CC BY
18© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014
С.П.Заднова, Д.А.Агафонов, А.В.Шашкова, Н.И.Смирнова
СРАВНИТЕЛЬНАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ ТИПИЧНЫХ И ГЕНЕТИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННЫХ ШТАММОВ VIBRIO CHOLERAE БИОВАРА EL TOR К ДЕЙСТВИЮ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Цель. Провести сравнительный анализ выживаемости типичных штаммов и генова-риантов V. cholerae биовара El Tor, завезенных в разные годы на территорию Российской Федерации, в отсутствие питательных веществ и в условиях температурного стресса. Материалы и методы. Исследовано 24 штамма V. cholerae биовара El Tor, выделенных в 1970 — 2011 гг., 8 из которых относились к типичным изолятам и 16 к генетически измененным вариантам. Выживаемость штаммов изучали в 0,9% растворе хлорида натрия и автоклавированной речной воде при различных температурных режимах (5, 25, 37 и 42°С). Белковый состав и продукцию экзополисахарида определяли методом электрофореза по U.K. Laemmli. Результаты. Показано, что геноварианты, как и типичные штаммы, могут длительное время (до пяти месяцев) существовать в отсутствие питательных веществ при температуре 25°С. Однако в отличие от типичных эльтор вибрионов геноварианты более устойчивы к температурному стрессу. В результате адаптации к высокой температуре (42°С) в клетках геновариантов увеличивается биосинтез белков-поринов внешней мембраны OmpU и/или OmpT, а при понижении (5°С) — экзополисахарида. Заключение. Геноварианты V. cholerae биовара El Tor способны лучше адаптироваться к изменению температуры, что, возможно, способствует их большему выживанию во внешней среде.
Журн. микробиол., 2014, № 2, С. 11—17
Ключевые слова: Vibrio cholerae, температурный стресс, адаптация, белки внешней мембраны, экзополисахарид
S.P.Zadnova, D.A.Agafonov, A.V.Shashkova, N.I.Smirnova
COMPARATIVE RESISTANCE OF TYPICAL AND GENETICALLY ALTERED VIBRIO CHOLERAE BIOVAR EL TOR STRAINS TO THE EFFECT OF UNFAVORABLE ENVIRONMENTAL FACTORS
Russian Research Institute of Plague Control «Microb», Saratov, Russia
Aim. Carry out comparative analysis of survival of typical strains and genovariants of V. cholerae biovar El Tor imported in different years to the territory of Russian Federation, in the absence of nutrients and under the conditions of temperature stress. Materials and methods. 24 V. cholerae biovar El Tor strains isolated in 1970 — 2011 were studied, 8 of those were typical isolates and 16 — genetically altered variants. Strain survival was studied in 0.9% sodium chloride solution and autoclaved river water at various temperature modes (5, 25, 37 and 42°C). Protein composition and exopolysaccharide production were determined by electrophoresis method by U.K. Laemmli. Results. Genovariants as well as typical strains were shown to be able to exist for a long time (up to 5 months) in the absence of nutrients at the temperature of 25°C. However, unlike typical eltor vibrios, genovariants were more resistant to temperature stress. As a result of adaptation to high temperature (42°C) biosynthesis of porin proteins of outer membrane OmpU and/or OmpT is increased in genovariant cells, and at lower temperatures (5°C) — exopolysaccharide. Conclusion. V. cholerae biovar El Tor genovariants are able to adapt to temperature change better, that may facilitate their higher survival in the environment.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2014, No. 2, P. 11—17
Key words: Vibrio cholerae, temperature stress, adaptation, outer membrane proteins, exopolysac-charide
ВВЕДЕНИЕ
Холера — острая диарейная болезнь человека, относящаяся к особо опасным инфекциям и вызываемая токсигенными штаммами V. cholerae О1 серогруппы классического и El Tor биоваров и О139 серогруппы. Клиническое проявление холеры обусловлено продукцией холерного токсина, кодируемого генами ctxAB, входящими в состав профага вирулентности СТХф [14]. В ходе развития текущей, 7 пандемии холеры, вызванной штаммами V. cholerae биовара El Tor, в результате изменения структуры и функции их профага вирулентности СТХф появились новые генетически измененные варианты (геноварианты) с повышенной вирулентностью [5,19]. На многих эндемичных территориях данные варианты вытеснили типичного возбудителя холеры эльтор и стали доминирующими. В ранее проведенных исследованиях нами установлено, что начиная с 1993 г., все эпидемические вспышки и спорадические случаи заболевания холерой на территории Российской Федерации были вызваны геновариантами V. cholerae биовара El Tor [6].
