CC BY
18
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
2020. Т. 15. № 1
medical news of north caucasus
2020. Vоl. 15. Iss. 1
Diagnoses. Medscape. 2018. Available at: https:// emedicine.medscape.com/article/1062640-overview 16. Wang Y., Yang B., Zhou G., Zhang F. Two Cases of Dermatitis Herpetiformis Successfully Treated with Tetracycline and Niacinamide. Acta Dermatovenerol. Croat. 2018;26(3):273-275.
17. Bevans S. L., Sami N. Dapsone and sulfasalazine combination therapy in dermatitis herpetiformis. Int. J. Dermatol. 2017;56(5):e90-e92. https://doi.org/10.1111/ijd.13542
Сведения об авторах:
Свечникова Елена Владимировна, доктор медицинских наук, заведующая отделением дерматовенерологии и косметологии; тел.: 89166828337; е-mail: elene-elene@bk.ru
Маршани Зарета Багауддиновна, врач-дерматовенеролог; тел.: 89031996934; е-mail: zbmarshani@mail.ru
Пюрвеева Кермен Валериевна, кандидат медицинских наук, заведующая отделением гастроэнтерологии; тел.: 89104731355; е-mail: gladki.purveeva@mail.ru
© Коллектив авторов, 2020 УДК 616-007-053.1
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15014 ISSN - 2073-8137
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ РЕНИН-АНГИОТЕНЗИВНОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ ПОЧЕК РАЗЛИЧНЫХ СТАДИЙ
Р. З. Ахметшин 1, Р. М. Шигапов 2, И. З. Латыпов 2, П. И. Миронов 1
1 Башкирский государственный медицинский университет, Уфа, Российская Федерация
2 Республиканская детская клиническая больница, Уфа, Российская Федерация
COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF RENIN-ANGIOTENSINE SYSTEM GENE POLYMORPHISM IN CHILDREN WITH CHRONIC KIDNEY DISEASE OF DIFFERENT STAGES
Akhmetshin R. Z. 1, Shigapov R. M. 2, Latipov I. Z. 2, Mironov P. I. 1
1 Bashkir State Medical University, Ufa, Russian Federation
2 Republic Pediatric Clinical Hospital, Ufa, Russian Federation
У 95 детей с хронической болезнью почек изучена частота аллелей и генотипов полиморфных локусов рецептора ангиотензина первого типа (AGTR1, rs5186 (1166A/C)), рецептора ангиотензина второго типа (AGTR2, -1332A/ G, rs1403543 (G1675A)), ангиотензинпревращающего фермента (ACE, (Ins-Del)), ангиотензиногена (AGT, rs4762 (Thr174Met)). Полиморфизмы генов ACE и AGT не были взаимосвязаны с прогрессированием ХБП. Дети с терминальной стадией ХБП являлись носителями мутантных форм AGTR1 и AGTR2. В случаях ХБП второй стадии и выше отмечалось достоверное увеличение носительства аллеля C полиморфного варианта гена AGTR1.
Ключевые слова: хроническая болезнь почек, дети, гены ренин-ангиотензиновой системы, полиморфизм
The frequencies of alleles and genotypes of polymorphic loci of angiotensin receptor 1 (AGTR1, rs5186 (1166A/C)), angiotensin-converting enzyme (ACE, (Ins-Del)) receptor of angiotensin the second type (AGTR2, -1332A/G, rs1403543 (G1675A)), angiotenzinogen (AGT, rs4762 (Thr174Met)) were studied in 95 children. No association of CKD progression with ACE and AGT genes polymorphisms was found out. Children with end-stage CKD were carriers of the mutant forms AGTR1 and AGTR2. In cases of CKD of the second stage and above, a significant increase in the carriage of the C allele of the polymorphic variant of the AGTR1 gene was noted.
Keywords: chronic kidney disease, children, genes of renin-angiotensin system, polymorphism
Для цитирования: Ахметшин Р. З., Шигапов Р. М., Латыпов И. З., Миронов П. И. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ РЕНИН-АНГИОТЕНЗИВНОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ ПОЧЕК РАЗЛИЧНЫХ СТАДИЙ. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020;15(1):65-68. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15014
For citation: Akhmetshin R. Z., Shigapov R. M., Latipov I. Z., Mironov P. I. COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF RENIN-ANGIOTENSINE SYSTEM GENE POLYMORPHISM IN CHILDREN WITH CHRONIC KIDNEY DISEASE OF DIFFERENT STAGES. Medical News of North Caucasus. 2020;15(1):65-68. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15014 (In Russ.)
