CC BY
50
УДК 619.614.48:637.02
Кривохижа G.M., к. вет. н., ст. наук. ствробггаик Тернотльська дослгдна станщя 1нституту еетеринарног медицины НААН,
м. Тернотль Кухтин М.Д., д. вет. н., професор Тернотльський нацюнальний техтчний утеерситет iм. I. Пулюя, м. Тернотль
Карпенко М.М. ©
Держаений НД1 з лабораторног дiагностики та еетеринарно-сантарног
експертизи, м. Киге
ПОРШНЯЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА ЗАСОБ1В ДЛЯ САН1ТАРНО1 ОБРОБКИ ТЕХНОЛОГ1ЧНОГО УСТАТКУВАННЯ МОЛОКОПЕРЕРОБНИХ ШДПРИСМСТВ
У статтi подано результати еиечення бактерицидног дп рiзних дезтф^ючих i мийно-дезтф^ючих засобiе, яю еикористоеують для сантарног обробки технологiчного устаткуеання молокопереробних тдприемсте до мiкроорганiзмiе у планктоннт формi та сформоеаних у бiоплiекоеки.
Встаноелено, що 0,03 % розчин дезтф^ючого засобу Медтарту та 0,3 % П3Оксотй актие 150 прояеляли бактерицидну дт до тест-культур мiкроорганiзмiе, зокрема S. aureus, E. coli, P. fluorescens i E. faecalis у планктонтй формi та сформоеаних у бiоплiеки за експозицп 30 хе., яка рекомендоеана тструкщею.
Робочi розчини засобiе: Чисто-пром ЛЗ, Бюмол i Бюлайт за експозицп 30 хе. прояеляли бактерицидну дт до тест-культур мiкроорганiзмiе, зокрема S. aureus, E. coli, P. fluorescens i E. faecalis у планктонтй формi. Однак за даног експозицп еЫ езятi е до^д мжрооргатзми, ят сформоеат у бiоплiеки прояеляли резистенттсть до 3,0 % розчину Бюмолу. Тест-культури мiкроорганiзмiе: S. aureus, E. coli i E. faecalis у бiоплiекоеiй формi були резистентними до 2,0 % розчину Чисто-прому ЛЗ. До засобу Бюлайт у 3,0 % концентрацп еияеиеся сттким E. faecalis у бiоплiекоеiй формi. Отримат дат сеiдчать про те, що мтрооргатзми, ям сформоеан у бiоплiеки быьш стшк до дп дезтфжуючих та мийно-дезтф^ючих засобiе, що необхiдно ерахоеуеати при розробц режимiе сантарног обробки технологiчного устаткуеання.
Ключовi слова: мийно-дезтф^ючий заЫб, тест-культури мiкроорганiзмiе, мжробн бiоплiеки, технологiчне устаткуеання молокопереробних тдприемсте, сантарна обробка
© Кривохижа е.М., Кухтин М.Д., Карпенко М.М., 2014
321
УДК 619.614.48:637.02
Кривохижа С.М., к. вет. наук, с.н.с. (terdosvet@meta.ua) Тернопольская опытная станция ИВМНААН, г. Тернополь Кухтин М.Д., д. вет. наук, профессор Тернопольский национальный технический университет им. И. Пулюя,
г. Тернополь Карпенко Н.Н.
Государственный НИИ по лабораторной диагностике и ветеринарно-санитарной экспертизе, г. Киев
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СРЕДСТВ ДЛЯ САНИТАРНОЙ ОБРАБОТКИ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ОБОРУДОВАНИЯ МОЛОКОПЕРЕРАБАТЫВАЮЩХ ПРЕДПРИЯТИЙ
В статье представлены результаты изучения бактерицидного действия различных дезинфицирующих и моюще-дезинфицирующих средств, используемых для санитарной обработки технологического оборудования молокоперерабатывающих предприятий к микроорганизмам в планктонной форме и сформированным в биопленки.
Установлено, что 0,03% раствор дезинфицирующего средства Медикарин и 0,3% П3Оксоний актив 150 оказывали бактерицидное действие к тест-культурам микроорганизмов, в частности S. aureus, E. coli, P. fluorescens и E. faecalis в планктонных форме и сформированным в биопленки при экспозиции 30 мин., рекомендуемой инструкцией.