В настоящее время интенсивно исследуются молекулярно-генетические свойства геновариантов, циркулирующих на эндемичных территориях, а также завезенных на территорию России и сопредельных государств [3, 6, 19 — 21, 24]. Однако не менее важным является изучение экологии новых вариантов. При анализе типичных штаммов V. cholerae биовара El Tor, вызвавших 7 пандемию холеры, было показано, что данные вибрионы хорошо приспособлены к выживанию во внешней среде [14]. В то же время, устойчивость генетически измененных вариантов V. cholerae биовара El Tor к действию различных повреждающих факторов внешней среды практически не исследована. В связи с изложенным, цель нашей работы состояла в проведении сравнительного анализа выживаемости типичных штаммов и геновариантов V. cholerae биовара El Tor, завезенных в разные годы на территорию Российской Федерации, в отсутствие питательных веществ и в условиях температурного стресса.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследования были проведены на 8 клинических типичных и 16 штаммах геновариантов V. cholerae О1 серогруппы биовара El Tor, выделенных на территории России во время вспышек или единичных случаях холеры, а также из внешней среды с 1970 по 2011 гг. (табл.). Штаммы хранились в лиофилизированном состоянии в Государственной коллекции патогенных бактерий. Для культивирования бактерий применяли бульон и агар LB (рН 7,2).
Для определения выживаемости штаммов в отсутствие питательных веществ из агаровой культуры каждого штамма готовили взвесь 1х109 м.к./мл по отраслевому стандартному образцу ОСО 42-28-59-86П и по 0,5 мл помещали во флаконы с 50 мл автоклавированной речной воды или 0,9 % раствором хлорида натрия. Посевы культивировали при температурах 5, 25, 37 и 42°С. Через каждые 4 дня делали высев по 0,1 мл на плотные питательные среды для получения изолированных колоний каждого штамма с последующим подсчетом количества выросших колоний [4].
Для изучения белкового состава клеток готовили образцы, используя агаровую культуру бактерий. Две петли (№ 2) культуры ресуспендировали в 100 мкл дистиллированной воды, добавляли 100 мкл «буфера образца» (0,125 М трис-HCl, рН 6,8; 4% ДСН; 20% глицерин; 2% 2-меркаптоэтанол; 0,03 мМ бромфеноловый
синий) и кипятили на водяной бане в Характеристика штаммов V. cholerae, использованных течение 5 мин. Электрофорез получен- в работе ных цельноклеточных лизатов проводили в присутствии додецилсульфата натрия по [15]. В работе использовали 12,5% и 15% гели. Электрофорез проводили до вхождения образца в разделяющий гель при нагрузке тока 10 мА и далее при 20 мА. Электродный буфер (рН 8,3) содержал: 0,192 М глицина; 0,025 мМ трис-HCl; 0,1% SDS. Гель после окончания электрофореза фиксировали в течение 16 — 18 ч в 200 мл 25% (V/V) изопропанола, растворенного в 7% уксусной кислоте. Для выявления белков гели окрашивали кумасси R-250, для обнаружения экзополисаха-рида — раствором азотнокислого серебра.
РЕЗУЛЬТАТЫ
На первом этапе работы был проведен сравнительный анализ способности типичных штаммов и генова-риантов V. cholerae биовара El Tor выживать в отсутствие питательных веществ. С данной целью штаммы были помещены в 0,9% раствор хлорида натрия (физиологический раствор, рН 7,2). Посевы инкубировали при температуре 25°C. В результате показано, что в данных условиях все штаммы выживали до пяти месяцев. Исключение составили только два штамма геновариантов М1345, М1429, которые оставались жизнеспособными до шести месяцев.
Таким образом, геноварианты, как и типичные эльтор вибрионы, способны длительное время выживать в условиях отсутствия питательных веществ.
