CC BY
29
УДК 616-002.582
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО, КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ И САРКОИДОЗОМ ЛЕГКИХ
Николаев А. В.
ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет», медицинский факультет; ООО «Медицинский Центр «МАГНИТ», Санкт-Петербург, Россия (190005, г. Санкт-Петербург, 6-я Красноармейская ул., д. 5-7), e-mail: leha.nikolayev.65@mail.ru
Цель: изучение показателей неспецифического, клеточного и гуморального иммунитета при туберкулезе (ТЛ) и саркоидозе легких (СЛ), для обоснования дифференциальной диагностики данных заболеваний Проведено сравнительное изучение гематологических и иммунологических (неспецифический, специфический, клеточный иммунитет) показателей у больных туберкулёзом (n=53), саркоидозом (n=24) и здоровых лиц (группа контроля, n=30). Также всем пациентам проводились общеклинические исследования (осмотр, опрос, клинико-биохимические анализы крови, ЭКГ и пр.)
Установлено, что при туберкулёзе и саркоидозе лёгких клинико-биохимические показатели крови имели значительные сдвиги к грани «норма-патология» (тенденция к анемии, воспалительный ответ организма), что свидетельствует о напряжении защитных систем организма.
Показатели среднего содержания СД20+ (B-лимфоцитов) при ТЛ и СЛ были практически одинаковыми, но выше, чем у здоровых лиц (р <0,05). Показатели среднего относительного содержания T-хелперов (CD4+, %) при ТЛ и СЛ также были практически одинаковыми и в обеих группах меньше, чем в группе контроля (p <0,05). При ТЛ и СЛ, в сравнении с данными здоровых лиц, обнаружен существенный дисбаланс в содержании провоспалительных цитокинов ИЛ-2 (снижение в 2,5 и 2,2 раза соответственно), ИЛ-6 (возрастание в 1,9 и в 6,0 раз) и ФНО-а (возрастание в 27 и в 24 раза соответственно). Следует подчеркнуть, что уровни средних показателей ИЛ-2 и ИЛ-6 были в 1,2 и в 3,1 раза выше в группе пациентов с СЛ, чем при ТЛ, а показатель ИФН-у, напротив, был в 1,3 раза выше в группе больных ТЛ. Эти различия в параметрах клеточного, неспецифического и гуморального иммунитета можно использовать при диагностике саркоидоза и туберкулеза легких в качестве физиологических и иммунологических маркеров этих заболеваний.
Ключевые слова: саркоидоз, туберкулёз, неспецифический иммунитет, клеточный и гуморальный иммунный ответ.
COMPARATIVE ASSESSMENT OF INDICATORS OF NONSPECIFIC, CELLULAR AND HUMORAL IMMUNITY IN PATIENTS WITH TUBERCULOSIS AND PULMONARY SARCOIDOSIS
Nikolaev А.V.
St. Petersburg University, Faculty of Medicine; "MAGNIT Medical Center" Limited Liability Company, St. Petersburg, Russia (190005, St. Petersburg, 6th Krasnoarmeiskaya St., 5-7 A), e-mail: leha.nikolayev.65@mail.ru
The purpose of the study is to clarify the status of indicators of nonspecific, cellular and humoral immunity in tuberculosis and pulmonary sarcoidosis in order to form a rationale for the differential diagnosis of these diseases.
A comparative study of hematological, immunological (nonspecific, specific, cellular immunity) and clinical parameters was performed in patients with tuberculosis (n = 53), sarcoidosis (n = 24) and in healthy patients (control group, n = 30). General clinical trials of all patients who participated in the study were also conducted (examination, interrogation, clinical and biochemical blood tests, ECG, etc.).
Clinical and biochemical blood tests showed a significant trend towards anemia and inflammatory response in tuberculosis and sarcoidosis, which indicated the increased functioning of the body defense systems. The mean levels of DM20+ (B-lymphocytes) in tuberculosis and sarcoidosis was almost the same and higher as compared to healthy controls, (p <0.05). Besides, the mean relative concentrations of T-helper cells or CD4+ cells in tuberculosis and sarcoidosis were nearly the same and lower as compared to healthy controls, (p <0.05). In contrast to the healthy group, patients with tuberculosis and sarcoidosis demonstrated a significant imbalance in the content of pro-inflammatory cytokines IL-2 (2,5- and 2,2-fold drop, respectively), IL-6 (1,9- and 6,0fold increase, respectively) and TNF-а (27- and 24-fold increase, respectively). It should be emphasized that the mean IL-2 and IL-6 levels were 1,2- and 3,1-fold higher in sarcoidosis patients as compared to those with tuberculosis, while the mean IFN-y level was 1,3-fold higher in tuberculosis patients by contrast. The obtained differences in the parameters of cellular, nonspecific and humoral immunity compared with the norm can be used in the diagnosis of sarcoidosis and pulmonary tuberculosis as physiological and immunological markers of these diseases.
