CC BY
63
УДК 615.1
СРАВНИТЕЛЬНОЕ БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КАПСУЛ ТАМСУЛОЗИНА МОДИФИЦИРОВАННОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ
Н.А. Уваров1, Е.Е. Лазарева1'2, В.К. Алексеев3, Е.В. Блынская 2, С.Э. Кондаков4
с ЗАО «Ф-Синтез»; НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН; Московская государственная академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова; химический факультет МГУ; e-mail: eaureus@mail.ru)
Проведено сравнительное биофармацевтическое исследование капсул тамсулозина модифицированного высвобождения и препарата «Омник». Дана оценка фармакокинетиче-ских показателей препаратов, определена относительная биодоступность. В опытах in vivo показано, что процессы всасывания, распределения, метаболизма и выведения тамсулозина при применении капсул тамсулозина модифицированного высвобождения (0,4 мг) и капсулы «Омник®» (0,4 мг) одинаковы, и лекарственные формы являются биоэквивалентными.
Ключевые слова: тамсулозин, фармакокинетика, биоэквивалентность.
Препараты из группы а1-адреноблокаторов в настоящее время занимают лидирующие позиции в терапии одного из наиболее часто встречающихся заболеваний пожилых мужчин - доброкачественной гиперплазии предстательной железы [1]. Первые представители данной группы - феноксибензамин и празозин, использовались в лечении нарушений мочеиспускания, вызванных доброкачественной гиперплазией предстательной железы. Однако их применение сопровождалось развитием большого числа побочных эффектов, а в случае празозина возникала необходимость частого применения, поскольку их период полувыведения небольшой [2]. Препараты следующего поколения - а1-адреноблокаторы длительного действия, такие как теразозин и доксазо-зин, характеризуются удобством применения, однако при их назначении необходимо титровать дозу, чтобы избежать развития одного из наиболее опасных побочных эффектов - ортостатической гипотензии [3, 4]. Данная проблема была решена с появлением на фармацевтическом рынке тамсулозина, нового препарата данной группы, который характеризуется высокой селективностью в отношении альфа-подтипа а1-адренорецепторов (рис. 1). Это обусловливает сочетание выраженности терапевтического действия и более низкой вероятности развития гипотензии на фоне лечения [5-7]. Эффективное и безопасное применение тамсулозина у больных с гиперплазией предстательной железы доказано многочисленными исследованиями, в которых достоверно продемон-
стрировано, что тамсулозин по сравнению с плацебо заметно уменьшает выраженность симптомов, а также нарушений мочеиспускания, обусловленных гиперплазией простаты [8, 9]. В то же время накопление дополнительного клинического опыта применения тамсулозина дает возможность дальнейшей оценки значения данного препарата в лечении больных с гиперплазией простаты. Немаловажную роль в этом занимает разработка и создание отечественных препа-ратов-джененриков тамсулозина, характеризующихся оптимальными значениями фармакокинетических параметров и относительной биодоступности. Это может быть достигнуто разработкой лекарственных форм с модифицированным, по сравнению с обычной формой, механизмом и характером высвобождения лекарственного вещества [10, 11].
S02NH
^СН
Рис. 1. Структурная формула тамсулозина (-)-(R)-5-[2-[[2-(О - Этоксифенокси) этил] амино] пропил]-2-метокси-бензолсульфонамида)
Материалы и методы
Приборы и аппаратура. рН-метр «HANNA pH 211» («Hanna Instruments», Германия), спектрофотометр «СФ-46» («ЛОМО»), весы «Sartorius LA 1200 S» («Sartorius AG», Германия), аппарат для встряхивания («Laboratory shaker type 358S», Польша), петлевой кран-дозатор фирмы «Rheo-dyne» (модель 7125, США), жидкостной хроматограф «Series 200» фирмы «Perkin Elmer» (США)
Изучаемые фармацевтические препараты. Тамсулозин (Tamsulozin) в капсулах модифицированного высвобождения по 0,4 мг производства фирмы «Ф-Синтез», Россия (препарат А). «Ом-ник®» в капсулах по 0,4 мг производства «Яману-чи Юроп Б .В.», Нидерланды (препарат Б). Физико-химические свойства и концентрация действующего начала тамсулозина в препаратах А и Б эквивалентны.