Далее была изучена выживаемость штаммов в условиях голодания при температуре 37°C (моделирование пребывания вибрионов в макроорганизме). В результате было установлено, что на 5 сут инкубации КОЕ всех штаммов уменьшилось более чем в 100 раз и продолжало постепенно снижаться в последующие дни наблюдения. Однако на 10 сутки штаммы геновариантов адаптировались к данным условиям существования, так как гибель клеток прекратилась. В дальнейшем 10 штаммов геновариантов стабильно сохраняли численность популяции, а у пяти штаммов (М1345, М1266, М1272, Р18899, Р17644) количество высеваемых клеток постепенно увеличивалось. В то же время, количество живых бактерий в популяции типичных штаммов продолжало снижаться. В итоге на 15 сутки выжили только штаммы геновариантов. Необходимо отметить, что на 8 сутки культивирования было обнаружено, что холерные вибрионы как типичных штаммов, так и геновариантов образуют конгломераты, состоящие из множества бактерий. Возможно, формирование конгломератов способствует лучшему выживанию V. cholerae в данных условиях.
Штамм V cholerae Место выделения Год выделения
Типичные штаммы
М713 Москва 1970
М712 Москва 1970
М818 Саратов 1970
М738 Пермь 1970
М888 Астрахань 1970
М1013 Башкирия 1972
С402 Ставрополь 1990
М1261 Пермь 1990
Генетически измененные варианты (геноварианты)
М1270 Татарстан 1993
М1272 Краснодар 1993
М1264 Краснодар 1993
М1299 Краснодар 1993
М1266* Пермь 1994
М1293 Дагестан 1994
М1269 Магнитогорск 1994
Р17644 Ачинск 1997
Р17645 Иркутск 1997
М1345 Казань 2001
М1429 Башкирия 2004
М1430 Тверь 2005
Р18899 Мурманск 2006
Л3226 Москва 2010
Л4150 Москва 2010
301* Таганрог 2011
Примечание. * Источник выделения —
внешняя среда; у остальных штаммов источник
выделения — больной.
Далее было исследовано влияние экстремальной температуры (42 и 5°C) на выживаемость штаммов V. cholerae биовара El Tor. В результате было обнаружено, что все изученные штаммы были более устойчивы к действию повышенной температуры. Так, при температуре 5°C штаммы погибали на 14 сут, в то же время, при температуре 42°C выживали до 60 сут. Однако измененные варианты, в отличие от типичных штаммов, характеризовались повышенной выживаемостью как при пониженной, так и при повышенной температуре. Так, при температуре плюс 5°C на 10 сутки жизнеспособными оставались 67% штаммов измененных вариантов и только 40% типичных штаммов. При температуре 42°C через 14 дней выжило 83% измененных вариантов и 60% типичных штаммов. К концу эксперимента все типичные штаммы погибали, в то же время, все изученные штаммы геновариантов оставались жизнеспособными.
Для изучения механизма выживания генетически измененных вариантов при температурном стрессе нами был изучен белковый спектр исследованных штаммов. При анализе белков, полученных из цельноклеточных лизатов штаммов, выращенных при температуре 42°C, методом электрофореза в присутствии до-децилсульфата натрия у всех изученных штаммов геновариантов было отмечено увеличение продукции белков внешней мембраны OmpT и/или OmpU соответственно с молекулярной массой 40 и 38 кДа (рис. А, дорожка 6). В то же время, у типичных штаммов продукция данных белков не изменялась (рис. А, дорожка 3). Учитывая полученные данные, можно высказать предположение, что одним из механизмов адаптации штаммов измененных вариантов к действию неблагоприятной для роста повышенной температуры является увеличение биосинтеза в клетках белков внешней мембраны OmpT и/или OmpU.
У штаммов геновариантов, находящихся при температуре 5°C, продукция белков OmpT/OmpU не изменялась (рис. А, дорожки 2, 5). Однако при изучении популяции была обнаружена ее гетерогенность. На третьи сутки культивирования наряду с типичными прозрачными или Т (translucent) колониями были обнаружены мутные крупные или О (opaque) колонии. При этом популяция типичных штаммов оставалась однородной и включала только Т колонии. В ранее проведенной работе нами было выявлено, что изменение морфологии колоний у О вариантов связано с синтезом дополнительного экзополисахаридного слоя на поверхности клеток [1]. При анализе полученных в данной работе О колоний геновариантов также было показано, что они синтезируют больше экзополи-сахарида, чем Т клоны (рис. Б, дорожка 5).