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Педиатрия ^^^^^^^^^^^^^^^^^
ORiGiNAL RESEARCH
Pediatrics
ХБП - хроническая болезнь почек
ACE - ангиотензинпревращающий фермент
AGT - ангиотензиноген
AGTR1 - рецептор ангиотензина первого типа AGTR2 - рецептор ангиотензина второго типа
Широкое внедрение генетических методов исследования в детскую нефрологию открыло новые возможности оценки предрасположенности к злокачественному течению хронической болезни почек (ХБП) и определило высокий спрос на исследования, выявляющие возможные подходы решения этой проблемы [13]. Известно, что некоторые гены системы ренин-ангиотензин, такие как AGT (ангиотензиногена), АСЕ (ангиотензинпревращающего фермента), AGTR1 и AGTR2 (рецепторов ангиотензина 1-го и 2-го типа), связаны с почечным дисгенезом [4]. Выявлена ассоциация полиморфных генетических маркеров ренин-ангиотензиновой системы с особенностями дебюта ХБП и выживаемостью у детей [1, 3, 5, 6]. Однако эти результаты не дают однозначного ответа на вопрос о патогенетической роли отдельных единичных полинуклеотид-ных замен генов системы ренин-ангиотензин в течении ХБП у детей, что диктует необходимость проведения дальнейших исследований в данной области.
Целью исследования явилась оценка генетической предрасположенности к злокачественному течению ХБП у детей на основе изучения полиморфизма генов системы ренин-ангиотензин.
Материал и методы. Дизайн работы - проспективное, обсервационное, контролируемое, одноцен-тровое исследование. Критерии включения: дети в возрасте от 2 месяцев до 14 лет с диагнозом ХБП, поступившие в клинику за период с февраля 2017 года по июль 2018 года. Критерии исключения: множественные врожденные пороки развития, поликистоз почек.
Обследовано 95 детей (58 мальчиков, 37 девочек, средний возраст - 150,3±58,9 месяцев). У 52 детей был диагностирован гломерулонефрит, у 43 детей ХБП была связана с врожденными аномалиями моче-выводящих путей: гидронефрозом (21), мегауретером (14), пиелоэктазией (6), пузырно-мочеточниковым рефлюксом (2). Стадии ХБП были классифицированы с использованием Clinical Practice Guidelines of the National Kidney Foundation's Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI guidelines) [7]. Хроническая болезнь почек определялась как повреждение почек или снижение скорости клубочковой фильтрации <90 мл/ мин/1,73 м2 в течение 3 и более месяцев. Скорость клубочковой фильтрации оценивалась по формуле G. J. Schwarz (1987). ХБП отсутствовала у 10 больных гломерулонефритом, ХПБ I, II, III и V стадий выявлена в 50, 16, 9 и 7 случаев соответственно.
На первом этапе исследования выделялась геномная ДНК лимфоцитов периферической крови стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции, затем проводилась пробоподготовка образцов ДНК, которая включала определение концентрации и степени очистки исследуемых образцов ДНК с помощью спектрофотометра Nanodrop 2000 Thermo Scientific (США). Далее были изучены частоты аллелей и генотипов полиморфных локусов ренин-ангиотензиновой системы: рецептора ангиотензина первого типа (AGTR1, rs5186 (1166A/C)), ангиотензинпревращающего фермента (ACE, (Ins-Del)), рецептора ангиотензина второго типа (AGTR2, -1332A/G, rs1403543 (G1675A)), ангиотензиногена
(AGT, rs4762 (Thr174Met)). Способы генотипирования приведены в таблице 1.