Key words: sarcoidosis, tuberculosis, nonspecific immunity, cellular and humoral immune respons.
Введение
На долю диффузных интерстициальных и дис-семинированных заболеваний легких (ДЗЛ) приходится около 5% всей легочной патологии и в последние десятилетия наблюдается увеличение их регистрации. При этом в 50-70% больным с ДЗЛ, в том числе и при саркоидозе легких (СЛ) первоначально ставится ошибочный диагноз «туберкулез легких» (ТЛ) с необоснованной противотуберкулезной химиотерапией. Очевидно, что неправильный диагноз ведет к хронизации патологии с частыми рецидивами и соответственно - к повышению инвалидизации и летальности среди пациентов [1, 2]
Возбудителем ТЛ являются микобактерии, а этиология СЛ неизвестна, но нарушения в состоянии иммунной системы играют важнейшую роль в патогенезе заболеваний [3].
Цель исследования - изучение показателей неспецифического, клеточного и гуморального иммунитета у больных ТЛ и СЛ для обоснования дифференциальной диагностики данных заболеваний.
Материал и методы
Клинические исследования проведены на базе ГБУЗ «Городской противотуберкулезный диспансер» г. Санкт-Петербурга. Лабораторные исследования проведены на базе ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии».
Для решения поставленной цели в 2011-2017 гг. комплексно обследованы 107 человек от 22 до 69 лет, распределенные в три группы: 1-ю группу составили 53 человека с ранее установленным диагнозом ТЛ, 2-ю группу - 24 пациента с установленным ранее диагнозом СЛ и 3-ю (контрольную группу - 30 практически здоровых людей. Распределение по тендерному признаку в трех группах было следующим. В 1 группу вошли 28 мужчин и 25 женщин, во 2-ю - 9 мужчин и 15 женщин, в 3-ю - 14 мужчин и 16 женщин. Средний возраст участников исследования в 1-й, 2-й и в контрольной группах составил 48,5±1,8, 52,1±2,6 и 46,7±1,6 лет соответственно. Группы не имели между собой достоверных различий по возрастному составу. Исключение составила 2-я группа, две трети которой составляли женщины. У лиц 3-ей группы при медицинском обследовании не обнаружено существенных заболеваний (сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта и т. д.), что позволило отнести их к практически здоровым.
Критериями включения больных в исследование были:
- возраст пациента в пределах 22 - 69 лет;
- документально подтвержденный ранее диагноз ТЛ или СЛ.
Критериями исключения больных из исследования были:
- возраст пациента: моложе 22 лет и старше 69
лет;
- беременность;
- наличие у пациентов документально подтвержденной алкогольной или наркотической зависимости;
- наличие у пациентов документально подтвержденной онкологической патологии;
- наличие запущенных, терминальных форм заболеваний.
Помимо общеклинического исследования (осмотр, опрос, клинико-биохимические анализы крови,
Экспериментальная медицина и клиническая диагностика
ЭКГ и пр.) всем пациентам проводили исследование иммунной системы. При оценке неспецифического иммунитета определяли фагоцитарную функцию нейтрофилов с помощью цитохроматического метода реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ - тест), выполняя одновременно спонтанный и индуцированный НСТ-тест. По отношению результатов индуцированного НСТ-теста к спонтанному НСТ - тесту высчитывали индекс стимуляции (ИС) по величине которого судили о величине фагоцитарной активности (резерва) нейтрофилов; единицы -усл.ед.
Состояние клеточного иммунитета определяли по абсолютному и относительному содержанию (в %) основных субпопуляций им-мунокомпетентных клеток (с фенотипом CD3+ (Т-лимфоцитов), CD4+ (Т-хелперов), CD8+ (цитоток-сических Т-лимфоцитов), CD20+ (В-лимфоцитов), CD16+CD56+ (NK-клеток-киллеров) в периферической крови с использованием метода проточной цитофлуориметрии на проточном цитофлуориметре «FacsCanto II» (Beckton Dickinson, США). Также высчитывали показатель соотношения СД4/СД8 для более точной оценки функции лимфоцитов.
