Способ модуляции апоптоза и клеточной пролиферации клеток меланомы кожи Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

различными морфологами. Предложенная ВОЗ в 1994 г. классификация медленно внедряется в практику. Изменения, соответствующие сложной ГЭ без клеточной атипии (СГЭ), многими морфологами трактуются как атипическая ГЭ (АГЭ) 1-11 степени. В то время как диагноз АГЭ по классификации ВОЗ 1994 г. оправдан только при наличии клеточной атипии эпителия гиперплазированных эндометриальных желез. В результате многолетнего наблюдения за больными с различными формами ГЭ установлено, что риск возникновения РЭ у больных с простой и сложной гиперплазией эндометрия составляет 1-3 %, а у больных с АГЭ - 15-50 %.

С целью выяснения структуры морфологических изменений эндометрия мы проанализировали 460 историй болезни женщин, подвергнутых диагностическому выскабливанию (ДВ) в 2009 г. в одном гинекологическом отделении. Из них 299 больных были в возрасте до 50 лет, а 161 больная - 51 год и старше. Рак эндометрия выявлен у одной больной до 50 лет и у 27 больных старше 50 лет, сложная АГЭ - у 9 и 3, простая и сложная неатипическая ГЭ - у 132 и 37 соответственно. За этот же период времени в поликлинике Онкологического клинического диспансера № 1 были обследованы 122 больные в возрасте старше 45 лет, направленные с диагнозом АГЭ. Из них 104 больным ДВ произведено по поводу аномальных маточных кровотечений, а 18 - на основании данных УЗИ, указывающих на гиперпластические изменения эндометрия. Все гистологические препараты были пересмотрены в патоморфологическом отделении диспансера. Первичный диагноз АГЭ был подтвержден у 22 больных, в том числе у 3 - в полипе эндометрия. У 70 больных диагноз

АГЭ был изменен на сложную ГЭ без атипии, в том числе у 15 - в полипе, у 24 больных установлен диагноз простой ГЭ. У остальных больных имелись воспалительные изменения в атрофичном эндометрии или материал признан неинформативным из-за распада ткани, так как ДВ производилось на фоне кровотечения. Больным с АГЭ было рекомендовано хирургическое лечение в объеме экстирпации матки с придатками. При исследовании операционного материала РЭ обнаружен у 4 больных, АГЭ - у 8, сложная ГЭ - у 4, атрофия эндометрия без признаков гиперпластических изменений - у 3 больных. Больным сложной ГЭ, в том числе в полипе, рекомендовано динамическое наблюдение с обязательным контрольным обследованием через 4-6 мес с применением влагалищного УЗИ и аспирационной биопсии эндометрия с цитологическим и гистологическим исследованием материала аспирата. При отсутствии признаков рецидива (персистенции) АГЭ и полипа рекомендовано дополнительное исследование через один год. При повторном обнаружении СГЭ или полипа - аблация эндометрия. Заключение: диагноз АГЭ оказывается завышенным у значительного числа больных, поэтому необходимо консультирование гистологических препаратов в специализированном учреждении; после принятия решения о хирургическом лечении АГЭ целесообразно произвести гистероскопию с прицельной биопсией. Это позволит у части больных выявить РЭ или отсутствие АГЭ, то есть ее полное удаление при первом ДВ и внести соответствующие коррективы в лечение с учетом возраста и общесоматического состояния больных.

СПОСОБ модуляции апоптоза и клеточной ПРОЛИФЕРАЦИИ КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ КОжИ

С.Н. ГЫРЫЛОВА

Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого,

г. Красноярск.

Актуальность. Меланома кожи является клеток меланомы к апоптоз-индуцирующим

агрессивным злокачественным новообразова- стимулам. Использование специфического

нием, характеризующимся высокой химиорези- ингибитора МЕК и0126 является доказан-

стентностью в результате особой устойчивости но эффективным способом снижения роста

клеток меланомы. Однако при воздействии МЕК-ингибиторов в опухолевых клетках происходит стимуляция остановки клеточного цикла, но не апоптоз. Поэтому представляется перспективным использовать в составе комбинированной терапии меланомы в сочетании с МЕК-ингибиторами препараты-индукторы апоптотической гибели клеток, к которым, в частности, относится специфический лиганд TsPO-PK11195.