Рабочие растворы средств: Чисто-пром ЛС, Биомол и Биолайт при экспозиции 30 мин. оказывали бактерицидное действие к тест-культурам микроорганизмов, в частности S. aureus, E. coli, P. fluorescens и E. faecalis в планктонных форме. Однако в данной экспозиции все взятые в опыт микроорганизмы, сформированные в биопленки оказывали резистентность к 3,0 % раствору Биомол. Тест-культуры микроорганизмов: S. aureus, E. coli и E. faecalis в биопленковой форме были резистентными к 2,0 % раствору Чисто-прома ЛС. К средству Биолайт в 3,0 % концентрации оказался устойчивым E. faecalis в биопленковой форме. Полученные данные свидетельствуют о том, что микроорганизмы, сформированые в биопленки более устойчивы к действию дезинфицирующих и моюще-дезинфицирующих средств, что необходимо учитывать при разработке режимов санитарной обработки технологического оборудования.
Ключевые слова: моюще-дезинфицирующее средство, тест-культуры микроорганизмов, микробные биопленки, технологическое оборудование молокоперерабатывающих предприятий, санитарная обработка
322
UDC 619.614.48:637.02
Kryvokhyzha Ye.M. - candidates of veterinary sciences, terdosvet@meta.ua Temopil Experiment Station IVM NAAS Kukhtyn M.D. - doctor of veterinary, professor Ivan Pulyuy National Technical University of Ternopil Karpenko N.N.
State Scientific and Research
Institute of Laboratory Diagnostics and Veterinary-Sanitary Expertise
COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF MEANS FOR SANITIZATION TECHNOLOGICAL DAIRY PROCESSING EQUIPMENT
The results of investigations of a study of bactericidal action of various disinfectants and washing-disinfectant mean used to sanitization equipment milk processing plants to microorganisms in planktonic form and biofilms formation.
Established that 0,03 % solution of disinfectant Medikarinu and 0,3 % P3Oksoniy active 150 showed bactericidal activity to test cultures of microorganisms, including S. aureus, E. coli, P. fluorescens and E. faecalis in planktonic form and formed in biofilm exposition for 30 min, which recommended instructions.
It is set that 0,03% solution of disinfectant of Медикарин and 0,3% П3Оксоний active 150 rendered a bactericidal action to test-cultures of microorganisms, in particular S. aureus, E. coli, P. fluorescens and E. faecalis in planktonic to the form and biofilms formation at a exposition 30 min, which recommended instructions. Working solutions means: Chysto-prom LS, Biomol and Biolayt at a exposition for 30 min. rendered a bactericidal action to test-cultures of microorganisms, in particular S. aureus, E. coli, P. fluorescens and E. faecalis in planktonic form. However in this exposition all taken in experience microorganisms, which are form bacterial biofilms showed resistance to 3,0 % solution Biomol. Test-cultures of microorganisms: S. aureus, E. coli and E. faecalis in biofilms formation were resistant to 2,0 % solution of Chysto-prom LS. To the means Biolayt at 3,0 % concentration was resistant E. faecalis in a biofilms formation. The obtained data testify that microorganisms, in biofilms formation more steady to the action of disinfectants and washing-disinfectants means, that must be taken into account at development of the modes of sanitization of technological equipment.
Key words: washing-disinfectant mean, test-culture of microorganisms, microbial biofilms, technological equipment milk processing plants, sanitization
Вступ. Виготовлення безпечно! i якюно! продукци неможливо без надежно! виробничо! саштари та ппени на молокопереробних пщприемствах. Важливу роль при цьому вдаграе застосування ращональних технолопчних режимiв саштарно! обробки устаткування з використанням сучасних мийних i дезшфкуючих засобiв [1].
Основне завдання процесу саштарно!' обробки е видалення залишюв молока чи молочних продукив, запобкання формуванню (видалення) бiоплiвок та знищення патогенних мiкроорганiзмiв i зменшення кшькосп умовно-патогенних мiкроорганiзмiв до такого рiвня, згщно з вимогами ппени, при якому вони не будуть впливати на яюсть молочно! продукци при повторному використанш устаткування [2].
323
Бiоплiвки мiкроорганiзмiв е важливою проблемою при виробництвi молочних продукпв. Адже вони прикршлюються та колонiзуються на поверхнi технолопчного устаткування i завдяки захисним мехашзмам, бiльш стiйкi до процесiв очищення та дезшфекци, порiвняно з планктонними мжрооргашзмами [3-5]. Тому вивчення бактерицидних властивостей рiзних мийно-дезiнфiкуючих засобiв до мiкроорганiзмiв як у планктоннiй формi так i сформованих у бiоплiвки е актуальним.
Метою роботи було порiвняльне вивчення бактерицидних властивостей рiзних мийно-дезiнфiкуючих засобiв, якi використовують для саштарно! обробки технологiчного устаткування молокопереробних тдприемств.
