Иммунотропная терапия Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Медицинская i а /л lyno. 1 огня 2001, Т. 3, №2 О 2001, СПб РО РААКИ

ИММУНОТРОПНАЯ ТЕРАПИЯ

РОНКОЛЕЙКИН В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ГНОЙНОХИРУРГИЧЕСКОЙ ПАТОЛОГИЕЙ: ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ РАНДОМИЗИРОВАННЫХ, ДВОЙНЫХ-СЛЕПЫХ, ПЛАЦЕБО-КОНТРОЛИРУЕМЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ

Агеев H.JL, Шамрай H.A., Овечкин A.B., Захарова H.A., Стрельцова Е.И., Леплина О.Ю., Черных Е.Р., Останин A.A.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, Россия

Введение. В настоящее время одним из перспективных направлений современной иммунокоррекции и иммунотерапии признается использование медицинских препаратов, основой которых являются цитокины. В хирургической практике, например, уже накоплен опыт по применению рекомбинантного интерлейкина-2 (Ронколейкина) при лечении различных форм инфекции. Однако следует признать, что большинство ранее проведенных клинических испытаний являлись “пилотными”. Поэтому назрела необходимость координированных усилий по оценке эффективности Ронколейкина на более высоком уровне клинических исследований.

Цель исследования. Для решения этой задачи была проведена настоящая работа по изучению эффективности ронколейкина в комплексном лечении больных с гнойно-хирургической патологией в дизайне рандомизированного, двойного-слепого, плацебо-контролируемого исследования.

Материалы и методы. Курс цитокинотерапии включал две подкожные инъекции либо ронколейкина (по 0,5 млн Ед,

1 раз/день, с интервалом в 3 дня), либо препарата-плацебо. При проведении лечения ни лечащий врач, ни пациент не знали о варианте проведения цитокинотерапии (двойное-слепое исследование). Кроме того, больные, включенные в исследование, попадали в экспериментальную или в контрольную группу-плацебо на основе случайного распределения, т.е. в результате процедуры рандомизации. В качестве основного критерия эффективности Ронколейкина использовали отсут-

ствие летального исхода в течение 28 дней после окончания лечения. Исследования были выполнены в группе, включающей 52 человек: 30 (58,0%) мужчин и 22 (42,0%) женщины в возрасте от 16 до 79 лет (41 ±2,0 лет). У большинства больных регистрировались гнойно-воспалительные заболевания органов брюшной полости (30/52; 58%) и раневая инфекция (19/ 52; 36%). Тяжелые осложнения в виде сепсиса (п=20), разлитого гнойного перитонита (РГГ1, п=15) были зарегистрированы у 67,3% (35/52) больных. При оценке степени тяжести обследованных больных средний балл по шкале АРАСНЕ-И в целом по группе составил 4,5±0,6 (0 - 18), по модифицированной шкале SAPS - 7,0±0,5 (0 - 16).

Результаты. Основная группа (п=26) и контрольная группа-плацебо (п=26) были однородны по полу, возрасту, основным нозологическим формам и степени тяжести инфекции.

Использование Ронколейкина проявлялось клиническим улучшением и иммунокорригирующим действием в 69,2% и 61,5% случаев, что значимо отличалось от аналогичных показателей (34,6 и 9,0%) в группе-плацебо (таблица). Особенно четко иммунокорригирующий эффект цитокинотерапии ронколейкином регистрировался при сравнении больных из оппозитных групп с исходно сниженными параметрами иммунитета (абсолютной лимфопенией, или низкой пролиферативной активностью лимфоцитов). Уровень 28-суточной летальности в основной клинической группе и в контрольной группе-плацебо составил 0 и 11,5%, соответственно.

Заключение. Полученные результаты являются предварительными, поскольку запланированные исследования выполнены примерно на 50%. Именно вследствие недостаточного количества больных выявленные различия в уровне летальности в настоящее время можно расценивать лишь как тенденцию, поскольку при сравнении точным методом Фишера частота летальных исходов в анализируемых группах достоверно не различалась (РТМФ=0,117). По завершении испытаний планируется не только провести анализ клинической эффективности ронколейкина в комплексном лечении больных с гнойно-хирургической патологией, но и разработать критерии назначения, прогноза и оценки эффективности цитокинотерапии.

Эффективность лечения “Плацебо” п=26 "Ронколейкин” п=26 РТМФ

Общеклиническая:

Улучшение 9/26 (34,6%) 18/26 (69,2%) 0,012

Без эффекта 10/26 (38,5%) 6/26 (23,1%)

Ухудшение 7/26 (26,9%) 2/26 (7,7%)

Иммунокорригирующая:

Улучшение 2/22 (9,0%) 16/26 (61,5%) 0,0002

Без эффекта 10/22 (45,5%) 8/26 (30,8%)

Ухудшение 10/22 (45,5%) 2/26 (7,7%) 0,003

ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НЕКОТОРЫХ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ЭНДОГЕННОЙ ПРИРОДЫ В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ГНОЙНО-ВОСПАПИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

Алсынбаев М.М., Медведев Ю.А., Бобкова Е.В., Кулагин В.Ф., Исрафилов А.Г., Корженевский A.A., Пахомов Д.В., Попова Е.П., Макеютова Л.Ф., Гизатуллин Р.Х.

ГУН "Иммунопрепарат’’, Башкирский государственный медицинский университет, г.Уфа, Башкортостан, Россия

Иммуномодуляторы эндогенной природы в сравнении с другими иммунопрепаратами отличаются естественностью происхождения, аутентичностью факторам иммунорегуляции организма человека и полипотентными возможностями использования в качестве средств иммунозаместительной и иммуномодулирующей терапии. Гнойно-ссптическая патология, индуцируемая в основном условно-патогенными бактериями, возникает и протекает на фоне нарушенных механизмов иммунной защиты, ввиду чего применение иммунопрепаратов выступает важным компонентом в лечении этих инфекций. В ГУГ1 “Иммунопрепарат” (г. Уфа) за последние годы использование новых биотехнологий переработки донорской крови позволило получить ряд эндогенных иммуномодуляторов с расширенным спектром лечебных возможностей - препараты лейкоцитарного интерферона в виде инъекционной и свечевой форм (ЛИ), иммуноглобулина для внутривенного введения (ИВ) и церулоплазмина (ЦП). Результаты клинического использования препаратов на базах Республиканской и четырех городских клинических больниц раскрывают новые аспекты их возможного применения для лечения гнойно-сеп-тической патологии.

Препараты ЛИ в условиях иммунодефицитных состояний (ИДС) проявляют достаточно широкий спектр иммунокорригирующей активности. Эффективность их применения при инфекциях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, во многом зависит от типа инфекции и характера имеющегося у больного ИДС. ЛИ не дает клинического улучшения (несмотря на положительную динамику некоторых показателен иммунограммы) при хронических рецидивирующих пиодермиях, но существенно улучшает результаты лечения хронических пиогенных процессов висцеральной локализации (остеомиелиты, местные воспалительные поражения органов брюшной полости). В последнем случае применение ЛИ наиболее эффективно у больных при ИДС с избирательной недостаточностью фагоцитарных механизмов защиты, Т- (но не В-) звена иммунной системы, а также при комбинированных ИДС. При системных инфекциях (хирургический сепсис), протекающих в условиях комбинированного ИДС, ЛИ корректируют нарушения как фагоцитарных и Т-опосредованных, так и В-опосрсдованных механизмов иммунной защиты.

ИВ, традиционно применяемый как средство иммуноза-меститсльной терапии, ввиду особенностей модификации биомолекул в ходе производства способен оказывать иммуномодулирующее действие, направленность которого зависит от характера изменений иммуногенеза в процессе заболевания. Предпринятая попытка использования ИВ при лечении гнойно-септической хирургической инфекции позволила разработать схему использования ограниченных доз препарата в качестве нммуномодулятора, обеспечивающего как определенную коррекцию недостаточности эффекторных проявлений активности в В-звене иммунной системы, так и стимулирующее влияние на процессы иммунопоэза и состояние Т-лим-

фоцитарного звена. Иммуномодулирующее влияние ИВ при хирургических инфекциях местного характера также проявляется балансировкой степени активации В- и Т- звеньев иммунной системы.

Биологические свойства ЦП предопределяют применение препарата для стимуляции эритропоэза и активации процессов тканевого дыхания в экстраиммунной иммунотерапии большинства ургентных состояний. Помимо этого белок обладает самостоятельным иммуностимулирующим действием. При гнойно-септической патологии применение ЦП в качестве иммуномодулятора наиболее эффективно у больных с анемией и нарушением транспорта кислорода, однако обеспечивает стимуляцию всех звеньев иммунной системы и вне последних обстоятельств. Ангиоксидантные свойства ЦП делают препарат перспективных для модуляции иммунитета у больных инфекцией с проявлениями системной воспалительной реакции.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОВЕДЕНИЯ ВНУТРИВЕННОЙ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПЕЧЕНИ

Антонов Ю.В., Недогода В.В., Свириденко О.Ю., Панина A.A.

Волгоградская медицинская академия, г.Волгоград, Россия

В последнее время достаточно распространённой является практика применения немедикаментозных методов лечения хронических диффузных заболеваний печени (ХДЗП). Так, в литературе имеются сообщения об использовании ультрафиолетового облучения крови, плазмафереза, внутривенной озонотерапии. В некоторых клиниках широко используется надвенное и внутривенное лазерное облучение крови. Вместе с тем, нет чётких данных о влиянии всех этих методов и, в частности, внутривенной лазеротерапии на иммунный статус больных ХДЗП.

Цель исследования. Проследить изменения иммунного статуса, возникающие в процессе проведения внутривенного лазерного облучения крови (ВЛОК) у больных хроническими диффузными заболеваниями печени (хроническим гепатитами и циррозами ).

Задачи исследования. Изучение состояния иммунного статуса и цитокинового профиля больных хроническими диффузными заболеваниями печени; установление корреляции между степенью тяжести поражения печени и характером иммунных нарушений; определение диагностически и прогностически значимых нарушений иммунного статуса; оценка влияния ВЛОК на состояние иммунной системы у больных ХДЗП.

Методы исследования. Исследование иммунного статуса проводилось по 16 параметрам (число CD3" клеток, CD4+ клеток, CD8" клеток, отношения CD47CD8\ числа CD16", CD 19*, HLA-DR+ клеток, IgA, IgM, IgG, IgE, спонтанного и индуцированного ИСТ теста, ЦИК, факторов комплемента С1-С5), дополнительно определялись интерлейкин-6 и гамма-ин-терферон. Оценку клеточного звена иммунитета проводили с помощью моноклональных антител на проточном цитофлюо-риметре, уровень циркулирующих иммунных комплексов - в реакции с раствором полиэтиленгликоля на спектрофотометре. Иммуноглобулины определяли по методу Манчини - функциональное состояние клеток фагоцитарного ряда - в тесте восстановления нитросинсго тетразолия. Состояние иммун-

Показатель Норма Группа I до ВЛОК Группа I после ВЛОК Группа II до ВЛОК Группа II после ВЛОК

CD4/CD8 1,0-1,5 1,8 1,49 1,8 (2,0 и 0,78) 1,62

ЦИК, ед. До 60 50,16 до 60 99,2 64,2

IL-6, пг/мл - 0,36 0,145 0,57 0,203

IFN-y, пг/мл - 7,07 4,59 8,75 5,88

ного статуса изучали и двух группах больных (I группа - 60 больных хроническими гепатитами, II группа - 22 больных циррозами печени) до и после проведения курса BJ10K (5-10 сеансов по 30-40 минут в зависимости от степени тяжести течения патологического процесса).

Результаты исследования. Наиболее часто наблюдались изменения со стороны пммунорегуляторного индекса (CD47 CD8+), уровней ЦИК, интерлейкина-6 и гамма-интерферона. Полученные данные в виде средних значений представлены в таблице.

Во второй группе среднее значение иммунорегуляторно-го индекса составило 1,8; однако, группа оказалась неоднородной - индекс был повышен у 50% больных (среднее значение 2,0), снижен у 27% больных (среднее значение 0.78). Следует особо отметить, что во 11 группе среди пациентов со сниженным соотношением оказались наиболее тяжёлые больные, у которых наблюдалось осложнённое течение заболевания, в частности, кровотечения из варикозно расширенных вен пищевода, выраженные явления цитолиза.

Выводы. Выявлено повышение уровней ЦИК, гамма-интерферона, интерлейкина-6 у больных ХДЗП, более выраженное у больных циррозами печени. Снижение ранее увеличенного показателя CD47CD8" у больных циррозами печени может иметь неблагоприятное прогностическое значение. Внутривенное лазерное облучение крови не оказывает негативного воздействия на иммунную систему больных ХДЗП. Применение ВЛОК у больных хроническими диффузными заболеваниями печени с целью иммунокоррекции представляется оправданным.

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА СУПЕРЛИМФ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ

Баранова.В.В., Снимщикова И.А.*, Крестинин В.О, Юдина С.М., Русанова Т.С.

Курский медицинский университет,

Курск,

Орловский госуниверситет *,

Орел, Россия

В настоящее время установлена важная роль нейтрофи-лов и продуцируемых ими медиаторов в патогенезе острого воспаления, Известно, что секреторный потенциал нейтрофи-лов значительно расширяет эффекторные возможности фагоцитов и во многом определяет течение и исход воспалительного процесса.

Учитывая это, а также данные ряда авторов о цитокино-вой регуляции системы нейтрофильных гранулоцитов, нами было изучено in vitro влияние препарата Суперлимф на функциональную активность нейтрофилов доноров и больных с гнойно-воспалительными процессами матки и ее придатков. При этом оценивали адгезивную, цитотоксичсскую, метаболическую и апоптотическую способности клеток. Нейтро-

филы выделяли, используя двойной градиент плотности фи-колл-верографина, и обрабатывали препаратом Суперлимф в дозах 5 и 10 мкт/мл. Результаты проведенных исследований показали, что инкубация нейтрофилов доноров с указанным препаратом приводила к повышению как спонтанной, так и стимулированной продукции миелопероксидазы, причем эффект был более выражен при использовании Суперлимфа в дозе 10 мкг/мл. Вместе с тем, обработка препаратами нейтрофилов больных сопровождалась дозозависимым снижением данных показателей. Как известно, наряду с миелопероксидазой, в формировании бактерицидности имеют значение свободные радикалы (супероксидный анион, синглетный кислород, гидроксильный радикал) и перекись водорода, продуцируемые фагоцитами и обладающие не только защитным действием, но и большим деструктивным потенциалом по отношению к клеткам и тканям. Экспериментально установлено, что обработка Суперлимфом нейтрофилов доноров приводила к усилению спонтанной и люминолиндуцированной хемилюминесценции (ХЛ), что, вероятно, связано с примирующим действием цитокинов. При анализе этих показателей у больных воспалительными заболеваниями матки и ее придатков выявлено иммуномодулирующее действие препарата на нейтрофилы: повышение исходно сниженной спонтанной и люминолиндуцированной ХЛ и снижение - исходно повышенной. В обоих случаях наиболее выраженный эффект наблюдался при использовании дозы Суперлимфа 10 мкг/мл. Кроме того, установлено, что инкубация нейтрофилов больных с препаратом сопровождалась дозозависимым снижением их адгезивной и цитотоксической активности, что имеет важное значение в течении и исходе воспалительного процесса. В последние годы доказано, что некоторые цитокнны (IL-1 (3, IL-6, TNFa, GM-CSF, IFNy) оказывают позитивное влияние на жизненный цикл нейтрофильных гранулоцитов, защищая их от апоп-тоза, как результата негативной активации, вызванной действием различных апоптогенов (ионизирующего излучения, глюкокортикостероидов, микробных агентов и др.) и тем самым увеличивая количество функционально полноценных клеток, обеспечивающих эффективную защиту от микроорганизмов в очаге воспаления. Учитывая это, мы исследовали влияние Суперлимфа на апоптотическую активность нейтрофилов. Апоптоз нейтрофилов оценивали методом цитоф-люоресцентного анализа и по экспрессии индукторного фактора апоптоза CD95. При этом установлено, что обработка in vitro нейтрофилов доноров и больных препаратом приводила к значительному снижению апоптоза нейтрофилов.

Таким образом, результаты экспериментальных исследований показывают, что Суперлимф оказывает дозозависимое влияние на функциональную активность нейтрофилов, патогенетически значимо модулируя их провоспали-тельные эффекты: снижает адгезию, цитотоксичность и апоптоз, корригирует, в зависимости от исходного состояния, кислородзависимый метаболизм и продукцию миелопероксидазы.

ВЛИЯНИЕ Т-ЛИМФОЦИТОВ НА ВОССТАНОВЛЕНИЕ ГЕМ0П0ЭЗА ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АУТОЛОГИЧНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

Бахтин С.И., Глазанова Т.В., Розанова O.E., Павлова И.E., Моисеев С.И., Нуйя М.Л., Бубнова Л.Н., Абдулкадырои K.M.

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии ,

Санкт-Петербург, Россия

В ретроспективное исследование были включены 56 больных гемобластозами, которым в качестве интенсификации лечения была выполнена трансплантация аутологичных периферических стволовых клеток (аутоТПСК) или трансплантация аутологичного костного мозга (аутоТКМ). Средний возраст пациентов составил 29 лет (от 15 до 54 лет). 16 больным выполнена аутоТПСК (группа 1) и 40 больным выполнена аутоТКМ (группа 2). Группы больных были равнозначны по возрастному, половому признакам и периоду времени от установления диагноза до трансплантации.

Основными режимами праймирования периферических стволовых клеток в группе 1 были: циклофосфан (Су) 7 г/м2 или Су 7 г/м2 + G-CSF (5цг/кг), кондиционирования в 1 и 2 группах: Bu + Су, Bu + Су + Vp-16, BEAM, ТАСС, UCN, LACE. Больным 1-й группы в процессе трансплантации стволовых клеток было инфузировано в среднем 3,8±0,13 х 10* ядерных клеток на кг веса больных, больным второй группы - 1,8±0,11 х 10“ ядерных клеток на кг веса больных. При заготовке трансплантата достаточным считалось количество CD34 для аутоТПСК >3,5 х Ю6 на кг, а для аутоТКМ >2,0 х 106 на кг.

Было изучено влияние отдельных субпопуляций лимфоцитов трансплантата CD3 , CD4 , CD8 , CD 16 , CD22 на приживление. Приживление трансплантата оценивали по возрастанию в периферической крови уровня лейкоцитов >1,0 х 10‘7л, гранулоцитов >0,5 х 109/л, тромбоцитов >20,0 х 107л.

Приживление трансплантата наступало быстрее после трансплантации аутологичных периферических стволовых клеток, чем после трансплантации аутологичного костного мозга (нейтрофилов, в среднем на 20,7±3,8 и 27,5±1,6 день, тромбоцитов 17,1+2,4 и 35,2±4,6 день, соответственно).

Пациентам 1 и 2 групп в составе трансплантата инфузировано CD3 клеток 1,25±0,12 х 10s на кг и 0,79±0,21 х 10s на кг, соответственно. В обеих группах время восстановления нейтрофилов коррелировало с количеством инфузированных CD3 клеток (г 1 =0,873 и ['2=0,781). Если больные получали >1,5х 10” на кг (группа 1) и >0,75 х 108 на кг (группа 2) приживление нейтрофилов происходило на 15,8± 1,3 и 21,5±2,8 дни, соответственно. Если больные получали <1,5 х 108 на кг (группа 1)и<0,75х 10* на кг (группа 2) приживление нейтрофилов происходило на 26±2,8 и 30± 1,8 дни, соответственно (р<0,05).

Корреляции между другими субпопуляциями лимфоцитов и приживлением установлено не было.

Таким образом, установлено, что количество Т-лимфоци-тов (CD3 клеток), входящих в состав аутологичного трансплантата могут влиять на восстановление гемопоэза после трансплантации аутологичных стволовых клеток. По-видимо-му, при заготовке трансплантата для выполнения трансплантации аутологичных стволовых клеток необходимо учитывать количество заготовленных Т-лимфоцитов.

ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ПРЕПАРАТАМИ ТИМУСА КОМПЕНСИРУЕТ НАРУШЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ КРЫС ПОСЛЕ ОЖОГОВОЙ ТРАВМЫ

Бекман Э.М., Семочкин С.В., Баранова О.А., Арион В.Я.

Научно-исследовательский институт физикохимической медицины М3 РФ, Москва

Введение. Дисфункция нейтрофилов после ожоговой травмы, в том числе нарушение фагоцитоза, широко освещена в литературе. Такое внимание к проблеме обусловлено тем, что нейтрофилы оказывают выраженное положительное воздействие на течение посттравматического процесса: осуществляют эрадикацию патогенных микроорганизмов поврежденных тканей, обеспечивает антиоксидантную защиту организма, а непосредственно в ране регулирует процессы репарации кожи. В то же время их гиперактивное состояние несет в себе и отрицательный момент: нейтрофилы периферической крови после ожоговой травмы накапливаются и разрушают ткани первично интактных органов вне очага поражения (легкие, печень, слизистые желудка и др).

Цель работы. Исследовать регуляторное влияние имму-нотропных препаратов тимуса на фагоцитоз при экспериментальной ожоговой травме у крыс. Для этого проводили комплексную оценку до и после травмы следующих показателей: адгезивная способность нейтрофилов периферической крови, активность ферментов миелопероксидазы (МПО) и кислой фосфатазы (КФ) в покое и при стимуляции, а также экскреция активных форм кислорода по уровню хемолюминисцен-ции (XJ1). В качестве иммуннокоррегирующих агентов использовали препараты, выделенные из тимуса крупного рогатого скота: известный пептидный препарат - Тактивин (ТА) и новый рибонуклеиновый - Риботим (РТ), состоящий, в основном, из низкомолекулярных тимусных РНК (оба препарата разработаны в нашей лаборатории).

Материалы и методы. Исследование проводили на трех группах крыс Вистар (всего 79 животных): гр. Н - до ожога; гр. К - после ожога, без иммунокоррекции; гр. ТА и гр. РТ -после ожога крысы получали по 0,2 мг/кг ТА или по 1мг/кг РТ, соответственно, два раза в неделю в течении 4-5 недель. Оценка всех показателей - на 4, 9, 15 и 30 день после травмы. Ожоговую травму (20% поверхности тела, IIIA степени) наносили по стандартной методике. Определение функциональной активности фагоцитирующих клеток проводили при помощи комплекса спектрофотометрических методов. Образование активных форм кислорода оценивали в тесте люминол-зависимой XJ1.

Основные результаты. Установлено, что изменение активности фагоцитирующих клеток крови крыс после ожога происходит со сменой фаз, иллюстрируя на примере иммунной системы развитие общего адаптационного синдрома Се-лье. Так, на четвертый день, характеризующий фазу постожо-гового гиперметаболического состояния (реакция тревоги; экстренная мобилизация защитных сил организма) в гр. К резко возрастает адгезивная и ферментативная активность фагоцитов: уровень адгезии 72,5±4,2% против 53,3±3,2% в группе Н; одновременно достоверно повышается уровни МПО и КФ. Иммунокоррекция ТА снижает показатели до нормы, а РТ повышает их в два раза. В гр. К растут также показатели ХЛ, которые удается снизить с помощью иммунокоррекции. К 15-му дню, когда адаптивные возможности исчерпываются (стадия истощения, период вторичной бактериемии) в группе К резко падает активность ферментов, примерно в два раза по

сравнению с группе Н. В этих условиях РТ эффективно компенсирует истощение функциональных возможностей нейт-рофилов.

Заключение. Результаты экспериментов указывают на то, что в изученной модели ожог сопровождается развитием фа-зово-протекающего иммунодефицитного состояния. Препараты тимуса в различной степени влияют на функциональную активность фагоцитов: ТА значимо предотвращает гиперактивность иммунной системы на ранних сроках после травмы, а РТ - эффективно устраняет истощение резервных возможностей иммунной системы, наступающее через 2-3 недели после ожога. Это, по-видимому, связано с разными механизмами действия препаратов: известно, что РНК-содержащие препараты действуют на фагоциты непосредственно, а полипептид-ные - опосредованно, через модуляцию цитокиновой активности лимфоцитов. Эффективность РТ, возможно, также объясняется особой ролью регуляторной РНК в процессе регенерации кожи. Важно, что иммунокоррекция положительно влияет как на функциональную активность фагоцитов, так и на процесс заживления ожоговых ран, что было показано нами в предыдущих исследованиях.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ОБОСНОВАНИЮ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ В ГИНЕКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Березина Л.А., Куляшова Л.Б., Иванова М.Б., Минкевич К.В., Карцева Н.А.

Больница Святого Великомученика Георгия,

Санкт -Пет ербург, Россия Государственный медицинский университет им. академика Павлова,

Санкт-Петербург, Россия

Было проведено иммунологическое обследование 26 женщин в возрасте 19-35 лет с диагнозом острый аднексит или обострение хронического аднексита. Обследование включало в себя иммунофенотипирование лимфоцитов с помощью моноклональных антител в цитотоксическом тесте, реакцию торможения миграции лейкоцитов с использованием фитоге-магглютинина (ФГА), характеристику фагоцитарной функции нейтрофилов, определение концентрации иммуноглобулинов классов IgA, IgM, IgG и иммуноглобулина класса IgE, а также уровень циркулирующих иммунных комплексов.

Пациентки составили две группы. В первую, контрольную, группу, вошли 13 женщин, которым проводили лечение аднексита по традиционной методике - антибактериальная терапия, витаминотерапия в течение 10-14 дней. 13 женщинам, составляющим вторую группу, проводился дополнительно курс лазеротерапии из 5 сеансов. Лазеросканирование проводилось ежедневно или через день, начиная с первого дня антибактериальной терапии. Был использован полупроводниковый лазерный аппарат АЛ-6000 (ООО АЛКОМ Медика) в терапевтическом режиме с использованием насадки для формирования параллельного пучка с диаметром оптического луча 3 мм. Проводили облучение надлобковой зоны и поясничной области бесконтактным методом.

