CC BY
22
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
пень расщепления иммуноглобулинов примерно в 10 раз выше, чем при использовании сорбента с 1 мг фермента на 1 мл (2-5% оставшихся нерасщепленными молекул иммуноглобулинов всех исследованных изотипов против 20-30% соответственно).
Заключение. Таким образом, на первом этапе исследований по разработке комбинированных форм иммунобиологических препаратов на основе КИП, был синтезирован сорбент с иммобилизованным папаином, проведены эксперименты по расщеплению иммуноглобулинов с помощью этого сорбента и анализ полученных образцов. Уровень расщепления иммуноглобулинов напрямую зависит от количества папаина, иммобилизованного на сорбенте.
НОВАЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ КОМПОЗИЦИЯ С БЕТАЛЕЙКИНОМ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА
Саркисян Н.Г., Ронь Г.И., Тузанкина И.А.
ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский
университет», Екатеринбург, Россия
ФГБУН«Институт иммунологии и физиологии» УрО
РАН, Екатеринбург, Россия
ФГАОУ ВО «Уральский федеральный университет
имени первого Президента России Б.Н. Ельцина»,
Екатеринбург, Россия
По данным ВОЗ, распространенность заболеваний пародонта встречается более чем у 90% взрослого населения. Для лечения и реабилитации пациентов с пародон-титом предложено множество методов и средств, однако проблема достижения стойкой ремиссии до настоящего времени остается нерешенной.
Нами было проведено клинико-рентгенологическое исследование на базе кафедры терапевтической стоматологии УГМУ г. Екатеринбурга в период с 2011 по 2016 г., целью которого явилось определение клинической эффективности лечения хронического генерализованного пародонтита с применением медикаментозной композиции глицерогидрогеля кремния с иммуномодулятором беталейкином. В исследовании приняли участие 75 пациентов с диагнозом «Хронический генерализованный пародонтит» в стадии ремиссии.
Пациентам основной группы (45 человек) на этапе медикаментозного лечения на десну и в пародонтальные карманы наносили композицию с глицерогидрогелем кремния и беталейкином — 1 в день, 10 процедур, предварительно инстиллируя теплой водой, а пациентам группы сравнения (30 человек) — препарат «Аекол».
Анализ клинической симптоматики позволил сделать заключение, что в группе пациентов, получавших композицию с беталейкином в стадии ремиссии, через 6 и 12 месяцев после лечения гигиеническое состояние полости рта оставалось на хорошем уровне, наблюдались динамические признаки улучшения состояния тканей пародон-та, отсутствовала кровоточивость, незначительно уменьшилась глубина пародонтальных краманов.
В группе, пролеченной по традиционной схеме с препаратом «Аекол», наблюдалось ухудшение гигиенических показателей, увеличение значений индекса воспалительного процесса, кровоточивость, отек десны, незначительное увеличение глубины пародонтальных карманов.
По данным рентгенологического исследования в основной группе, в отличие от группы сравнения, через 6
и 12 месяцев отмечалось уменьшение и местами исчезновение очагов остеопороза.
Продолжительность ремиссии при лечении по традиционной схеме, без включения топических композиций составила 5 месяцев, при использовании композиции с беталейкином — 10 месяцев.
Таким образом, применение препарата глицероги-дрогеля кремния в композиции с беталейкином в комплексном лечении хронического генерализованного па-родонтита в стадии ремиссии позволило получить более высокий терапевтический эффект, чем тот, который был достигнут в случае применения только лекарственных препаратов, без предложенной композиции.
По данному исследованию получен патент РФ № 2470640, 2012 г «Средство для лечения воспалительных заболеваний полости рта и способ лечения воспалительных заболеваний полости рта».
СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ИЗБЫТОЧНОГО АДГЕЗИОГЕНЕЗА
Снимщикова И.А., Медведев А.И., Шохина М.Д., Честнихина А.Д., Афонина И.А.