Таблица 1
Перечень локусов и способы генотипирования
Ген Полиморфный локус Способ генотипирования Производитель
AGT Thr174Met, rs4762 ПЦР в режиме реального времени в присутствии флуоресцентных зондов ООО «Синтол»
AGTR1 A1166C rs5186 ПЦР в реальном времени в присутствии флуоресцентных зондов ООО «Синтол»
AGTR2 G1675A, rs1403543 Аллель-специфичная ПЦР в режиме реального времени с флуоресцентным красителем ООО «Литех»
ACE определение инсерции и делеции ПЦР классического типа с последующим разделением продуктов амплификации в полиакриламид-ном геле -
AGTR2 A-1332G ПЦР классического типа с последующим расщеплением продуктов амплификации ферментом рестрикции и разделением полученных фрагментов в полиакриламидном геле -
Генетические локусы AGT rs4762 (Thr174Met) и AGTR1 rs5186 (1166A/C) были определены с помощью наборов фирмы ООО «Синтол» методом ПЦР в реальном времени в присутствии флуоресцентных зондов. Генетические локусы AGT Met235Thr и AGTR2 rs1403543 (G1675A) изучались с помощью наборов фирмы ООО «Литех» методом ПЦР в реальном времени с аллель-специфичными прайме-рами в присутствии флуоресцентного красителя SYBR Green. Использовали ДНК-амплификатор реального времени BioRad CFX-96 Real Time Touch System (США). Амплификацию локусов генов ACE (Ins-Del) и AGTR2 (-1332A/G) осуществляли с помощью ДНК-амплификатора Gene Amp 2700 (Applied Biosystems, США). Дизайн набора праймеров и подбор рестриктазы проводили с помощью пакетов программ Vector NTI, Primer3Plus и PrimerSelect. Молекулярно-генетический анализ осуществлялся на базе лаборатории ПЦР-анализа кафедры генетики и фундаментальной медицины Башкирского государственного университета (зав. кафедрой проф. Э. К. Хуснутдинова).
Статистическая обработка данных выполнялась в операционной среде Windows 7 с использованием программы «STATISTICA 6.0». Вычисляли х2-тест. Критическое значение уровня значимости категорирован-ных переменных было равно 5 %.
Результаты и обсуждение. В таблице 2 представлены результаты анализа полиморфизма аллелей генов системы ренин-ангиотензин (ACE, AGT, AGTR1 и AGTR2) у детей с ХБП. Изучение полиморфизма гена ангиотензинпревращающего фермента у детей с ХБП показало, что аллели I и D гена АСЕ встречались примерно с одинаковой частотой. Частота аллеля D (ответственного за развитие нефропатии) была сопоставимой у пациентов с различными стадиями хронической болезни почек (p>0,05).
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
2020. Т. 15. № 1
medical news of north caucasus
2020. Vоl. 15. Iss. 1
Таблица 2
Анализ полиморфизма аллелей исследуемых генов у детей с ХБП
Аллели ХБП G, n = 1G ХБП 1, n = 5G ХБП 2, n = 16 ХБП 3, n = 9 ХБП 5, n = 7
n (%) n (%) р n (%) P n (%) P n (%) P
Ген ACE I 13 (65) 56 (56) >G,G5 14 (43,8) >G,G5 9 (5G) >G,G5 8 (57) >G,G5
D 7 (35) 44 (44) >G,G5 16 (56,2) >G,G5 9 (5G) >G,G5 7 (43) >G,G5
Ген AGT C 18 (9G) 88 (88) >G,G5 26 (81,3) >G,G5 15 (83,3) >G,G5 12 (85,7) >G,G5
T 2 (1G) 12 (12) >G,G5 6 (18,7) >G,G5 3 (16,7) >G,G5 2 (14,3) >G,G5
Ген AGTR1 A 16 (8G) 81 (81) >G,G5 22 (68,8) >G,G5 13 (72,2) >G,G5 1G (71,4) >G,G5
C 4 (2G) 19 (19) >G,G5 1G (31,2) <0,05 5 (27,8) <0,05 4 (28,6) <0,05
Ген AGTR2 A 9 (45) 54 (54) >G,G5 2G (45,3) >G,G5 9 (5G) >G,G5 8 (57,1) >G,G5
G 11 (55) 46 (46) >G,G5 12 (54,7) >G,G5 9 (5G) >G,G5 6 (42,9) <0,05
Примечание. Данные представлены в виде абсолютных и относительных значений, для статистического анализа применялся критерий х2. Достоверность различий рассчитывали относительно детей в стадии ХБП 0.
Различия в распределении частот аллелей гена ан-гиотензиногена (AGT вариант rs4762) у детей с различными стадиями ХБП не обнаружены. Встречаемость аллеля С (ответственного за развитие нефропатии) не зависела от стадии ХБП.
Известно, что фактором риска прогрессирования хронической болезни почек является сохраняющаяся артериальная гипертензия[7]. К генотипам, ассоциированным с ней, относятся аллель С (генотипы A/С и С/С) гена рецептора ангиотензина первого типа и аллель A (генотипы G/A и A/A) гена рецептора ангиотензина второго типа [4].