Состояние гуморального иммунитета оценивали по содержанию иммуноглобулинов (Ig) изотипов А, М и G, определяли их в крови с помощью имму-ноферментного анализа методом двойных антител с наборами реактивов «ИФА-БЕСТ» (ВЕКТОР БЕСТ, Россия).
Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) средней и низкой молекулярной массы (смм и нмм соответственно) определяли спек-трофотометрическим методом с использованием по-лиэтиленгликоля-6000. Реакцию оценивали на спектрофотометре СФ-26 (ЛОМО, Россия).
Содержание цитокинов - фактора некроза опухоли-а (ФНО-а), интерферона-у и интерлейки-нов: 2, 4, 6 (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6) в сыворотке крови исследовали с помощью иммуноферментного анализа с применением диагностических тест-систем ООО «Протеиновый контур» (Россия).
Статистическую обработку полученных количественных данных осуществляли на персональном компьютере с применением программного обеспечения STATISTICA 10 для Windows (StatSoft, США) и Exel (Microsoft, США). Для описания полученных данных рассчитывали средние значения и стандартные отклонения в каждой группе для всех количественных показателей. Качественные данные выражали через частоты встречаемости в %. Статистическую достоверность различий между частотными показателями групп оценивали с использованием критерия х2 (хи-квадрат) с учетом поправки Йетса. Значения количественных показателей проходили проверку на соответствие нормальному распределению по методу Колмогорова-Смирнова.
Для выявления статистически значимых различий по количественным показателям использовали критерий Стьюдента для несвязанных выборок с нормальным распределением признака. При отсутствии нормального распределения значений признака статистическую значимость различий между группами оценивали с использованием непараметрического U-критерия Манна-Уитни. Критическое значение уровня статистической значимости нулевой гипотезы принимали равным 0,05.
Результаты исследования
Средние показатели данных возраста, частоты сопутствующей соматической патологии и курения в исследуемых группах пациентов с ТЛ и СЛ были практически одинаковыми, но ТЛ чаще встречался у мужчин (60,4±6,7%), СЛ чаще наблюдался у женщин -54,2% (р > 0,05).
Наиболее часто больные жаловались на кашель: при ТЛ - 45,3±6,8% пациентов, при СЛ - 29,2±9,3% (р>0,05). Другие «легочные» жалобы на выделение мокроты, на боли в грудной клетке, на кровохарканье у больных ТЛ были еще реже (до 10% случаев по каждому из симптомов) и чаще при ТЛ (до 5% пациентов при СЛ и 6-10% при ТЛ).
Среди «не легочных» жалоб и симптомов у пациентов с ТЛ и СЛ в каждом третьем случае отмечались жалобы, косвенно указывавшие на синдром интоксикации (слабость, недомогание повышение температуры тела, раздражительность, нарушение сна (р>0,05).
При ТЛ пациенты ни разу не предъявляли жалоб на миалгии, узловатую эритему и наличие полного синдрома Лефгрена, а при СЛ эти проявления были отмечены соответственно в 4,2%, 8,3% и 8,3% наблюдений (р>0,05).
Таким образом, большинство пациентов с ТЛ и СЛ были в стабильно компенсированном состоянии, что подтверждали и средние показатели клинико-биохимических анализов, которые приближались к границе «норма-патология», что было более выражено при ТЛ. В целом при ТЛ и СЛ была выявлена тенденция к анемии, проявлениям воспалительного ответа организма, которые прогрессировали при обострениях ТЛ и СЛ и были более выраженными при ТЛ. Фоном и возможной причиной этих изменений был компенсированный, латентный эндотоксикоз (накопление в организме продуктов метаболизма вследствие нарушений обмена веществ). Процесс эндотоксикоза был подтвержден по показателям скорости оседания эритроцитов (СОЭ), лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) и ядерного индекса интоксикации (ЯИИ), величины которых у легочных больных были достоверно выше, чем в группе контроля (р<0,05), в большей степени при ТЛ.
Нами получены следующие результаты, отражающие показатели НСТ-теста при ТЛ и СЛ (табл. 1; рис.1).