Иммунный статус исследовали непосредственно перед лечением и через 3-5 дней после окончания терапии.

Полученные результаты позволили установить при первичном обследовании у 11 пациенток нормальное количество CD3 Т-лимфоцитов; у 13 женщин число Т-клеток было существенно ниже нормы. Количество CD 4 клеток было снижено у 15, а количество CD8 цитотоксических лимфоцитов -у 13 пациенток. После лечения у 3 женщин контрольной груп-

пы число зрелых Т-клеток оставалось на низком уровне, в то время как после лазеротапии у 7 человек количество CD3 лимфоцитов соответствовало нормальному количеству, а у 6

- было достоверно выше. Количество CD4 Т-хелперов у женщин первой группы после лечения в 6 случаях оставалось на низком уровне, во второй группе снижение количества этих клеток было выявлено только у 1 пациентки, у 2 - показатели превышали нормальное значение. Число CD8 лимфоцитов у

6 больных контрольной группы оставалось на низком уровне, после лазеротерапии недостаточное количество этих клеток наблюдали у 2 женщин, у 3 количество цитотоксических лимфоцитов превышало нормальный уровень.

Количество CD20 В-лимфоцитов, натуральных киллеров (CD 16 ), активированных Т-лимфоцитов (CD 25 ) до и после лечения существенно не изменилось, как и показатели миграционной активности, фагоцитарной функции лейкоцитов, концентрация иммуноглобулинов классов IgA, IgM, IgG.

У 12 пациенток при первичном обследовании была выявлена гипериммуноглобулинемия IgE - 300-900 кЕ/л, при норме 20-100 кЕ/л. После лечения повышенный уровень lg Е оставался у 4 женщин в каждой группе.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о пролиферирующем влиянии лазера на Т-лимфоциты, что обосновывает преимущественное использование лазеротерапии у пациентов с выраженным угнетением Т-клеточного иммунитета.

ВЛИЯНИЕ ДАЛ АР ГИ НА НА СУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ СОСТАВ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ КРУПНЫХ БРОНХОВ У ДЕТЕЙ С ПРОСТОЙ ГИПОПЛАЗИЕЙ ЛЕГКОГО

Боровская Т.Ф., Рыбальченко Я.H., Махотин A.A., Пичугина С.В., Самарская Е.М., Козлов В.К.

Хабаровский филиал ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства, Детская краевая больница №2, Детская городская больница №2, Хабаровск, Россия

Введение. Слизистая оболочка бронхов является “входными воротами” для инфекции, а эпителий бронхов рассматривается как пограничная зона, отражающая реакцию поверхности тела и внутренней среды организма. Нормальное строение слизистой оболочки бронхов в норме поддерживается межклеточными взаимодействиями. В условиях хронического воспаления у детей с простой гипоплазией легкого происходят выраженные иммунные, воспалительные, дистрофические и склеротические изменения.

Цель исследования. Определение состава иммунокомпе-тентных клеток слизистой оболочки бронхов у детей с простой гипоплазией легкого до и после проведенной стандартной терапии и при использовании в комплексном лечении больных даларгина.

Материал и методы. Нами обследовано 32 больных с простой гипоплазией легкого на фоне стандартной схемы лечения. Испытуемой группе (п=18) дополнительно в/м вводили даларгин в дозе 1 мг в сутки в течение 10 дней. Доза введения препарата была минимальной, так как по данным N.H. Spector (1990) высокие дозы подавляют, а низкие усиливают иммунные реакции.

Популяции и субпопуляции клеток лимфоидного ряда слизистой оболочки бронхов идентифицировали иммунофлюо-ресцентным методом с использованием МКА серии ИКО (ВОНЦ РАМН) на проточном цитометре FACScan фирмы

“Becton Dickinson”. Забор кусочков слизистой оболочки на уровне среднедолевого и нижнедолевого бронхов производили биопсийными щипцами Moden ЕВ-20С с помощью бронхоскопа Olympus BF type 1Т-10 (Япония). Выделение лимфоцитов из ткани проводили по методу С,Л. Несгерчук с соавт. (1994).

Основные результаты. При исследовании показателей клеточного звена иммунитета слизистой оболочки бронхов у детей с простой гипоплазией легкого на фоне лечения стандартными схемами, отмечали снижение процентного содержания Т-лимфоцитов (CD3 ) до 30,86±3,М%, Т-хелперов (CD4 ) до 25,26±3,03%, Т-супрсссоров (CD8 ) до 24,38±2,89%, лимфоцитов, несущих на мембране клеток рецепторы к антигенам CD 16 до 13,15±5,55% по отношению к контролю. Кроме того, регистрировали активацию гуморального звена иммунитета слизистой оболочки бронхов в виде повышения уровня иммуноком-петентных клеток, несущих на мембране рецепторы к CD50 (25,83±3,18%), CD71" (22,06±2,32%), CD20 (39,86±5,47%), IgG (35,20±3,64%). Низкоаффинный рецептор к IgE CD23 в сопоставляемой группе имел тенденцию к снижению (32,25±6,96%) по сравнению с группой контроля (41,97±9,02%). При использовании в комплексном лечении больных даларгина регистрировали изменение иммунологических показателей слизистой оболочки бронха в сравнении с группой больных, получавших стандартные схемы лечения, в виде увеличения процентного содержания клеток, несущих на мембране CD3 (43,25± 1,45%), CD4 (31,5±3,60%), CD8 (28,85±0,85%), CD16(22,45±2,43%). Показатели гуморального звена иммунитета слизистой оболочки бронхов характеризовались, снижением числа CD20 (15,45±6,25%), CD50 (20,85±1,55%), CD7f (19.40±13,5%) клеток.

Заключение. При воздействии внутриклеточных бактерий и вирусов на организм происходит снижение защитных факторов иммунной системы, в результате чего происходит снижение активации макрофагальной системы, процессов фагоцитоза и антигенной переработки, угнетение популяции Т-лимфоцитов. Полное завершение воспалительного процесса характеризуется нормализацией иммунных показателей, причем, число Т-лимфоцитов приходит к норме последним. Возможно, этот показатель является одним из критериев окончания воспалительного процесса. В настоящее время доказано, что опиодные пептиды играют важную роль в регуляции иммунных механизмов. Поэтому применение даларгина в комплексной терапии больных простой гипоплазией легкого в качестве иммуномодулятора является обоснованным и крайне необходимым.

ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ С ОЖОГАМИ ПРИ КОНТАКТЕ ИХ КРОВИ С УГОЛЬНЫМ СОРБЕНТОМ СКТ-6А-ВЧ IN VITRO

Буркова Н.В., Эйсмонт Ю.А., Соломенников A.B., Арсениев H.A., Джурко Б. И., Крецер И.В., Кузнецова JI.A., Крылов K.M., Шлык И.В., Кузнецов С.И.

Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования, Научно-исследовательский институт скорой помощи им.И. И.Джанелидзе,

Санкт-Петербург, Россия

Контакт крови с сорбционными препаратами в процессе гемоперфузии сопровождается активацией лейкоцитов, в результате которой реализуется их стереотипный ответ - индукция генерации активных форм кислорода АФК. Процесс ге-

нерации нейтрофильными лейкоцитами АФК мы рассматриваем как один из компонентов твердофазной контактной гемомодуляции, которая сопровождается образованием в крови большого разнообразия биоактивных молекул, что играет ведущую роль в оказании лечебного эффекта, возникающего в результате проведения сеанса гемосорбции.

В настоящем исследовании была предпринята попытка охарактеризовать реакцию лейкоцитов доноров и больных ожоговой болезнью при контакте их крови с угольным сорбентом СКТ-6А-ВЧ в условиях in vitro, чтобы в дальнейшем оценить, насколько редокс-регуляция будет способствовать заживлению ожоговых ран.

В условиях in vitro была исследована кровь 8 больных с ожогами различной степени. Контрольную группу составили 8 доноров. Кровь забирали из локтевой вены или из подключичного катетера в шприц с гепарином (25 Ед/мл) и инкубировали с сорбентом в шприце в ротационном режиме при комнатной температуре. У доноров исследовали пробы крови до начала контакта и через каждые 20 мин в течение 2-х часов; у больных точки проведения анализов были - до, 20, 40 и 60 мин. В пробах крови исследовали: 1) динамику клеточного состава крови; 2) способность клеток генерировать АФК в спонтанном и индуцированном (зимозан) режимах методом люминолзависимой хемилюминесценции (XJI) (люминометр LKB-Wallac 1251, Швеция); 3) флюоресценцию плазмы крови, что является отражением перекисного окисления (анализатор “СТЭМ”, ГОИ им.С.И.Вавилова, Россия); 4) некоторые биохимические показатели крови на многопрофильном анализаторе Stat Profile Ultra, (США).

Полученные результаты свидетельствуют, что с увеличением времени инкубации угля с кровью растет показатель, который характеризует удельную ХЛ. В группе доноров ХЛ начинает снижаться только со 100 мин инкубации. Причем динамика однотипна для спонтанной и индуцированной ХЛ как в группе доноров, так и в группе больных. Возрастание ХЛ (наряду с адгезионными процессами) объясняет резкое снижение глюкозы в плазме, так как за счет ее окисления через глюкозомонофосфатный шунт обеспечивается поставка необходимой энергии, в результате чего происходит “респираторный взрыв” в клетке с образованием АФК. У здоровых доноров происходила более интенсивная утилизация глюкозы. Уже через час содержание ее в крови составило всего 5% от исходного значения. В то же время у пострадавших с термическими поражениями снижение содержания глюкозы было значительно менее выраженным и через час после начала сорбции содержание глюкозы в крови составило 26% исходного значения.

Генерацию АФК нейтрофилами можно рассматривать как начальный этап процесса свободнорадикального перекисного окисления липидов (ПОЛ), а возрастание концентрации продуктов ПОЛ - как универсальный механизм повреждения биомембран и макромолекул. Исходя из наших данных об усилении генерации АФК в процессе гемоконтактной процедуры, следовало бы ожидать увеличения продуктов ПОЛ в исследуемых образцах плазмы в те же сроки. Однако, полученные нами результаты регистрации ПОЛ флуоресцентным (ФЦ) методом свидетельствуют об обратном. Концентрация флуоресцирующих метаболитов в плазме постоянно снижается как в группе больных, так и доноров. Уменьшение концентрации продуктов ПОЛ в процессе процедуры, при увеличении количества агентов их образующих (АФК), очевидно, можно объяснить реализацией сорбционных свойств активированного угля.

Таким образом, индукция генерации АФК является прямым подтверждением развития активационных процессов в

клетках, запускающихся в результате твердофазной контактной гемомодуляции. Исходя из регуляторных представлений, кратковременную и скомпенсированную генерацию АФК, очевидно, можно рассматривать как один из лечебных факторов гемоконтактной процедуры. Надо полагать, что взаимоотношения АФК и перекисного окисления имеют достаточно сложный характер, так как ХЛ и ФЦ представляют собой результирующую величину процессов генерации, поглощения и взаимодействия АФК с сорбентом и макромолекулами.

ПРИМЕНЕНИЕ ОКСИМЕТАЦИЛА В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ

Вагапова Д.Р., Кляшева М.Н.

Республиканская клиническая больница им. Г. Г. Куватова, г. Уфа,

Башкирский государственный медицинский

университет,

г. Уфа, Россия

Введение. Хронический пиелонефрит представляет собой одну из наиболее важных проблем нефрологии. Это заболевание характеризуется распространенностью, склонностью к хроническому течению и в ряде случаев приводит к формированию хронической почечной недостаточности. Причиной развития инфекционного процесса в ткани почек и чашечнолоханочной системы является снижение реактивности организма. В свою очередь, длительно протекающие воспалительные процессы приводят к вторичным иммунодефицитным состояниям. Наряду с этим, традиционные методы лечения с применением антибиотиков способствуют, также, усугублению иммунодефицита. Поэтому включение в комплекс традиционных лечебных средств иммунотропных препаратов является обоснованным и необходимым.

Цель работы. Оценка эффективности применения окси-метацила в комплексном лечении больных хроническим пиелонефритом на основе анализа показателей неспецифического, гуморального и клеточного иммунитета.

Материалы и методы. Исследование состояния иммунитета проведено у 30 больных в возрасте от 18 до 60 лет со средней длительностью заболевания 15±1,4 года. Больные хроническим пиелонефритом получали антибактериальную терапию с включением препарата оксиметацил в дозе 50 мг 2 раза в сутки в течении 10 дней.

Оценка иммунного статуса включала определение содержания субпопуляций лимфоцитов методом непрямой иммунофлюоресценции (СОЗ, С04, С08, С022, СО 16) с помощью моноклональных антител (“Медбиоспектр”, Москва), исследование фагоцитарной активности нейтрофилов с частицами латекса с расчетом фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа, метаболической активности нейтрофилов в НСТ-тес-те, количественное определение сывороточных иммуноглобулинов классов О, А, М методом радиальной иммунодиффузии, определение комплементарной активности крови по 50% гемолизу.

Результаты. Проведенные исследования показали значительное улучшение показателен иммунного статуса больных хроническим пиелонефритом, которые получали комплексную терапию с включением оксиметацила.

Установлено повышение числа СОЗ клеток (69,3±1,2%, до лечения 54,3±0,9%; р<0,001), С04 клеток (38,0±0,7%, до лечения 24,6±0,5%; р<0,001), СО 16 клеток (13,6±0,4%, до лече-

ния 6,0±0,3%; р<0,001), CD22 клеток (11,8±0,4%, до лечения 7,8±0,6%; р<0,001).

У больных, в комплекс лечения которых был включен оксиметацил уровень Ig А увеличился 1,2 раза и составил 3,3±0,1 г/л (до лечения 2,6±0,09 г/л; р<0,001).

В процессе комплексного лечения у больных хроническим пиелонефритом наблюдалось значительное улучшение состояния неспецифических клеточных и гуморальных факторов защиты. Фагоцитарный индекс увеличился в 1,3 раза и составил 68,9±1,4% (до лечения 50,1±1,0%; р<0,001), фагоцитарное число повысилось в 1,6 раза и составило 7,5±0,2 (до лечения 4,5±0,1; р<0,001). Усилилась метаболическая активность нейтрофилов, что выразилось в увеличении числа клеток, восстанавливающих нитросиний тетразолий до 14,6±0,2%, до лечения 10,5±0,4% (р<0,001) Комплементарная активность после лечения у больных практически достигла уровня показателей здоровых лиц (69,1 ± 1,9, до лечения 48,7±1,2; р<0,001).

Выводы. Проведенный анализ показал, что применение оксиметацила в комплексном лечении хронического пиелон-фрита увеличивает объем Т-клеточной популяции, нормализует соотношение иммунокомпетентных клеток, повышает содержание клеток с маркерами естественных киллеров, восстанавливает фагоцитарную активность лейкоцитов, усиливает метаболическую активность нейтрофилов, положительно влияет на гуморальное звено иммунитета, что подтверждается достоверным увеличением концентрации иммуноглобулина А.

Таким образом, оксиметацил обладает высокой иммуномодулирующей активностью и может быть рекомендован для включения его в комплексную терапию хронического пиелонефрита.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У БОЛЬНЫХ С ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ПИГМЕНТНОЙ АБИОТРОФИЕЙ СЕТЧАТКИ (ППАС) И ИХ ИЗМЕНИЕНИЯ ПОД ВЛИЯНИЕМ РЕТИНАЛАМИНА

Васильева Л.А., Пасхина М.Н.

Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН,

Россия

Распространенность ППАС среди населения весьма значительна: 1 случай на 5000-10000 населения. Патогенез заболевания до настоящего времени не ясен. A.Rahmi (1973) изучая содержание иммуноглобулинов у 52 больных с ППАС и в контроле выявил повышенный уровень иммуноглобулина М у больных с ППАС, что позволило автору предположить, что некоторые формы пигментной абиотрофии являются не просто наследственным, но и иммунологическим заболеванием. Результаты исследований, проведенных С.Е.Стукаловым и С.Л. Писаренко (1980) так же свидетельствовали, что при выраженных изменениях сетчатой оболочки при пигментных абиотрофиях развиваются явления аутосенсибилизации. С. Heredia et al. (1994) показали, что в патогенезе пигментных абиотрофий учавствуют иммунокомплексы.

Целью нашей работы являлось изучение состояния иммунного статуса у больных с ППАС и влияния ретиналамина на иммунологические показатели. Клинические исследования включали наблюдения над 103 больными, 56 из которых было проведено иммунологическое обследование. При проведении этих исследований большое внимание уделялось комплексной оценке иммунного статуса: определяли Т-лимфоциты (Е-

РОК), В-лимфоциты (М-РОК), теофиллин-резистентные и чувствительные Е-лимфоциты, розсткообразующие нейтро-филы (Е-РОН), фагоцитарную активность нейтрофилов, а также функцию лимфоцитов в реакции торможения миграции (РТМЛ) с митогеиами, иммуноглобулины, ЦИК, С-З-компо-нент комплемента. Выявлено, что у больных имелись нарушения в Т-системе иммунитета, о чем свидетельствует достоверное снижение количества Т-лимфоцитов (1,23±0,09 вместо 1,7±0,2) и их субпопуляций Т-хелперов и Т-супрсссоров. Наряду с этим выявлено нарушение функциональной активности Т-лимфоцитов. Выявлено достоверное увеличение количества В-лимфоцитов с 0,33±0,07 до 0,49±0,04. Наблюдалось так же снижение уровня ЦИК и С-З-компонента комплемента. Повторное иммунологическое обследование пролеченных рстиналамином больных показало, что не произошло существенных изменений со стороны количественных и функциональных показателей Т-системы иммунитета. Наряду с этим имеет место несущественное уменьшение сенсибилизации организма к антигенам сетчатки 93,0±4,55 до лечения и 98,4±7,79 после лечения в разведении 1:9; 92,5 ±6,84 до лечения и 95,0±8,03 после лечения в разведении 1:19. Не отмечается статистически достоверного влияния ретиналамина на состояние гуморального звена иммунитета, за исключением незначительного увеличения содержания С-З-компонента комплемента (от 0,69±0,03 до лечения до 0,74±0,04 после лечения), а так же снижение фагоцитарной активности. Статистически недостоверно влияние ретилина на показатели неспецифической резистентности организма.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о неспецифическом влиянии ретиналамина на показатели клеточного и гуморального иммунитета и неспецифической резистентности.

ЦИТОКИНОВЫЕ МРНК ВЛИЯЮТ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ КЛЕТОК К АЛЬФА-ИНТЕРФЕРОНУ

Вершинина М.Ю., Наровлянский A.H., Амченкова А.М., Мезенцева М.В., Ершов Ф.И.

НИИ эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН,

Москва

Клеточная чувствительность к интерферонам (1FN) в настоящее время является одним из основных параметров, характеризующих систему интерферона на клеточном и орга-низменном уровнях. Показаны существенные отличия в метаболизме IFN-чувствительных и IFN-нечувствительных клеток. В последнее время активно проводятся исследования цитокиновых мРНК в различных линиях клеток в попытке определить роль цитокинов в ответе клеток на то или иное воздействие. Установлено, что IFN-a и его индукторы могут усиливать дифференцировку клеток в направлении Th 1 -типа иммунного от вета, который, в основном, ассоциируется с продукцией IFN-y, IL-2 и TNF. Целью настоящей работы явилось сравнительное изучение активности цитокиновых мРНК в линиях клеток с различной IFN-чувствительностью при их обработке IFN, ингибитором действия 1FN и индуктором 1FN, чтобы выявить роль цитокиновых мРНК в клеточной чувствительности или резистентности к IFN-a .

Исследования были проведены на линиях перевиваемых клеток моноцитарной лейкемии человека J-96 и J-41. В эксперименте был использован рекомбинантный человеческий аль-фа2-интерферон (реаферон) с активностью 10(' ME/мл, инги-

битор действия интерферона (ИДИ) с активностью 32 интер-ферон-ингибирующих единицы (ИИЕ)/мл и препарат Каго-цел. Выделение РНК проводили по методике P.Chomczynsky, N.Sacchi. RT-PCR выполнялась с парами праймеров для следующих цитокинов: IFN-гамма, IFN-альфа, IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a.

Показано, что в культуре клеток J-96 конститутивно присутствует тРНК пяти из исследуемых восьми пар цитокинов, а именно: IFN-a и у, IL-1, IL-6 и TNF-a, в то время как в клетках линии J-4I - тРНК трех цитокинов: IL-1, IL-6, TNF-a. В клетках J-96 при обработке IFN активируется тРНК для IL-2 и IL-4. В сублинии J-41 при обработке IFN исчезает тРНК цитокинов, конститутивно присутствующих в контрольной культуре клеток J-41. При обработке клеток J-96 ИДИ или препаратом Кагоцел не было обнаружено изменений в активности цитокиновых мРНК по сравнению с контрольной культурой. В то же время при обработке клеток IFN-нечувстви-тельной культуры J-41 ИДИ наблюдали полное исчезновение активности цитокиновых мРНК, подобно тому, что мы наблюдали при обработке клеток J-41 IFN. Обработка клеток IFN-нечувствительной культуры J-41 Кагоцелом наоборот приводит к активации мРНК для IFN-a, IFN-y и IL-2.

Таким образом, показано, что, по-видимому, клеточная IFN-нсчувствительность может быть связана с отсутствием в клетках конститутивной экспрессии мРНК для IFN-a и -у, что приводит к подавлению IFN-индуцированных цитокиновых ответов и углублению IFN-дефицита. Однако, такое состояние может коррегироваться индукторами IFN, восстанавливающими экспрессию мРНК для IFN-a и -у.

ВЛИЯНИЕ ТИАМИНА НА ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ СТРЕССЕ

Виноградов С.В., Якубчик A.A., Мороз B.JL, Горецкая М.В.,

Гродненский государственный медицинский университет, Кафедра анестезиологии и реаниматологии, Институт биохимии НАНБ, Региональный эндокринологический научно-практический центр

Предложенная Selye (1936) модель иммобилизационного стресса стала общепринятым способом воспроизведения гормонально-обусловленной иммуносупрессии. Многочасовая фиксация животных в положении лежа на спине вызывает лим-фопснию [Горизонтов и др. 1983.], миграцию Т-лимфоцитов в костный мозг [Шахов и др. 1999], инволюцию тимуса и селезенки [Tarcic N. et al 1995], снижение на 59 и 96% секреции IL-2 в лимфоузлах и селезенке, соответственно [Sheridan et al. 1991 ].

Иммобилизационный стресс (restraint) снижает экспрессию генов IL-2 и c-fos в культуре переживающих Т-лимфоцитов [Корнева Е.А. и др. 1999].

В наших опытах, выполненных на крысах-самцах линии Wistar (массой 130-150 г.) с моделированием стрессорной иммуносупрессии по классической схеме показано отчетливое снижение уровня В-лимфоцитов в крови через 1-48 ч. иммобилизации и снижение в эти же сроки функциональной активности Т-лимфоцитов.

Тиамин-хлорид (200 мг/кг за сутки до иммобилизации, затем через каждые 24 часа и последняя инъекция за 2 часа до забоя), являющийся мощным антистрессором [Виноградов, 1984] уменьшает лимфопению и восстанавливает включение С14-™-мидина в ДНК при исследовании спонтанной пролиферации Т-лимфоцитов и ее активации митогенами (LPS, PKW, FGA).

Полученные результаты обсуждаются с позиции концепции витаминно-гормональных связей, которая не требует привлечения гипотезы коферментного механизма [Vinogradov et al. 1987].

ДЕЙСТВИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТА С НА КИНЕТИКУ МОДУЛИРОВАННОГО АП0ПТ03А НЕЙТРОФИЛОВ ЧЕЛОВЕКА

Винокуров М.Г., Юринская М.М., Прохоренко И.Р., Гражданкин Е.Б., Косякова Н.И., Печатников В.А.

Институт биофизики клетки РАН,

Институт фундаментальных проблем биологии РАН, г. Пущине, Россия

Ключевым механизмом поддержания структурно-функционального постоянства органов и тканей организма человека является апоптоз. Особый интерес представляет исследование молекулярных механизмов апоптоза клеток иммунной системы, в частности нейтрофилов, играющих важную роль в норме и при различных патологических состояниях организма человека. Известно, что ультрафиолет является индуктором апоптоза в различных типах клеток. В настоящее время ультрафиолетовое облучение диапазона С (УФС) широко применяется в практической медицине при различных заболеваниях, хотя молекулярные механизмы его действия пока практически не выяснены. В представленной работе исследовали влияние УФС, липополисахаридов (ЛПС) и Hg2+ на динамику развития апоптоза культивируемых нейтрофилов с целью выяснения роли различных путей внутриклеточной сигнализации в регуляции апоптоза нейтрофилов человека in vitro. Нейтрофилы выделяли из периферической крови здоровых доноров на 2-х слойном градиенте фиколл-верографина и облучали УФ-светом с длиной волны 254 нм на аппарате “Изольда” МФ-73М в фосфатном буфере pH 7.2. После облучения клетки культивировали в среде RPM1-1640 с 10% эмбриональной телячьей сывороткой (“Sigma”). Процент апоп-тотических клеток определяли методами проточной цитометрии (с использованием флуоресцентного зонда Hoechst-33258) и световой микроскопии. Процент живых клеток определяли методом проточной цитометрии.