Таким образом, в результате адаптации к низкой температуре геноварианты синтезируют на поверхности клетки дополнительный экзополисахаридный слой.
Продукция белков (А) и экзо-полисахарида (Б) штаммами V. cholerae биовара El Tor при культивировании в речной воде при температуре 42°C и 5°C. 1—3 — типичный штамм М1261; 4—6 — геновариант Л3226. Дорожки 2,5 — штаммы, выращенные при 5°C; 3,6 — при 42°C. Стрелками слева отмечены белки OmpT и OmpU и экзополисахарид.
1 ? з л
ЭГС
шлл^т
I ? э 4 3 i ¡Н
ОБСУЖДЕНИЕ
Холерный вибрион способен не только вызывать тяжелое диарейное заболевание человека, но и является автохтонным обитателем водоемов и, образуя био-ценотические связи с водными организмами, способен длительное время (15 месяцев и более) сохраняться во внешней среде. При этом, выйдя из макроорганизма, холерный вибрион попадает в условия недостатка питательных веществ, изменения температуры, осмолярности среды и т.д. Предполагается, что наиболее важными параметрами, контролирующими рост V. cholerae во внешней среде, являются температура и соленость среды [11, 16, 22]. Еще Р. Кохом установлено, что оптимальной для роста холерного вибриона является температура от 35 до 37°С. При температуре 41°C наблюдается слабый рост, а при температуре ниже 10°C вибрионы не размножаются, но могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких дней [22]. Учитывая данные литературы о способности вибрионов эльтор сохранять жизнеспособность при низкой температуре (в том числе во льду) и их выделении из геотермальных источников нами были проведены модельные эксперименты по изучению влияния отсутствия питательных веществ и различной температуры культивирования (5, 25, 37, 42°C) на выживаемость типичных штаммов и геновариантов.
В литературе установлено несколько механизмов выживания типичных штаммов V. cholerae биовара El Tor при изменении температуры культивирования. Показано, что при повышении температуры возрастает биосинтез альтернативного сигма фактора с32 (белок RpoH), который повышает транскрипцию гена теплового шока dnaK, кодирующего продукцию белка с молекулярной массой 23 кДа [10]. С целью адаптации к низкой температуре (ниже 15°C) холерные вибрионы синтезируют два низкомолекулярных белка холодового шока — CspV и CspA соответственно c молекулярной массой 7,7 и 7,5 кДа [7]. Кроме продукции белков холодового шока еще одним механизмом выживания при резком понижении температуры (ниже 5°C) является переход холерного вибриона в некультиви-руемое состояние. При этом клетки приобретают коккоидную форму, значительно уменьшаясь в размере и редуцируя биосинтез липидов, углеводов и ДНК [11]. При формировании коккоидной морфологии колоний обнаружено увеличение биосинтеза белков с молекулярной массой 8, 26 и 194 кДа и уменьшение 28 и 183 кДа белков [8].
С целью установления механизма выживания генетически измененных вариантов V. cholerae биовара El Tor при пониженной и повышенной температуре нами был изучен белковый спектр всех взятых для анализа штаммов. При этом наличие дополнительных белков теплового или холодового шока выявлено не было. В то же время, у геновариантов, находящихся при температуре 42°C, было обнаружено увеличение биосинтеза белков внешней мембраны — OmpU и/или OmpT. Как известно, при значительном изменении температуры культивирования нарушается структура и проницаемость мембран микроорганизмов, что приводит к снижению содержания растворенных веществ в клетке и в итоге к потере жизнеспособности. Белки OmpU и OmpT являются одними из основных белков, участвующих в образовании пор во внешней мембране и поддержании структурной целостности мембраны. При этом содержание белка OmpU может составлять до 60% от количества всех белков внешней мембраны. Кроме того, данные белки выполняют защитную функцию [9, 18]. Возможно, выявленное нами увеличение биосинтеза белков OmpU и/или OmpT у штаммов геновариантов V. cholerae биовара El Tor при культивировании при высокой температуре (42°C) способствует сохранению структуры и проницаемости внешней мембраны бактерий и является одним из механизмов их адаптации к действию теплового стресса.