Таблица 1
Показатели неспецифической резистентности и фагоцитоза у обследованных пациентов при ТЛ, СЛ и в контрольной группе здоровых (М±m %)
Показатели 1-я группа (туберкулез) (п=53) 2-я группа (саркоидоз) (п=24) Контрольная группа (п=30)
НСТ-спонтанный, % 20,7±1,5* 19,6±1,6* 12,4±1,2
НСТ-индуцированный, % 25,2±1,4* 27,1±1,3* 21,1±1,3
Индекс стимуляции, усл. ед. 1,2±0,04* 1,4±0,05*# 1,7±0,06
*- различия средних показателей в 1-й и 2-й группах статистически значимы относительно показателей контрольной группы (р <0,05); # - различия между показателями 1-й и 2-й групп статистически значимы (р <0,05).
Рис. 1. Показатели НСТ-теста (в %) и индекса стимуляции (усл. ед. - для наглядности увеличены в 10 раз) у
обследованных пациентов
Мы изучали абсолютное и относительное представлены только количественные данные отно-число лимфоцитов в крови и эти показатели имели сительного среднего содержания (%) иммунокомпе-однонаправленную динамику. Поэтому в таблице 2 тентных лимфоцитов.
Таблица 2
Количество иммунокомпетентных клеток у больных туберкулезом и саркоидозом легких (М±m, %)
Показатели 1-я группа (туберкулез; п=53) 2-я группа (саркоидоз; п=24) Контрольная группа (здоровые; п=30)
CD3+, % 74,6±7,3 79,1±3,6 74,2±8,5
CD20+, В-клетки, % 12,8±0,4* 12,7±0,4* 11,7±0,3
Экспериментальная медицина и клиническая диагностика
CD4+, хелперы, % 31,9±1,6%* 32,2±1,4%* 37,2±1,7%
CD8+, супрессоры, % цитотоксические-Т-лимфоциты 20,4±1,8* 15,9±1,1*# 15,3±1,0
ИндексCD4 / СД8, усл. ед. 1,6±0,2* 2,0±0,1* 2,4±0,2
CD16+CD56+, эффекторы, % ЫК-клетки 13,4±0,8* 11,0±0,9*# 9,3±1,0
*— различия показателей в 1-й и 2-й группах статистически значимы в сравнении с данными контрольной группы (р <0,05); #— различия показателей статистически значимы в 1-й и 2-й группах (р <0,05).
Среднее содержание CD3+ Т-лимфоцитов в 1-й, 2-й группах больных и в группе контроля составили соответственно 74,6±7,3%, 79,1±3,6% и 74,2±8,5%, то есть несколько повышались при легочной патологии, особенно при СЛ (р>0,05).
Показатель среднего содержания СД20+ (В-лимфоцитов) при ТЛ и СЛ были практически одинаковыми (12,8±0,4%, 12,7±0,4% соответственно), но достоверно выше, чем у здоровых пациентов -11,7±0,3% (р <0,05).
Показатели среднего относительного содержания Т-хелперов (CD4+, %) при ТЛ и СЛ были практически одинаковыми (31,9±1,6% 32,2±1,4% соответственно; р>0,05) и в обеих группах достоверно меньше, чем у здоровых 37,2±1,7% (р <0,05).
При оценке лимфоцитограмм обнаружилось снижение при ТЛ и СЛ продукции СД4+ (уровень при ТЛ был ниже, чем при СЛ и у здоровых пациентов - см. выше) и одновременное повышение (р<0,05) продукции СД8+, в сравнении с данными при СЛ и у здоровых людей: показатель составил 20,4±1,8%, 15,9±1,1% и 15,3±1,0% соответственно.
При этом расчетный средний индекс CD4 / СД8, усл. ед. в группе больных с ТЛ был наиболее низким, составил 1,6±0,2 усл. ед. и достоверно отличался от показателя при СЛ - 2,0±0,1 усл. ед. и у здоровых людей - 2,4±0,2 усл. ед. (р<0,05).
Процентное среднее число натуральных киллеров (ЫК-клеток) CD16+CD56+ в периферической крови в 1-й, 2-й группах пациентов составило 13,4±0,8% и 11,0±0,9%, что было достоверно выше (р<0.05), чем в контрольной группе (9,3±1,0 %).
Во 2-й группе у больных СЛ отмечена та же закономерность, но менее выраженная.
Эта же тенденция была и в среднем показателе процентного содержания CD16+CD56+ (ЫК-киллеры) в крови, уничтожающих патогенные клетки: при ТЛ и при СЛ данный показатель был в 1,4 раза и в 1,2 соответственно выше, чем у здоровых лиц.