Фармакокинетические исследования. Для исследования использовали 6 здоровых кроликов-самцов породы шиншилла массой 2,9±0,3 кг. Животных содержали в стационарных условиях при естественном световом режиме и стандартном рационе (комбикорм, вода). За 12 ч до начала эксперимента животных лишали пищи, оставляя свободный доступ к воде. Исследуемые препараты вводили кроликам согласно плану рандомизации (табл. 1). Препараты вводили перорально, однократно, по две капсулы (разовая доза 0,276 мг/кг).
Испытание препаратов осуществляли по перекрестной схеме - каждый кролик попеременно получал изучаемый препарат и препарат сравнения. Интервал времени между приемом препаратов составлял две недели.
Отбор проб. Пробы крови в объеме, достаточном для получения 0,5 мл сыворотки, отбирали из ушной вены кроликов в стеклянные пробирки до применения препарата (холостая проба) и через интервалы времени: 1, 2, 4, 6, 10, 14, 18 и 24 ч после введения препарата. Сыворотку крови отделяли центрифугированием при 5000 об/мин и хранили до анализа при температуре 20°С.
Методика количественного определения. Для ко -личественного определения неизмененного тамсулозина использовали метод ВЭЖХ. Разделение проводили на стальной хроматографической колонке Luna C18(2) размером 4,6^150 мм фирмы «Phenomenex» (размер зерен сорбента 7 мкм). Элюент - смесь аце-тонитрила и 30 мМ водного раствора калия диги-дрофосфата. Скорость потока элюента 1,0 мл/мин. Объем петли дозатора 100 мкл. Для детектирования
использовали флюориметрический детектор с длиной волны возбуждения 228 нм и длиной волны испускания 326 нм. Время удерживания тамсулозина ~10,2±0,3 мин.
Пробоподготовка. К 0,5 мл сыворотки крови добавляли водный раствор кислоты для подкисления и дважды экстрагировали тамсулозин бутилацетатом (двумя объемами по 2 мл), после чего проводили обратную экстракцию из бутилацетата в 2 мл фосфатного буфера с рН 2. 100 мкл полученного раствора вводили в хроматографическую колонку с помощью петлевого инжектора.
Метод расчета концентраций. Концентрацию тамсулозина в сыворотке рассчитывали с помощью абсолютной калибровки. Калибровка линейна в диапазоне 50-1300 нг/мл сыворотки (рис. 2). На основании данных время-концентрация рассчитывали следующие фармакокинетические параметры: AUC(0-a)) - площадь под фармакокинетической кривой (0-то), нгхч/мл; Тмакс - время достижения максимальной концентрации тамсулозина в крови, ч; Смакс - максимальная концентрация тамсулозина в крови, нг/мл; T1/2 - период полувыведения; &эл - константа элиминации.
Относительную биодоступность препарата А по сравнению с препаратом Б определяли, используя уравнение:
F = [AUC(A) х D(E)] / [ АиС(Б) х D(A)],
где AUC - площадь под кривой зависимости «время-концентрация», нгхч/мл; D - введенная доза, мг/кг.
Фармакокинетические параметры рассчитывали с помощью компьютерной программы M-IND, для статистической обработки данных использовали программу Excel.
Результаты и обсуждение
На основании результатов исследований проведен сравнительный анализ фармакокинетических показателей тамсулозина в крови после однократно-
200 400 600 800 1000 1200 1400 Концентрация тамсулозина, нг/мл
Рис. 2. Калибровочный график
Т а б л и ц а 1
Значения фармакокинетических параметров тамсулозина после однократного перорального введения капсул модифицированного высвобождения и препарата сравнения «Омник» кроликам
в дозе 0,276 мг/кг
Номер объекта исследования Т макс Смакс AUC(0_M) Т 1 1/2 Кэл ^макс/АиС(0-м)
капсулы тамсулозина модифицированного высвобождения
1 4 1191 24297,1 12,381 0,0560 0,0490
2 4 1031 21562,8 11,965 0,0579 0,0478
3 4 998 19946,6 11,574 0,0599 0,0500
4 4 1223 24707,9 12,009 0,0577 0,0495
5 4 922 19139,9 11,485 0,0603 0,0482
6 4 1297 25307,0 11,225 0,0618 0,0513
Среднее 1110 22493,5 11,773 0,0589 0,0493
Стандартное отклонение 134 2403,9 0,384 0,0019 0,0012
Доверительный интервал 108 1923,5 0,307 0,0015 0,0009
капсулы препарата сравнения «Омник»
1 4 1048 22520,4 12,263 0,0565 0,0465
2 4 958 18037,4 11,074 0,0626 0,0531
3 4 907 16663,3 10,221 0,0678 0,0544
4 4 1073 23676,5 12,614 0,0550 0,0453
5 4 898 16529,1 10,449 0,0663 0,0543
6 4 1073 23867,5 12,674 0,0547 0,0450
Среднее 993 20215,7 11,549 0,0605 0,0498
Стандартное отклонение 75 3203,6 1,009 0,0053 0,0042
Доверительный интервал 60 2563,4 0,807 0,0043 0,0034
го перорального введения кроликам капсул тамсулозина модифицированного высвобождения и препарата сравнения «Омник» в дозе 0,276 мг/кг
В табл. 2 приведены рассчитанные по полученным показателям концентрационных значений фармако-кинетические параметры См^ AUC^^ ^
кэл и отношение Смакс/АиС(0 ш), отражающие степень, скорость всасывания и элиминацию тамсулозина при применении изучаемых лекарственных препаратов.