По нашим данным, редкий аллель C полиморфного варианта rs5186 гена AGTR1 обнаруживался примерно одинаково у больных с отсутствием ХБП или с ХБП первой стадии, тогда как у пациентов с ХБП второй, третьей и пятой стадий он встречался достоверно чаще (p<0,05). Не выявлено статистически значимых различий в частоте аллеля C между детьми с ХБП II, III и V стадий (p>0,05). Полученные результаты свидетельствуют, что аллель С гена AGTR1 может являться маркером неблагоприятного течения хронической болезни почек у детей.
У наших больных мутантный аллель A в гене AGTR2 (вариант rs1403543) встречался чаще (p<0,05), чем у пациентов с терминальной стадией хронической почечной недостаточности. У детей с другими стадиями ХБП достоверных различий (p>0,05) в распределении частот аллелей и генотипов полиморфного варианта rs1403543 в гене AGTR2 не обнаружено. Таким образом, только при ХБП пятой стадии выявлено наличие наследственной предрасположенности к злокачественному течению артериальной гипертензии, ассоциированной с аллелем A гена AGTR2.
Имеется мнение, что полиморфный вариант Alu Ins/Del ангиотензинпревращающего фермента и мута-
Литература/References
1. Chiu H. L., Tangri N., Djurdiev O., Helen H. L., Barrett B. J. [et al.]. Perceptions of prognostic risks in chronic kidney disease: a national survey. Can. J. Kidney Health Dis. 2015;2:53.
https://doi.org/10.1186/s40697-015-0088-z
2. Capone V. P., Morello W., Taroni F., Montini G. Genetics of congenital anomalies of the kidney and urinary tract: the current state of play. Int. J. Mol. Sci. 2017;18:796. https://doi.org/10.3390/ijms18040796
3. Даминова М. А. Хроническая болезнь почек у детей: этиология, классификация и факторы прогрессирова-ния. Вестник современной клинической медицины. 2016;9(2):36-41. [Daminova M. A. Chronic kidney disease
ция T704C (Met235Thr) в гене ангиотензиногена могут использоваться для прогнозирования хронической почечной недостаточности при гломерулонефрите (IgA-нефропатия) [9, 10]. По нашим данным, взаимосвязь вышеуказанных генетических полиморфизмов с про-грессированием ХБП у детей отсутствовала.
Вместе с тем было отмечено, что дети с терминальной стадией ХБП достоверно чаще являются носителями мутантных форм генов рецептора ангиотензина первого (A1166C) и второго типов (G1675A), ответственных за злокачественное течение артериальной гипертензии. Кроме того, у пациентов с ХБП второй стадии и выше наблюдалось увеличение носительства патологического аллеля C полиморфного варианта rs5186 гена AGTR1.
В ряде работ выявлено, что определяющим фактором риска прогрессирования ХБП является некорри-гируемая артериальная гипертензия [3, 7]. Именно эти гены ответственны за предрасположенность к плохо контролируемой артериальной гипертензии [4].
Исследование имело ряд ограничений, таких как небольшой объем выборки, отсутствие рандомизации, что требует дальнейшего подтверждения результатов на более значимой популяции больных. По нашему мнению, для эффективной реабилитации детей с ХБП, ассоциированной с некорригируемой артериальной гипертензией, необходим генетический скрининг с целью выявления генетических факторов ее развития.
Заключение. Таким образом, прогрессирование хронической болезни почек у детей взаимосвязано с носительством аллеля С гена AGTR1 (рецептора ангиотензина первого типа) и аллеля А гена AGTR2 (рецептора ангиотензина второго типа).
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
in children: etiology, classification and progression factors. Vestnik sovremennoj klinicheskoj mediciny. - Bulletin of modern clinical medicine. 2016;9(2):36-41. (In Russ.)].
4. Gribouval O., Gonzales M., Neuhaus T., Aziza J., Bieth E. [et al.]. Mutations in genes in the renin-angiotensin system are associated with autosomal recessive tubular dysgenesis. Nature Genetics. 2005;37:964-968. https://doi.org/10.1016/j.ajhg.2009.07.010
5. Седашкина О. А., Маковецкая Т. А., Печкуров Д. В. Роль некоторых генетических факторов в прогресси-ровании хронической болезни почек у детей. Практическая медицина. 2015;7:72-77. [Sedashkina O. A., Makoveckaja T. A., Pechkurov D. V. The role of some genetic factors in the progression of chronic kidney disease
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Фармакология. Клиническая фармакология
ORiGiNAL RESEARCH
Pharmacology. Clinical pharmacology
in children. Prakticheskaja medicina. - Practical medicine. 2015;7:72-77. (In Russ.)].