Подобные изменения мы обнаружили у легочных больных, в большей степени при ТЛ: доля «наивных» Т-лимфоцитов (СД4+) уменьшалась при увеличении процента лимфотоксических (СД8+) клеток и клеток-убийц (CD16+CD56+, ЫК-клеток) и снижении среднего показателя индекса СД4/СД8 - рис. 2.
Рис. 2. Относительное содержание в крови лимфоцитов СД4+, СД8+, ЫК-клеток (%) и индекса СД4/СД8 (усл. ед., для наглядности увеличен в 10раз) у обследованных пациентов
В любом случае защитная активация клеточного иммунитета при ТЛ и СЛ, по сравнению со здоровыми людьми, направлена на подавление микобактерий и токсической агрессии, которая, как мы установили выше, была при обоих легочных заболеваниях, более выраженная при туберкулезе.
В целом следует отметить, что при ТЛ и СЛ, в сравнении с группой контроля, обнаружен существенный дисбаланс в содержании провоспалитель-ных цитокинов ИЛ-2 (снижение в 2,5 и 2,2 раза соответственно), ИЛ-6 (возрастание в 1,9 и в 6,0 раз соответственно) и ФНО-а (возрастание в 27 и в 24 раза соответственно).
Следует подчеркнуть, что уровни средних показателей ИЛ-2 и ИЛ-6 были в 1,2 и в 3,1 раза соответственно выше в группе пациентов с СЛ, чем при ТЛ, а показатель ИФН-у, напротив, был в 1,3 раза выше в группе больных ТЛ.
Уровни же противовоспалительных цитокинов в крови у больных ТЛ и СЛ, в сравнении с данными у здоровых людей, менялись лишь в сторону существенного увеличения: уровень ИЛ-4 возрастал в 7,9 и в 9,8 раз соответственно, а ИФН-у - в 3,6 и в 2,9 раза соответственно. При СЛ средний показатель ИЛ-4 был в 1,3 раза выше, чем при ТЛ, а показатель ИФН-у, наоборот, был в 1,3 раза выше при ТЛ, чем при СЛ (табл.3.)
Вятский медицинский вестник, № 1(65), 2020
Таблица 3
Концентрации цитокинов в плазме крови обследованных пациентов (М±ш, нг/мл)
Показатели 1-я группа (туберкулез; п=53) 2-я группа (саркоидоз; п=24) Контрольная группа (п=30)
ИЛ-2 38,8±7,9* 46,2±11,2* 98,5±6,4
ИЛ-4 32,9±9,2* 41,3±7,2* 4,2±0,8
ИЛ-6 6,0±1,3* 18,7±3,8*# 3,1 ±0,4
ФНО-а 114,2±11,3* 101,2±12,5* 4,3±1,2
ИФН-у 185,4±21,2* 146,7±11,3*# 50,9±1,6
*— различия показателей в 1-й и 2-й группах статистически значимы относительно показателей контрольной группы; # - различия показателей в 1-й и 2-й группах статистически значимы (р <0,05-0,001).
Таблица 4
Содержание иммуноглобулинов и ЦИК в крови у обследованных пациентов (М±ш)
Показатели Группа 1 (туберкулез) (п=53) Группа 2 (саркоидоз) (п=24) Контрольная группа (здоровые; п=30)
^ А, г/л 2,8±0,2 2,8±0,1 3,1±0,3
^М, г/л 2,0±0,3* 1,9±0,2* 1,2± 0,3
^О, г/л 22,6±0,3* 19,6±0,2*# 14,6±0,4
ЦИКнмм, усл. ед. 109,8±9,8* 96,2±9,5* 72,7±4,5
ЦИКсмм, усл. ед. 57,8±3,2* 45,8±4,0*# 31,3±3,2
*— в 1-й и во 2-й группах различия показателей статистически значимы относительно соответствующих показателей контрольной группы (р <0,05): #- различия показателей в 1-й и 2-й группах статистически значимы (р <0,05).
По-видимому, изменения в содержании изученных цитокинов у больных ТЛ и СЛ обусловлены не только микобактериями (туберкулез), но и наличием эндотоксикоза, о котором мы указывали выше.
Анализ результатов показателей гуморального иммунитета показал, что у больных ТЛ и СЛ, в сравнении с данными здоровых людей, имеет место угнетение синтеза антител класса ^ А, активация синтеза антител ^ М и ^ О, возрастание образования ЦИК.
Эти изменения были более выражены при ТЛ, но разница в средних показателях при СЛ была достоверной (р <0,05) только в отношении уровней ^ О, ЦИК смм ( табл.4.).
