CC BY
35
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XI, № 2, 2015
Семенов Г. В.
ГУ «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий» Министерства здравоохранения Республики Беларусь, г. Минск
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЧАСТОТА ВСТРЕЧАЕМОСТИ HLA-ПАРАМЕТРОВ У ЖИТЕЛЕЙ БЕЛАРУСИ И В ДРУГИХ ПОПУЛЯЦИЯХ
Сведения, полученные в результате изучения полиморфизма главного комплекса гистосовме-стимости в популяциях различной этнической принадлежности, создают основу для развития ряда направлений клинической трансплантологии, диагностического направления (определение предрасположенности к различным заболеваниям), и могут рассматриваться также с антропологической точки зрения. Это является предпосылкой для проведения исследований HLA-разнообразия на современном молекуляр-но-генетическом уровне.
Сравнительное изучение HLA-полиморфизма среди различных популяций представляет интерес как теоретическая база для практических рекомендаций в клинической трансплантологии по поиску доноров аллогенного костного мозга в пределах генетически близких популяционных групп. С этой целью нами проанализированы HLA-параметры доноров республиканского регистра с аналогичными показателями в русской популяции (г. Москва и Северо-Западный регион России) и популяциях Польши, Чехии и Германии.
Население Минского региона, среди которого представлены белорусы, русские, украинцы и другие национальности, относят к восточнославянским народам. Получены сравнительные данные, отражающие встречаемость HLA-генов локусов А, В, С и DRB1 среди популяций, представляющих восточнославянские народы (жители г. Москвы и северо-западного региона России, Минского региона), западнославянские (жители Польши) и жителей Западной Европы (Германия, Чехия).
Исследование антигенов I класса системы HLA (локусов А, В, С) проводили серологическим методом с помощью классического лим-фоцитотоксического теста с использованием панели собственного производства. Молеку-лярно-генетическое HLA-типирование II класса у потенциальных доноров регистра выполнялось по методологии SSO. Детекция результатов осуществляли на мембранных стрипах. Искомые HLA-аллели в процессе реакции окрашивались с участием фермента пероксидазы. Набор окра-
шенных полос на стрипе интерпретировали с помощью специальной компьютерной программы после сканирования.
В локусе А среди восточнославянских популяций достоверно значимые различия относились к антигенам А*30, А*31, А*32 и А*33. Причем А*30 в белорусской популяции был снижен по сравнению с жителями г. Москвы; А*31, напротив, повышен по отношению к москвичам и жителям северо-запада, так же как и А*32 и А*33 по отношению к последним. В сравнении с поляками изменения коснулись антигенов А*01, А*26 и А*33. Частота встречаемости А*26 и А*33 достоверно чаще наблюдалась у доноров белорусского регистра, а А*01 — у жителей Польши. Самые существенные различия получены при сравнении с жителями Германии. Частота антигенов А*01, А*03 и А*29 была достоверно повышена в немецкой популяции, а антигены А*25 и А*26 достоверно чаще встречались у жителей Минского региона.
В локусе В анализ данных среди восточнославянских популяций показал относительно близкие значения частот HLA-генов. Сниженной у доноров регистра по сравнению с поляками оказалась встречаемость генов В*08, В*27 и В*38. Целый спектр антигенов выявился при сравнительном анализе популяции Минского региона и жителей Германии. Частота генов В*08, В*15 и В*51 у немцев более чем в 1,5 раза превышала частоту аналогичных генов у доноров регистра. Напротив, гены В*13, В*41, В*52 и В*56 существенно чаще идентифицировались у жителей Минского региона. Но наиболее значимые различия обнаружили антигены В* 18 и В*38, которые у минчан встречались в 2-2,5 раза чаще, чем в Германии.
В локусе С у жителей Минского региона определялась не вся «линейка» антигенов, так же как отсутствуют и данные по северо-западному региону России. Из определяемых достоверное снижение частоты встречаемости по сравнению с поляками и немцами обнаружил ген С*07, только с немцами — С*03 и С*05.
Что касается локуса DRB1, то, несмотря на то, что два гена DRB1*13 и DRB1*15 оказались до-
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИММУНОГЕНЕТИКИ И ТКАНЕВОГО ТИПИРОВАНИЯ»
Санкт-Петербург 24-25 июня 2015 г.