Было показано, что УФС в диапазоне доз от 6 до 600 Дж/м2 in vitro вызывает дозозавнеимое ускорение апоптоза нейтрофилов с насыщением при 250 - 300 Дж/м: (45±2%) относительно контроля (10±1%). I мкт/мл ЛПС (из E.co/i) ингибировал спонтанный и УФС-индуцированный апоптоз нейтрофилов. Предварительное (перед УФС -облучением) действие ЛПС задерживало апоптоз нейтрофилов на 4,5 час культивирования, в то время как действие ЛПС после УФС-облучения не отменяло УФС-зависимой активации апоптоза на этот же временной интервал. HgCl, (1-5 мкМ/ мл) не оказывал влияния на жизнеспособность и спонтанный апоптоз нейтрофилов и на 80% ингибировал УФС-индуцированный апоптоз. N-ацилцистенн (25 мМ) на 30% ингибировал УФС-индуцированный апоптоз исследуемых клеток. Предполагается, что Fas рецептор является ключевым звеном при инициации апоптоза нейтрофилов под действием УФС. Представляется достаточно вероятным, что одним из механизмов действия УФС при лечебном применении может быть обнаруженное нами ускорение апоптоза нейтрофилов при УФ облучении крови, которое значительно снижает количество циркулирующих праймированных нейтрофилов.

Работа выполнена при финансовой поддержке фонда “Университеты России. Фундаментальные исследования”, грант № 991928

ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ТЕРАПИЯ КАК СПОСОБ ОПТИМИЗАЦИИ ИММУНОТЕРАПИИ ВИРУСНЫХ И ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

'■2Волчек И.В., 2,3Нестеров H.H., 4Сологуб Т.В., 3 Александрова В.И., ^Иванова В.В., 3 Семиков В.А., 2Багке H.A.

POO “Терра Медика”,

.Центр индивидуальной медицины, Научно-практический центр экспертизы, протезирования и реабилитации инвалидов им. Г.А.Альбрехта,

Медицинская

академия им. И.И.Мечникова,

Санкт-Петербург, Россия

Большое количество иммунотропных препаратов разработано и внедрено в практическое здравоохранение в настоящее время. Однако при этом иммунотерапия пока еще не заняла достойного места в лечении наиболее значимых заболеваний человека (ВИЧ-инфекция, гепатиты В и С, онкологические заболевания и т.д.), одной из причин этого, по нашему мнению, является отсутствие индивидуального подхода к назначению иммунопрепаратов и их доз.

Задачей данного исследования была разработка метода, позволяющего индивидуализировать выбор иммунотропных препаратов конкретному больному и оценка клинической эффективности индивидуальной терапии больных с вирусными и онкологическими заболеваниями.

Разработана новая тест-система, основанная на определении тиол-дисульфидиого (SH/SS) соотношения крови больного методом амперометрического титрования и его динамики после инкубации in vitro с лекарственными препаратами (Патент РФ № 2150700). Тестировались препараты рекомбинантных интерферонов (1FN) отечественного (Реаферон, “Вектор” и НИИ ОЧБ, Санкт-Петербург) и импортного производства (Интрон А, “Шеринг-Плау” и Роферон, “Хоффман Ля Рош”), интерлейкина-1 (Беталейкин, НИИ ОЧБ, Санкт-Петербург), интерлейкина-2 (Ронколейкин, “Биотех”, Санкт-Петербург), индукторы интерферонов (Неовир, “Фармавит”, Цик-лоферон, “Полисан”), а также иммуномодулятор Украин (“Новицкий Фарма”, Австрия), обладающий канцеростатической активностью. Проведено обследование и лечение более 400 пациентов с острыми и хроническими гепатитами С (ХГС) и

В, герпесом, различными формами и стадиями онкологических заболеваний.

Установлено, что реакция каждого больного на исследованные препараты носила индивидуальный характер и зависела от формы, стадии заболевания, генотипа инфицирующего вируса, а также вида препарата и его дозы и часто менялась после проводимого лечения. Например, наиболее часто оптимальными дозами Реаферона были дозы, соответствующие введению препарата в количестве 0,5, 1 и 2 млн.ME, тогда как стандартные дозы, соответствующие введению 3 и 5 млн. ME в 70-80% случаев вызывали цитотоксические эффекты, что, по нашему мнению, объясняет большое количество побочных эффектов терапии IFN. Назначение препаратов в дозе, повышающей SH/SS соотношение увеличило частоту противовирусного эффекта 1FN и Украина при ХГС в 2,5 - 3 раза, позволило снизить дозы обоих препаратов в 5 - б раз и частоту побочных эффектов IFN в 6 раз. Индивидуальная терапия была эффективной при всех исследованных вирусных заболеваниях, при онкологических заболеваниях отмечалось снижение количества онкомаркеров, иммуностимулирующий, гемостимулирующий и анаболический эффекты.

Таким образом, индивидуальная терапия, основанная на использовании предложенного способа скрининга лекарственных препаратов, позволяет значительно повысить эффективность лечения вирусных и онкологических заболеваний, снизить количество побочных эффектов терапии, а также ее стоимость.

ВЛИЯНИЕ МИЕЛОПЕПТИДОВ НА ПОКАЗАТЕЛИ КИСЛОРОДОЗАВИСИМОЙ БАКТЕРИЦИДНОСТИ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ, БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ И ОРГАНОВ ЛИМФОМИЕЛОИДНОГО КОМПЛЕКСА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПРОНИКАЮЩЕМ РАНЕНИИ ГЛАЗА

Гаврилова Т.В., Гейн С.В., Шилов Ю.И., Михайлова A.A., Черсшнев В.А.

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН,

Пермь, Россия,

Институт биоорганической химии

им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН,

Москва, Россия

Цель работы. Исследовать влияние миелолида, миелопеп-тидов МП-1 и МП-3 на динамику показателей кислородозависимой бактерицидное™ фагоцитирующих клеток периферической крови и макрофагов органов лимфо-миелоидного комплекса в HCT-тесте и их связь с изменением количественного состава лейкоцитов крови при проникающем ранении глаза.

Материалы и методы. Эксперимент проведен на половозрелых крысах-самцах популяции Wistar. Животным всех групп наносилось проникающее ранение глаза. Затем крысы были разделены на 4 группы в зависимости от схемы терапии: 1-я - без лечения, 2-я - терапия миелопидом, 3-я - терапия МП-1, 4-я - терапия МП-3. Все препараты вводили через 365 минут после нанесения травмы, а в последующем через день (курс - 5 инъекций). Оценку кислородозависимых механизмов бактерицидности фагоцитирующих клеток периферической крови проводили в спектрофотометрическом варианте HCT-теста до нанесения травмы, через 360 мин, 1, 3, 5, 7 и 14 суток после нее. Помимо этого оценивали изменения показателей НСТ теста с клетками перитонеального смыва, селезенки. лимфатических узлов, костного мозга и тимуса, а также изменения клсточности н/или массы соответствующих органов на 14-е сутки после ранения.

Основные результаты. Установлено, что при проникающем ранении глаза развивается глубокая депрессия бактерицидного потенциала фагоцитирующих клеток периферической крови в ранний посттравматический период по абсолютным и относительным показателям HCT-теста, несмотря на увеличение суммарного числа гранулоцитов и моноцитов крови. Сравнительная оценка разных схем терапии показала, что миелопид и МП-3 уменьшают выраженность травматического угнетения бактерицидного потенциала фагоцитирующих клеток в HCT-тесте. Миелопид и МП-3 отменяли развитие моноцитоза, а миелопид уменьшал продолжительность нейт-рофпльного лейкоцитоза. Миелопид и МП-1 оказывали активирующий эффект на постановление нитросинего тстразолня клетками тимуса по абсолютным показателям как в спонтанном, так и стимулированном варианте теста. МП-1 и МП-3 повышали показатели HCT-теста с клетками костного мозга и брюшной полости только в пробах без добавления зимозана

(спонтанный вариант). На бактерицидный потенциал клеток селезенки и лимфатических узлов проводимая терапия не влияла.

Заключение. В целом полученные данные указывают на перспективность дальнейших исследований возможности использования миелопептидов в иммунокорригирующей терапии при проникающем ранении глаза.

ИЗМЕНЕНИЯ МАКРОФАГОВ ПЕЧЕНИ ПОД ВЛИЯНИЕМ КРИОПЛАЗМОСОРБЦИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ГЕПАТИТАМИ

Гайковая Л.Б., Радченко В.Г., Верин В.К., Дамбаева В.А

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Хронические гепатиты протекают с нарушением функций печени, обусловленными морфофункциональными изменениями на уровне гепатоцитов и синусоидов. Данные изменения послужили поводом для изучения функций клеток синусоидов печени при патологическом процессе до и после лечения с применением криоплазмосорбции (КПС). КПС - метод экстракорпоральной гемокоррекции, основанный на разделении форменных элементов и плазмы с последующей ее обработкой в виде криопреципитации и сорбции супернатанта ( в среднем 4-5 процедур с интервалом 1-2 дня).

Цель и задачи. Изучение клеточной выстилки синусоидов печени, в частности печеночных макрофагов, их морфофункциональных и реактивных изменений в корреляции с динамикой клинических и иммунологических показателей крови при использовании КПС в комплексном лечении больных хроническими гепатитами.

Материалы и методы. В исследование включены 3 группы. Основная - 73 больных хроническими заболеваниями печени в возрасте от 16 до 80 лет, из которых 29 страдают хроническим гепатитом выраженной активности, 29 - хроническим гепатитом на цирротической стадии, 15 - первичным билиарным циррозом печени. Группа сравнения (50 пациентов) по форме заболевания, степени тяжести, активности патологического процесса и исходному иммунному статусу не отличается от группы исследования и получала медикаментозное лечение без применения КПС. Контролем служила группа здоровых лиц в количестве 30 человек, соответствующая по возрасту и полу группам исследования. Больные двух групп получали этиот-ропную, патогенетическую, и симптоматическую терапию. Все исследуемые до и после лечения подвергались общеклиническим, биохимическим, вирусологическим, иммунологическим исследованиям. По показаниям больным производилась пунк-ционная биопсия печени по методике Менгини.

Основные результаты. Положительная динамика клинических проявлений в основной группе наблюдалась в 64%, тогда как в группе сравнения в 53%. При оценке клинических показателей крови отмечалось снижение СОЭ (Р<0,05), увеличение количества тромбоцитов(Р<0,05), достоверно увеличивался уровень моноцитов (Р<0,05). При биохимическом исследовании наблюдалась нормализация белково-синтетической функции печени. Отмечалось снижение содержания фиб-ронектина (Р<0,05) при изначально повышенных его показателях и нормализация уровня протромбина (Р<0,05). В иммунологическом исследовании крови до лечения отмечался сниженный уровень показателей клеточного иммунитета, в динамике после применения КПС наблюдалась тенденция к его

нормализации is виде увеличения числа CD3 (Р<0,05), CD4 (Р<0,05), CD8 (Р<0,05) клеток. Иммунорегуляторный индекс CD4 /CD8 (Р<0,()5) увеличивался у пациентов с хроническим гепатитом выраженной активностью и на стадии цирроза. При исследовании гуморального звена иммунитета наблюдалось снижение циркулирующих иммунных комплексов, иммуноглобулинов IgM, IgG. Для гистологических исследований у 73 больных основной группы сделано 47 биопсий Установлено, что после КПС интенсивность дистрофических и некро-биотических процессов печеночной паренхимы снижается. Размеры очаговых некрозов уменьшаются вплоть до полного их исчезновения. Эндотелиальная выстилка еинусондов постепенно нормализуется. Эндотелиоциты выстилки приобретают уплощенную форму, а их цитоплазма истончается. Популяция энлотелиоцнтов уменьшается, особенно у больных циррозом печени. Изначально набухшие и гипертрофированные клетки Купфера уменьшаются в размерах.

Заключение. Таким образом, КПС является эффективным методом лечения в комплексной терапии больных хроническими гепатитами, оказывает определенное воздействие на клеточную выстилку се синусоидов, снижая интенсивность дистрофических и некробиотических изменений данных клеток. Установлена прямая корреляционная связь между иммунологическими и морфометрическими показателями у больных хроническими гепатитами.

КРИОГЕПАРИНОПРЕЦИПИТАЦИЯ КАК МЕТОД ИММУНОКОРРЕКЦИИ В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ НА СТАДИИ ЦИРРОЗА

Гайковая Л.Б., Зиновьева Е.Н.

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Хронические заболевания печени отличаются тяжестью течения патологического процесса, как правило сопровождаются эндогенной интоксикацией и аутоиммунной агрессией, обусловленных морфо-функциональными изменениями в органе. Этим определяется настоятельная необходимость поиска и внедрения в практику здравоохранения новых, наиболее эффективных методов лечения.

Цель и задачи. Оценка иммуномодулирующего эффекта криогеиаринопреципитации (КГП) при лечении больных хроническими гепатитами на стадии цирроза печени.

Материалы и мет оды. Изучение воздействия КГП (в среднем проводилось 4 сеанса с элиминацией до 1 ООО мл крови за процедуру), проводимой на фоне комплексной терапии пациентов с хроническими гепатитами на стадии цирроза, на течение заболевания проводилось у 20 пациентов (13 мужчин и

7 женщин) в возрасте от 32 до 63 лет. Средний возраст данной группы составил 49,3 лет. Всем пациентам до лечения, после него и через 6 месяцев определяли уровень фибронектина (ФН), оценивался иммунологический статус и регионарный кровоток методом допплер-флоуметрии. Группу сравнения составили 20 человек, соответствующих по полу, возрасту и характеру основного заболевания.

Основные результаты. Исходно, у всех пациентов обеих групп наблюдалось повышение содержания ФН (р < 0,001). Данные иммунологических показателей отражали угнетение клеточного иммунитета: снижение содержания CD3 клеток (р<0,001), CD4 клеток (р<0,001), при низких цифрах CD4 / CD8 (р<0,05). Выявлено снижение спонтанной миграции (СМ) (р<0,001) и повышение индекса миграции (ИМ)

(р<0,001). Высокая активность гуморального звена иммунитета характеризовалась высокими цифрами IgA (р<0,05), IgM (р<0,001) и IgG (р<0,001), циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) (р<0,001). Иммунологические нарушения нашли свое отражение в расстройстве микроциркуляции в виде повышения регионарного сосудистого сопротивления (РСС) (р<0,01) и ухудшения капиллярного кровотока (КК) в проекции печени (р<0,01). Выявлена обратная корреляционная связь между уровнем ЦИК и КК (г =-0,77, р<0,01). Отмечена прямая корреляция между уровнем фибронектина и ЦИК (г =+0,60, р<0,05). Иммунный и реологический дисбаланс сопровождался увеличением размеров гепатоцитов, макрофагов, значительным расширением портальных вен. В результате действия КГП у пациентов отмечено достоверное снижение уровня ФН (р<0,01), в иммунограмме наблюдалась положительная динамика не только со стороны гуморального, но и значимая коррекция клеточного звена иммунитета. Так, выявлено повышение содержания CD3 клеток (р<0,001), CD4 клеток (р<0,05), при неизмененном уровне CD8 клеток (р > 0,05) с нормализацией индекса CD4 /CD8 (р<0,05) и функционального состояния лимфоцитов, уменьшение ЦИК (р<0,001), IgA (р<0,01), IgM(p<0,01), IgG (р<0,001). По данным флоуметрии наблюдалась нормализация портального кровотока за счет снижения РСС (р<0,01), улучшения КК (р<0,01) в результате разблокирования иммунной системы и удаления крупнодисперсных патологических субстанций. В группе сравнения динамика вышеперечисленных показателей оказалась недостоверной. Иммунологическое исследование, проведенное через 6 месяцев после курса КГП, показало, что при сравнении показателей, полученных через полгода, с показателями до проведения терапии имела место дальнейшая индукция ремиссии в виде повышения числа CD3 клеток (р<0,05), CD4 клеток (р<0,001), ИМ (р<0,05), снижение ЦИК (р<0,001), IgM (р<0,001), IgG (р<0,001). Положительная динамика со стороны иммунной системы подтверждалась улучшением показателей микроциркуляции, а также морфологической картины в виде уменьшения размеров гепатоцитов, макрофагов и диаметра портальных вен.

Заключение. Таким образом, патогенетически обоснованное применение КГП в комплексном лечении больных циррозом печени приводит к коррекции иммунологических и реологических показателей, улучшая морфологическую картину и, в конечном счете, замедляя темп прогрессирования патологического процесса.

МЕСТНАЯ ЦИТОКИНОВАЯ ТЕРАПИЯ ПРИ ГНОЙНЫХ СИНУСИТАХ

Галкина О.В., Катинас Е.Б., Лавренова Г.В., Буравцова H.A., Симбирцев A.C., Тотолян A.A.

Санкт-Петербургский Государственный Медицинский Университет им. акад. И.П.Павлова

Острые гнойные синуситы часто являются следствием вирусной инфекции верхних дыхательных путей. Среди факторов, способствующих развитию данной патологии, следует отметить анатомические особенности строения носа и гайморовых пазух, нарушение мукоциллиарного транспорта и дефекты местного иммунитета.

Во многих случаях применение традиционной антибактериальной терапии способствует угнетению местного иммунитета слизистых, что в свою очередь приводит к хронизации воспаления. В связи с этим нами была проведена местная цитокиновая терапия ронколейкином (рекомбинантный чело-

веческий IL-2, “Биотех”,С.-Петербург, Россия) и беталейки-ном (рекомбинантный человеческий IL-1, “Цитокин”, С.-Петербург, Россия) 92 пациентам с острым гнойным синуситом, находящимся на лечении в клинике JIOP-болезней СПбГМУ им.акад.И.П.Павлова. Всем пациентам в полость верхнечелюстных и/или лобных пазух во время пункции вводили однократно ронколейкин (РЛ) в количестве 250.000 МЕ (п=52) или беталейкин (БЛ) - 50 нг (п=40 ). После этого всем пациентам проводили промывание пазух физиологическим раствором 1 раз в день до полного очищения пазух. Иммунологический анализ периферической крови, назальных смывов (НС) и смывов из пазух (СП) проводили трижды: до начала терапии, через 24 часа после введения препарата, на 5-6 сутки после начала терапии. Во всех биологических жидкостях определяли концентрацию альбумина (бромкрезоловый метод), IgA, IgM, IgG, slgA, IgE, lgG 1 -4 (ИФА). Кроме того, в НС и СП определяли концентрацию 1L-8 (ELISA). По результатам ЛОР-обсле-дования все пациенты были разделены на две группы. В первую группу вошли пациенты с выраженным отеком и гиперемией слизистой оболочки полости носа, гипертермией, выраженными спонтанными болями и болезненностью при пальпации лица, длительностью заболевания не более 10 дней (острое течение). Во вторую группу вошли пациенты с умеренным болевым синдромом или отсутствием болей, нормальной температурой тела, и длительностью заболевания более 10 дней (подострое течение).

Клиническое выздоровление при терапии РЛ и БЛ отмечалось в 92% случаев. Полное очищение пазух при терапии БЛ наступало на 2-4 сутки, РЛ- на 3-5 сутки. Местное введение РЛ и БЛ не вызывало статистически достоверных изменений концентрации IgE в исследуемых биологических жидкостях. У пациентов из первой группы введение РЛ на протяжении всего курса терапии вызывало постепенное снижение исходно повышенной концентрации IgA, IgM, IgG и нормализацию повышенной проницаемости гемато-тканевого барьера пазух (р<0,05). Концентрация альбумина в СП пациентов

2 группы после введения РЛ не менялась. В СП пациентов данной группы выявлено достоверное повышение концентрации IgA, IgM, IgG (р<0,01) через сутки после введения РЛ и снижение уровня этих показателей к окончанию курса терапии. Конечная концентрация иммуноглобулинов в СП пациентов обеих групп приближалась к нормальному уровню. Изменение концентрации исследуемых иммуноглобулинов в НС было аналогично изменению в СП. Однако, нами не было выявлено статистически достоверных отличий в концентрации иммуноглобулинов в НС пациентов во время проведения иммунокорригирующей терапии. Динамика уровня IL-8 в СП при терапии РЛ и БЛ полностью соответствовала активности воспалительных реакций, протекающих на слизистой пазух. До начала иммунотерапии концентрация IL-8 в СП пациентов 1 группы достигала 8000 пг/мл. На 5-6 день после начала терапии у пациентов получавших РЛ она снижалась до 1250±375 пг/мл, БЛ- до 1056±386 нг/мл. Максимальная исходная концентрация IL-8 в СП пациентов 2 группы была 6000 пг/мл. Через 24 часа после введения РЛ или БЛ она достигала

10.000 пг/мл. К моменту окончания терапии в группе получавшей РЛ концентрация IL-8 снижалась до 1300±580 пг/мл, в СП пациентов получавших БЛ- до 1500±590 пг/мл. Повышенная концентрация IL-8 в СП после окончания терапии может быть обусловлена тем, что воспалительные реакции на слизистой продолжаются и после исчезновения клинических признаков воспаления. Для полного восстановления нормального функционирования всех звеньев местного иммунитета гайморовых пазух требуется более длительный период времени.

Таким образом, БЛ и РЛ при местном введении стимулируют локальный синтез IL-8. Это способствует активации защитных механизмов на слизистой и ускорению процессов элиминации патогена. Полученные данные позволяют сделать вывод о том, что местное применение РЛ и БЛ является эффективным способом лечения острых гнойных синуситов.

ВЛИЯНИЕ РИДОСТИНА НА ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ РЕЦИДИВИРУЮЩИМ ГЕНИТАЛЬНЫМ ГЕРПЕСОМ

Герасимова Н.М., Кузовкова Т.В., Левчик Н.К.

Уральский НИИ дерматовенерологии и иммунопатологии Минздрава России,

Екатеринбург, Россия

Ридостин представляет собой смесь натриевых солей двухспиральной рибонуклеиновой кислоты и одноцепочечной РНК и является иммунотропным препаратом (индуктором интерферона). Препарат применяют для лечения и профилактики инфекционно-воспалительных заболеваний, в частности при генитальном герпесе. Нами было обследовано и отобрано для лечения 14 пациентов с генитальной герпесвирусной инфекцией. Из них 9 больных с рецидивирующим генитальным герпесом (тяжелая форма течения: 6-8 и более рецидивов в год) и 5-е субклинической формой генитального герпеса. Мужчин

- 9; женщин - 5. Средний возраст составил 28,5 лет. Препарат назначался парентерально (внутримышечно) с преваритель-ным разведением 2 мл 0,5% раствора новокаина в дозе 8мг один раз в 3 дня, курс 7 инъекций. Помимо ридостина пациенты получали во время клинических проявлений рецидива противовирусный препарат ацикловир. Побочных реакций отмечено не было. Эффективность терапии оценивалась по влиянию на текущий рецидив, продолжительность межреци-дивного периода, прекращение вирусовыделения со слизистой мочеполовых органов, показатели иммунного статуса (динамика изменения показателей до лечения и спустя 1 месяц после терапии). Эффективность терапии расценивалась как значительное улучшение при уменьшении продолжительности рецидива и/или увеличении межрецидивного периода более чем в 2 раза; как улучшение - при уменьшении продолжительности рецидива и/или увеличении межрецидивного периода менее чем в 2 раза. Положительный эффект от проведенной терапии при субклинической форме генитального герпеса расценивался при регрессе жалоб (вульводиния, диспа-реуния), прекращении выделения вируса простого герпеса со слизистой мочеполовых органов (результаты прямой иммунофлюоресценции и полимеразной цепной реакции через 1 месяц после проведенного лечения). Оценка иммунного статуса проводилась с помощью методики непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов: СОЗ-панель ЛТЗ, CD4-панель ЛТ4, CDS-панель ЛТ8, CD 19-панель ЛТ19, CD16-na-нель ЛЫК 16 (производство НПО “Сорбент”, г.Москва). Фагоцитарная активность нейтрофилов определялась с использованием в качестве диагностикума Staphylococcus aureus 209. Сывороточные иммуноглобулины (IgA, IgM, IgG) определялись методом простой радиальной диффузии в геле по Ман-чини. Для статистической обработки применялся t-критерий Фишера. После проведенной терапии значительное улучшение в течение болезни (увеличение продолжительности ремиссии в 3-3,5 раза) было достигнуто у 5 больных рецидивирующим генитальным герпесом в 55,6%, улучшение (увеличение продолжительности ремиссии в 1,5-2 раза) - у 4 (44,4%)

больных. Положительный эффект от проведенной терапии был достигнут у 4 больных субклинической формой генитального герпеса.

До лечения у пациентов с генитальной герпес-вирусной инфекцией было выявлено снижение относительного и абсолютного содержания CD3 клеток (относительный показатель 44,6±5,33%; контрольная группа 48,6±0,39%; абсолютный показатель 0,91 ±0,1 х 107л; контрольная группа 1,15±0,01x109/ л), CD4 клеток (относительный показатель 21,0±3,0%; контрольная группа 26,98±0,31%; абсолютный показатель 0,42±0,06х 10ч/л контрольная группа 0,61±0,01 х 109/л), относительного содержания CD8 клеток (27,2±1,64%; контрольная группа 23,31±0,26%), при этом показатель соотношения им-мунорегуляторных клеток CD4 /CD8 был достоверно снижен по сравнению с контрольной группой (0,82±0,17%; контрольная группа 1,49±0,01) (р<0,05).

После проведенной терапии ридостином содержание CD3 клеток (относительный показатель 53,0±2,69%; абсолютный показатель 1,43±0,15 х 10ч/л), CD4 клеток (относительный показатель 29,5± 1,28%; абсолютный показатель 0,74±0,09 х 109/л), индекс CD4 /CD8 (1,6±0,19) достоверно повысились, при этом показатель относительного содержания цитотокси-ческих лимфоцитов (CD8 - 21,6±2,26%) снизился.