Установлено, что более активно накапливаются особенно опасные ЦИК смм, напомним - их уровни при ТЛ и СЛ были увеличены, в сравнении с данными группы контроля, в 1,9 и в 1,5 раз соответственно (рис. 3.).
ЦИК нмм ЦИКсмм
Рис. 3. Содержание в крови ЦИК нмм и ЦИК смм (усл. ед) у обследованных пациентов.
Обсуждение
Спонтанный показатель НСТ-теста возрастает при острой интоксикации и воспалительной реакции организма (в частности, при легочной патологии, онкологических заболеваниях), а ИС, отражающий функциональные резервы нейтрофилов по перевариванию патогенов, либо увеличивается, либо прогрессивно снижается при декомпенсации функции фагоцитов [4]. Наши исследования подтвердили эти положения. Нашли подтверждение и полученные нами показатели повышенного числа лимфоцитов,
другие авторы рассматривают лимфоциты как активаторы специфического иммунитета при легочной патологии [5].
Повышение уровней клеток-убийц (киллеров), как и В-лимфоцитов (СЭ20+) при снижении индекса СД4/СД8 имеет место при усилении деструкции тканей, возрастании степени эндотоксикоза и активации защитного воспалительного процесса в организме [6], что также подтвердили наши данные.
Являясь маркерами функционального состояния иммунитета, цитокины, выделяемые активиро-
ванными клетками, одновременно осуществляют ведущую роль в запуске различных типов иммунного ответа при хронических заболеваниях, в частности, при ТЛ и СЛ [7]. В любом случае, подобные проявления активации гуморального ответа при ТЛ и СЛ отражают наличие эндотоксикоза и защитного воспалительного процесса [8].
Хотя в целом состояние большинства пациентов с ТЛ и СЛ было стабильно компенсированным, изменения клинико-биохимических показателей крови свидетельствовали, что, в сравнении с данными здоровых людей, имеется сдвиг средних количественных данных в сторону патологии в виде тенденции к ухудшению «красной и белой крови», латентному эндоток-сикозу при напряжении функции систем естественной детоксикации (печени и почек) (табл. 2-4; рис. 2-3).
Показатели иммунограмм у легочных больных свидетельствовали о повышении активности ней-трофилов (НСТ-тест) при сниженной их переваривающей способности; в клеточном звене иммунитета выявлено увеличение количества и активации лимфоцитов со сдвигом в сторону цитотоксических клеток и клеток-киллеров, дисбаланс в содержании провоспалительных цитокинов и увеличение противовоспалительных цитокинов; гуморальный иммунитет характеризовался дефицитом ^ А, увеличением концентраций ^ М, ^ G, ЦИК нмм и ЦИК смм.
Дефицит СД4+ (нативных лимфоцитов) при ТЛ ведет к ухудшению течения болезни из-за недостаточности продукции ИФН-у-цитокина с уменьшением активации макрофагов в отношении МБТ. При антигенной нагрузке СД4+ лимфоциты распознают антиген, затем дифференцируются в лимфатических узлах с образованием эффекторных форм лимфоцитов, обладающих уже цитотоксическими свойствами (СД8+). Чем тяжелее инфекция, эндотоксикоз, тем выше уровень СД8+ в организме больного и ниже соотношение СД4/СД8, как это было показано К. Код-жимой и соавторами [9].
Именно это мы обнаружили при оценке лимфо-цитограмм - снижение при ТЛ и СЛ продукции СД4+ (уровень при ТЛ был ниже, чем при СЛ и у здоровых лиц - см. выше) и одновременное повышение (р<0,05) продукции СД8+, в сравнении с данными при СЛ и у здоровых людей: показатель составил 20,4±1,8%, 15,9±1,1% и 15,3±1,0% соответственно.
При этом расчетный средний индекс CD4 / СД8, усл. ед. в группе больных с ТЛ был наиболее низким, составил 1,6±0,2 усл. ед. и достоверно отличался от показателя при СЛ - 2,0±0,1 усл. ед. и у здоровых людей - 2,4±0,2 усл. ед. (р<0,05).
Процентное среднее число натуральных киллеров (ЫК-клеток) CD16+CD56+ в периферической крови в 1-й, 2-й группах пациентов составило 13,4±0,8% и 11,0±0,9%, что было достоверно выше (р<0.05), чем в контрольной группе (9,3±1,0%).