стоверно измененными по отношению к москвичам, в целом в восточнославянской популяции наблюдались одинаковые значения частот генов. По сравнению с западными славянами у минчан реже идентифицировался ген DRB1*03 и чаще DRB1*15. С немецкой популяцией этих различий больше и они более выражены. Это относится к DRB1*03, DRB1*04 и DRB1*16, причем если DRB1*03 и DRB1*04 значимо реже встре-
чались в Минском регионе, то DRB1*16 значимо реже встречался в Германии.
Полученные результаты свидетельствуют о возможности взаимодействия формируемого в Республике Беларусь регистра доноров ГСК с регистрами доноров всех рассмотренных популяций и, в первую очередь, регистрами восточнославянских народов как генетически наиболее близких.
Соколова Ю. В., Чечеткин А. В., Павлова И. Е., Бессмельцев С. С., Бубнова Л. Н.
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург
KIR-ГЕНЫ У ДОНОРОВ СТВОЛОВЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ КЛЕТОК РЕСПУБЛИКАНСКОГО РЕГИСТРА
Введение. Аллогенная трансплантация ге-мопоэтических стволовых клеток (ГСК) от родственных и неродственных доноров — стандартный вид высокотехнологичной терапии при многих онкогематологических заболеваниях.
Система KIR-генов, обладающая высоким уровнем полиморфизма и играющая важную роль в регуляции цитолитической активности естественных киллеров, может оказывать влияние на эффективность трансплантации гемопо-этических стволовых клеток. Определение KIR-генотипа донора необходимо для обеспечения наиболее благоприятного клинического исхода трансплантации и повышения эффективности терапии.
Целью данного исследования явилось изучение генетических особенностей иммуногло-булинподобных рецепторов киллерных клеток (KIR) у потенциальных доноров Республиканского регистра доноров гемопоэтических стволовых клеток Регистра Российского НИИ гематологии и трансфузиологии.
Материалы и методы. Для изучения распределения KIR-генов и KIR-генотипов у потенциальных доноров ГСК было проведено молекулярно-генетическое типирование 100 образцов крови русских лиц из Республиканского Регистра доноров в возрасте от 20 до 60 лет. Генотипирование осуществляли методом поли-меразной цепной реакции с сиквенс-специфиче-скими праймерами (PCR-SSP) с использованием наборов KIR Genotyping SSP Kit (Invitrogen, WI, USA). Частоту встречаемости KIR-генов и генотипов определяли метом прямого подсчета. Для проведения сравнительного анализа ча-
стот встречаемости KIR-генов и KIR-генотипов у потенциальных доноров ГСК нашего регистра и в других популяциях были использованы данные Allele Frequencies KIR Database (http:// www.allelefrequencies.net). Обозначение KIR-генотипов производили в соответствии с этой же базой. Распределение потенциальных доноров на группы в соответствии с их KIR В статусом («best», «better», «neutral») проводили при помощи калькулятора http://www.ebi.ac.uk/ipd/kir/.
Результаты. В исследуемой группе доноров ГСК установлена 21 разновидность KIR-генотипов: АА-генотипы — у 33 % доноров, Вх — у 67 %, что сопоставимо с данными, полученными для других европеоидных популяций. Единственный активирующий ген, присутствующий в АА генотипе — KIR2DS4, был выявлен у всех лиц, имеющих данный генотип. При этом две трети обследуемых были гомозиготны по аллельным вариантам KIR2DS4*003-007, имеющим делецию в экзоне 5 и кодирующим неэк-спрессируемые формы KIR-рецепторов. Только один из 33 носителей АА генотипа был гомозиготен по аллельным вариантам KIR2DS4*001/002, кодирующим экспрессируемые рецепторы.
Среди Вх-генотипов наиболее часто встречались: ID5 (11 %), ID2 (8 %), ID4 (7 %) и ID71 (6 %), что составило вместе почти треть популяции. 16 из 21 Вх-генотипов имели частоту встречаемости менее 4 %, и вместе также составили около трети популяции — 35 %.
Частота встречаемости ингибирующих KIR-генов составила: для 2DL1-96 %, 2DL2-47 %, 2DL3-85 %, 2DL5-52 %, 3DL1-96 %; а частота активирующих — 2DS1-40 %, 2DS2-47 %,