Таким образом терапия ридостином, назначенная с учетом иммунологических отклонений, способствует увеличению межрецидивного периода, прекращению вирусовыделения у пациентов с генитальной герпесвирусной инфекцией, как при манифестном, так и при субклиническом течении.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ БЕТАЛЕЙКИНА И РОНКОЛЕЙКИНА ПРИ ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКИХ СИНУСИТОВ ХЛАМИДИЙНОЙ ЭТИОЛОГИИ

Глазников Л.А, Пониделко С.Н, Симбирцев А.С, Позняк A.J1.

Военно-медицинская академия,

НИИ Особочистых Биопрепаратов М3 РФ,

Санкт-Пет ербург, Россия

Введение. В последние годы появились публикации, свидетельствующие о важной роли хламидий в этиопатогенезе острых и хронических синуситов. Их развитие, как правило, происходит на фоне ослабления иммунной защиты организма. Хламидии обладают своеобразными механизмами защиты от иммунной системы, что способствует развитию у больных декомпенсированного вторичного иммунодефицитного состояния характеризующегося нарушением гуморального (В-клеточного) звена, дисбалансом иммунорегуляторного индекса, уменьшением естественных киллеров, гиперпродукцией IgA, IgG, а также Т-супрессией.

Цель п задачи. Целью нашего исследования явилось изучение эффективности рациональных схем применения современных отечественных цитокиновых препаратов “Беталейки-на” и “Ронколейкина” при лечении больных с рецидивирующими, хроническими воспалительными заболеваниями око-лоносовых пазух, вызываемых хламидиями.

Материалы и методы. В комплексном лечении больных с синуситами хламидийной этиологии нами использовалась следующая схема введения иммунопрепаратов 32 больным (опытная группа) хроническими синуситами одновременно с проведением базисной антибактериальной терапии. Применялся “Беталейкин” по 10 нг ингаляционно, а также 25 нг местно (в пазухи) в течение 2 суток. “Ронколейкин” применялся в последующем по схеме: ингаляционно по 250.000 ME

ежедневно + местно (в пазухи) по 250.000 МЕ через день в течение 5 суток. В качестве базисной этиотропной терапии использовался: “ВИЛЬПРАФЕН” (макролидный антибиотик с 16-членным лактоновым кольцом) по 500 мг 2 раза в день в течение 14 сут. С целью повышения эффективности антихла-мидийной терапии больные получали ежедневно однократно 400 мг Макмирора на фоне приема антибиотика. Результаты исследований сравнивали с данными, полученных при лечении больных контрольной группы (п=28), цитокиновая терапия которым не применялась. Для оценки эффективности проводимой терапии использовали сроки элиминации хламидий из пазух, а также сроки нормализации иммунологических показателей: спонтанная и индуцированная продукция 1Ь-1, 1Ь-2,1Ь-8 в сыворотке крови, а также в смывах из околоносо-вых пазух.

Результаты. Анализ сравнительных исследований содержания 11.-1,1Ь-2,1Ь-8 в сыворотке крови и смывах из около-носовых пазух показал, что до начала лечения уровень данных цитокинов был существенно повышен за исключением 1Ь-2 у большинства больных (83,3%). У остальных пациентов наблюдалась гипопродукция провоспалительных цитокинов (1Ь-1,1Ь-8) и невыраженная гиперпродукция 1Ь-2. У данной категории больных синуситы были обусловлены микст-инфекцией, что вероятно приводило к развитию более выраженного иммунодефицитного состояния. Хламидийные синуситы проявлялись характерными клиническими признаками: необильным слизисто-гнойным отделяемым, упорными головными болями, субфебрильной температурой, синдромом хронической усталости. Проведение комплексной терапии с одновременным комбинированным применением цитокиновых препаратов вызывало существенное повышение содержания провоспалительных цитокинов в содержимом пазух на фоне положительной динамики клинических проявлений заболевания. В результате проведенного лечения отмечалось прекращение слизисто-гнойного отделяемого, купирование головных болей, нормализация температуры тела, восстановление носового дыхания, нормализация риноскопической картины у 37,5% лиц на 3-5 сутки у 62,5% пациентов на 8-10 сутки лечения. Бактериологическая санация от хламидий наступила у 98% больных на 10 сутки после окончания терапии. Через 1 месяц после лечения у 87,5% пациентов опытной группы при повторном исследовании хламидии не выявлены, в то время как у лиц контрольной группы хламидии были обнаружены у 14 (50%) человек. В течение последующих 3 месяцев имели место рецидивы заболевания у 12,5% переболевших из опытной группы и у 50% лиц контрольной группы.

Заключение. Таким образом использование цитокиновых препаратов “Беталейкина” и “Ронколейкина” в комплексной терапии больных с хроническими синуситами хламидийной этиологии повышает ее эффективность, что подтверждается сокращением сроков бактериологической санации и иммунологических показателей, а также уменьшением количества рецидивов заболевания.

ВЛИЯНИЕ “ДЕГЛУТАМА” НА ИЗМЕНЕНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МАКРОФАГОВ

Горецкая М.В., ‘Френкель Б.И., *Дюрдь Т.И.

Институт биохимии НАН Беларуси,

Областная клиническая больница,

Гродно

Введение. Одной из чувствительных к воздействию иммуномодуляторов систем является система мононукле-

арных фагоцитов, функциональная активность которых является основой неспецифической резистентности организма (Зайцева Л.Г. и др. 1994). В связи с этим большой интерес представляет поиск путей направленного воздействия на определенные функции макрофагов с целью регуляции увеличения или в ряде случаев уменьшения их активности. Удобной моделью для изучения динамики таких процессов являются перитонеальные макрофаги (МФ).

Цель исследования. Изучение низкомолекулярного пептида — препарата “деглутам”, содержащего производное Ь-глутамина, в качестве модулятора цитостатической активности макрофагов.

Методы исследования. Опыты ставили на белых беспородных мышах-самцах. Для выделения перитонеальных макрофагов животным внутрибрюшинно вводили 5 мл среды 199 с гепарином (10 ЕД/мл). Макрофаги концентрацией 5 х 107кле-ток/'мл вносили в стерильные пластиковые чашки Петри ¿=40 мм и преинкубировали с деглутамом в течение 1 часа в различных концентрациях (1%, 0,1%, 0,01%, 0,001%). Затем к эффекторным клеткам добавляли клетки-мишени (клетки био-гггатов человеческих опухолей: рак молочной железы, рак почки, острый миелобластный лейкоз) в соотношении 20:1, подобранном эмпирическим путем. За 4 часа до окончания инкубации вносили радиоактивную метку С|4-тимидин (5 мкКи/мл) для учета изменения пролиферации опухолевых клеток. Измерение проводили на сцинтилляционном счетчике МагкП.

Результаты. По сравнению с контролем деглутам (ДГ) стимулировал цнтостатическую функцию перитонеальных макрофагов на клетки-мишени, проявив при этом дозозависимый эффект. Инкубируя МФ с клетками острого миелоб-ластного лейкоза максимальный цитостатический индекс (44%) был у клеток прединкубированных с 0,01% раствором ДГ. Индекс был более чем в 2 раза выше, чем у резидентных макрофагов. Увеличение концентрации деглутама в 10 раз незначительно уменьшил цитостатический индекс (ЦСИ), который составил 37%, а увеличение концентрации ДГ в 100 раз привело к снижению ЦСИ до 18%. Сходную картину прослеживали с клетками рака молочной железы. Лучший результат показали МФ прединкубированные с 0,01% раствором деглутама (ЦСИ = 45%). Уменьшение до 0,001% ДГ привело к понижению ЦСИ до 22,5%, а увеличение концентрации ДГ до 0,1% и 1% раствора изменило цитостатический индекс до 40% и 25%. Следует отметить, что ЦСИ макрофагов прединкубированных с 0,01% ДГ на клетки рака молочной железы возрос в 2 раза по сравнению с резидентными МФ. Если цитостатический индекс активности макрофагов с клетками острого мислобластного лейкоза и рака молочной железы не превышал 50%, то на клетки рака почки человека макрофаги ответили более высоким индексом. У клеток рака почки добавленных к макрофагам обработанных 0,01% раствором ДГ цитостатический индекс составил 69%. Это в 4,6 раза больше цитостатического индекса не обработанных раствором ДГ макрофагов, инкубированных с клетками рака почки.

Выводы. На изменении цитостатической функции макрофагов было продемонстрировано иммуномодулирующее свойство деглутама: при низких концентрациях он стимулирует цнтостатическую активность макрофагов, а при высоких концентрациях - подавляет. В данной работе рассмотрен лишь один аспект действия препарата. Вполне логично предположить, что ДГ может также оказывать действие и на другие звенья сложной системы иммунитета и перспективен для дальнейшего изучения.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДИПЕПТИДА ВИЛОНА НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ФИБРОБЛАСТОВ

Гумен A.B., Бутюгов A.A.*, Назаров П.Г.*, Малинин В.В.

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН*, Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Санкт-Петербург, Россия.

В эндогенной регуляции защитных реакций организма одну из ключевых ролей играют иммуномодулирующие пептиды, оказывающие разностороннее влияние на функции иммунной системы. В исследованиях последних лет обоснована высокая биологическая активность регуляторных пептидов тимуса, как естественных, так и синтетических, в отношении иммунологической реактивность организма, прежде всего клеточного иммунитета и функций Т-лимфоцитов. Одним из наименее изученных свойств тимических пептидов является их влияние на пролиферативную активность не только непосредственно иммунокомпетентных, но и других клеток-мише-ней. Целью настоящей работы было исследование влияния короткого синтетического аналога тимических пептидов -вилона (Lys-Glu), созданного в Институте биорегуляции и геронтологии, на интенсивность пролиферации культивируемых фибробластов. В работе использованы клеточные линии фиб-робластов мышей L929 и трансформированных клеток костного мозга человека L41. Клетки культивировали в 96-луноч-ных плоскодонных планшетах в среде RPMI-1640 (Flow, UK) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (Био-лот, СПб) в концентрации 6-8 тыс. клеток/лунка в атмосфере 5% СО, и 100% влажности при 37°С в течение 72 часов. Препарат вилон вносили через 24 часа после начала инкубации в диапазоне концентраций 100 мкг/мл -1 нг/мл. Интенсивность пролиферации оценивали по методу Mossman (1983) с внесением в среду МТТ за 28 часов до окончания инкубации клеток. Установлено, что вилон вызывает дозозависимое достоверное усиление пролиферации клеток линии L929 в концентрациях 10 мкг/мл - 1 нг/мл с максимальным эффектом при концентрации препарата 100 нг/мл. Стимулирующее действие вилона на пролиферацию клеток линии L41 наблюдалось при концентрациях пептида 100 мкг/мл - 1 мкг/мл. Таким образом, впервые показано, что короткий синтетический аналог тимических пептидов потенцирует пролиферацию фибробластов L929 и клеток линии L41.

ВЛИЯНИЕ БАКСИНА НА ПРОДУКЦИЮ ИНТЕРФЕРОНА (IFN), ПРОВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ

Гусева Т.С., Паршина О.В., *Малашенкова И.К.,-Тазулахова Э.Б.,*Дидковский H.A.

НИИЭиМ им.Н.Ф. Гамалеи РАМН,

Москва,

*Институт физико-химической медицины Москва, Россия

Цель и задачи исследования. Актуальной задачей современной медицины признана коррекция иммунного статуса с помощью натуральных биологически активных веществ, которые восполняют дефицит многих незаменимых пищевых веществ, витаминов, микро- и макроэлементов. К таким препаратам относится новый препарат Баксин (нутрицевтик, ОАО “Аксон”, Москва). Учитывая, что в патогенезе различных за-

болеваний принимают активное участие IFN и интерлейкины, уровень которых влияет на клиническую картину, целью данной работы являлось экспериментальное изучение действия препарата Баксни на показатели иммунитета при вирусной патологии.

Материалы и методы. Клинико-иммунологические исследования крови пациентов, получавших Баксин в течение месяца, проводились до начала лечения, на фоне применения препарата (через 7 и 14 дней ог начала ) и после окончания лечения. Определение биологической активности IFN проводили в плазме крови и in vitro по общепринятой методике. Определение IL-1, 4, 6 и TNF- и 1FN- в плазме проводили методом ИФА с помощью коммерческих наборов фирмы “Протеиновый контур”, С.-Петербург. Внутриклеточные инфекции CMV, HSV I, II и VI типов и EBV определялись методом ДНК-диагностики (Литсх и Амплисенс) в пробах крови и слюны.

Результаты. При анализе цитокинового статуса, проведенного у пациентов с синдромом хронической усталости, вызванным вирусом Эпштейн-Барр, было показано, что Баксин не оказывал влияние на уровени продукции IL-6 и TNF-в плазме крови, однако снижал исходно повышенный уровень IL-4 до нормы к концу лечения. На IFN-статус применение Баксина значительного влияния не оказывало, но отмечалось кратковременное повышение уровней IFN в плазме до 16 Ед/мл к концу 1 недели лечения. При отсутствии спонтанной продукции IFN-a стимуляции Бакенном клеток не происходило, однако при наличии спонтанной продукции препарат оказывал стимулирующее влияние, увеличивая продукцию IFN-a в 10 раз. К концу лечения препаратом отмечалось субъективное улучшение состояние пациентов, которое объективно подтверждалось отсутствием или значительным снижением количества выявляемых копий ДНК ранее диагностированных вирусов.

Заключение. Механизм действия Баксина до конца не выяснен, но полученные предварительные данные по влиянию препарата Баксин на клинико-иммунологические показатели у пациентов с различными вирусными заболеваниями, говорят в пользу применения данного препарата в противовирусной терапии.

АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ И ТЕРМОДИНАМИЧЕСКАЯ СТАБИЛЬНОСТЬ ИЗОЛИРОВАННЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ VL И VH ДОМЕНОВ АНТИТЕЛ МЫШИ

Дубновицкий А.П.

Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск, Беларусь.

Введение. Рекомбинантные антитела и их укороченные фрагменты нашли широкое применение в диагностике и иммунотерапии. Двух- и однодоменные антигенсвязывающие конструкции на основе вариабельных доменов иммуноглобулинов при введении in vivo обладают рядом преимуществ по сравнению с полноразмерными антителами. Высокая проникающая способность, оптимальная фармакодинамика и сниженная иммуногенность делают фрагменты антител более подходящей основой для конструирования иммунотоксинов. В этом отношении VH домен рассматривается как более перспективная (по сравнению с VL доменом) структура, так как его вклад в формирование антигенсвязывающего центра считается более значительным. В то же время недостатками VH доменов являются его низкая растворимость и известная склонность к их агрегации. VL домен, обладающий высокой

растворимостью и устойчивостью к агрегации, как самостоятельная основа для конструирования иммунотоксинов систематически изучен не был.

Цель работы. Оценить возможность использования изолированных УЬ и УН доменов для конструирования иммунотоксинов на основе сравнения их термодинамической стабильности и антигенсвязывающей активности.

Материалы и методы. Однодоменные фрагменты мышиных моноклональных антител к ферритину селезенки человека получали в виде нерастворимых тел включения после экспрессии в клетках Е.соИ ВЬ21 (БЕЗ) рЬуэЗ под контролем промотора Т7 РЕ1К-полимеразы, индуцируемого ИПТГ. Материал тел включения солюбилизировали с использованием гуанидина гидрохлорида. Очистка белков проводилась при помощи металлоаффинной хроматографии на колонке с №-1МТА сефарозой. Процедура рефолдинга состояла в последовательном снижении концентрации денатуранта путем диализа. Константы аффинности взаимодействия рекомбинантных белков с ферритином определены в конкурентном ИФА с иммобилизованным на твердой фазе антигеном. Структура изолированных доменов изучена при помощи КД- и флуоресцентной спектроскопии (собственной и АНС). Термодинамическая стабильность белков определялась по результатам разворачивания в присутствие возрастающих концентраций денатуранта по методу Пэйса, а также методом дифференциальной сканирующей микрокалориметрии (ДСК).

Основные результаты. Изолированные УЬ и УН домены получены в растворимом виде с высоким выходом и чистотой более 95%. Оба домена конкурируют с родительским моноклональным антителом за иммобилизованный антиген. Константы ассоциации с ферритином УЬ и УН доменов отличаются незначительно и составляют 0,35108 М'1 и 0,410* М'1 соответственно. По данным КД- и флуоресцентной спектроскопии VI. домен обладает пространственной структурой, типичной для иммуноглобулинов. УН домен не достигает полного фолдинга и представляет собой молекулу с компактной третичной, но частично измененной вторичной структурой. В отличие от УЬ домена, УН домен в физиологических условиях связывает гидрофобный зонд АНС, что свидетельствует о наличии экспонированных растворителю гидрофобных кластеров на поверхности молекулы. По данным ДСК температура плавления обоих изолированных доменов - около 59 °С, однако энтальпия термоденатурации УЬ домена составляет 3,5 кал/г против 0,12 кал/г у УН домена. При практически идентичной антигенсвязывающей активности УЬ и УН доменов большая стабильность УЬ домена делает его более подходящей основой для конструирования иммунотоксинов.

Заключение. Изолированный УЬ домен мышиного антитела сохраняет антигенсвязывающую активность в отношении белкового антигена и, таким образом, может служить в качестве распознающего модуля для конструирования иммунотоксинов. Использование исследованного УН домена ограничивается низкой стабильностью рекомбинантного белка.

ИММУНОКОРРЕКЦИЯ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ИНФЕКЦИОННЫМ ЭНДОКАРДИТОМ

Дюжиков А.А., Углов А.И., Перелыгина Г.М.

Центр кардиологии и сердечно-сосудистой хирургии, г. Ростов-на-Дону

Иммунологическая реактивность больных инфекционным эндокардитом (ИЭ) является ключевым фактором в развитии этого заболевания и имеет свои особенности в разных стадиях

болсчни и изменяется под влиянием лечебных воздействий, иммуномодулирующей терапии, оперативных вмешательствах.

Цель исследования. Изучить динамику иммунного статуса и оценить эффективность использования иммуномодуляторов.

Материал и методы. С 1990 по 2001 г оперировано 265 больных инфекционным эндокардитом. Из всего количества больных сформированы 3 группы схожие по виду возбудителя, активности процесса,степени недостаточности кровообращения и виду оперативного вмешательства, всего 64 больных. 1 группа - 19 человек не получавшие иммунокорригирующую терапию, 2 группа - 23 пациента в качестве иммуно-модулятора использовался миелопид. 3 группа - 22 больных, иммунокоррекция у которых проводилась полноксидонием. Всем больным наряду с общеклиннчеекпм исследованием проводилась исследование иммунного статуса в динамике на следующих этапах: исходный - при поступлении в стационар, на 7-е сутки лечения, на 7- е су тки после операции. Иммунологическое обследование включало тесты 1-го и 2-го уровня. Субпопуляциопный анализ лимфоцитов проводили с использованием моноклональных антител (МКА).

Результаты и обсуждение. Проведенный анализ исходных пммунограмм выявил наличие субпопуляциониого дисбаланса в сторону умеренного увеличения пула супрессорных Т лимфоци тов и уменьшение уровня Т лимфоцитов с хел-перпо-индукторными свойствами во всех клинических группах, что подтверждается инверсией иммунорегуляторного индекса CD4 /CD8 . Высокий уровень ЦИК отмечен во всех группах. Показатели спонтанноного НСТ-теста оказались повышенными у большинства больных. Уровень иммуноглобулинов сыворотки так же оказался повышен у большинства больных ИЭ, при этом в большей степени оказался повышен уровень IgM.

Сопоставление данных анализа клеточного иммунитета выявило различия в группах. Во 2 и 3 группах уже на 10-е сутки от начала иммунокоррекции отмечено существенное возрастание общего количества Т лимфоцитов за счет клеток с хелнерно-индукторнымп свойствами, что сопровождается достоверным повышением значения иммунорегуляторного индекса.

Динамика сыворо точных иммуноглобулинов классов IgG, IgM, IgA характеризовалась плавным снижением концентрации до нормальных и субнормальных значений.

Результаты исследования функциональной активности нейтрофилов с помощью НСТ-теста обнаруживают существенные различия в его динамике у больных разных групп. В целом преобладала позитивная динамика НСТ -теста как спонтанного так и активированного.

Заключение. На фоне проводимой иммуномодулирующей терапии наблюдается оптимизация большинства анализируемых иммунологических параметров, это очевидно обуславливает лучший клинический эффект лечения: уменьшение частоты протезного эндокардита, парапротезных фистул и инфицирования послеоперационных ран.

ПЕРСПЕКТИВЫ КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ХИТОЗАНА

Жоголев К.Д., Никитин В.Ю., Цыган В.Н.

Военно-медицинская академия,

Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время во всем мире отмечается возрастание интереса специалистов к препаратам на основе хитозана (произ-

водных хитина) в связи с возможностями их использования в различных областях медицины. Эти биополимеры, имеющие природное происхождение и известную химическую структуру, обладают ценными биологическими свойствами. Они малотоксичны, хорошо биологически совмещаются с организмом человека, постепенно расщепляясь до мономеров глюкозамина. У них выявлены иммуномодулирующие, адъювантные, противомик-робные, фунгистатические, противоопухолевые, радиозащитные, противовоспалительные, ранозаживляющие, гемостатические, антихолестсрические, липогропные и другие медикаментозные свойства. Однако, до сих пор у нас в стране (при наличии большой сырьевой базы) не разработано ни одного фармакологического препарата на основе хитозана, и пока он используется только в качестве биологически активной добавки в пищу (БАД).

Целью исследования явилась разработка новых иммуномодулирующих препаратов на основе хитозана, изучение их биологических свойств и экспериментально-лабораторное обоснование их клинического применения.

Были изучены образцы хитозана, различающиеся по молекулярной массе, степени дезацетилирования и содержанию карбокси-, сульфо- и аминогрупп.

Все изученные образцы даже при парэнтеральном введении оказались малотоксичными по сравнению с параллельно исследованными другими полисахаридами (пирогенал, продигиозан). Они не вызвали аллергизирующего и пирогенного эффектов.

Результаты исследований, проведенных на животных (мышах, крысах, кроликах, поросятах), свидетельствуют об эффективности применения препаратов хитозана при бактериальных и вирусных инфекциях, а также при раневой болезни. Показано, что наиболее важную роль в реализации лечебного действия лекарственных средств, созданных на основе хитозана, имеет их действие на иммунную систему.

Данные, полученных при изучении влияния различных лекарственных форм хитозана (растворов, гелей, пленок) на процесс заживления кожной раны у крыс и кроликов, показали, что они обеспечивают достоверное ускорение процесса репарации кожи.

Хитозан оказался эффективным стимулятором остеогенеза. Это свойство хитозана было установлено при его применении в виде губки для устранения экспериментально созданного костного дефекта нижней челюсти у кроликов.

Исследование механизмов стимулируюшего эффекта хитозана при заживлении ран показало, что в основе его лежит активация фазы биологического очищения раны. Главная роль при этом принадлежит повышению функциональной активности фагоцитов: ускорению миграции фагоцитов в рану (очаг воспаления), а также усилению фагоцитарной активности макрофагов вследствие увеличения положительного заряда их поверхностной мембраны, что, является основным механизмом активации начальных фаз фагоцитоза (хемотаксис, адгезия). Изучение цитохимическими методами метаболизма фагоцитирующих клеток показало, что хитозан вызывает достоверное увеличение активности ферментов гликолиза, гек-созомонофосфатного шунта и цикла Кребса. По данным НСТ-теста применение хитозана приводит к достоверной активации кислородзависимых систем бактерицидное™ макрофагов. Препараты хитозана усиливают антителогенез и увеличивают титры циркулирующих в крови антител.

Полученные данные позволили сделать вывод о перспективности разработки лекарственных форм хитозана для наружного, энтерального и парэнтерального применения.

В результате проведенных исследований установлено, что биологические и, в частности, иммуномодулирующие свойства препаратов хитина и хитозана зависят от молекулярной массы, степени дезацетилирования, процентного содержания химических группировок, включенных в структуру препара-

та, а также от вида сырья, из которого получен хитозан (криль, креветки, крабы). Сочетание выраженной биологической активности с биодеградируемостью делают возможную область применения хитозана в медицине весьма обширной.

ИНТЕРЛЕЙКИНОТЕРАПИЯ, ПОВЫШАЮЩАЯ РЕАКТИВНОСТЬ Т - КЛЕТОЧНОГО ОТВЕТА - НОВАЯ СТРАТЕГИЯ В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С

Журкин А.Т., Фирсов C.JI., Лисицина З.Н.

Государственная педиатрическая медицинская академия,

Санкт-Петербург, Россия

Механизм развития хронического гепатита С ( ХГС ) у 70 -80% инфицированных вирусом гепатита С связывается с особенностями биологии возбудителя, а также с иммуногенетичес-кими факторами человека.. Существенное значение в поддержании патологического процесса у больных гепатитом С придается недостаточности Т - клеточного иммунного ответа, в частности, CD4 специфических лимфоцитов и дисбалансу цитокинов.

Целью работы является изучение эффекта повышения реактивности CD4 лимфоцитов и характера влияния на другие иммунологические показатели монотерапии Ронколейкином

- полным структурным и функциональным аналогом эндогенного IL - 2, у больных ХГС. Иммунологические (число клеток, несущих CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25, HLA-DR, РТМЛ) показатели и влияние Ронколейкина на репродукцию вируса (РНК - HCV) изучены у 36 больных ХГС в возрасте 22,5±1,8 лет (1-я группа) и 30,5±1,5 лет (2-я группа) с длительностью заболевания соответственно 30,5±11,5 месяцев и 118±29,3 месяцев. Курсовая доза Ронколейкина у больных 1-й группы составила 8 млн. ЕД, а у 2-й - 12 млн. ЕД.