В то же время, при культивировании геновариантов в речной воде при температуре плюс 5°C изменения в биосинтезе белков выявлены не были. Однако было установлено, что клетки продуцируют дополнительный экзополисахаридный слой. Учитывая данные литературы о том, что штаммы V. cholerae, способные экспрес-сировать экзополисахарид, обладают большей устойчивостью к повреждающим факторам и лучше сохраняются во внешней среде [2, 12, 13, 17, 23], можно предположить, что продукция экзополисахарида штаммами геновариантов способствует их выживанию в условиях низких температур.
Таким образом, в результате проведенных исследований показано, что генетически измененные варианты V. cholerae биовара El Tor, как и типичные штаммы, могут длительное время выживать в отсутствие питательных веществ. При этом геноварианты способны лучше адаптироваться к изменению температуры, увеличивая биосинтез белков OmpU и/или OmpT при ее повышении и экзополиса-харида при понижении, что, возможно, способствует их большей выживаемости во внешней среде.
Работа выполнена в рамках гранта РФФИ №12-04-00285 и по ГК №53-Д от 04.06.2012 г. в рамках реализации ФЦП «Национальная система химической и биологической безопасности Российской Федерации (2009 — 2013 г.)».
ЛИТЕРАТУРА
1. Заднова С.П., Смирнова Н.И. Роль внеклеточного экзополисахарида в адаптации возбудителя холеры во внешней среде. Проблемы особо опасных инфекций. 2010, 3 (105): 13-19.
2. Милютин В.Н., Дрожевкина М.С., Ломов Ю.М. и др. Механизмы и диапазон изменчивости холерных вибрионов. Ростов-на-Дону, Ростовское книжное издательство, 1981.
3. Миронова Л.В., Балахонов С.В., Урбанович Л.Я. и др. Обнаружение «гибридных» штаммов Vibrio cholerae Eltor при эпидемических осложнениях в Сибири и на Дальнем Востоке. Журн. микробиол. 2011, 5: 12-18.
4. Смирнова Н.И., Кульшань Т.А., Челдышова Н.Б., Осин А.В. Структурные и функциональные изменения генома возбудителя холеры в водной среде. Эпидемиол. и инфекц. болезни. 2007, 5: 22-27.
5. Смирнова Н.И., Горяев А.А., Кутырев В.В. Эволюция генома возбудителя холеры в современный период. Мол. генет., микробиол. вирусол. 2010, 3: 11-19.
6. Смирнова Н.И., Горяев А.А., Заднова С.П., Краснов Я.М., Лозовский Ю.В., Кутырев В.В. Генетическая характеристика штаммов Vibrio cholerae, завезенных на территорию Российской Федерации в разные периоды 7 пандемии холеры. Журн. микробиол. 2011, 3: 3-10.
7. Datta P.P., Bhadra R.K. Cold shock response and major cold shock proteins of Vibrio cholerae. Appl. Environ. Microbiol. 2003, 69 (11): 6361-6369.
8. Carroll J., Mateescu M.C., Chava K. et al. Response and tolerance of toxigenic Vibrio cholerae O1 to cold temperatures. Antonie van Leeuwenhoek. 2004, 79: 377-384.
9. Chakrabarti A.K., Chaudhuri K., Sen K., Das J. Porins of Vibrio cholerae: purification and characterization of OmpU. J. Bacteriol. 1996, 17 (2): 524-30.
10. Chakrabarti S., Sengupta N., Chowdhury R. Role of DnaK in vitro and in vivo expression of virulence factors of Vibrio cholerae. Infect. Immun. 1999, 67 (3): 1025-1033.
11. Colwell R.R., Hug A. Vibrios in the environment: viable but nonculturable Vibrio cholerae. In: I. Kaye, P.A. Blake, O. Olsvik (ed.). Vibrio cholerae and cholera: molecular to global perspectives. Washington, 2005, 9: 117-133.
12. Finkelstein R.A., Boesman-Finkelstein M., Chang Y., Hase C.C. Vibrio cholerae hemagglu-tinin/protease, colonial variation, virulence and detachment. Infect. Immun. 1992, 60 (2): 472-478.