ФГБОУ ВО «Орловский государственный университет имени И.С. Тургенева», Медицинский институт, Орёл, Россия
Введение. Одной из актуальных проблем абдоминальной хирургии остается профилактика образования спаек после воспалительных заболеваний органов малого таза и оперативных вмешательств, поскольку спаечный процесс может стать причиной кишечной непроходимости, тазовых болей, бесплодия и внематочной беременности у женщин. Данные исследований патогенеза спаечного процесса, критериев ранней диагностики и прогноза, несмотря на многочисленность, достаточно противоречивы, что не позволяет разработать стройную лечебно-диагностическую концепцию. Известно, что на развитие и исход репаративного процесса после операционной травмы в первую очередь влияет локальная реакция клеток воспаления и состояние местного звена иммунитета, контролирующего дифференцировку клеток-предшественников в фибробласты и регулирующих их активность. Исследованиями последних лет показано, что одним из перспективных способов предупреждения патологического адгезиогенеза после оперативных вмешательств может быть ускорение процессов репаратив-ной регенерации раны путем воздействия на первичный локально-воспалительный процесс, ведущую роль в обеспечении которого играют перитонеальные макрофаги и продуцируемые ими медиаторы.
Цель и задачи. Целью работы явилось экспериментальное обоснование применения глюкозаминилмура-милдипептида, являющегося действующим веществом препарата ликопид, в профилактике и лечении спаечных процессов брюшной полости. Задачи исследования: исследовать метаболическую активность перитонеальных макрофагов больных со спаечным процессом (спонтанную и стимулированную продукцию оксида азота; антимикробных пептидов: кателицидина LL-37, лактоферри-на, миелопероксидазы; воспалительных и противовоспалительных цитокинов: IL-ip, IL-6, IL-8, IL-10, TNFa, TGF-P); изучить in vitro влияние глюкозаминилмурамил-дипептида (ГМДП) на функциональную активность пе-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммуномодуляторы эндогенной и экзогенной природы Immunomodulators of endogenous and exogenous nature
ритонеальных макрофагов больных с различной степенью выраженности спаечного процесса.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находились 105 пациентов со спаечным процессом органов брюшной полости различной степени выраженности (средний возраст 39,7±3,5 лет). Перитонеальную жидкость получали на диагностическом этапе лапароскопии путем активной аспирации, а затем центрифугировали в течение 10 минут при 1500 об./мин. Осадок, представляющий собой клеточную суспензию, использовали для цитологического исследования и выделения перитоне-альных макрофагов, которые получали путем культивирования в пластиковых планшетах в среде RPMI-1640 при 37 °С в атмосфере 5% СО2 в течение 2 часов. Непри-липшие клетки удаляли 3-х кратным промыванием средой 199. Прилипающие клетки, около 90-95% которых составляли перитонеальные макрофаги, ресуспендирова-ли в полной среде RPMI-1640 в концентрации 2 млн/мл и использовали в соответствии с целью эксперимента. Концентрацию стабильного метаболита оксида азота (нитрита) в пробах определяли спектрофотометрически с помощью реактива Грисса. Продукцию миелоперокси-дазы оценивали по методике Азнабаевой Л.Ф. с расчетом показателя пероксидазной активности исследуемой биологической жидкости. Определение концентрации кате-лицидина LL-37 и лактоферрина проводилось методом твердофазного ИФА с помощью набора реагентов Hbt (Нидерланды), ЗАО «Вектор-Бест» (Россия). Концентрацию цитокинов в перитонеальной жидкости и куль-туральной среде оценивали методом твердофазного ИФА с помощью набора реагентов ООО «Протеиновый контур», ООО «Цитокин» и DRG (Germany).
Результаты. Проведенные исследования показали, что у большинства пациентов с избыточным адгезиогенезом отмечалось снижение уровня метаболитов NO, повышение продукции TGF-ß, IL-10, кателицидина LL-37, лакто-феррина и миелопероксидазы в перитонеальной жидкости и супернатантах культивируемых перитонеальных макрофагов. При этом ГМДП в оптимальных концентрациях оказывал иммуномодулирующее действие на функциональную активность макрофагов больных со спаечным процессом различной степени выраженности.
Заключение. Глюкозаминилмурамилдипептид обладает иммуномодулирующим действием на функциональную активность перитонеальных макрофагов, что обосновывает возможность применения препарата ликопид при патологии органов брюшной полости с целью предупреждения избыточного адгезиогенеза.