Исследования показали, что до начала лечения у большинства больных ХГС было снижено содержание CD3 , CD4 , CD8 лимфоцитов, соответственно у 81,2%, 87,5%, 56,2% пациентов. У 56,2% больных был снижен иммунорегуляторный индекс. У всех больных со сниженным содержанием CD4 лимфоцитов имел место субкомпенсированный иммунодефицит этого типа клеток (снижение от 500 до 200 кл/мкл). Под влиянием проводимой терапии, особенно у больных 2-й группы, происходило статистически значимое увеличение содержания CD 4 лимфоцитов, и эффект нормализации сохранялся до окончания лечения у большинства больных. Отмечено статистически значимое увеличение u CD8 лимфоцитов. Выраженный стимулирующий эффект Ронколейкина отмечался на содержании CD25 , HLA - DR и NK. - клеток.

Полученные данные подтверждают, что в патогенезе гепатита С иммунологические механизмы играют существенную роль, а отсутствие адекватного Т - клеточного ответа к вирусным антигенам на начальной стадии болезни является главной причиной развития ее хронической формы.

ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ВЕСТИМОМ

ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТУБЕРКУЛЕЗЕ

Заболотных Н.В., Виноградова Т.И., Пигарева Н.В., Котов А.Ю., Симбирцев A.C.

Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии Минздрава России

Переключение иммунного ответа при туберкулезе с Til-2, преобладающего при развитии инфекции, на протективный

Th-1 является наиболее перспективным направлением иммунокоррекции данного заболевания. Препараты, способные активировать Th-1 по аутокринному механизму, - рекомбинантный интерлейкин 2 (rhIL-2) и интерферон-у (rhlFN-y), проявляют при их использовании в терапии туберкулеза терапевтическое и иммунокорригирующее действие, существенно изменяя тяжесть течения инфекции. Новый иммуномодулирующий препарат, синтетический дипептид бестим (ГНЦ НИИ ОЧБ), стимулируя дифференцировку и функциональную активность Th-1, обладает перед rhIL рядом преимуществ: имеет более низкую себестоимость; активен при внутримышечном введении; не содержит эндотоксинов и не иммуногенен.

В работе исследовалась эффективность включения бести-ма в терапию экспериментальной туберкулезной инфекции, и его влияние на состояние системы иммунитета . Использована модель генерализованного туберкулеза у мышей, вызванного внутривенной инокуляцией М. bovis (0,1 мг) разной степени вирулентности. Бестим (0,01,0,1, 1,0 и 10,0 мкг/кг, внутрибрю-шинно; 5 и 10 инъекций, 1,0 мкг/кг per os) вводили на фоне изониазида ( 10 мг/кг) с 20-го дня после заражения. Фагоцитоз макрофагов (Saccharomyces cerevisiae) исследовали на пластиковых одноразовых чашках Петри. Пролиферация клеток тимуса и селезенки определялась в реакции блаеттранеформа-ции по включению Н3- тимидина. Продукцию IL-2 оценивали в культурах клеток тимуса и селезенки по уровню пролиферации IL-2 зависимой клеточной линии CTLL. Определение уровня IL-4 и ИФН-у проводили в супернатантах клеток селезенки и сыворотке крови с использованием иммуноферментных тест систем Quantikine ™ (R&D Systems, Minneapolis).

Полученные результаты свидетельствуют, что бестим (оптимальная доза 0,1 мкг/кг) существенно повышал эффективность этиотропной терапии при всех исследованных вариантах течения инфекции (остропрогрессирующем, стандартноп-ротекающем и вялотекущем). Параллельно повышению результативности лечения наблюдалась стимуляция поглотительной и переваривающей функции перитонеальных макрофагов при их ингибиции. Использование Бестима привело к восстановлению пролиферативной активности клеток тимуса и селезенки, стимулированной поликлональными активаторами. Отмечено восстановление продукции IL-2, усиление продукции IFN-y и снижение продукции IL-4 клетками селезенки мышей. В сыворотке крови животных, леченных Вестимом уровень IFN-y был существенно выше, а уровень IL-4 -достоверно ниже, чем в группе контроля лечения.

Представленные данные позволяют предположить, что реализация терапевтического эффекта Бестима осуществляется за счет коррекции препаратом высокой степени ингибиции Th-1, развивающейся при экспериментальной туберкулезной инфекции.

МЕХАНИЗМЫ ФОРМИРОВАНИЯ И СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РАННИХ АНЕМИЙ У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ

Закирова JI.P, Тузанкина И.А, Синявская О.А, Кладиев А.А, Симбирцев A.C.

Уральская Государственная Медицинская Академия, областной центр клинической иммунологии, Екатеринбург,

Научно- исследовательский институт особо чистых биопрепаратов,

Санкт- Петербург, Россия

Внедрение новых перинатальных технологий позволило увеличить выживаемость новорожденных детей, особенно с экстремально низкой массой тела. Однако еще остаются се-

ТАБЛИЦА 1. КОНЦЕНТРАЦИЯ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ.

Группы детей Количество детей Концентрация

по уровню ЭПО эндогенного ЭПО (т11/мл) И-8 (пг/мл) Ж (пг/мл)

1. 24 0,37±2,34 7,565+19,11 124,27+98,68

2. 7 12,13±5,04 9,143+24,19 307,14±379,42

3. 8 56,08±25,67 63,33+155,13 0,00+0,00

рьезные проблемы, одной из которых является развитие тяжелой ранней анемии новорожденных (РАН).

Цель работы. Клинико- лабораторная диагностика РАН и оценка эффективности патогенетической терапии рекомбинантным эритропоэтином человека (р-ЭПО) - Эпокрином.

Задачи. 1) Оценить роль перинатальных факторов риска в развитии РАН. 2) Определить содержание эндогенного эрит-ропоэтина (ЭПО) в сыворотке крови у новорожденных различного гестационного возраста. 3) Определить уровень ци-токинов - интерлейкина- 8 (11_-8) и фактора некроза опухоли (тар) в сыворотке крови у новорожденных детей. 4) Провести анализ эффективности применения Эпокрина для коррекции РАН.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 140 новорожденных детей (75 мальчиков и 65 девочек) различного гестационного возраста от 25 до 40 недель, с массой тела при рождении от 900 до 3750 граммов, из них 116 детей были недоношенными - 28,4% - первой степени недоношенности, 40,5% - второй степени, 25,9% - третей степени, 5,2% - четвертой степени. Проведено динамическое исследование показателей, характеризующих состояние активности системы эритрона, автоматическим способом на аппарате “Сс11-Оуп -3500”. Для количественного определения ЭПО, ТОТ и 1Ь -8 использовался иммуноферментный анализ по стандартной методике - у 39 детей. Дополнительно проведены исследования на уровень эндогоксикоза, иммунологическое обследование, содержание железа в сыворотке крови, общая жслезосвязы-вающая способность сыворотки (ОЖСС), насыщение транс-феррипом.

Основные результаты: При проведении дискриминантного анализа анамнестических сведений, четыре основных фактора предрасполагали к развитию РАН - у 95% детей из обследуемых: гестоз второй половины беременности, внесший вклад равный 60%, роды до срока - 72%, поражение ЦНС - 85%, критические состояния, требующие продленной ИВЛ -54%.

Результаты проведенного исследования показателей крови при рождении выявили более низкий уровень гемоглобина (НЬ). особенно у глубоко недоношенных детей, чем в группе доношенных (НЬ у доношенных -189,6+25,44 г/л, 1-2 степень недоношенности - 1 79,4±32,15 г/л, третья степснь-171,4±24,44 г/л, четвертая степень - 151,5±12.02 г/л), при изучении этих показателей в динамике было найдено снижение уровня НЬ (ниже 135 Г/л) уже на второй неделе внеутробной жизни. Сравнивая динамику показателей красной крови у новорожденный детей с различными сроками гестации было обнаружено более быстрое и интенсивное падение НЬ у глубоко недоношенных детей.

Исследование показателей обмена железа выявило снижение уровня сывороточного железа (12, 414±2,5 мкмоль/л), нормальные показатели ОЖСС (34,629± 13,95 мкмоль/л) и коэффициента насыщения трансферрина железом (37,4±16,5%). Полученные результаты свидетельствуют о латентном дефиците железа.

По результатам исследования уровня эндогенного ЭПО в сыворотке крови у новорожденных детей в позднем неонатальном периоде, было выделено три группы: 1. ЭПО менее 5 ти/мл - 24 ребенка (0,37±2,34 ти/мл); 2. ЭПО от 5 до 20 гаи/ мл - 7 детей (12,13±5,04 ши/мл); 3. ЭПО более 20 ти/мл - 8 новорожденных (56,08±25,67 ти/мл). В тех же образцах крови было проведено исследование концентрации - 1Ь-8 и ТОТ.

Эпокрин вводился детям основной группы с учетом динамики падения НЬ, наличием факторов риска, гестационного возраста подкожно через день в утренние часы в стартовой дозе 200 ед/кг. Продолжительность лечения, доза варьировали в зависимости от показателей активности системы эритрона (НЬ, Ш, Ш). Благодаря данному методу лечения, удалось избежать трансфузий эритроцитарной массы у 62,5% детей основной группы. В группе плацебо - лишь 26,9% новорожденных не получили гемотрансфузий.

Выводы: 1) Таким образом, наиболее весомыми факторами риска для развития РАН являются: морфо- функциональная незрелость организма, нейро-иммунологические расстройства и наличие критических состояний. 2) Уровень эндогенного ЭПО может быть неадекватен дебюту и степени выраженности РАН. 3) Наличие в крови цитокинов острой фазы предрасполагает к развитию анемического процесса за счет антагонистического действия на рецептор эндогенного ЭПО. 4) Использование Эпокрина показало достаточно высокую эффективность лечения РАН и отсутствие побочных реакций.

ВЛИЯНИЕ АУТОТРАНСФУЗИИ УЛЬТРАФИОЛЕТОМ ОБЛУЧЕННОЙ КРОВИ (АУФОК) НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ БРОНХИТОМ

Калинина Е.П., Шакирова О.В.

Научно-исследовательский институт медицинской климатологии и восстановительного лечения - Владивостокский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН,

Владивосток, Россия

Состояние иммунной системы организма человека является определяющим для характера течения хронических заболеваний, появления осложнений, частоты возникновения обострений, длительности ремиссии. Наблюдающееся в последние годы снижение экономического уровня жизни большинства населения в сочетании с ухудшением условий окружающей среды обуславливает рост числа иммунодефицитных состояний. Велика необходимость изучения возможности применения немедикаментозных методов иммунокорекции, не менее эффективных и более щадящих, чем лекарственные.

Целью нашего исследования явилось изучение влияния АУФОК на состояние иммунной системы лиц с бронхолегочной патологией.

Объектом исследования явились 107 пациентов, страдающих различными формами хронического бронхита (ХБ). Назначался курс из 4-5 процедур АУФОК с интервалом и 3-4 дня при объеме облучаемой крови, начиная от 0,8-1,0 мл/кг веса больного с увеличением на 10-20 мл при каждом последующем сеансе. Результативность АУФОК-терапии определялась данными иммунограмм, изучавшимися в динамике (до и после курса лечения). Фенотипирование лимфоцитов проводили моноклональными антителами (Беларусь). Фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) определяли по методу Маян-ского Д. Н. с соавторами. Для оценки иммуноглобулинов (Ig) основных классов IgA, IgM, IgG в сыворотке крови использовали метод Манчини.

Установлено, что применение АУФОК - терапии привело к изменению характеристики субпопуляции Т-лимфо-цитов в сторону увеличения CD4 клеток на 23%, следствием чего явилась нормализация иммунорегуляторного индекса CD4 /CD8 (2,1 ±0,07). Возрос уровень фагоцитоза на 12,8± 1,6%, что указывает на повышение функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов. Это свидетельствует об активации гуморального и клеточного иммунитета. Выявлено повышение содержания IgG на 1,9±0,27 г/л, IgA на 0,69±0,08 г/л у лиц с исходно низкими показателями, вследствие чего уровень иммуноглобулинов стал соответствовать норме. При исходно нормальном иммунном статусе не происходило заметного влияния на него в процессе лечения.

Таким образом, применение АУФОК-терапии в восстановительном лечении больных ХБ способствует нормализации иммунного статуса за счет возрастания звена неспецифической резистентности организма, стимуляции угнетенного иммунитета. УФО крови, как многие природные лечебные факторы, в средне терапевтической дозе (570-870 Дж/м ) обладает иммуномодулирующим действием и может применяться на различных этапах восстановительного лечения, являясь достаточно несложным и доступным методом, обладающим минимумом противопоказаний и побочных эффектов.

ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА У МЫШЕЙ ПРИ ГЕМОПЕРФУЗИИ ЧЕРЕЗ СОРБЕНТЫ

Канаев П.А., Латаш В.Г., Кузнецов С.И.

ООО Самсон-Мед”,

Научно-исследовательский институт гриппа РАМН, Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования, Санкт-Петербург, Россия

Активность системы комплемента (С) у мышей при гемо-перфузии через различные сорбенты оценивали в условиях физиологической нормы, без моделирования у животных каких-либо патологических состояний. В отличие от условий in vitro, целостный организм способен многопланово отреагировать на включение во внутреннюю среду организма экстракорпорального контура с сорбентом, активируя все каскадные системы и воздействуя на рецепторный аппарат клеток, что по принципу обратной связи отразится и на потенциальной реактивности каскада комплемента.

Реакцию системы комплемента у мышей оценивали при подключении к системе гемоциркуляции различных гемокон гактных препаратов, в качестве которых использовали: угольный гемосорбснт СКН-2К, Агарозу 4Б, Ага-розу-БСА (бычий сывороточный альбумин, иммобилизо-

ванный на агарозе 4Б), Имасорб А-700 (белок A Staphylococcus aureus, ковалентно связанный с агарозным носителем) и ГПА (гранулированный поперечносшитый аубази-дан). Гемонерфузию у мышей, находящихся под нембута-ловым наркозом и гепаринизированных, проводили по схеме вена>вена. Объем колонок с сорбентом составлял 0,1 мл. Время гемоперфузии - 10-15 мин, скорость кровотока в экстракорпоральном контуре - 2-3 мл/час. Суммарную активность комплемента оценивали гемолитическим методом по СН50. Учет комплементарной активности осуществляли до сорбции, через 2, 4, 6 и 24 часа после ее окончания. Контролем служила группа мышей, которых наркотизировали нембуталом и внутривенно вводили аналогичную с опытом дозу гепарина.

Результаты проведенных экспериментов свидетельствуют, что происходит уменьшение гемолитической активности системы С как в контрольной группе животных, так и при подключении всех испытанных сорбентов. Наиболее резкое понижение активности прослеживалось при использовании угля СКН-2К, где к 2-х часовой отметке активность С снижалась на 92% и к 4 часам составляла 1% от исходного уровня. Гипореактивное состояние системы С сохранялось до 6 часов, затем наблюдалось повышение активности до 39% от исходного к 24 часам опыта. После гемоперфузии через Агарозу 4Б отмечалось линейное падение уровня активности до 6 часов с повышением активности системы С до 42% через сутки. Модификация агарозной матрицы белками (БСА и белок A S.aureus) оказывала влияние на комплементарный каскад. На Агарозу-БСА реакция системы С менее выражена (падение уровня активности до 44% к 6 часам и его восстановление до 61% от исходного к 24 часам). Имасорб А-700, который имеет в качестве селективного лиганда более реактогенный белок по сравнению с БСА, приводит к более резкому падению активности С к 4 часам (19% от исходного уровня) с последующим незначительным возрастанием активности. К 24 часам эксперимента уровень активности системы С в плазме мышей составил 25% его исходного значения. Чистая агарозная матрица, таким образом, по своим анти-комплементарным свойствам занимает промежуточное положение между Агарозой-БСА и Имасорбом А-700, что указывает на определенный вклад в процесс активации С, который вносят белковые структуры, иммобилизованные на твердофазном носителе. При использовании ГПА падение уровня комплементарной активности наблюдалось на протяжении всего эксперимента (12% от исходного к 24 часам). Аналогичная динамика характерна и для контрольной группы мышей, только уровень активности снижался значительно меньше.

Наряду с сорбционными и активационными процессами, которые влияют на систему комплемента при контакте крови с поверхностью сорбентов и приводят к изменению активности этой системы, известно, что гепарин также обладает антикомплементарной активностью. Это подтверждают и результаты наших исследований. Он непосредственно связывается с С1 -ингибитором и усиливает его ингибирующее действие. При этом гепарин является также конкурентным ингибитором расщепления С4 и С2, а также препятствует связыванию фактора В с СЗЬ и способствует взаимодействию последних с Н и I.

Таким образом, падение активности системы С в плазме крови мышей при гемоперфузии через различные ге-моконтактные препараты может иметь различную природу и каждый конкретный механизм вносит свой определенный вклад в функционирование каскада комплемента.

СОВМЕСТНОЕ ПРИМЕНЕНИЕ СОРБЕНТА И АНТИСЕПТИКОВ ВОДОРОСЛЕВОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ПРИ ЭКССУДАТИВНОМ ДИАТЕЗЕ

Кашутин С.Л., Афанасенков В.Ф., Добродеева JI.K., Щеголева Л.С.

Институт физиологии природных адаптаций УрО РАН, г. Архангельск, Россия

Детский экссудативный диатез в основном ассоциируется с функциональными нарушениями желудочно-кишечного тракта, иммунной и эндокринной систем. Лечение этого заболевания относится к весьма сложным терапевтическим проблемам. Полифункциональность изменеий предполагает по-липрагмазию. С этих позиций представляло интерес изучение терапевтического эффекта от препаратов водорослевого происхождения, сочетающих свойства антисептиков, иммунокорректоров и энтеросорбентов.

Проводилось клинико-иммунологическое обследование детей больных детским экссудативным диатезом в возрасте от 7 месяцев до 3 лет. Лечебные мероприятия, проводившиеся в амбулаторных условиях, включали применение не менее месяца энтеросорбции (1% гель альгината калия) и иммунокоррекции продуктами комплексной обработки водорослей, сочетающими свойства антисептиков - в первые 10 дней фи-толона и, в последующие 10 дней водного экстракта ламинарий (ламисептона) в разовой дозе 1 капля на кг веса. Указанные препараты разработаны совместными исследованиями сотрудниками лаборатории морских водорослей (заведующая Дяднцина А.М.) СевПИНРО и лабораторией экологической иммунологии (заведующая проф. Добродеева Л.К.) Архангельского Института физиологии природных адаптаций УрО РАН. В состав терапии не входили антигистаминиые средства и препараты кальция; местное лечение осуществлялось смазыванием очагов поражения 1% раствором перманганата калия и 1% гепариновой мазью. Клинико-иммунологический контроль проводился дважды до лечения и при наступлении улучшения, когда оставалось легкое шелушение и незначительная гиперемия в области щек. Группу контроля составили дети такого же возраста, общее лечение которых проводилось стандартными общепринятыми методами, а местное лечение не отличалось от опытного. Иммунологическое обследование включало определение фагоцитарной активности клеток периферической крови и слизистой кишечника, а также фено-типирование лимфоцитов методом непрямой иммунонерок-сидазной реакции.

Наступление ремиссии при применении 1% геля альгината калия и фитолона происходит через легкое обострение кожного процесса у 70% больных, наступающее через 1-2 дня после начала терапии, проявляющееся в усилении гиперемии, зуда, и появления новых пятен. При монотерапии 1% гелем альгинатом калия обострение наступает на 7

- 8 день. Обострение длится 4 - 5 дней, после чего через 5

- 7 дней (после окончания обострения) на коже туловища и конечностей гиперемия и зуд становится менее значительными, но сохраняется еще яркая эритема с расчесами, покрытыми геморрагическими корочками на щеках. Стихание кожного процесса на лице наступает позже, и в среднем, к 21 дню экссудативный диатез проявляется в виде легкого шелушения и незначительной, периодически возникающей гиперемии, в области щек. Следует отметить, что обострение кожного процесса более выражено, при назначении в первые дни ламисептона, чем фитолона, особенно при дисбактериозе, формируемом за счет грибов рода Candida, в отличии от дисбактериоза при стафилококковой

инфекции. При назначении общепринятых методов лечения, особенно при акцентировании на проведение местного лечения, в том числе в ряде случаев кортикостероидными мазями, разрешенными в детской практике, кожный процесс течет монотонно; любые изменения в диете сопровождаются обострениями, тогда как проведение энтеросорбции и иммунокоррекции позволяет расширить рацион без ухудшения кожного процесса. Эффективность лечебных мероприятий сопровождается изменениями в периферической крови: снижается содержание нейтрофильных лейкоцитов с признаками старения, активированных форм Т-лимфоци-тов (СОЗ ), а также С038 клеток (с 0,96±0,11 х■ 10Ч кл/л до 0,48±0,05 х 101' кл/л), имеется резкое снижение концентрации С022 ) В-клеток (с 1,17±0,12 х 109 кл/л до 0,62±0,06 х-101' кл/л; р<0,01), ^А (с 1,89±0,21 г/л до 1,31 ±0,13 г/л; р<0,01) и (с 1,82±0,19 г/л до 1,29±0,13 г/л; р<0,01), концентрации ЦИК (менее 2,0 г/л), а также увеличение в структуре лимфоцитограммы малых форм лимфоцитов (до 26,75±2,73%) и% активных фагоцитов. Обострение кожного процесса в первые дни лечения, по-видимому, также связаны с усилением фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов (с 27,12±0,11% до 34,12±0,13%; р<0,01) и местного антителообразования (в^А) непосредственно в кишечнике.

Зависимость уровня заболеваемости, манифестации и клинического течения хронической патологии кожи от изменений метеоусловий, несомненно, имеет огромное значение. С этих позиций представляло интерес изучения динамики иммунологической реактивности больных нейродермитом в зависимости от сезонных изменений метеофакторов.

Выявлена зависимость частоты обострения нейродермита от смены фотопериодики: неблагоприятные условия для течения нейродермита складываются осенью, зимой и весной. Представляло интерес сравнительное изучение иммунологической реактивности в зависимости от изменения продолжительности светового дня у больных нейродермитом. Осенью и зимой обострение протекает на фоне дефицита общего пула Т-лимфоцитов и функционально активной их части (СОЗ ) (0,84±0,11 Гкл/л против 1,05±0,11 Гкл/л; р<0,01).

Сравнивая показатели иммунологической реактивности, в летние месяцы регистрируется высокая активность всех основных процессов. Так концентрация фенотипов функционально активных СОЗ и С04 Т-лимфоцитов, отражающие процессы дифференцировки, составили в июне 1,05±0,11 Гкл/ л против 0,13±0,007 Гкл/л в декабре; р<0,01 и 1,16±0,12 Гкл/ л против 0,78±0,06 Г кл/л; р<0,01. Кроме того, летом повышаются резервные возможности Т-клеток (0,48±0,02 Гкл/л против 0,13±0,007 Гкл/л; р<0,01). Цитотоксическая активность клеток в наиболее благоприятные месяцы для течения нейродермита, реализуемая через фенотипы лимфоцитов С08 , СО 16 и СО 11 практически в 2 раза превышает таковую в декабре (р<0,05-0,01). Процессы антителообразования также довольно значительны (1,09±0,09 Г кл/л против 0,85±0,07 Г кл/ л). Высокому уровню дифференцировки иммунокомпетент-ных клеток летом соответствует высокий уровень их активации через рецепторы к трансферрину (С071) и интерлейки-ну-2 (С025), а также и лимфопролиферации, регистрируемый по содержанию СОЮ и СО^М клеток (р<0,01).

Таким образом, в месяцы более легкого течения нейродермита, его ремиссии, а следовательно, и меньшей обращаемости, активизированы практически все иммунозависимые процессы: пролиферации, дифференцировки и активации посредством интерлейкин-2 и трансферрин-зависимыми механизмами, более полноценны резервные возможности имму-нокомпетентных клеток.

ИММУНОТЕРАПИЯ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА РАЗЛИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ

Кеворков H.H., Бахметьев Б.А., Черешнев В.А.

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН. Пермь, Россия

В настоящее время большинство клинических иммунологов, терапевтов и педиатров рассматривают возможность развития хронического воспалительного процесса любой локализации (бронхолегочная, мочевыводящая системы, кожа, ЛОР-органов, репродуктивной системы и прочее) как следствие недостаточности функции иммунной системы, наличия пролонгированного вторичного иммунодефицитного состояния (ВИС). В развитие последнего свой, далеко не малый вклад, вносит и столь широко практикуемая антибиотикоте-рапия, поскольку большинство антибиотиков во-первых обладают бактериостатическим действием и, во-вторых, с различной степенью выраженности снижают активность имму-ноцитов. И все же, главной причиной развития ВИС нужно признать удручающую экологическую ситуацию сложившуюся в нашей стране. Дистрессы, несбалансированное питание, низкое качество питьевой воды, вредные выбросы автотранспорта и промышленных предприятий, а также воздействие многих других вредных факторов приводят к нарушению функционирования того или иного звена иммунной системы, а чаще к развитию комбинированных форм ВИС. При этом исследование иммунной системы людей с одной стороны можно рассматривать как индикаторный набор тестов, выявляющих на достаточно раннем этапе экологическое неблагополучие существования индивидуума, с другой - позволяет целенаправленно терапевтически вмешаться в ситуацию, снять или в значительной степени ослабить основные проявления ВИС, что, в свою очередь, весьма благотворно сказывается на клиническом течение заболевания.

