более высоким адаптационным потенциалом к росту на модифицированной среде по сравнению с аспергиллами.
3.Наибольший интерес для дальнейшего исследования представляют культуры A. niger F-51 и P.claviforme F-32, для которых на модифицированных средах зафиксирован высокий индекс лизиса и высокая скорость роста соответственно.
Список литературы
1.Можина Н.В., Руденская Г.Н. Коллагеноли-тические ферменты патогенных микроорганизмов. // Биомедицинская химия - 2004. - Т. 50, № 6. - С. 539-553
2.Alster N.S., Tansi E.L. Hypertrophic scars and keloids: etiology and management. // Am. J. Clin. Dermatol. - 2004. - V. 4, № 4. - P. 39-42
3.Friedman K., Pollack S.V., Manning T., Pinnell S.R. Degradation of porcine dermal connective tissue by collagenase and hyaluronidase. // Br. J. Dermatol. -1986. - V. 115, № 4. - P. 403-408
4.Mutalir S. Treatment of keloids and hypertrophic scars. // Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol. -2005. - V. 71, № 1. - P. 3-8
5.Neely A.N., Clendening C.E., Gardner J. Gelatinase activity in reloads and hypertrophic scars. // Wound Repair Regen. - 1999. - V. 7, № 3. - P. 166171
6.Peled Z.V., Phelbs E.D.,Updike D.L. Matrix metalloproteinases and the ontogeny of scarless repair: the other side of the wound healing balance. // Plast. Reconstr. Surg. - 2002. - V. 110, № 3. - P. 808-811
УДК 597.553_
ПИТАНИЕ ЛЕНКА BRACHYMYSTAX LENOK И БАЙКАЛЬСКОГО ХАРИУСА
THYMALLUS BACALENSIS СРЕДНЕГО ТЕЧЕНИЯ РЕКИ ЧИКОЙ _(ЗАБАЙКАЛЬСКИЙ КРАЙ)_
Евгения Павловна Горлачева,
научный сотрудник лаборатории водных экосистем Института природных ресурсов экологии и криологии СО РАН, Россия, г. Чита
FOOD LENOK BRACHYMYSTAX LENOK AND THE BAIKAL GRAYLING THYMALLUS BAICALENSIS MIDDLE REACHES OF THE RIVER CHIKOY (ZABAYKALSKY KRAI)
Eugene P. Gorlacheva,
researcher of the laboratory of water ecosystems Institute of natural resources, ecology and Cryology SB RAS, Russia, Chita DOI: 10.31618/ESU.2413-9335.2018.1.56.12-16 В 2017 году был изучен состав пищевого комка ленка и хариуса среднего течения р.Чикой В желудках ленка и хариуса обнаружены куколки и имаго амфибиотических насекомых. Основу рациона по массе занимали веснянки и ручейники. Установлено изменение пищевых компонентов в разные сезоны наблюдений. Состав пищи ленка и хариуса имеет отличие в разных водотоках. Все это способствует расхождению рыб по пищевым нишам и более полному использованию кормовой базы.
In 2017, we studied the composition of the bolus Lenka and chorusbridge reaches of the river Chikoy In the stomach, Lenka, grayling and discovered the pupa and imago of amphibiotic insects. The basis of the diet by mass