Таким образом, изучение лимфоцитоиммуно-грамм показало однонаправленность динамики показателей по относительному содержанию иммуноком-петентных клеток. При ТЛ большинство изучаемых показателей были выше, чем в группе контроля (р <0,05 - >0,05), кроме показателя CD4+ (процент хел-перов).
Следует подчеркнуть, что и при ТЛ, и при СЛ указанные изменения были однонаправленными, более выраженными в первом случае и обусловленными не только наличием возбудителя болезни (при
Экспериментальная медицина и клиническая диагностика
ТЛ), но и выявленного нами эндотоксикоза, возникающего в результате поражения легочной ткани.
По-видимому, профилактикой прогрессирова-ния заболеваний ТЛ и СЛ является включение в курсы комплексного лечения пациентов детоксикацион-ных процедур (плазмафереза) и иммуномодуляторов [10]. Последнее тем более актуально, так как подобные пациенты часто страдают не только от одной патологии. Показано, что обструктивные заболевания лёгких часто могут быть сопряжены с кардиоваску-лярными патологиями [11], и это может быть дополнительным поводом для включения в схему лечения детоксикационных процедур и иммуномодуляторов.
Выводы
1. При ТЛ и СЛ клинико-биохимические показатели крови (концентрация цитокинов, иммуноглобулинов) имели значительные сдвиги к грани «норма-патология» (тенденция к анемии, воспалительный ответ организма), которые свидетельствуют о мобилизации защитных систем организма.
2. Проявления повышения активности у больных с ТЛ и СЛ обнаружены в неспецифическом звене иммунитета, в зависимости от типа заболевания. Так, у пациентов с СЛ средние показатели ИЛ-2 и ИЛ-6 были в 1.2-3.1 раза выше, чем у больных с ТЛ, а показатели ИФН-у в 1.6 раза были выше у больных с ТЛ, чем у больных с СЛ.
3. Изменения показателей ИЛ-2, ИЛ-6, а также ИФН-у, снижение показателей СД4+, повышение показателей СД8+) у пациентов при ТЛ и СЛ можно связать с латентным эндотоксикозом в результате деструкции легочной ткани.
Конфликт интересов. Автор заявляет об отсутствии явного или потенциального конфликта интересов, связанного с публикацией статьи.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Литература/References
1. Дробот Н. Тестовые задания для самостоятельной работы и контроля знаний студентов по фтизиатрии. М.: Издательский дом Академии Естествознания, 2017. [Drobot N. Testovye zadaniya dlya samostoyatel'noi raboty i kontrolya znanii studentov po ftiziatrii. Moscow: Izdatel'skii dom Akademii Estestvoznaniya, 2017. (In Russ.)]
2. Pokorski M. Clinical Research Involving Pulmonary Disorders. Springer, 2018. P. 118.
3. Morris T., Ries A., Bordow R. Manual of Clinical Problems in Pulmonary Medicine.7th edition. Wolters Kluwer, 2014. P. 661.
4. Широхова Н., Карабиненко А., Стороженков Г. Роль пульмональных аутоантител в иммунопатогене-зе внебольничной пневмонии у лиц пожилого и старческого возраста // Российский Медицинский Журнал. 2011. №1. С. 3-8. [Shirohova N., Karabinenko A., Storozhenkov G. The role of pulmonary autoantibodies in the immunopathogenesis of non-hospital pneumonia in elderly and seniors. Russian medicaljournal. 2011;1:3-8. (In Russ.)]
5. Oswald-Richter K., Richmond B., Braun N., et al. Reversal of Global CD4+ Subset Dysfunction Is Associated with Spontaneous Clinical Resolution of Pulmonary Sarcoidosis. J. Immunol. 2013; 190 (11): 5446-5453.
6. Рахматуллина И., Валиева Н. Использование лазеротерапии при сочетанной лучевой терапии у больных раком шейки матки // Эффективная Терапия. 2003. №9(4). С. 62-64. [Rakhmatullina I., Valieva N. Use of Laser Therapy in Combined Radiation Therapy in Cervical Cancer Patients. Effective Therapy 2003;9(4):62-64. (In Russ.)]
7. Hyldgaard C., Kaae S., Riddervold M., et al. Value of s-ACE, BAL lymphocytosis, and CD4+/CD8+ and CD103+CD4+/CD4+ T-cell ratios in diagnosis of sarcoidosis. Eur. Respir. J. 2012;39 (4):1037-1039.