Говоря о хроническом воспалительном процессе любой локализации, следует уточнить, что с нашей точки зрения существует принципиальная разница в иммунологическом ведении больного в фазе ремиссии и при обострении заболевания. В первом случае, видимо следует говорить об иммуно-профилактических мероприятиях; во втором - о собственно иммунотерапии с последующей иммунореабилитацией.

Во всех случаях при назначении иммунокоррегирующих препаратов необходимо придерживаться принципов посимп-томности и адекватности т.с. в каждом конкретном случае,

ориентируясь на выявляемые изменения иммунограммы (избирательная или комбинированная форма ВИС и выраженность изменений), назначать больному те лекарственные средства, которые относительно избирательно воздействуют на пораженное звено иммунитета в комбинации, если это необходимо, с антибиотиками и другими противомикробными препаратами. В комплексную терапию целесообразно включать поливитамины, микроэлементы, аминокислоты, адаптогены, энтеросорбенты и гепатопротекторы.

ОЦЕНКА КЛИНИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИММУНОМОДУЛЯТОРА ЛИКОПИД В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ЧАСТО И ДЛИТЕЛЬНО БОЛЕЮЩИХ (ЧДБ) ДЕТЕЙ

Кирюхин A.B., Парфенова H.A., Дегтярева М.В., Чумакова М.М., Андронова Т.М.

Областная клиническая больница, детская больница №1, г. Владимир,

Российский Государственный Медицинский Университет,

Москва, Россия

Проблема профилактики, лечения и реабилитации часто и длительно болеющих детей является одной из наиболее актуальных в педиатрии.

Целью работы. Оценка клиническлй эффективности иммуномодулятора Ликопид в комплексной терапии часто и длительно болеющих детей в возрасте от 1,5 до 13 лет.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 149 часто болеющих детей, которые посещали детские дошкольно-школьные учреждения. Из них 93 ребёнка в возрасте от 1,5 до 5 лет получали Ликопид в дозе 1 мг 1 раз в день per os в течение 10 дней, 56 детей в возрасте 6-13 лет получали Ликопид по 1 мг 2 раза в сутки в течение 10 дней. У всех детей в анамнезе отмечались частые случаи острых респираторных вирусных инфекций, а также обострения хронических инфекционно-воспалительных заболеваний респираторного тракта (от 3 до 10 раз в течение года). Для лабораторного обоснования целесообразности иммуномодулирующей терапии Ликопидом обследовали 45 детей из тех же детских коллективов, болеющих 1-2 раза в год.

Проводилось клиническое наблюдение в динамике, исследование формулы периферической крови, сывороточных уровней иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Определяли фагоцитарный

ЧДБ дети 1,5-5 лет, получавшие Ликопид, при взятии под наблюдение ЧДБ дети 1,5-5 лет, получавшие Ликопид, через 1 год от проведения иммунокоррекции

Частота заболеваний за год. 5,44±0,15 2,48+0,16 Р<0,01

Средняя длительность

заболеваний. 11,15±0,42 8,93+0,36 Р<0,01

Доля среднетяжёлых и тяжёлых

форм заболеваний. 75,3% 42,5%

Сывороточный уровень 1дА (г/л) 0,32±0,05 0,78+0,2 Р<0,05

Фагоцитарный индекс (%) 13,24±1,32 22,2+1,6 Р<0,01

Количество детей, относящихся

к группе ЧДБ болеющих. 100% 19,5% Р<0,01

индекс (%), абсолютное и относительное количество Т-лим-фоцитов. Все лабораторные исследования проводились до начала терапии Ликопидом, через 10 дней, 6 и 12 месяцев от начала исследования. Клиническую эффективность Ликопи-да оценивали в течение года по наличию у пациентов, участвующих в исследовании, случаев возникновения ОРВИ или обострений бронхита. Оценивали тяжесть и длительность заболеваний перед началом иммуномодулирующей терапии и через 1 год после её окончания.

Результаты. 1) В группе ЧДБ детей младшего возраста по сравнению с болеющими 1-2 раза в год перед началом исследования было достоверно снижено количество лейкоцитов и, в частности, лимфоцитов. Поскольку Ликопид стимулирует активацию моноцитов и макрофагов, выделение ими цитокинов, усиливающих пролиферацию лимфоцитов, то выявленные изменения могут служить обоснованием для включения Ликопида в комплекс лечебных мероприятий на фоне базисной терапии, а также в качестве монотерапии в меж-рецидивный период. 2) В группе ЧДБ детей 1,5-5 лет в течение 1 года наблюдения были выявлены следующие изменения (табл.)

3) В старшей возрастной группе через 1 год после иммунотерапии также было установлено достоверное уменьшение частоты (1,88±0,1 против 4,22±0.2 до лечения) и длительности заболеваний (7,5±0,3 против 9,1±0,5), доли среднетяжёлых и тяжелых форм (33,3% против 87% до лечения Ликопидом), количества детей, относящихся к группе ЧДБ (14,7% против 100% до иммунотерапии), увеличение сывороточного уровня IgG. Ни в одном случае не было побочных реакций.

Заключение, включение Ликопида в комплексную терапию ЧДБ детей различного возраста является безопасным и высоко эффективным.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОТЕРАПИИ БАКТЕРИАЛЬНЫМИ ИММУНОМОДУ-ЛЯТОРАМИ НА ПОКАЗАТЕЛИ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ

Климов Э.В.

Лаборатория клинической иммунологии и аллергологии, санаторий им. Орджоникидзе МинЭнерго РФ, г. Сочи

Проведено обследование 76 часто и длительно болеющих детей (ЧБД) в возрасте от 3 до 11-ти лет в процессе иммунотерапии бактериальными иммуномодуляторами рибомунил (Р), ИРС-19 и их комбинации (длительность мониторинга -12 месяцев).

В исследовании принимали участие ЧБД, частота острых респираторных заболеваний у которых превышала 6 раз в год. В ходе обследования осуществляли фенотипирование лимфоцитов периферической крови методом непрямой иммунофлуоресценции после их специфического связывания с моноклональными антителами к поверхностным дифференцировоч-ным антигенам (CD3, CD4, CD8, CD 16, CD24); концентрацию иммуноглобулинов сыворотки крови IgA, IgG, IgM проводили с помощью иммунотурбидиметрии (Tina-Quant), а уровень секреторного IgA и лизоцима в слюне методом РИД.

Среди обследуемых пациентов лишь у каждого четвертого ЧБД не было выявлено никаких отклонений со стороны исследуемых показателей. У 49% ЧБД имело место снижение общего количества Т-лимфоцитов, главным образом за счет снижения числа CD4 лимфоцитов. Значительных отклонений в содержании В-лимфоцитов (CD24 ) и NK-клеток (CD 16 ) отмечено не было. У 75% ЧБД были зарегистрированы низ-

кие значения содержания э^А в слюне при сравнении со здоровыми детьми аналогичного возраста. В ряде случаев, одновременно с низким уровнем продукции 1§А на слизистой, фиксировались низкие значения концентрации ^А в сыворотке. Корреляции между невысоким уровнем ^А и б^А и показателями популяционного и субпопуляционного состава лимфоцитов не отмечалось.

Наиболее продолжительная стимуляция синтеза сывороточного и секреторного ^А и лизоцима была зафиксирована при комбинированной иммунотерапии Р и ИРС-19 на протяжении всего периода мониторинга, а при монотерапии Р - в течение 9-ти месяцев исследований. У большинства ЧБД, пролеченных Р и ИРС-19 позитивные сдвиги гуморальных факторов защиты коррелировали с выраженным снижением частоты респираторных инфекций, а также со значительным уменьшением необходимости антибиотикотерапии. В возрастном аспекте это в большей степени касалось ЧБД младшей возрастной группы - 87,5% детей от 3-х до 7-ми лет за 12 месяцев мониторинга болели менее 2-х раз; с увеличением возраста эффективность иммунотерапии Р снижалась, а ИРС-19, наоборот, возрастала, особенно, в части снижения частоты применения противомикробных препаратов - 73% ЧБД болели менее 2-х раз в год. Необходимо заметить, что Р наиболее отчетливо оказывал влияние на синтез ^А, б^А и общее число Т-лимфоцитов на протяжении всего мониторинга, а ИРС-

19 в большей степени воздействовал на продукцию э^А и

в течение 6-ти месяцев исследования.

Таким образом, иммунотерапия бактериальными иммуномодуляторами, благотворно влияя на основные показатели системного и местного иммунитета, позволяет снизить частоту респираторных заболеваний, а также необходимость использования противомикробных препаратов у часто болеющих детей.

ВЛИЯНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНА-13 НА СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ У БОЛЬНЫХ ГЕПАТИТОМ С

Конусова В.Г., Романова Е.С., Кузнецов Н.И., Чурилова И.В., Леонова Н.В., Дроздова Ю.И., Симбирцев А.С.

ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов,

Кафедра инфекционных болезней МАПО, Санкт-Петербург

Известно, что 1Ь-1|3, провоспалительный цитокин плеот-ропного действия с одной стороны активирует кислородный метаболизм фагоцитирующих клеток, а с другой стимулирует продукцию супероксиддисмутазы (СОД), фермента обеспечивающего актиоксидантную защиту в организме. В связи с этим представляет большой интерес изучение оксидантно-антиоксидантных процессов у больных гепатитом С и В, получавших с лечебной целью препарат интерлейкина-1(3 (Бе-талейкин), так как известно, что в основе нарушений наблюдаемых при данной патологии лежат свободно-радикальные процессы.

В исследование было включено 19 больных хроническим гепатитом С и В, которые получали Беталейкин. Препарат вводили внутривенно, капельно в дозе 5-8 нг/кг веса больного в 300 мл физиологического раствора в течение 3 часов. На курс больные получали по 5 инъекций через день. Кровь для исследования от больных получали до и сразу же после первого введения препарата, через сутки после введения, в середине курса лечения (5-й день от начала введения препарата),

на следующий лень после окончания курса и череч месяц после проведенного курса лечения. Исследовали следующие показатели: продукцию кислородных радикалов клетками периферической крови методом люминол-завпеимой хсмилю-мииесцснцнн (ХЛ), используя хемилюминомегр модель 1251 (LKB), Результаты реакции выражали светосуммой в мВ, продуцируемых клетками цельной крови больных за 30 минут. Уровень СОД в эритроцитах изучали кверцетиновым методом (за единицу активности принимали концентрацию фермента, вызывающую ингибирование реакции окисления квер-цетпна на 50%). Процессы псрекиспого окисления липидов оценивали по содержанию МДА (малонового альдегида) в сыворотке крови, определяемого по реакции с тиобарбитуро-вой кислотой.

На основании проведенных исследований было показано, что до введения препарата уровень спонтанной люминолза-впеимой ХЛ у больных хроническим гепатитом С и В не отличался от нормы (3,59±0,32 и 3.95±0,1 соответственно) и не изменялся в процессе лечения. Вместе с тем, индуцированная форбол-мирнстат-ацетатом (ФМА) ХЛ у больных была снижена до лечения (12,4±1,3), но сравнению со здоровыми ( 18,6±0.3). Непосредственно после введения препарата Бета-лейкпн нами отмечено недостоверное увеличение индуцированной ХЛ (15,4±2,3). Через месяц после лечения этот показатель был достоверно выше и достигал нормальных величин ( 17,2± 1,51), что свидетельствовало о нормализации фагоцитарной реакции у больных хроническим вирусным гепатитом.

Содержание СОД в эритроцитах больных гепатитом С и В до лечения было различным: у 12 больных этот показатель был ниже нормы ( 16000±1000 ед./мл цельной крови), что свидетельствовало об истощении антиоксидантпой системы. У 7 больных уровень СОД в эритроцитах соответствовал норме (29000±6000 ед./мл цельной крови). После лечения Беталей-кином содержание СОД в эритроцитах у всех больных было в пределах нормы (25,4±2,9).

При анализе активности процессов псрекиспого окисления липидов до лечения установлено, что у 5 больных МДА в сыворотке был повышен (8,73± 1,19, при норме 3,9±0,6), что являлось показателем псрекиспого окисления липидов, по-впднмому, свидетельствовало об активности вирусного процесса. Через месяц после лечения Беталейкином этот показатель снижался до нормального уровня (4,34±0,35). У 14 больных уровень МДА до лечения был в пределах нормы (5.63±0,6 ) и оставался таковым до конца лечения.

Таким образом, нами показано, что лечение Беталейкином больных хроническим гепатитом С и В приводит к нормализации свободнораднкальных процессов в организме.

СТАДИОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИГЕНЫ В ОЦЕНКЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С ПЕРЕЛОМАМИ ДЛИННЫХ КОСТЕЙ МЕТОДОМ МДМ-ТЕРАПИИ

Коханов A.B., Мнрошников В.М., Сурииков Д.Б., Коханов С.В.

Астраханская государственная медицинская академия, 11ПК4К "Экологическая медицина ”

ООО ГПК "Асшраханьгазпром ”,

Поликлиника №42 горболмшцы № 20, Санкт-Петербург, Россия

Между процессами иммуногенеза и репаративной регенерации существует многоуровневая система взаимных вли-

яний. Предполагается участие в данной взаимосвязи стади-оепецифических антигенов, для большинства из которых обнаружена иммупорегуляторная активность (Бабаева А.Г, 1972, Мнрошников В.М., 1992 и др.).

В этом плане актуально включение иммунохимических тестов на стадиоспецифические белки, отражающих как локальные процессы посттравматической регенерации, так и состояние компенсаторно-приспособительных систем организма, в комплекс динамической оценки у больных с повреждениями опорно-двигательного аппарата (Коханов A.B., Ми-рошников В.М, 1999).

Особенно важно прогнозировать вероятность срыва процессов адаптации в условиях применения современных методов устранения костных дефектов (остеосинтез одновременно на 2-3 уровнях, пролонгирование репаративного остеосинтеза, применение массивных аллотрансплантатов и т.п.).

Ранее проведённые нами исследования подтвердили адекватность использования наряду с маркёрами резорбции и пролиферации костной ткани, показателей иммунного статуса в комплексе с иммунохимическими тестами на белки сыворотки крови, ассоциированные е различными физиологическими и патологическими состояниями.

Целью работы являлась оценка эффективности лечения травматологических больных, в том числе эффективности МДМ-терапии, на основе клинических и иммунохимических показателей.

Наряду с общеклиническими анализами крови в 472-х образцах сыворотки у 277-ми больных с диафизарными переломами бедренной, плечевой и обеих берцовых костей, ие осложнённых травматическим шоком, определяли в динамике белки острой фазы (СРБ, связанный с беременностью ос,-гликопротеин - СБАГ, лактоферрин - ЛФ), онкофетальные маркёры: а-фетопротсин (АФП); раковоэмбриональный антиген (РЭА); плацентарную щелочную фосфатазу (ПЩФ) и иммуноглобулины классов IgA, IgG, IgM. Экспериментальная группа больных в отличие от контрольной группы получала дополнительно курс мезоди-энцефальной модуляции (МДМ-терапию). Динамическое наблюдение у части больных продолжалось свыше 3-х месяцев.

Показано, что уровень экспрессии онкофетальных белков и СБАГ, отражающий процессы репаративной регенерации, коррелирует с рентгенологическими и биомеханическими признаками заживления. Выявлено повышение уровня АФП в процессе консолидации костей почти в 10 раз, а РЭА - в 4 раза. Появление ПЩФ регистрируется значительно позднее по сравнению с другими антигенами (в первые пять дней ПЩФ методом встречного электрофореза обнаруживается лишь в 11% случаев, в то время как на второй неделе - в 51% наблюдений). Отмечен параллелизм в направленности изменений между некоторыми показателями гомеостаза: лейкоцитоз - лактоферрин; иммуноглобулины - СБАГ. Кинетика СРБ значительно колеблется в зависимости от возраста и пола больных с механической травмой.

Установлено, что у травматологических больных, получавших МДМ - терапию, достоверно ускоряется клиническая реабилитация, а также нормализация уровня острофазовых белков и иммунологических показателей.

Выявленные нами особенности кинетики онкофетальных и острофазовых белкой отражают различные стороны восстановительного процесса и имеют прогностическое значение.

ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОГО ИНТЕРФЕРОНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ СИСТЕМЫ ИНТЕРФЕРОНА БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

Кузнецов С.И., Смирнов H.A., Латаш В.Г., Арнненко Р.Ю., Аникин В.Б.

Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования,

Научно-исследовательский институт гриппа РАМН, Санкт-Петербург, Россия

Особый интерес интерферон (1FN) представляет в плане его клинического использования. Клиническое применение индукторов IFN и особенно рекомбинантных препаратов IFN показало очевидную перспективность данных средств для лечения и профилактики некоторых вирусных и онкологических заболевании. Настоящее исследование предполагало отследить влияние экзогенного IFN, которое он оказывает па изменения вну три системы 1FN больных с различными заболеваниями вирусной н невирусной этиологии.

У 45 больных было в динамике исследовано состояние IFN-статуса па фоне получаемой ими интерферонотерагши. Курс лечения состоял в 2-3-х недельном ежедневном в/м введении рекомбинантных препаратов IFN. В основном больные получали IFN-a (Реаферон,Россия), по некоторым вводили IFN-y (Имукин, ФРГ). Исследование IFN-статуса включало определение общего сывороточного IFN, а также регистрацию способности лейкоцитов крови больных осуществлять продукцию IFN различных типов на индукторы in vitro. IFN-статус у больных оценивали до начала лечения, через сутки после первой инъекции, в середине курса, через 1-2 суток после окончания введения препарата и в отдаленные сроки (через 2-5 месяцев после выписки больных). Обозначенные выше показатели статистически обрабатывали для общей группы больных, а также в последующем пх делили на две подгруппы: I) больные (22 человека) с заболеваниями вирусной природы и 2) остальные больные (23 человека) с нсинфекци-онной патологией.

Обращают на себя внимание резко измененные показатели IFN-статуса у обследованных больных до начала лечения. Общий сывороточный IFN колебался в разных подгруппах больных в пределах 23-25 ME/мл, в то время как у здоровых доноров этот показатель не должен превышать фоновых значений (0-4 ME/мл). С другой стороны, индуцированная продукция лейкоцитами больных различных типов IFN составляла около 30% от продукции донорских IFN-синтезирующих клеток. IFN-статус здоровых лиц был получен ранее в той же лаборатории и соответствовал для общего сывороточного IFN

- 3,1±1,6 ME/мл; IFN-a/ß - 396,4±41,7 ME и IFN-y- 20б,3±26,0 ME (Яковлев A.A. и соавт.,1997). Активность циркулирующего IFN в сыворотке мало менялась на протяжении всего периода обследования и практически не зависела от заболевания (вирусной или невирусной этиологии). Сразу после окончания курса IFN-терапии отмечалась тенденция к возрастанию активности циркулирующего IFN особенно в подгруппе больных с неинфекционной патологией. Одпако в отдаленные сроки в обследованных подгруппах тенденция в активности сывороточного IFN сменилась на противоположную, хотя данные различия были также недостоверны. Противоположные изменения можно отметить в продукции клетками больных индуцированного in vitro IFN. Сразу после окончания курса лечения снижение индуцированной продукции IFN наблюдали для его a/ß- и у- типов у больных с вирусной и невирусной патологией. Причем для неинфекционных боль-

иых это угнетение продукции индуцированного IFN было достоверным. В отдаленные сроки наблюдения продуктивные свойства лейкоцитов в отношении IFNcx/p восстанавливались, даже превысили их уровень, который наблюдали до начала лечения. Продукция IFN-y лимфоцитами in vitro в эти сроки восстановилась только в подгруппе больных нсинфекцион-ными заболеваниями, в то время как реактивность клеток у вирусных больных не достигла исходного уровня.

Таким образом, получены предварительные данные о влиянии экзогенного IFN на состояние функциональной активности системы 1FN больных с различными заболеваниями. Выявлены незначительные колебания в уровне общего сывороточного IFN на протяжении всего курса лечения и в отдаленные сроки после его окончания. Индуцированная продукция IFN различных типов in vitro была более выражена и зависела от индивидуальной интерфероногенной реактивности больного, его заболевания и типа экзогенного IFN, вводимого при лечении.

РЕАКЦИЯ СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА НА ГЕМОПЕРФУЗИЮ ЧЕРЕЗ СОРБЕНТЫ В УСЛОВИЯХ ИММУНОКОМПЛЕКСНОЙ ПАТОЛОГИИ ПОЧЕК У КРОЛИКОВ

Латаш В.Г., Кузнецов С.И.

Научно-исследовательский институт гриппа РАМН, Санкт-Петербург, Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования, Россия

Система комплемента (С) представляет собой сложную эффекторную систему белков и гликопротеинов плазмы крови, которая играет существенную роль в поддержании гомеостаза. Комплементарный каскад может запускаться различными агентами эндогенного и экзогенного происхождения. В зависимости от активирующего стимула процесс активации системы па начальном этапе может развиваться разными путями, которые в завершающей фазе приводят к образованию общего для обоих путей эффекторного мембранолитического комплекса. Существенным для проведения гемосорбции представляется тот факт, что в результате взаимодействия плазмы крови с поверхностью сорбентов происходит инициация белков системы контактной активации, ключевым компонентом которой является фактор Хагемана (XII). Фактор Хагемана активируется при контакте с любой чужеродной поверхностью (сорбент), а его активная форма способна “запускать” все специализированные ферментативные каскады плазмы, в том числе через взаимодействие с С1 s и систему комплемента. Значительное влияние на функционирование системы С оказывают патологические процессы, развивающиеся в организме при различных заболеваниях. Цель настоящего исследовании состояла в оценке способности системы С отвечать запуском комплементарного каскада по классическому и альтернативному путям активации на включение в систему гемоциркуляции кроликов экстракорпорального контура с различными сорбентами. Модифицированную реакцию системы С в данных экспериментах можно было ожидать из тех соображений, что гемосорбцию у кроликов проводили на фоне развития у них тяжелой аутоиммунной патологии почек.

Иммунокомплексную патологию у кроликов моделировали путем ежедневного в/в введения бычьего сывороточного альбумина (БСА) в течение 4-х месяцев. Гемоперфузию у кроликов проводили под нембуталовым наркозом после гепари-низации, катетеризируя бедренные сосуды и используя схему

подключения сорбционных колонок артерия > вена. В качестве сорбционных препаратов использовали: уголь СКН-2К, Агароза 4Б (крупнозернистая), Агароза -БСА (БСА, иммобилизованный на агарозе 4Б) и Имасорб А-700 (белок А Staphylococcus aureus, ковалентно связанный с агарозой 4Б). Для оценки общей гемолитической активности системы С (СН50) по классическому пути в качестве гемсистемы использовали оптимально сенсибилизированные эритроциты барана, для регистрации активации системы С по альтернативному пути - свежеполученные эритроциты человека. Забор крови для проведения анализов осуществляли до гемосорбции, на 20-ой и 40-ой минутах процедуры, через 30 мин после ее завершения и спустя 2-4 суток по окончанию эксперимента. Анализы проводили в пробах крови, полученных из общего кровотока и сразу после колонок.

В проведенных экспериментах реакция системы С на контакт крови с сорбентами (Имасорб А-700, СКН-2К, Агароза-БСА) в постколоночных пробах была однотипна как для классического, так и альтернативного путей. Через 20 минут после начала гемоперфузии отмечали падение общей гемолитической активности системы С с последующим ее возрастанием к 40-ой минуте сорбции. Реакция системы комплемента на чистый агарозный носитель была противоположной. Иначе изменялась активность С в системном кровотоке. При этом также прослеживались общие тенденции для классического и альтернативного путей. Более “мягко” система С отреагировала на гемоперфузию через Имасорб А-700 и угольный сорбент СКН-2К, в то время как контакт крови с чистым агарозным носителем и БСА, иммобилизованным на агарозе, приводил к выраженному колебанию общей гемолитической активности системы С в разные сроки гемосорбции и после нее. Реакция системы С на Имасорб А-700 для классического и альтернативного путей активации разнонаправлена, однако антикомплементар-пые свойства данного препарата выражены незначительно.

Таким образом, исследованные сорбенты при проведении гемоперфузии у кроликов с иммунокомплсксной патологией почек запускают комплементарный каскад по обоим путям активации - альтернативному и классическому. Степень выраженности реакции системы С и динамика развития в ней активационных процессов завися! от химической структуры гемоконтактного препарата и времени экспозиции с ним.

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЦИКЛОФЕРОНОМ ХЛАМИДИЙНОГО ЭНДОЦЕРВИЦИТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МОНИТОРИНГА ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЛИМФОЦИТОВ

Ледванов М.Ю., Стукова Н.Ю., Журавель В.А., Семененко М.С., Фирстова В.В., Кравцов А.Л., Вихрев Д.В., Китков А.В., Егорова Е.В., Бутковская М.Н.

Пензенский государственный университет, г. Пенза,

РосНИПЧИ "Микроб’', г. Саратов, Россия

При урогенитальном хламидиозе (УХ), как правило, регистрируются значительные нарушения иммунологического гомеостаза. Однако отсутствие четких критериев степени нарушения иммунологического гомеостаза при УХ и, соответственно, обоснованных показаний к назначению тех или иных иммуномодуляторов (отдельно или совместно с антибиотиками) не позволяет в достаточной мере эффективно проводить комп-

лексную патогенетически корректную терапию заболевания. В связи с этим целью работы явилось изучить изменения иммунологического гомеостаза у женщин с хламидийным эндоцер-вицитом, разработать на основе данных иммунограмм показания и критерии эффективности иммуномодулирующей терапии индуктором эндогенного интерферона циклофероном.