6. Шарнова Ж. П., Тихомиров Е. Е., Цыгин А. Н. Полиморфизм генов ренин-ангиотензиновой системы при не-фротическом синдроме у детей. Педиатрическая фармакология. 2006;3(4):10-l7. [Sharnova Zh. P., Tihomirov E. E., Cygin A. N. Gene polymorphism of the renin-angiotensin system in nephrotic syndrome in children.
Pediatricheskaja farmakologija. - Pediatric pharmacology. 2006;3(4):10-17. (In Russ.)]. 7. KDIGO 2012 clinical practice guideline for the evaluation and management of chronic kidney disease. Kidney International. Supll. 2013;(1):163. https://doi.org/10.1038/kisup.2012.46
Сведения об авторах:
Ахметшин Рустэм Закиевич, кандидат медицинских наук, заведующий кафедрой педиатрии ИДПО; тел.: 89173428247; e-mail: rz47@rambler.ru
Шигапов Расим Мазгарович, врач отделения урологии; тел.: 89273466414; e-mail: rasim14@list.ru
Латыпов Ирек Зигангалеевич, заведующий отделением гемодиализа; тел.: 89177542620; e-mail: i.z.latypov@mail.ru
Миронов Петр Иванович, доктор медицинских наук, профессор кафедры анестезиологии и реаниматологии с курсом ИДПО; тел.: 89177735811; e-mail: mironovpi@mail.ru
© Коллектив авторов, 2020 УДК 615.015.44
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15015 ISSN 2073-8137
ЭТНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АНТИАГРЕГАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ У ЖИТЕЛЕЙ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ
В. А. Батурин \ А. В. Иванова \ К. А. Муравьев \ А. А. Царукян \ Е. Н. Колодяжная 2
1 Ставропольский государственный медицинский университет, Российская Федерация
2 ООО «Центр клинической фармакологии и фармакотерапии», Ставрополь, Российская Федерация
ETHNIC CHARACTERISTICS OF ANTIAGGREGANT ACTION OF ACETYLSALICYLIC ACID IN RESIDENTS OF STAVROPOL TERRITORY
Baturin V. A. \ Ivanova A. V. \ Muravyev K. A. \ Tsarukyan A. A. \ Kolodyazhnaya E. N. 2
1 Stavropol State Medical University, Russian Federation
2 Center for Clinical Pharmacology and Pharmacotherapy, Stavropol, Russian Federation
У больных кардиологического стационара, получающих ацетилсалициловую кислоту в дозе 75 мг в сутки, через 5 дней от начала лечения проводилась лазерная агрегатометрия. Оценивалась эффективность антиагрегационной терапии в этнических группах славян (русские и украинцы) и армян - жителей Ставропольского края. Установлено, что в славянской этнической группе чаще выявлялись случаи недостаточной эффективности ацетилсалициловой кислоты (26 %), чем среди армян (9,8 %). При этом у 7,3 % больных в славянской этнической группе по данным агре-гатометрии эффект ацетилсалициловой кислоты вообще не обнаруживался. Среди армян таких пациентов не было выявлено.
Ключевые слова: ацетилсалициловая кислота, резистентность, агрегатограмма, этнические особенности
In patients of a cardiology unit receiving acetylsalicylic acid 75 mg per day, laser aggregometry was performed 5 days after the start of treatment. The effect of anti-aggregation therapy was evaluated in the ethnic groups of the slavs (Russians and Ukrainians) and Armenians - residents of the Stavropol Territory. It was established that in the Slavic ethnic group, cases of insufficient effectiveness of acetylsalicylic acid (26 %) were more often detected than among Armenians (9.8 %). Moreover, in 7.3 % of patients in the Slavic ethnic group, according to aggregatometry, the effect of acetylsalicylic acid was not detected at all. There were no such cases among Armenians.
Keywords: acetylsalicylic acid, resistance, aggregatogram, ethnic characteristics
Для цитирования: Батурин В. А., Иванова А. В., Муравьев К. А., Царукян А. А., Колодяжная Е. Н. ЭТНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АНТИАГРЕГАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ У ЖИТЕЛЕЙ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020;15(1):68-71. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15015