13. Finkelstein R.A., Boesman-Finkelstein M., Sengupta D.K. et al. Colonial opacity variations among the choleragenic vibrios. Microbiology. 1997, 143 (1): 23-34.
14. Kaper J.B., Morris J., Levin M. Cholera. Clin. Microbiol. Rev. 1995, 8 (1): 48-89.
15. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head ofbacteriophage T. Nature. 1970, 227 (5259): 680-685.
16. Louis V.R., Russek-Cohen E., Choopun N. et al. Predictability ofVibrio cholerae in Chesapeake Bay. Appl. Environ. Microbiol. 2003, 69: 2773-2785.
17. Meno Y., Waldor M.K., Mekalanos J.J., Amako K. Morphological and physical characterization of the capsular layer of Vibrio cholerae O139. Arch. Microbiol. 1998, 170 (5): 339-344.
18. Merrell D.S., Bailey C., Kaper J.B., Camilli A. The ToxR-mediated organic acid tolerance response of Vibrio cholerae requires OmpU. J. Bacteriol. 2001, 183: 2746-2754.
19. Nair G.B., Faruque S.M., Bhuiyan N.A. et al. New variants of Vibrio cholerae O1 biotype El Tor with attributes of the classical biotype from hospitalized patients with acute diarrhea in Bangladesh. J. Clin. Microbiol. 2002, 40 (9): 3296-3299.
20. Nguyen B.M., Lee J.H., Cuong N.T. et al. Cholera outbreaks caused by an altered Vibrio cholerae O1 El Tor biotype strain producing classical cholera toxin B in Vietnam in 2007 to 2008. J. Clin. Microbiol. 2009, 47: 1568-1571.
21. Safa A., Nair G.B., Kong R.Y.C. Evolution of new variants of Vibrio cholerae O1. Trends Microbiol. 2010, 18: 46-54.
22. Singleton F.L., Attwell R.W., Jangi M.S., Colwell R.R. Effects of temperature and salinity on Vibrio cholerae growth. Appl. Environ. Microbiol. 1982, 44 (5): 1047-1058.
23. Waldor M.K., Colwell R., Mekalanos J.J. The Vibrio cholerae O139 serogroup antigen includes an O antigen capsule and lipopolysaccharide virulence determinants. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994, 91 (24): 11388-11392.
24. Taviani E., Grim C.J., Choi J. et al. Discovery of novel Vibrio cholerae VSP-II genomic islands using comparative genomic analysis. FEMS Microbiol Lett. 2010, 308 (2): 130-137.
Поступила 18.06.13
Контактная информация: Заднова Светлана Петровна, д.б.н.,
410005, Саратов, Университетская, 46, р.т. (8452)26-47-23
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014
Г.Н.Холодок1, И.Н.Алексеева1, Н.В.Стрельникова2, В.К.Козлов1
КОЛОНИЗАЦИОННЫЕ СВОЙСТВА УСЛОВНО ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ, ИЗОЛИРОВАННЫХ ПРИ ПНЕВМОНИЯХ У ДЕТЕЙ
Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания — НИИ охраны материнства и детства, Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск
Цель. Оценка фенотипов и факторов патогенности 476 штаммов условно патогенных бактерий, изолированных из респираторных образцов 973 детей, больных внебольничной пневмонией, и 365 детей без симптомов респираторной инфекции. Материалы и методы. Использовали количественный метод посева трахеального аспирата и носоглоточных мазков на сертифицированные питательные среды, идентификацию проводили согласно стандартным методикам. Результаты. Установлено, что адгезивная, «антиинтерфероно-вая», антилизоцимная и собственная бактерицидная активность Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp. обеспечивают им в сочетании с известными факторами агрессии колонизационное преимущество перед другими пневмопатогенами. Показано, что индексы адгезивной адгезивности гра-мотрицательных бактерий менее 2,5 являются маркерами инвазивных штаммов. Уровень антилизоцимной активности менее 2,14 мкг/мл и отсутствие «антиинтерфероновой» активности характеризуют неинвазивные штаммы условно патогенных бактерий. Заключение. Выявленные фенотипические особенности условно патогенных бактерий могут быть использованы в клинической практике для оценки этиологической значимости микроорганизмов, изолированных из трахеального аспирата у больных пневмонией.
2. ЖМЭИ 2 № 30
17