В работе исследован характер функциональных и метаболических изменений в отдельных электрокинетически гетерогенных субпопуляциях лимфоцитов крови у женщин с эндо-цервицитом хламидийной этиологии. Электрофоретическое фракционирование клеток проводили методом препаративного клеточного электрофореза в свободном потоке жидкости на аппарате Elphor VaP-5. Регистрацию соотношения лимфоцитов, находящихся в различных фазах клеточного цикла (G0+G1, S, G2+M) осуществляли после окраски специфически связывающимися е ДНК флуорохромами (этидиум бромид + митра-мицин) на проточном цитофлюориметре 1СР-22 (PWYWE).

Сравнительный анализ гистограмм распределения лимфоцитов крови у здоровых и больных хламидийным эндоцервици-том женщин позволил показать отчетливое снижение электрофоретической подвижности (ЭФП) лимфоцитов в группе больных, а также достоверные изменения у больных профиля распределения лимфоцитов по ЭФП. Особенно выраженные изменения ЭФП касались фракций лимфоцитов с низкой электрофоретической подвижностью. Представлены закономерности, отражающие значительные изменения функциональных характеристик лимфоцитов крови у женщин с хламидийным эндоцер-вицитом: увеличение числа клеток, находившихся в фазе синтеза ДНК (S-фаза клеточного цикла), постсинтетическом периоде интерфазы и собственно митозе (G2+M - фазы клеточного цикла) в низкоподвижных фракциях. Выявлена способность цикло-ферона обеспечивать восстановление иммунологического гомеостаза, выражающееся в нормализации электрокинетических и пролиферативных свойств различных субпопуляций лимфоцитов. Впервые с использованием конкретных значений электрофоретических свойств лимфоцитов показана зависимость между исходным состоянием иммунной системы у больных, страдающих эндоцервицитом хламидийной этиологии, и эффективностью последующей терапии циклофероном.

Обоснована необходимость иммуномониторинга хлами-дийного инфекционного процесса в динамике иммуномодулирующей терапии циклофероном. Определена практическая значимость и количественные критерии комплекса наиболее информативных иммунологических и функционально-метаболических тестов для оценки иммунного статуса женщин с хламидийным эндоцервицитом.

Результаты исследований могут быть использованы в практическом плане для выделения среди больных урогенитальным хламидиозом группы женщин, эффективное лечение которых возможно с использованием индуктора эндогенного интерферона - циклоферона без применения антибиотиков.

ГУМОРАЛЬНЫЕ ФАКТОРЫ СИСТЕМНОГО И МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО БРОНХИТА РИБ0МУНИЛ0М

Литовская A.B., Егорова И.В.

Научно-исследовательский институт гигиены и профпатологии М3 РФ,

Нижний Новгород, Россия

Заболеваемость хроническим бронхитом (ХБ) среди работников промышленных предприятий, подвергающихся воздействию раздражающих дыхательные пути аэрозолей, паров и

газов, а также различных видов пыли, выше, чем среди населения в целом. Поэтому проблема повышения эффективности лечения профессионального ХБ, по-прежнему, актуальна.

Известно, что большое значение в развитии и течение ХБ имеют нарушения местного иммунитета респираторного тракта. При использовании в терапии ХБ иммунотропных препаратов бактериального происхождения показаны стимулирующее влияние гликопина на уровни IgA, slgA, специфических антител в бронхиальном секрете и слюне (А.М.Борисова и др., 1996; О.П.Артемова и др., 1996); активирующий эффект рибомунила на уровень slgA (А.М.Борисова и др., 1994).

Цель исследования - изучение динамики состояния гуморального звена системного и местного иммунитета у больных профессиональным ХБ при применении Рибомунила в комплексном лечении указанной патологии в клинических условиях.

Под наблюдением находились 18 больных ХБ (13 мужчин и 5 женщин в возрасте от 39 до 56 лет) в стадии ремиссии или не резко выраженного обострения. Иммунологические исследования проводились до назначения Рибомунила и после 3-х недельного курса терапии препаратом. Определялись концентрации IgM, IgG, IgA в сыворотке крови, slgA, IgA, lgM, IgG в слюне методом радиальной иммунодиффузии, уровень ли-зоцима в слюне нефелометричсским методом, рассчитывался коэффициент сбалансированности (Кеб) показателей местного иммунитета (В.Г.Дорофейчук и др., 1987).

После лечения Рибомунилом по группе в целом наблюдались нарастание уровня IgG в сыворотке крови, в слюне - увеличение лизоцима и понижение IgG, что приводило к существенному уменьшению Кеб, т.е. выраженности нарушения сбалансированности факторов. Повышение IgA слюны отмечалось у 9 из 18 больных, slgA - у 6 из 16. Четкой взаимосвязи содержания иммуноглобулинов сыворотки крови и слюны не обнаружено. Установлен параллелизм в положительной динамике клинико-функциональных и иммунологических характеристик. Наибольшая частота совпадений определялась в отношении состояния иммунитета слюны: нормализация Кеб имела место у 8 из II больных с улучшением клинической симптоматики и функции внешнего дыхания; увеличение уровня IgG сыворотки отмечалось у 6 из 11 нацистов.

Таким образом, терапия Рибомунилом у больных профессиональным ХБ способствовала снижению выраженности дисбаланса гуморальных факторов слюны за счет преимущественного увеличения активности лизоцима и понижения IgG, а также повышению уровня IgG сыворотки кровн.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ИММУНОПРЕПАРАТОВ “БЕСТИМ” И “РОНКОЛЕЙКИН” ПРИ ПОРАЖЕНИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ХЛАМИДИЙНОГО ГЕНЕЗА

Лобзнп Ю.В., Позник А.Л., Смирнов М.H., Симбирцев A.C., Котов А.Ю., Мудрицкий В.М.

Военно-медицинская академия, МО РФ,

НИИ Особочистых Биопрепаратов М3 РФ,

ООО "Биотех",

Санкт-Петербург, Россия

С целыо определения клинической и иммунологической эффективности рекомбинантного препарата IL-2 "Роиколей-кин” и синтетического дипептида гамма-О-глутаминил-Ь-трнптофана “Бсстима” произведено их клиническое испытание на группе больных с острыми поражениями нервной системы (менингиты, менингоэицефалиты) хламидийной этио-

логии. Препарат “Ронколейкин” применялся у 15 больных с данной патологией. Контрольную группу составили больные (n=21) с аналогичной нейроинфекцией, получавших обычную базисную терапию. Препарат “Бестим” применялся у 11 больных с нейрохламидиозами. Контрольную группу составили больные (п=17) с аналогичной патологией, которые на фоне обычной базисной терапии получали плацебо. Все больные находились на стационарном лечении в отделении нейроинфекции городской инфекционной больницы №30 (г.Санкт-Петербург.), и клинике инфекционных болезней ВМА. Хла-мидийная этиология заболевания была подтверждена исследованием спинномозговой жидкости и сыворотки крови методом НРИФ и ИФА на наличие антихламидийных антител, исследованием центрифугата ликвора методом ПИФ и ПЦР на наличие антигенов хламидий. Диагноз подтверждался также с помощью культурального метода - выделением хламидий из спинномозговой жидкости, крови, слизистых оболочек на перевиваемой культуре клеток. Анализ результатов комплексного обследования больных выявил следующую структуру хламидийной этиологии нейроинфекции: (Ch.trachomatis диагностирована у 23,5% пациентов, Ch. pneumoniae у 62,5%, Ch. psittaci у 10,3%, микст-хламидиозы диагностированы у 3,7% больных) .

Всем больным проводилось комплексное иммунологическое исследование крови в динамике. У большинства больных были выявлены значительные иммунопатологические изменения. На фоне лимфопении наблюдалось уменьшение им-мунорегуляторного индекса CD4/CD8 за счет уменьшения числа Т-хелперов. У большинства больных (89%), несмотря на усиление поглотительной функции нейтрофилов, отмечалось угнетение процесса клеточного переваривания. При исследовании цитокинового статуса отмечалось значительное уменьшение индуцированной продукции IL-2, усиление выработки IL-1 и IL-8, как в периферической крови, так и в лик-воре больных. Выявленные нами иммунологические нарушения являются объективным признаком истощения иммунной системы у данной категории больных и явились прямым показанием для назначения им заместительной иммунотерапии препаратом IL-2 - “Ропколейкина”. Данный препарат назначался в подостром периоде заболевания (вторая неделя с момента начала заболевания) по схеме 500.000 ЕД внутривенно капельно, через сутки, 5 инъекций, на фоне базисной терапии. Препарат “Бестим” назначался во второй опытной группе но 100 мкг через сутки внутримышечно 10 инъекций. Все больные получали одинаковую базисную терапию, включающую антибиотики, витамины, мочегонные, десенсибилизирующие, ноотропные препараты и т.д.

Критерием эффективности проведенной нами иммунотерапии служили сроки нормализации основных клинических синдромов, сроки санации СМЖ, а также сроки нормализации иммунологических показателей. По сравнению с контрольными группами больных (не применялись “Ронко-лейкин”и "Бестим”), в опытных группах отмечалось более динамичное снижение показателей плеоцитоза ликвора. Также в этих группах больных не отмечалось ликворологнчес-ких обострений и рецидивов заболевания. Динамика течения основных клинических симптомов заболевания также существенно отличалась в лучшую сторону. Контрольные иммунологические исследования у лиц опытных групп выявили увеличение процентного и абсолютного числа CD4 клеток (Т-хелперов), увеличение индекса CD4 /CD8 , увеличение индекса завершенности фагоцитоза, в то время как в контрольных группах больных данные же показатели иммунограммы вообще не нормализовались или нормализовались, но в более поздние сроки.

Таким образом, наши исследования выявили высокую эффективность отечественных иммуномодуляторов “Ронко-лейкина” и "Бестима” при лечении больных нейроинфекцией хламидийной этнологии. Целью дальнейших исследований будет разработка и апробация более рациональных схем применения данных нммуиотропных препаратов у больных с хламидийной инфекцией, протекающей с преимущественным поражением нервной системы.

ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ СЕЛЕЗЕНКИ НА СИСТЕМУ КОМПЛЕМЕНТА

Макаров A.A., Апташев A.B., Сускова B.C., Прохоров В.Л.*

НИИ Трансплантологии и искусственных органов М3 РФ, г. Москва

*НИИ Эпидемиологии и микробиологии им. II.Ф. Гамалеи РАМН, г. Москва

Проведенное нами лечение больных с гнойно - септическими заболеваниями (ГСЗ) с помощью введения им перфузата селезенок свиньи, коров или лиофилизата спленоперфуза-та - сплснопида, содержащих вырабатываемые селезенкой биологически акгивные вещества (БАВ) и широкий спектр природных цнтокинов, в 75 - 80% случаев давало хороший клинический эффект. Во время терапии нами проводился иммунологический мониторинг, включавший определение активности системы комплемента, активность СЗ компонента комплемента и наличие комплсмент-фиксирующих антител (КФА) к суммарным антигенам ткани сердца, почек, печени и коллагену. Обследованные больные по активности системы комплемента и СЗ до начала лечения были разделены на три группы: I (п-11) - пациенты с активностью комплемента и СЗ выше нормы, II (п=7) - с нормальной активностью системы комплемента и СЗ. III (п=19) - с комплементарной недостаточностью. После окончания курса спленогераиии в первой группе активность системы комплемента и СЗ снижалась до нормальных значений (5,5-7,5 и 90-110 СНк/50 соответственно), во второй - практически не изменялась, в третий - повышалась до нормальных значений.

При изучении динамики КФА нами получены следующие результаты: до лечения у 80% больных выявлялись антитела к одному или нескольким тканевым антигенам. Уровень орга-носпецпфических ан тител к одному или нескольким тканям корреллировал с тяжестью состояния больного и наличием у него явлений полиорганной недостаточности. После енлено-тсрапии у 100% процентов больных КФА практически не определялись.

Эти результаты можно объяснить влиянием БАВ и природных цитокинов, содержащихся в спленоперфузатс и спле-нопиде, на систему комплемента. Данное предположение было проверено нами в экспериментах in vitro.

На модели гемолитической системы определения активности комплемента одновременное добавление к этой системе комплемента и сплснопида или комплемента и перфузата приводило к ускорению лизиса антигена (эритроцитов барана, обработанных специфическими антителами) в 1,5-2 раза по сравнению с лизисом антигена после добавления одного комплемента. Это указывает на участие БАВ и цитокинов селезенки в разрушении комплекса антиген - антитело и лизисе чужеродных клеток.

В стендовых опытах перфузат и спленопнд обладали способностью лизпровать культуру стафилококков в разведении

от 1:2 до 1:8. Добавление к перфузату или спленопиду разведенного лиофилизированного комплемента морской свинки позволило получить лизирующий эффект в титре 1:16- 1:32 и выше. Отдельно взятый комплемент в той же концентрации лизиса бактерий не вызывал.

Обнаруженное усиление лизиса и удаления из организма как возбудителя, так и токсических иммунных комплексов при совместном действии перфузата или спленопида с комплементом теоретически обосновано ролью последнего в иммунологических реакциях. Это может быть использовано в дальнейшем для усиления терапевтического эффекта препаратов из селезенки свиней и коров у больных с ГСЗ путем одновременного введения пациентам и комплемента при условии достаточного количества и переносимости его.

ИММУНОМОДУЛЯТОР СПЛЕНОПИД - М-КОМПЛЕКС ЦИТОКИНОВ, ВЫРАБАТЫВАЕМЫХ СЕЛЕЗЕНКОЙ ТЕЛЯТ

Макаров A.A., Сускова B.C., Апташев A.B., Сусков О.И., *Полонский А.Ю., **Токарская Н.К., ***Колпаков О.Ф.

НИИ Трансплантологии и искусственных органов М3 РФ, г. Москва

*ГКБ№>67, ** ГКБ№ 83, ***ГКБ№52, г. Москва

Селезенка вырабатывает большое количество биологически активных веществ (БАВ) и, в том числе, природные цитоки-иы (ПЦ). Наличие этих веществ обеспечивало эффективность лечения нами гнойно-септических воспалительных заболеваний (ГСВЗ) и аутоиммунных заболеваний (АИЗ), которое проводилось путем введения препаратов, полученных из селезенки свиньи (спленоперфузат, спленопид). Путем ультразвукового дробления ткани селезенок телят крупного рогатого скота, последующей ультрафильтрацией экстракта и лиофилизацией его получен спленопид - М (СМ), содержащий комплекс БАВ и ПЦ с молекулярной массой менее 50 кДа и, в том числе, - 1L-

I ß, 1L-2, IL-4, IL-6, IL-8, TNFct, INFyn GM-CSF. Концентрация данных веществ в СМ составляла 100 - 2000 пг/мл.

Спленопид - М апробировался нами как выраженный иммуномодулятор, обладающий также антибактериальным, детоксицирующим, протнвоспалительным действием, оказывающий влияние и на местный иммунитет. С этой целью СМ применялся нами путем 7-10 кратных внутримышечных и внутривенных инъекций и наружного применения с помощью многократных аппликаций, орошений, введений раствора СМ в санируемые области, ультразвуковой ингаляции растворами СМ верхних дыхательных путей, а также использованием в виде цитокиновой мази на индифферентной основе (условное название - цитомакин).

Включение внутримышечных или внутривенных введений СМ в комплексное лечение больных с ГСВЗ, сопровождающихся обычно иммунодефицитами, дало в 70 - 80% случаев хороший клинический эффект. Он проявляется со 2-х -3-х суток положительной динамикой клинико-лабораторных показателей, купированием лимфопении, лейкоцитоза, палоч-ко-ядерного сдвига формулы влево и др. Ииммунокорриги-рующий эффект подтверждается нормализацией клеточного иммунитета и иммунорегуляторного звена, повышением бактерицидной активности нейтрофилов, снижением уровня низкомолекулярных ЦИК.

У больных с АИЗ - СКВ, ревматоидным и реактивным артритами и др. - включение 3-5 кратных внутримышечных

инъекций СМ в комплектную терапию дало положительный эффект в 65-75% случаев. Улучшение проявлялось уменьшением выраженности суставного синдрома, снижением лабораторной активности процесса (уровня АНФ, СОЭ, С'РБ, се-ромукоида). Купировались проявления инфекционных осложнений, легче удавалось снизить дозу кортикостероидов, удлинялись сроки ремиссии.

При ннфузип СМ больным с ГСВЗ и АИЗ побочные реакции (ознобы) отмечались редко (в 5 - 7% случаев) и легко купировались антигистаминиыми препаратами.

При местном применении раствора и мази СМ удавалось сократить сроки заживления инфицированных ран. трофических язв и пролежней. Выраженный терапевтический эффект отмечен после кратковременного применения цитомакина у больных с герпетическими поражениями кожи. Орошение раствором СМ гнойных ран, санируемых полостей и инфицированных слизистых верхних дыхательных путей приводило к быстрому санирующему эффекту.

Эффективность местного применения СМ, очевидно, связана в первую очередь с активацией местного иммунитета и антибактериальным действием препарата.

Большой набор вводимых природных цитокпнов с разнонаправленным действием на иммунную систему создает организму благоприятные условия для самостоятельного выбора нужного направления иммунокоррекции, чем, надо полагать, и определяется эффективность применения СМ при ГСВЗ и АИЗ.

ВНОВЬ О ПРЕПАРАТАХ “ТРАНСФЕР-ФАКТОРА” КАК О СРЕДСТВЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ

Мац А.Н.

Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН,

Москва, Россия

Современные иммунотерапия и иммуномодуляцня ведут своё происхождение от двух альтернативных способов лечения - специфической серотерапии (или вакцинотерапии) и неспецифической терапии. Ещё в начале прошлого века иммуно-специфические и иммунофармакологичсские свойства лекарственных средств рассматривались как принципиально различные, что и учи тывалось при назначении рациональной терапии. В настоящее время известно множество иммуномодуля-горов от нукленната, производных нмидазола и биоактивных пептидов до рекомбинантных цитокпнов и колониестимулиру-юших факторов, оказывающих разнообразные фармакологические эффекты на иммунную систему. Вероятно, нет ни одного лекарственного препарата, особенно инъекционного, который в той или иной степени не влиял бы на количественные параметры и даже форму иммунного ответа, и не обладал бы им-мунофармакологической активностью. Однако управление специфичностью иммунного ответа требует иной фармакодинамики и возможно лишь с помощью антигена (аллергена) или готовых специфических продуктов полноценной иммунной системы - антител, специфически коммутированных Т- и В -клеток, а также антигенспецифичных рецепторных и внеклеточных белков Т-клеточного происхождения, к которым и относятся так называемые “трансфер-факторные” белки.

Эти пммунопротеины (семейство высокополяриых, гидрофильных низкомолскулярных белков) присутствуют в лимфоцитарных экстрактах,культуральной среде и крови в крайне скудной (пикомолярной) концентрации, но проявляют свою активность в фемтомолярной концентрации, обладая необычными физико-химическими свойствами. Всё это затрудняет структурно-функциональный анализ и порождает

скепсис по поводу самого их существования. Полвека о них было известно лишь очень немного: они проходят через диализную мембрану и “переносят” способность экспрессировать клеточный иммунитет от сенсибилизированных доноров к неиммунизированным реципиентам. Однако в последнее время благодаря основному свойству ТФ-белков -аффинно связываться с непроцессированными специфическими антигенами без участия молекул главного комплекса гистосовместимости, из лимфоцитов иммунизированных животных были выделены и очищены до гомогенности 8 таких белков различной индивидуальной специфичности с мол. массой около 5 kDa, то есть, 40 - 60 аминокислотных остатков. При картировании в их составе были обнаружены пептиды, общие для всех и индивидуальные для каждого ТФ-белка. Независимо от иммуноспецифичности и видовой принадлежности любой ТФ-белок имеет константную С-конце-вую последовательность Лсй-Лсй-Тир-Ала-Глн-Асп-Лей(и-ли Вал)-Глу-Асп-Асн, негомологичную какой-либо из базы данных по известным пептидам. Вариабельные последовательности ТФ-белков ещё не сиквенированы, кодирующие их V-, D-, J- и С-гены не идентифицированы, и ни один из этих белков пока не клонирован.

Как полагают, солюбилизированный ТФ-белок своим С-концевым пептидом связывается с Thl-клетками (а также с цитотоксическими Т-лимфоцитами и CD8 Т-клетками), которые вследствие этого приобретают способность отвечать на специфический антиген активацией и пролиферацией вопреки иммунологической наивности реципиента или отсутствию у него иммунологического распознавания данного антигена. Лимфоцитарный экстракт содержит множество индивидуальных ТФ-белков самой различной специфичности. Их репертуар теоретически должен отражать Т-клеточную иммунологическую память донора лимфоцитов, то есть, все его прошлые встречи с возбудителями инфекций. Ещё не появилось ни одной публикации с результатами клинического применения высокоочищенных моноспецпфичсских (моноклональных) ТФ-белков. Как и 25 лет назад, для лечения больных применяются нефракционированные диализаты и ультрафильтраты лейкоцитарных экстрактов или одна из их фракций, полученная без аффинного разделения. Всё же, несмотря на это, ТФ-препараты следует относить не к иммуномодуляторам, а к средствам специфической пммунотсранин и по действующему началу, и по специфическим “иммунорсабилита-ционмым” эффектам на реципиента. Тем не менее, неочищенным ТФ-прспаратам свойственна неспецифическая иммуно-фармакологическая активность, например способность ингибировать синтез TNFct, инактивировать фактор транскрипции NF-кВ и мобилизовать Са”-траиспорт, которая в ряде случаев используется в клинике, но не представляется решающей.

ТФ-препараты под названиями lmmodin и Imunor (Чехия), Hebertrans (Куба), Transfer Factor (Китай, Италия, Германия, Австрия, Швейцария, Швеция, Венгрия, Украина, Португалия, США, Австралия, Новая Зеландия, Мексика и Бразилия), IMREG-1 и Sil (CLIIA),RCTF-1 (Япония) и Аффинолейкин (Россия) были использованы для специфической иммунотерапии (в общей сложности) десятков тысяч больных с различной патологией без каких-либо серьёзных побочных эффектов. За четверть века было проведено 50 плацебо-контролируемых испытаний клинической эффективности так называемых “не-специфических”, точнее полиспецифичсских, ТФ-препаратов, приготовленных из лимфоцитов здоровых доноров и содержащих множество разных по специфичности ТФ-белков, в лечении хронических рецидивирующих инфекций. В них приняли участие 2 600 больных. В 39 из 50 испытаний выявлена достоверная клиническая эффективность ТФ-препаратов, в том чис-

ле но вссх 12 - при герпесвирусных инфекциях HVS 1/2, HZV, EBV, HHV-6, CMV - снижение частоты рецидивов, улучшение клинического и иммунологического статуса, во всех 5 - при ВИЧ-инфекции, характеризующихся задержкой прогрессирования, в 5 из 8 - при микобактериальных и грибковых инфекциях, в 3 из 5 - при гепатите В, в 5 из 10 - при патологии, обусловленной условнопатогенными бактериями. Отсутствовала эффективность при лечении заболеваний неясной или предположительно вирусной этиологии - рассеянный и боковой амиотрофический склероз, синдром хронического утомления и растройства иммунорегуляции, истинный ау тизм, рак простаты в стадии D3, бородавки, но ТФ-препараты способствовали выживанию больных немелкоклеточным раком лёгкого. В 51 открытом нерандомизрованном испытании с участием более 8000 больных эффективность полиспецифичсских и особенно специфических ТФ-преиаратов была значительно выше. Только в 6 публикациях сообщается о неудачах. “Специфические” ТФ-препараты были получены из лимфоцитов иммунизированных животных или специально иммунизированных доноров, либо доноров, отобранных но высокой ГЗТ к нужному антигену, либо доноров из домашнего окружения больного, или при-говленны по специальной технологии "репликации” ТФ-бел-ков в культуре лимфобластов человека. Все 7 испытаний при герпесвирусных инфекциях и все 7 - при хроническом гепатите В оказались успешными.

Отечественный препарат ТФ-белков человека Аффинолей-кин разработан совместно НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова РАМН, Московским НИИ глазных болезней им. Гельмгольца и Пермским НПО “Биомед”, которое осуществляет его серийный выпуск. Аффинолейкин отличается от своих зарубежных коммерческих аналогов большей степенью очис-гкп от примесей с нежелательной фармакологической активностью. в частности, от хемокинов и цитокинов (TNF, 1L-1, IL-6 и 1L-10), провоцирующих репликацию персистентных вирусов, и сам вирусологически надёжно безопасен. По нашим данным, он защищает мышей от смертельного герпесвирусного и стафилококкового, а хомячков - от туберкулёзного и флавпвпрусного менингоэнцсфалита, ускоряет излечение герпесвирусного кератита у кроликов, особенно в сочетании с ацикловиром. При этом он не обладает ни острой, ни хронической токсичностью, (в том числе -эмбриотоксичпос-тыо) иа мышах и морских свинках в дозах, которые более чем в 1000 раз превышают терапевтические для человека.

В составе Аффиполсйкппа при интерференционно-зональной хроматографии и конкурентной иммуносорбции выявлены нпзкомолекулярные (5-8 kDa) белковые компоненты, аффннно связывающиеся с глнкопротсинами вируса простого гсрпсса 1, стафилококковым белком А, очищенным белком туберкулина и поверхностным антигеном вируса гепатита В. Это связывание пространственно не препятствует аффинным взаимодействиям специфических антител с указанными антигенами.