8. Авдеева В.Б. Клинико-иммунологические показатели у пациенток с гнойно-воспалительными заболеваниями органов малого таза // Медико-социальные проблемы семьи. 2009. №14(2). С. 68-71. [Avdeeva V.B. Clinical and immunological parameters in patients with purulent-inflammatory diseases of the pelvic organs. Medical and social problems of the family 2009;14(2):68-71. (In Russ.)]
9. Kojima K., Maruyama K., Inaba T., et al. The CD4/CD8 ratio in vitreous fluid is of high diagnostic
value in sarcoidosis. Ophthalmology 2012;119 (11):2386-2389.
10. Воинов В., Илькевич М., Карчевский К. и др. Плазмаферез в лечении интерстициальных болезней легких // Эфф. Терапия. 2013. №19(1). С. 6263. [Voinov VA., Ilkevich M.M., Karchevskiy K.S. et al. Plasmapheresis in the treatment of interstitial lung diseases. Effective Therapy. 2013;19(1):62-63. (In Russ.)]
11. Подкаменный В., Медведев А., Ерошевич А., Лиханди Д., Гордеенок С., Чепурных Е., Боро-дашкина С. Непосредственные результаты применения «гибридной методики» для полной реваскуля-ризации миокарда при многососудистом поражении коронарных артерий у больных ИБС // Сибирский медицинский журнал. 2011. №102(3). [Podkamennyj V.A., Medvedev A.V., Eroshevich A.V., Likhandi D.I., Gordeenok S.F., Chepurnykh E.E., Borodashkina S.Yu. Immediate results of "hybrid technique" application for complete myocardial revascularization in multivascular coronary artery lesions in patients with CHD. Siberian Medical Journal. 2011;102(3). (In Russ.)]
615.272.2:546.46:615.838.97:616.31-053.9
КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ СОСТАВА И СВОЙСТВ РАСТВОРОВ, СОДЕРЖАЩИХ МИНЕРАЛЬНЫЕ ВОДЫ, ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ГЕРОНТОСТОМАТОЛОГИИ
Садыкова О.М., 2Белоконова Н.А., 2Жолудев С.Е., 2Лелекова Р.П.,.3КосареваМ.А, 4Дьяконов Д.А.
'ФГБОУ ВО Кировский государственный медицинский университет Минздрава России, Киров, Россия (610998, г. Киров, ул. К. Маркса, 112), e-mail: olastomat@yandex.ru.
2ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет Минздрава России, Екатеринбург, Россия (620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3)
3ФГАОУ ВО «Уральский федеральный университет имени первого Президента России Б.Н. Ельцина, Екатеринбург, Россия (620002, г. Екатеринбург, ул. Мира,19)
4ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России», Киров (610027, г. Киров, ул. Красноармейская, 72), e-mail: dyakonov@niigpk.ru
Современная демографическая ситуация характеризуется большой скоростью увеличения доли людей пожилого возраста. Известно, что в результате возрастных изменений нарушается обмен макро- и микроэлементов. Важным структурным элементом, регулирующим активность сотен ферментов, является магний. Содержание магния у лиц зрелого возраста находится на нижней границе среднероссийских показателей, и отмечена тенденция к снижению с увеличением возраста.
С терапевтической целью и в качестве средства профилактики широкого спектра болезней на территории РФ используют 42 типа природных минеральных вод. Однако, в литературе нет критериев выбора состава растворов и оценки их свойств для использования в геронтостоматологии.
Актуальным, эффективным средством лечения для различных категории больных, в том числе и в ге-ронтостоматологии является использование растворов на основе минеральных вод, содержащих магний. Цель работы: выбор и обоснование критериев оценки состава и свойств растворов, содержащих минеральные воды, для использования в геронтостоматологии.
Согласно полученным экспериментальным данным в геронтостоматологии целесообразно использовать растворы, содержащие минеральные воды, состав и свойства которых предварительно оценены по показателям: рН, осмоляльность, скорость диффузии макро-элементов, изменение величины свето-пропускания при нагреве раствора.
Объектом исследования является минеральная вода «Фатеевская», эффективность применения в ге-ронтостоматологии которой доказана.
Ключевые слова: геронтостоматология, минеральный обмен, микроэлементы, минеральная вода, магний
EXAMINATION CRITERIA FOR EVALUATING COMPOSITION AND PROPERTIES OF WATER SOLUTIONS CONTAINING MINERAL WATER USED IN GERIATRIC DENTISTRY