Анализ полученных данных позволил установить, что исследуемая лекарственная форма тамсулозина и препарат сравнения обладают сходными фармако-кинетическим профилем, обусловленным близкими значениями ключевых показателей.
Максимальная концентрация (Смакс) достигается приблизительно через 4 ч после введения препаратов и составляет 1110±108 нг/мл для изучаемого препарата и 993±60 нг/мл для препарата сравнения (рис. 3).
Время достижения максимальной концентрации (Тмакс) для обоих препаратов составляет ~4 ч.
Период полуэлиминации (Т1/2) после введения изучаемого препарата составил 11,773±0,307 ч, после введения препарата сравнения - 11,549±0,807 ч.
Такой показатель, как площадь под фармакоки-нетической кривой (АиС0-оо) для изучаемого препарата равна 22493,5±1923,5 нгч/мл, для препарата сравнения - 20215,7±2563,4 нгч/мл.
Т а б л и ц а 2
Сравнительные значения величин отношения АиСА/ АиСБ и Смакс(А)/Смакс(Б)
Номер объекта исследования / = лисА / лисБ , % {" = с /С % ^ макс(А)' макс(Б) ' /0
1 107,89 113,65
2 119,54 107,62
3 119,70 110,03
4 104,36 113,98
5 115,79 102,67
6 106,03 120,88
Среднее 112,22 111,47
Стандартное отклонение 6,34 5,68
Доверительный интервал 5,07 4,55
Т а б л и ц а 3
Сравнительные значения параметров отношения отношения АиСА/АиСБ
С /С
макс(А) макс(Б)
Номер объекта исследования /' = лисА/ лисБ (%) {" = с / С % ^ макс(А) макс(Б )' /0
1 107,89 113,65
2 119,54 107,62
3 119,70 110,03
4 104,36 113,98
5 115,79 102,67
6 106,03 120,88
Среднее 112,22 111,47
Стандартное отклонение 6,34 5,68
Доверительный интервал 5,07 4,55
Отношение Смакс/ЛиС0-оо составило 0,0493±0,0009 и 0,0498±0,0034 для изучаемого препарата и препарата сравнения соответственно.
Из вышеприведенного видно, что перечисленные фармакокинетические параметры не имеют между собой достоверных отличий.
Оценку относительной биодоступности лекарственной формы тамсулозина проводили не только путем сравнения значений максимальной концентрации (Смакс), времени ее достижения (Тмакс), периода полуэлиминации (Т1/2), площади под фарма-кокинетической кривой (ЛиС0оо), но и отношения
ЛиСА/ЛиСБ и Смакс(А)/Смакс-
Приведенные в табл. 3 значения позволяют заключить, что зависимости концентрации тамсуло-зина в крови кроликов после введения препарата
Рис. 3. Фармакокинетические кривые усредненных концентраций тамсулозина в крови кроликов: 1 - препарат «Ом-ник», 2 - тамсулозин модифицированного высвобождения
капсул тамсулозина модифицированного высвобождения и препарата сравнения «Омник» сходны, средние величины f' (112,22%) и f" (111,47%) укладываются в пределы 80-125%, а различия между значениями Смакс/АиС(0-Ш) для сравниваемых препаратов (табл. 3) при p > 0,95 недостоверны.