Матер1али i методи. Дослщження бактерицидно! ди мийно-дезiнфiкуючих засобiв до планктонних форм мiкроорганiзмiв проводили з використанням тест-культур E. coli (№ 078), S. aureus (№ 209-Р), E. faecalis (ATCC 19433) та P. fluorescens (ATCC 13525). Культури попередньо перевiрили на стiйкiсть до температури, фенолу, хлорамiну згiдно методичних рекомендацш [6]. Тест-культури вирощували на МПА. 1з добово! культури бактерш готували завись на фiзiологiчному розчиш з вмiстом 100 млн./см3 бактерiальних клiтин за оптичним стандартом мутности У стерильнi баночки Флоринського з вмютом 10 см3 розчинiв дослщжуваних засобiв з робочими розчинами вносили по 0,1 см3 приготовлено! завис культури. Перемшували та через 10, 20 i 30 хвилин вщЫвали в кiлькостi 1 см3 в чашки Петр^ якi заливали 15 см3 МПА. Дослiджували бактерицидну дш всiх засобiв в концентрацiях та за температури згщно iнструкцiй iз застосування. Експозицiю 10, 20 i 30 хвилин вибирали в залежност вiд часу, який зазвичай витрачаеться на обробку устаткування молокопереробних тдприемств у виробничих умовах.
При визначенш чутливост мiкроорганiзмiв, сформованих у бiоплiвки до мийно-дезiнфiкуючих засобiв у стерильш одноразовi пластиковi чашки Петрi вносили добовi тест-культури мiкроорганiзмiв в об'емi 1,0 см3 у концентраци 105 КУО/см3, витримували 3 год за юмнатно! температури, потiм додавали 5,0 см3 МПБ та iнкубували за t 30 °С протягом 24-48 год. Зливали з чашок поживне середовище, в чашку вносили 5,0 см3 робочого розчину засобу за температури, яка вказана в шструкци застосування та витримували певний промiжок часу, згщно з експозищями застосування даних засобiв на молокопереробних тдприемствах, зокрема 10, 20 i 30 хвилин. Пкля експозицп розчин обережно зливали, чашки триразово вiдмивали стерильним фосфатним буфером.
З чашок брали змиви за допомогою стерильних тампошв i проводили посiв на чашки Петрi з МПА. Пiсля шкубаци в термостатi проводили оцiнку результат дослiджень [6].
Порiвняльну оцiнку чутливост мiкроорганiзмiв, якi сформованi у бiоплiвки та планктонних форм мiкроорганiзмiв до засобiв для санiтарно! обробки устаткування молокопереробних тдприемств проводили використовуючи наявш на ринку Укра!ни засоби: дезшфжуюч^ зокрема ПзОксонiй актив 150 (дiючi речовини - надоцтова i оцтова кислоти та перекис водню), Медкарш (дихлорiзоцiанурат натрiю); лужнi мийно-дезiнфiкуючi -Чисто-пром ЛЗ (четвертинш амонiевi сполуки (ЧАС) i поверхнево-активнi речовини (ПАР)), Бюмол (сумiш лугiв, ПАР, комплексон) та кислотний мийно-дезiнфiкуючий зааб - Бiолайт (ортофосфорна кислота, ПАР).
324
Результати дослщжень. Результати дослщжень бактерицидно! ди дезшфжуючих та мийно-дезшфжуючих засобiв для саштарно! обробки технологiчного устаткування молокопереробних пщприемств, подано в табл.
З даних табл. видно, що 0,03 % розчин дезшфкуючого засобу Медiкарiну та 0,3 % П3Оксонш актив 150 проявляли бактерицидну дiю до вЫх взятих в дослiд планктонних форм тест-культур мiкроорганiзмiв та сформованих у бiоплiвки за експозицi! 30 хв., яка рекомендована iнструкцieю.
Таблиця
По|Мвняльна характеристика чутливостi мпкроорганпмпв, якч сформоваш у бшпшвки, до засобiв для саштарно!* обробки технологiчного
устаткування молокопереробних пщприемств, n=36
Назва засобу Концентрац1я розчину, % Бактерп Кшьшсть бактеpiй у 1 см3 завис або змиву для мiкpооpганiзмiв у бiоплiвках
S. aureus E. coli P. fluorescens E. faecalis
екcпозицiя, хвилин
10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30
Чисто-пром ЛЗ t 40±5 °C 2,0 % планкт. + + - +
бiоплiвка + + + + + + + + - + + +
П3Оксонш актив 150 t18±5 °C 0,3 % планкт. + + - - - - + + - - - -
бiоплiвка - - - - - - - - - + - -
Бiомол t 40±5 °C 3,0 % планкт. - - - + - - + - - + - -
бiоплiвка + + + + + + + + + + + +
Бiолайт КС 96 t 30±5 °C 3,0 % планкт. + - - - - - + - - + - -
бiоплiвка + + - + - - + - - + + +
Медiкаpiн t18±5 °C 0,03 % планкт. + +
бiоплiвка - - - - - - - - - + - -
Контроль планкт. + + + +
бiоплiвка + + + +
Примiтка "+" - наявний picT, "-" - вщсутнш picT
Робоч1 розчини засобу Чисто-пром ЛЗ за експозици рекомендовано! шструкщею 20 хв. проявляли бактерицидну дш до планктонних тест-культур, зокрема E. coli, P. fluorescens i E. faecalis, однак даш розчини за цей час не шактивували S. aureus, вщсутшсть росту якого за дано! концентраци вiдмiчали через 30 хв.