Целью исследования было определение возможности модуляции апоптоза и пролиферации клеток меланомы кожи ингибитором МЕК UO126 в комбинации с лигандом TsPO РК11195.

Материал и методы. Для исследования использовалась человеческая культура клеток меланомы кожи SK-MEL-1 (ATCC). Клетки выращивались в среде RPMI 1640 с 10 % содержанием фетальной бычьей сыворотки при 37°C в CO2 инкубаторе (5% CO2). Клетки рассеивались в чашки Петри с плотностью 2-4*106 кл/мл за

24 ч до начала эксперимента. К суспензии клеток добавлялся TsPO лиганд РК11195 (Sigma) в концентрации 10 ^mol/L, 100 nmol/L и 10nmol/L. В другой группе к суспензии клеток добавлялся блокатор МАРК-Ш126 (Sigma) в концентрации 10 и 50 ^mol/L. Кроме того, мы проводили инкубирование суспензии клеток одновременно блокатором МЕК U0126 и лигандом РК11195, в концентрациях 10 ^mol/L и 10 nmol/L соответственно. В контрольной группе клетки оставались без лечения. Через 72 ч оценивался уровень апоптоза, пролиферации и TsPO. Выраженность апоптоза оценивалась с помощью окраски акридиновым оранжевым/бромистым

этидием. Определялся процент апоптотических клеток с ядром, окрашенным (полностью или фрагментарно) в оранжевый цвет. Уровень клеточной пролиферации и TsPO оценивался путем иммуноцитохимического окрашивания клеток согласно стандартным методикам.

Результаты. После инкубации клеток меланомы с РК11195 и с и0126 во всех концентрациях наблюдалось повышение уровня апоптоза в 5 и 6 раз соответственно, регистрируемое как появление ядер клеток меланомы, окрашенных в оранжевый цвет. В случае комбинации РК11195 и и0126 происходило более интенсивное повышение числа апоптоз-положительных клеток - в 8 раз (40 % апоптотических клеток). При определении уровня клеточной пролиферации регистрировалось снижение экспрессии PCNA, что определялось как достоверное уменьшение количества положительно-окрашенных клеток. При этом более выраженный эффект снижения экспрессии маркера клеточной пролиферации в 3-3,5 раза наблюдался после инкубации с и0126 в концентрации 50 цто1/Ь и после инкубации с РК11195 в концентрации 10 цто1^ и 100 пто1^. В группе сочетанного применения данных терапевтических агентов в более низких концентрациях (10 цто1/Ь и 10 пто1/Ь) также происходило снижение экспрессии, но лишь на

25 %, что сопоставимо с результатами, полученными после монотерапии РК11195 и Ш126.

Выводы. Отмечено значимое преимущество сочетанного применения РК11195 и и0126, данные терапевтические агенты синергетически активируют апоптоз в минимальных концентрациях в эксперименте на культуре клеток меланомы.

развитие синдрома «сухого глаза» ПОСЛЕ БРАХИТЕРАПИИ МЕЛАНОМЫ ХОРИОИДЕИ

Е.И. ГЮНТНЕР1, Л.Е. СЕМЕНОВА2, Т.Р. КАРДАВА2

ГОУВПО «Челябинская государственная медицинская академия», кафедра онкологии1, ГЛПУ «Челябинский окружной клинический онкологический диспансер», онкоофтальмологический центр2

Актуальность определяется вероятностью контактном и дистанционном лучевом лечении

развития вторичного синдрома «сухого глаза» онкологической патологии органа зрения. Один

за счет лучевого повреждения тканей глаза при из органосохранных методов лечения меланомы