ПРОБЛЕМЫ БЕЗОПАСНОСТИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ИНТЕРФЕРОНОВ
Солдатов А.А., Авдеева Ж.И., Медуницын Н.В.
ФГБУ«Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Среди биотерапевтических препаратов наиболее широко применяемой в клинике группой препаратов являются препараты интерферонов (IFN), применяемые для лечения гепатитов B и C, некоторых опухолей (лейкоз, саркома Капоши), рассеянного склероза. Для повышения эффективности препаратов используются модификации молекул IFN полиэтиленгликолем. Применение препаратов IFN часто сопровождается развитием таких побочных реакций (ПР) как вирусные, грибковые, бакте-
риальные инфекции, анемия, нейтропения, лейкопения, тромбоцитопения, гипотериоз, гипертиреоз, дерматит, псориаз, крапивница, экзема, миалгия и др., а у детей еще и новообразования, гиперкинезии, нарушение функции печени, энурез, задержки роста и др. Нечасто лечение препаратами IFN может вызвать развитие таких тяжелых ПР, как гломерулосклероз, липоидный нефроз, гломеру-лонефрит и гломерулопатия, эритроцитарная аплазия, тромбоцитопеническая пурпура, саркидоз, ревматоидный артрит, васкулит, мононейропатия, пептическая язва, панкреатит, некролиз, синдром Стивена-Джонсона, гемолитический уремический синдром (даже с летальным исходом) и др. Появление антител (Ат) к препарату сопровождается снижением его эффективности. Механизмы развития многих ПР до конца не изучены. С одной стороны, развитие данных осложнений связано с им-муномодулирующими свойствами IFN, т.к. он является очень активным цитокином системы иммунитета. С другой стороны, в развитии ПР основную роль могут играть Ат к препарату.
Развитие иммунного ответа на введение препаратов IFN связано со многими особенностями биологических свойств самого IFN и особенностями препарата IFN, которые обусловлены системой экспрессии рекомби-нантного белка, производственного процесса, состава препарата, условий хранения и транспортирования. IFN, как цитокин, обладает способностью стимулировать выработку Ат. Экспериментально показано, что препараты на основе IFN человека, вводимые с другими белками, вызывали усиление иммунного ответа (IFN выступал в роли адъюванта). Кроме того, Yeung V.P. с соавт. показали, что в молекуле IFNß-1ß содержатся высокоантигенные эпитопы, распознаваемые Т-клетками, которые при введении мышам линии Balb/C вызывали развитие иммунного ответа. Удаление с помощью генно-инженерных методов данных эпитопов в молекуле IFN предотвращало развитие иммунного ответа мышей на препарат. Наличие в аминокислотной цепочки белка IFNa и -ß участков, которые являются Т-клеточными эпитопами, было подтверждено методами in silico. Большое значение в развитии «нежелательной» иммуногенности препаратов IFN играют факторы, связанные с производством и хранением препаратов IFNa. Препараты, получаемые различными производителями, обладают разными биологическими свойствами. Например, IFNß-1b (Betaseron), полученный в системе клеток E.coli, не содержит гликанов, в отличие от гликозилированных препаратов IFNß-1a (Avonex и Rebif), получаемых в системе клеток СНО. Клинические исследования показали, что эффективность IFNß-1ß ниже, чем IFNß-1a, в связи с этим IFNß-1ß вводится в более высоких дозах, чем IFNß-1a. При лечении IFNß-1ß значительно быстрее образуются Ат к препарату, чем при применении IFNß-1a. Частота выработки Ат к препаратам IFNß при в/м введении препарата Avonex составила 2%-6%, тогда как при п/к введении — Rebif в 12%-28% и Betaseron в 28%-47%. С другой стороны, Betaseron обладает плохой растворимостью и имеет склонность к агрегации, которая, как было установлено в исследованиях с удалением стабилизатора (альбумина) из препаратов IFNß, активно влияет на их иммуногенную активность. Сложно установить, что является основным фактором «нежелательной» иммуногенности препаратов IFNß: профиль гликозилирования, состав препарата, путь и частота введения или др. Следует отметить, что лечение пегилированным препаратом IFNß сопровождается выработкой Ат не только к белку препарата, но и к