Розчини засобу Бюмол у концентраци 3,0 % шактивували S. aureus у планктоннш фоpмi протягом 10 хв., але за дано! концентраци не проявляли бактерицидно! ди до E. coli, P. fluorescens i E. faecalis. За експозици 20 хв. розчини даного засобу знешкоджували вс тест-культури мiкpооpганiзмiв у планктоннш формг
Розчини засобу Бюлайт у 3,0 % концентраци проявляли бактерицидну дш до E. coli у планктоннш фоpмi уже протягом 10 хв., а вщсутшсть росту S. aureus, P. fluorescens i E. faecalis вiдмiчали за дано! концентраци протягом 20 хв.
325
Po6o4i розчини 3aco6iB: Чисто-пром ЛЗ, Бюмол i Бюлайт за експозицп 30 хв. проявляли бактерицидну дш до Bcix дослщжуваних тест-культур мiкроорганiзмiв у планктоннш форм1 Однак за дано! експозицп бшьшкть мiкроорганiзмiв, яю сформованi у проявляли резистентнiсть.
Таким чином, мжрооргашзми, якi сформованi у бiоплiвки бiльш стiйкi до дп дезшфжуючих та мийно-дезiнфiкуючих засобiв, що необхщно враховувати при розробцi режимiв саштарно! обробки технологiчного устаткування.
Висновки. 1. Робочi розчини мийно-дезiнфiкуючих засобiв Чисто-пром ЛЗ, Бюмол i Бюлайт за сво!ми бактерицидними властивостями щодо мiкроорганiзмiв, яю сформованi у бiоплiвки поступаються Меджаршу та П3Оксонiй активу 150, що слщ враховувати при вивченнi ефективност санiтарноï обробки устаткування молокопереробних тдприемств у виробничих умовах.
2. Дiючi речовини, що входять в склад Меджаршу та П3Оксонш активу 150 е перспективними при розробщ ефективних варiантiв мийно-дезiнфiкуючих засобiв для санiтарноï обробки устаткування на молокопереробних пщприемствах.
Перспективи подальших досл1джень. Вивчення ефективностi застосування дезiнфiкуючих (Медiкарiн та П3Оксонiй актив 150) i мийно-дезiнфiкуючих (Чисто-пром ЛЗ, Бюмол i Бюлайт) засобiв при саштарнш обробцi технологiчного устаткування молокопереробних тдприемств.
Л1тература
1. Васильев Л. Г. Гигиеническое и противоэпидемическое обеспечение производства молока и молочных продуктов / Васильев Л. Г., Абрамова-Оболенская Н. И., Павлов В. А. - М.: Агропромиздат, 1990. - 303 с.
2. Кузина Ж. И. Научное обоснование и промышленная реализация инновационных технологий санитарной обработки оборудования в молочной промышленности : автореф. дис. на соиск. ученой степ. доктора техн. наук: спец. 05.18.04 "Технология мясных, молочных, рыбных продуктов и холодильных производств" / Ж. И. Кузина. - М., 2010. - 48 с.
3. Costerton J. W., Lewandowski Z., Caldwell D. E., Korber D. R. Lappin-Scott. H. M.: Microbial biofilms. Ann. Rev. Microbiol. 49, 1995, S. 711-745.
4. Bagge D., Hjelm M., Johansen CH., Huber I., Gram L.: Shewanella putrefaciens adhesion and biofilm formation on food processing surfaces. App. Env. Microbiol., 67, 2001, s. 2319-2325.
5. Kumar C. G., Anand S. K.: Significance of microbial biofilms in food industry: a review. Int. J. Food Microbiol., 42, 1998, S. 9-27.
6. Методичт рекомендацп. Оцшка придатност та ефективност мийних, дезшфжуючих i мийно-дезшфжуючих засобiв для санiтарноï обробки дошьного устаткування та молочного швентаря / [Ю. Б. Перкш, Я. Й. Крижатвський, £. М. Кривохижа, Н. Ф. Моткалюк, М. Д. Кухтин, Н. В. Крушельницька] -Тернотль: Тернотльська державна сiльськогосподарська дослщна станцiя 1КСГП НААН, 2012. - 67с.
Рецензент - д.с.-г.н., професор Щсарик О.Й.
326