На основании вышесказанного можно сделать вывод, что капсулы тамсулозина модифицированного высвобождения и капсулы препарата сравнения «Омник®» биоэквивалентны.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Dong Z., Wang Z., Yang K., Liu Y., Gao W., Chen W. Tamsulosin versus terazosin for benign prostatic hyperplasia: a systematic review // Syst Biol Reprod Med. 2009. 55. N 4. P. 129.
2. Measurement of free drug and clinical end-point by highperformance liquid chromatography-mass spectrometry. Applications and implications for pharmacokinetic and pharmacodynamic studies.Bronwyn Atcheson, Paul J. Taylor, Peter I. Pillans, Susan E. Tett.Analytica Chimica Acta. 2003. 492. P. 157.
3. MichelM.C. // J. Pharmacol Sci. 2010. 112. N 2. P. 151.
4. Блынская Е.В., Алексеев К.В., Кондаков С.Э., Аляутдин Р.Н., Балабаньян В.Ю. // Вестн. Моск. ун-та. Сер. 2. Химия. 2011. 52. № 2. С. 154.
5. Иремашвили В.В. // Российский мед. журн. 2009. № 25. С. 49.
Таким образом, проведенное на кроликах исследование сравнительной фармакокинетики и относительной биодоступности лекарственных форм тамсулозина (капсулы по 0,4 мг) показало, что процессы всасывания, распределения, метаболизма и выведения тамсулозина при применении капсул тамсулозина модифицированного высвобождения (0,4 мг) производства фирмы «Ф-Синтез» и капсулы «Омник®» (0,4 мг) производства «Яманучи Юроп Б. В.» одинаковы, и лекарственные формы являются биоэквивалентными.
6. Nickel J.C., Sander S., Moon T.D. // I nt. J. Clin. Pract. 2008. 62. N 10. P. 1547.
7. Методическиерекомендациипо проведению качественных клинических исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов. М., 2001. С.19.
8. Naslund M.J., Miner M. A review of the clinical efficacy and safety of 5alpha-reductase inhibitors for the enlarged prostate // Clin. Ther. 2007. 29. N 1. P. 17.
9. Ren R.M., Kou M., Lan X.X. // Chin Med. J. 2010. 123. N 2. Р. 234.
10. Roehrborn C.G. // Rev.Urol. 2009. 9. (Suppl 1). Р. 1.
11. Ogata I., Yamasaki K., Tsuruda A., Tsuzaki S., Ishimatsu T., Hirayama H., Seo H. // Yakugaku Zasshi. 2008. 128. N 2. P. 291.
Поступила в редакцию 10.03.13
COMPARATIVE BIOPHARMACEUTICAL RESEARCH OF CAPSULES OF TAMSULOSIN THE MODIFIED LIBERATION
N.A. Uvarov, E.E. Lazareva, V.K. Alexeev, E.V. Blynskaya, S.E. Kondakov
(JSC "F-Synthesis"; Department of the Russian Academy of Medical Sciences of Zakusov scientific research institute ofpharmacology of the Russian Academy of Medical Science; Moscow State Academy of Fine Chemical Technology. MV Lomonosov; Department of Chemistry Lo-monosov Moscow State University)
Comparative biopharmaceutical research of capsules of tamsulosin the modified liberation and a preparation of "Omnic" is carried out. The estimation of pharmacokinetics indicators of preparations is spent, relative bioavailability is defined. In experiences in vivo it is shown that processes of an absorption, distribution, a metabolism and deducing of tamsulosin at application of capsules тамсулозина the modified liberation of 0,4 mg and capsules of "Omnic" of 0,4 mg are identical also medicinal forms are bioequivalent.
Key words: tamsulosin, pharmacokinetics, bioequivalence.
Сведения об авторах: Уваров Николай Александрович - генеральный директор ЗАО «Ф-Синтез», канд. хим. наук (uvarov@f-sintez.ru); Лазарева Елена Евгеньевна - директор производства ЗАО «Ф-Синтез», канд. хим. наук (lazareva@f-sintez.ru); Алексеев Виктор Константинович - соискатель кафедры биомедицинских и фармацевтических технологий Московской государственной академии тонкой химической технологии имени М.В. Ломоносова (conwieck@yandex.ru); Блынская Евгения Викторовна - ст. науч. сотр. лаборатории готовых лекарственных форм НИИ фармакологии им. В .В. Закусова РАМН, канд. фарм. наук (eaureus@mail. ru); Кондаков Сергей Эмильевич - вед. науч. сотр. кафедры химической кинетики химического факультета МГУ, докт. фарм. наук (kse@excite.chem.msu.ru).
