CC BY
8СОВРЕМЕННЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ ВГС-ИНФЕКЦИИ.
Низкий уровень репликации ВГС в гепатоцитах- не обеспечивает надежных морфологических (цитоплазматические включения) или ультраструктурных (вирионы) критериев для диагностики такой инфекции с помощью световой и электронной микроскопии. Однако, вопросы клеточной и субклеточной локализации, а также тропизма ВГС с одной стороны, и сопоставления уровня вирусной репликации в инфицированных тканях с уровнем виремии в сыворотке крови больных гепатитом С, с другой требуют использования современных методов, которые сочетают как морфологические, так и молекулярно-биологические аспекты диагностики в едином целом. Такими методами в настоящее время являются in situ гибридизация (ISH) и полимеразная цепная реакция in situ в варианте с обратной транскрипцией (RT-PCR in situ). Следует отметить, что по сути оба метода представляют собой гибридизацию зондовых молекул с вирусной мишенью, находящейся внутри среза биоптата ткани, заключенной в парафин. При этом в варианте ISH мишенью является РНК ВГС, а в случае RT-PCR in situ - амплифицированная к ДНК ВГС, что и позволяет существенно повысить чувствительность гибридизации.
Использование ISH позволило ряду авторов обнаружить ВГС не только в гепатоцитах, но также в негепатических мононуклеарных клетках, в клетках желчных протоков, кожного эпителия, и эпителиальных клетках слюнных желез. Y. Tanaka показал, что часто гепатоциты, инфицированные ВГС, имели два ядра, a S.W.Cho сообщил, что гибридизационные сигналы от ВГС зондов локализованы иногда в ядре гепатоцитов. На основе последних данных было сделано предположение, что часть жизненного цикла ВГС (вероятно репликативного) проходит в клеточном ядре.
Однако, многочисленные данные по локализации ВГС, полученные с помощью ISH, частично противоречили друг другу, поэтому в дальнейшем было обращено особое внимание на постановку различных контрольных экспериментов и повышение чувствительности ISH. G. Nuova разработал метод RT-PCR in situ в 1991г. и за 8 лет провел работу по его модификации, которая позволила улучшить фоновые характеристики метода и довести пороговую чувствительность до уровня 1 копии РНК ВГС на клетку. В настоящее время проводятся исследования по уточнению данных, полученных при изучении ВГС инфекции методом ISH с помощью модифицированной методики G. Nuova. Это является кратким содержанием обзора исследований по применению ISH и RT-PCR in situ методов к изучению ВГС инфекций, который будет опубликован в журнале "Вопросы вирусологии" № 2, 2000г. А,А. Маныкин, Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН.
РИСК ИНФИЦИРОВАНИЯ ВИРУСАМИ ГЕПАТИТОВ В и С ЛИЦ,
ОКАЗЫВАЮЩИХ ПЛАТНЫЕ СЕКСУАЛЬНЫЕ УСЛУГИ
В настоящее время в мире складывается неблагоприятная ситуация по заболеваниям, передающимся половым путём (ЗППП). Причинами этого являются социальные потрясения, влекущие за собой экономическое неблагополучие, и, так называемая, сексуальная революция (или, по определению сексолога Л.М. Щеглова, сексуальный бунт), которую сегодня переживает Россия. Наиболее угрожающее положение складывается по таким ЗППП, как ВИЧ/СПИД, герпесвирусная инфекция, хламидиоз и вирусные гепатиты. По данным Центра Госсанэпиднадзора Таганрогской области в 1998 году по сравнению с 1996 годом в структуре всех вирусных гепатитов произошёл рост инфекций с парентеральной передачей возбудителя (ВГВ с 24.9% в 1996 г. до 53.9% в 1998 г., ВГС с 3.1% до 10.9%). Заражение вирусными гепатитами с парентеральной передачей возбудителя за счёт реализации полового пути происходило в 54.2% случаев (Егорова И.П., Шестерякова В.И.,1999). Зарегистрировано, что в последние годы доля полового пути в структуре путей передачи возбудителей вирусных гепатитов значительно возросла (Соринсон С.Н., 1998). По данным Центра Госсанэпиднадзора в г. Москве только за три года (1994-1997 гг.) она увеличилась с 28.6 до 41.6%.
Подтверждением эпидемиологической значимости полового пути передачи гепатитов В и С могут служить высокие уровни носительства этих вирусов среди