Терапевтическая эффективность Аффинолейкина была установлена в контролируемых клинических испытаниях на больных глубокими формами офтальмогерпеса с присоединением бактериальной и грибковой инфекции, не поддающихся этиотропиой терапии, включающей ацикловир, рекомбинантный альфа-интерферон, ннтерфероиогены, и патогенетической фармакотерапии. Курс инъекций препарата достоверно повышал эффективность лечения: ускорялись эпителиза-ция изъязвлений роговины, рассасывание инфильтратов и купирование ирита. Как выяснилось, в основе лечебного действия Аффииолейкипа лежит восстановление пммунореактив-иостп в отношении герпесвирусных антигенов н прямой "ан-тнадгезпнный" эффект связывания ТФ-белков с поверхностными структурами инфекционных агентов.

БЕТАЛЕЙКИН В КОРРЕКЦИИ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ

Мезенцева Е.А., Карпова М.И., Карпов И.А., Шумилин И.И., Матвеева Д.Н., Долгушина А.И.

Государственпая медицинская академия,

Челябинск. Россия

Механическая травма приводит к развитию вторичной иммунологической недостаточности , выраженность которой коррелирует с тяжестью повреждения. Мы исследовали состояние иммунной системы при ушибах головного мозга и переломах трубчатых костей конечностей. Уже с первых дней после травмы у больных наблюдалось увеличение общего количества лейкоцитов и ней-трофилов, снижение числа СЭЗ , СЭ4 и СБ16 лимфоцитов, нарушение эффекторных функций нейтрофилов, изменение количества компонентов комплемента, цитокинов и иммуноглобулинов в крови. В комплексном лечении больных с травмами нами применялся иммуностимулятор “Беталейкин”, который является лекарственной формой рекомбинантного человеческого 1Е-1(3. Препарат был получен в НИИ ОЧБП г. Санкт-Петербурга. У 1Ь-1 существует около 50 функций: активация нейтрофилов, стимуляция Т и В лимфоцитов, индукция синтеза ростовых факторов и ряда цитокинов, усиление резорбции поврежденной ткани, ускорение регенерации. Нами было пролечено 33 пациента с переломами трубчатых костей, 51 с ушибами головного мозга и 27 больных, перенесших реконструктивно-восстановительные операции в области головы и шеи после удаления опухолей (опытные группы). Препарат вводился ежедневно с 4-7 суток после травмы и с 1-2 суток после реконструктивных операций в течение 5 дней в/в капельно в дозе 5 нг/кг на физ. растворе, время инфузии 1-3 часа. На фоне введения у большей части пациентов наблюдался озноб, пи-рогеиная реакция до 38-39°С, которая купировалась после окончания инфузии. Всем больным проводилось иммунологическое обследование до и после введения препарата с определением следующих параметров: общее содержание лейкоцитов, число СЭЗ , С04 , С08 , СБ19 , СО 16 лимфоцитов, количество нейтрофилов, их НСТ-редуцирующая, фагоцитарная, секреторная активности, содержание 1§А, ^М, 1§С, 1Ь-1а, 11^-1 (3, 1Ь-8, ТЫР-а и компонентов комплемента в крови. Результаты сопоставляли с данными иммунологических исследований больных с такими же диагнозами, не получавших “Беталейкин", которые составили группы сравнения. В качестве контроля использовали иммунологические показатели здоровых лиц. Мы получили следующие результаты: 1) в опытных группах абсолютное число СОЗ лимфоцитов после лечения повышалось до уровня здоровых лиц, а в группах сравнения оставалось достоверно ниже его; 2) абсолютное количество С04 лимфоцитов после курса "Беталейкнна” возрастало и достигало контрольного уровня; у больных, не получавших препарат, наоборот, содержание данных клеток падало; 3) у пациентов опытных групп после лечения повышались до нормального уровня интенсивность фагоцитоза, фагоцитарное число и функциональный резерв нейтрофилов, а в группах сравнения данные показатели снижались.

ЭНДОГЕННЫЕ ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫЕ ПЕПТИДЫ КАК ОСНОВА ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ

Михайлова A.A.

Институт биоорганической химии

им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН,

Москва, Россия

Эффективная и безвредная иммунокоррекция - одна из основных проблем современной клинической иммунологии. В решении этой проблемы существенную роль играет наличие иммуномодуляторов, направленно действующих на поврежденное звено иммунитета и не вызывающих побочных эффектов. Этими свойствами обладают препараты, разрабатываемые на основе эндогенных иммунорегуляторных пептидов, реализующих свои иммуномодулирующие эффекты по природным механизмам.

На конкретных экспериментальных примерах эффектов индивидуальных синтезированных иммунорегуляторных пептидов костного мозга - мислопсптидов (МП) показаны особенности их действия как эндогенных регуляторов: они воздействуют на определенную клетку-мпшень, на поверхности которой экспрессируются специфические рецепторы к данному пептиду. На моделях различных форм иммунодефицит-ных состояний продемонстрировано направленное корригирующее воздействие МП на поврежденное звено иммунитета и отсутствие эффекта в случае нормального состояния иммунной системы.

Описаны основные свойства двух новых миелопептидных иммуномодуляторов. Серамил обладает противобактериаль-ным эффектом. Его действующую основу составляет МП-3 (Leu-Val-C'ys-Tyr-Pro-Gln), направленно стимулирующий мак-рофагальное звено иммунитета. Бивален проявляет противоопухолевую активность. Его действующей основой является МП-2 (Leu-Val-Val-Tyr-Pro-Trp), восстанавливающий активность Т-лимфоцитов, подавленную в организме опухолено-ситсля. Закончено доклиническое изучение данных иммуномодуляторов.

ИММУНОТРОПНЫЕ И АДАПТОГЕННЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОКСИМЕТИЛУРАЦИЛА В СПОРТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

Мокеева Е.Г., Сперанский В.В., Плсчев В.В., Мокеев Г.И.

Башкирский государственный медицинский университет. Уфимский государственный авиатехнический университет, г. Уфа, Россия

Прсдсорсвноватсльиый (тренировочный) и соревновательный периоды у спортсменов высоких достижений часто сопровождаются супрессией функций системы иммунитета (P.C.Суздальский, В.А.Левандо, 1976-1998) и, естественно, снижением устойчивости организма к некоторым инфекциям вирусной и бактериальной этиологии (В.Н.Волков и О.В.Бухарин,1966; RomanowsKi, 1971 и др.).

Целью данного исследования являлось уточнение функционального состояния системы иммунитета в подготовительный период у спортсменов силового троеборья - приседания со штангой на плечах, жим лежа, тяга становая, и решение вопроса о целесообразности иммунокоррекции, иммуноадаптации.

Объектом наблюдения являлись 2 группы спортсменов высших спортивных разрядов (по 10 человек в каждой). Пред-соревновательная подготовка спортсменов проводилась по единой тренировочной программе продолжительностью 5 недель с пиками нагрузки по объему на 2-й и 3-й неделях.

О характере и степени изменения иммунного статуса спортсменов судили по данным иммунограмм в еженедельной динамике, включая исходный фон.

В результате оказалось, что показатели лейкоцитограм-мы периферической крови нс претерпевали существенно значимых отклонений от диапазона физиологической нормы и имелась лишь тенденция к понижению относительного уровня моноцитов и тотальных лимфоцитов на 3-й неделе подготовки. При этом фагоцитарное звено системы иммунитета характеризовалось тем, что на 2-й неделе физических нагрузок значимо снижался процент активных фагоцитов (Fi) и их поглотительная способность (Fc), несколько возрастал О,-зависимый метаболизм (NST) и индекс активации (ИАН).

В структуре клеточного звена системы иммунитета обратило на себя внимание значимое понижение к 3-й неделе тренировочного периода содержания Т -лимфоцитов, удерживающееся вплоть до 5-й недели. На этом фоне количество Т : и соответственно их соотношение к Т возрастало на 3-4 неделях. Уровень В-лимфоцитов динамично снижался в течении первых 4-х недель тренировок и имел тенденцию приближения к исходному уровню на 5-й неделе.

Динамика уровней иммуноглобулинов IgM, IgA, и IgG характеризовалась небольшим понижением всех трех классов только на 1-й неделе тренировок. В последующие недели классы IgM и IgA возвращались к исходным значениям, а IgG динамично прирастал до окончания 5-й недели, но не превышал максимального значения нормы.

Указанные отклонения иммунного статуса являются, на наш взгляд, отражением временной преходящей дисфункции системы иммунитета и зависят от резервно-адаптивных возможностей организма индивидуума.

Сохранить пли повысить этот иммуио-адаптивный резерв, нам представлялось возможным, используя один из предшественников синтеза нуклеиновых кислот фармакопейный препарат - оксиметилурацил, обладающий мягкими физиологичными иммуностимулирующими и иммуномодулирующими возможностями (Н.В.Лазарев, 1961; Д.Н. Лазарева, Е. К. Алехин, 1985) и не относящийся к классу допинговых.

Результат оказался обнадеживающим. У спортсменов, принимавших препарат (10 человек), эти выше отмеченные отклонения либо не проявлялись совеем, или были выражены в значимо меньшей степени, сокращался при этом период времени возвращения функций системы иммунитета в норму.

Вполне возможно, что оксиметилурацил может пополнить ряд нммунотропных адаптогенов.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ БЕТАЛЕЙКИНА В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ И ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Москалев A.B., Осипова О.H., Сбойчаков В.Б.

Военно-медицинская академия, Балтийская клиническая центральная бассейновая больница, Санкт-Петербург, Россия

Введение. В настоящее время отмечено значительное возрастание частоты и распространенности инфекций, вызываемых вирусами семейства Herpesviridae, среди кото-

рых наибольшее значение имеют цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) и инфекция, вызванная вирусами простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов. Особенностью данных заболеваний является способность вирусов персистировать в организме, и проявлять свои свойс тва на фоне иммуно-супрессии.

Цель и задачи исследования. Оценить эффективность применения бсталейкипа в комплексном лечении больных с герпетической и цитомегаловирусной инфекцией, у которых, но-видимому, имеется иммунодефицит, выражающийся недостаточной функциональной активностью иммунокомпетент-ных клеток (ИКК), приводящий к ингибиции механизмов фагоцитоза.

Материалы и методы. Нами обследовано 17 больных с высокими уровнями антител к ЦМВИ и ВПГ 1 и 2 типов. У больных не менее 3-4 раз в году на фоне высоких уровней антител к ЦМВ и ВПГ 1 и 2 типов развивались также и острые респираторно-вирусные заболевания. 1цС--антитела в сыворотке крови определяли с помощью твердофазного им-муноферментного анализа (ИФА) на тест-сисгсмах ЗАО “Век-тор-Бест”. Функциональное состояние ИКК изучали по показателям параметров фагоцитоза стандартными методами. 9 больным на фоне применения основных противовирусных препаратов (ацикловир, фамцикловир, рибаиирнн) беталей-кин вводили внутривенно канслыю но разработанной нами методике. 8 больным применялось только противовирусные препараты и витамины.

Результаты. У 10 обследуемых были выявлены высокие титры 1цС-антител к ВПГ 1 и 2 типов и у 7 больных к ЦМВ, у 3-х обследуемых высокие уровни ^(¡-антител были выявлены и к ВПГ, и к ЦМВ. У всех больных в фазе обострения процент фагоцитирующих клеток был выше 80%. Микробное число (МЧ) было в диапазоне 9-14 микроорганизмов. Показатель завершенности фагоцитоза (Г13Ф) в пределах 60,4%-62.1%. Индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) -- 0,8-1,1. Количество активных фагоцитов (КАФ) -3,9-4.8 х 10ч/л. Абсолютный фагоцитарный показатель (АФП) - 17,5-18,1 х 10'7л. В периоде ремиссии заболевания показатели фагоцитоза в сравниваемых группах выглядели следующим образом. У 9 больных, которым вводили но схеме беталейкин, было достоверно увеличено количество макрофагов, участвующих в фагоцитозе (77,4±1,8 и

72,1 ±2,1%; р<0,05), эффективность фагоцитоза также была на более высоком уровне (ПЗФ: 73,1±2,4 и 67,2±2,2; р<0,05, ИЗФ: 3,2±0,6 и 1,7±0,4; р<0,05) по сравнению с показателями 8 больных, которые получали только противовирусные препараты и витамины.. Абсолютный фагоцитарный показатель также находился на более высоком уровне (14,8±0,6 и 12,4±0,8; р<0,05).

Заключение. ЦМВ и ВПГ тин 1 и 2 обладает иммуно-супрессивными свойствами, в частности угнетают функциональную активность фагоцитирующих клеток. Видимо. имеет место нарушение синтеза и поступления в кровь провоспалительных цитокинов, в первую очередь интерлейкина-1 Р (II.-1 (3) и фактора некроза опухолей а (ТЫРа). Эти цитокины на всех этапах фагоцитоза потенцируют процесс уничтожения возбудителей микрофагами, усиливают процессы опсонизацпи микроорганизмов, миграции нейтрофилов в очаг воспаления, адгезии их к эндотелию сосудов, индуцируют синтез провоспалитсльного цитоки-на - 1Ь-8, основная функция которого - усиление хемо-таксической активности микрофагов. Введение экзогенного рекомбинантного 1Ь-1(3 (бсталейкнна) компенсирует недостаточность механизмов фагоцитоза и снижает частоту рецидивов.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ БЕТАЛЕЙКИНА У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Москалев А.В., Сбойчаков В.Б., Осипова О.Н.

Военно-медицинская академия, Балтийская клиническая центральная бассейновая больница, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Лечение урогенитальных хламидиозов, по общему признанию, является сложной задачей, которое зачастую н после 2-х - 3-х курсов этиотропной терапии оказывается безуспешным. Это объясняется тем, что проводимая химиотерапия должна быть достаточной для проникновения в клетку-хозянна и тем, что курсовое применение антибиотиков эффективно только во время репродуктивной фазы хламидийной инфекции, а также возможностями пер-систенции в эпителиальных клетках, моноцитах и тканевых макрофагах.

Цель и задачи работы. Изучить спектр провоспалительных цитокинов у больных с инфекцией, вызванной С. trachomatis. Оценить эффективность применения реком-бинатного интерлейкина -1 [3 (IL1 -(3) - беталейкина в комплексном лечении урогенитальных хламидиозов.

Материалы и методы. Нами были обследованы 11 больных (6 женщин и 5 мужчин), у которых при контрольных обследованиях выявлялись специфические хламидийные тельца методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ). Уровни провоспалительных цитокинов (IL-1 (3, 1L-8, TNFa) и антагониста 1L -l(IL-lra) определяли в супернатантах иммунофер-ментным методом, используя диагностические тест-системы, полученные на основе научных разработок НИИ Особо Чисті,їх Биопрепаратов г. Санкт-Петербург и ЗАО "ВЕКТОР-БЕСТ”. Беталейкин вводили внутривенно капельно по разработанной нами методике. Специфические хламидийные тельца определяли в материале из уретры и цервикального канала в реакции ПИФ с моноклональными хламидийными родоспс-цнфичсскими флюоресцирующими диагностическими антителами (ХлаМоноСкрин) фирмы “Ниармедик плюс”. Контрольную группу из 9 человек составили практически здоровые обследуемые.

Результаты. До проведения иммуномодулирующей терапии бсталейкином были выявлены достоверно сниженные уровни провоспалительных цитокинов IL-8 (13,4±2,2 и 19,8±2,5 пг/мл; р<0,05), TNFa (8,2± 1,7 и 13,1±1,8 пг/мл; р<0,05) у больных с урогенитальной хламидийной инфекцией по сравнению с обследуемыми контрольной группы, а также достоверно увеличенные уровни - IL-1 га (752±84 и 498±76 пг/мл; р<0,05). Уровни провоспалитсльного ци-токина IL-1Р у больных хотя и не отличались достоверно от показателей контрольной группы, но имели тенденцию к снижению (826±97 и 1036±104 пг/мл; р>0,05). После проведения иммуномодулирующей терапии беталейкином уровни провоспалительных цитокинов были значительно увеличены и не отличались достоверно от показателей контрольной группы: IL-1(3- 1053±112 пг/мл, TNFa - 16,9±2,4 пг/мл, 1L-8 - 18,7±2,8 пг/мл. Показатели антагониста IL-1 (IL-lra) оставались практически на прежнем уровне -698±96 пг/мл. При контрольном обследовании больных хламидийные тельца в реакции ПИФ были выявлены только у трех больных.

Заключение. У больных с хламидийной урогенитальной инфекцией имеются нарушения кинетики воспаления и иммунного ответа ннутриклеточно паразитирующими С. trachomatis. Так страдает цитокиновая кинетика, характери-

зующаяся снижением синтеза и секреции провоспалительных цитокинов (IL-8, TNFa, IL-1|3) и преобладанием противовоспалительного IL-lra, который конкурирует с 1L-1 (3 за связывание с рецепторами иммунокомпетентных клеток. Введение экзогенного рекомбинантного IL-1 (3 (беталейкина) восстанавливает нормальную иммунокинетику и значительно улучшает результаты этпотропной терапии.

ВЛИЯНИЕ ПОЛИОКСИДОНИЯ И ЛИКОПИДА НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ С ПИОДЕРМИЯМИ

Москалец О.В., Иваненко Т.В., Суровикин В.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского, Москва, Россия

Сравнительно недавно в клиническую практику вошли два новых отечественных иммуномодулятора: полиоксидоний (ПО) и лнкопнд (Л). Несмотря на принципиально разную химическую структуру и механизмы действия, основной мишенью обоих препаратов является фагоцитарное звено иммунитета. Показания для их применения тоже во многом схожи.

Цель работы. Оценить клиническую эффективность данных препаратов у больных с пиодермиями, а также провести анализ их влияния на некоторые показатели иммунного статуса в сравнительном аспекте.

Материалы и методы. В исследование включено 22 больных в возрасте от 16 до 55 лет с часторецидивирующпми фолликулитами (11 чел.), фурункулезом (8 чел.), абсцессами подкожной клетчатки (2 чсл.) и гидраденитом (1 чел.), у которых при обследовании обнаружены измененные показатели фагоцитоза. Для оценки иммунного статуса проводили определение уровня сывороточных иммуноглобулинов классов IgM, IgA, IgG по Манчини, поглотительной способности нейтро-филов (захват частиц латекса), кислородозависимых реакций фагоцитоза (спонтанный НСТ-тест) и анализ субпопуляцион-ного состава лимфоцитов (CD3 , CD4 , CD8 , CD16 , CD20 , CD25 клеток) с использованием моноклональных антител серии ЛТ (“Сорбент”, Москва). У всех больных патологический процесс был в фазе стихающего обострения или ремиссии. Всею 12 человек получали ПО, на курс 60 мг, 10 человек

- Л, на курс 100 мг.

Результаты. Поглотительная способность нейтрофилов была снижена у 18 больных (82%), причем у 8 из них показатели НСТ-геста были снижены, у 4 - в пределах нормы, а у 6 - повышены. У остальных 4 больных отмечалось только снижение НСТ-тес-та. После лечения ПО исходно сниженные показатели фагоцитоза повышались, причем в большинстве случаев (9 из 12) они достигали нормальных значений, а у 3 человек, показатели НСТ-теста возросли существенно (в несколько раз). При нормальных показателях НСТ-теста отмечался их некоторый рост, а при повышенных - дальнейшей активации кислородо-зависимых процессов не происходило. После курса Л нормализация поглотительной способности произошла лишь у 5 из 10 больных. Нам не удалось четко установить направленность действия Л на показатели ИСТ -теста. Следует отметить, что как ПО, так и Л увеличивают экспрессию рецепторов к интерлейкину-2 (CD25). В то же время, у тех больных, которые имели различные отклонения в клеточном звене иммунитета (дисбаланс CD4 /CD8 лимфоцитов, повышение количества CD 16 клеток) их нормализация отмечалась только после лечения ПО. Средняя продолжительность ремиссии составила 4,2 месяцев при терапии ПО и 1,8 месяца при терапии Л.

Выводы. По предварительной оценке ПО оказывает более выраженный модулирующий эффект на процессы фагоцитоза, чем Л, а также влияет на соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов и количество МК-клеток. У больных с часто рецидивирующими пиодермиями более длительная ремиссия отмечалась после терапии ПО, что позволяет отдать ему предпочтение при лечении этого контингента больных.

НЕКОТОРЫЕ СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО БРОНХИТА

Норец И.А.

Медицинская академия, железнодорожная больница, г.Астана, Казахстан

В течении хронического бронхита важную роль играет нарушение иммунитета. Проведена оценка иммунного статуса и различных методов его коррекции у 197 больных хроническим бронхитом различной степени тяжести в возрасте от 22 до 60 лет.

Исходно при хроническом бронхите отмечалось снижение уровня Т-лимфоцитов и Т-хелперов, фагоцитарной активности нейтрофилов, дисбаланс иммуноглобулинов ^А, ^М, 1§0 при преобладающем снижении ^А и ^О, повышение количества эозинофилов.

С целью коррекции иммунного статуса в комплексной терапии назначался пентоксил по 0,2 гр. 3 раза в день в течение 10-12 дней. Оценка иммунного статуса после терапии позволила отметить наиболее эффективное действие пентоксила в сравнении с традиционной терапией. Значительно уменьшилась эозинофилия, улучшились показатели Т-лимфоцитов, повысился уровень ^М, 1§А и увеличилась фагоцитарная активность нейтрофилов на фоне общего клинического улучшения.

Полученные данные свидетельствуют о возможности применения препарата с целью иммунокоррекции при хроническом бронхите.

Выявленная у больных хроническим бронхитом депрессия клеточного и гуморального иммунитета под влиянием иммунокорректирующего действия пентоксила значительно уменьшается, что проявляется повышением уровня ]§А, 1§М и ^О, повышением фагоцитарной активности нейтрофилов, снижением числа эозинофилов и эозинофильно-лимфоцитарного показателя.

НОВЫЙ ПОДХОД К ОТБОРУ ИММУНОАКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Оспелышкова Т.П., Григорян С.С., Ершов Ф.И.

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН,

Москва

Практически любое заболевание инфекционной и неинфекционной природы связано с различной степенью выраженности дефицитом системы интерферонов. Нашими многочисленными исследованиями показана недостаточность системы интерферона (ШИ), особенно ее а-звена, при острых воспалительных гинекологических заболеваниях (ОВГЗ), сифилисе; у-звена при хронических воспалительных гинекологических заболеваниях (ХВГЗ), псориазе; а- и у-звеньев у хирургических реанимационных больных с эндотоксикозами, с па-пилломатозом гортани, при онкологии, у больных с аутоиммунными заболеваниями.

Целью работы было выявление наиболее оптимальных иммуноактивных лекарственных препаратов для корректной терапии заболеваний. Нами разработан комплекс тестов, основанный на воздействии препаратов IFN, индукторов IFN, иммуномодуляторов в их расчетной дозе на лейкоциты цельной крови человека in vitro, т.е. выявления индивидуальной чувствительности (ИЧ) людей к указанным препаратам. Титрование IFN проводили в диплоидной культуре фиброблас-тов человека М-19 по общепринятой методике. Оценку ИЧ проводили по степени изменения а- и Y-IFN-продуцирующей способности лейкоцитов под воздействием препаратов и соответствующих значений IFN-статуса.

Предварительное определение ИЧ лейкоцитов и последующее лечение с рекомендованным иммуноактивным препаратом в базисной терапии было проведено нами у ряда больных с ОВГЗ, ХВГЗ, псориазом, ревматоидным артритом. Нормализация показателей клеточного иммунитета, IFN-статуса после лечения, как правило, коррелировала с положительными клиническими данными.

Подобный подход к отбору иммуноактивных препаратов позволяет получить важную дополнительную информацию для последующего обоснования, индивидуального корригирования и оптимизирования терапии широкого спектра инфекционных и неинфекционных заболеваний, что представляет практическую ценность для лечащего врача.

ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ НИЗКОДОЗОВОЙ ТЕРАПИИ ОТЕЧЕСТВЕННЫМ ПРЕПАРАТОМ ВНУТРИВЕННОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА НА СОДЕРЖАНИЕ TNFa У БОЛЬНЫХ МИАСТЕНИЕЙ ГРАВИС

Пешняк Ж.В., Потапова С.М., Пономарева Е.Н.*, Рукша Е.В., Кузьмепок О.И.

Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови,

Минск, Беларусь

*Научно-исследовательский институт неврологии и физиотерапии,

Минск, Беларусь

Введение. В постчернобыльский период в Беларуси наблюдается значительный рост аутоиммунных заболеваний. В их число входит миастения гравис (МГ), патогенез которой связан с патологией внлочковой железы. Если до 1986 года она диагностировалась лишь в единичных случаях, то в 2000 году Банк Данных Республики насчитывал 720 больных МГ, из них 54 случая заболевания было выявлено только в 2000 году. Миастения гравис (МГ) - классическое орган-специфи-ческое, антитело-индуцированное и Т-клеточно-зависимое аутоиммунное заболевание. В базисную схему лечения МГ входит применение антнхолинэстеразных препаратов (АХЭП), иммуносупрессоров (глюкокортикоидов и цитостатиков). С 1982. года за рубежом при лечении МГ наряду с базисной терапией начали применять препараты внутривенного иммуноглобулина (ВВИГ). В настоящее время известно, что действие ВВИГ полифункционально. Одним из важных эффектов, связанных с ВВИГ терапией является модуляция продукции ци-токинов иммунными клетками в результате блокады их Fc-рецепторов.

Цель исследования. Изучить действие отечественного препарата внутривенного иммуноглобулина нормального человеческого (производства Республиканской станции переливания крови и НИИ ГПК, г. Минск) в суточных дозах от 0,15-0,2 г/кг веса больных, вводимого три раза на содержание про-

воспалительного цитокина TNFa, участвующего в патогенезе МГ. Содержание его определялось до введения ВВИГ, через 24 часа после 1-ого введения и после окончания курса лечения (через 4-5 суток).

Материалы и методы. На базе Белорусского Республиканского миастенического центра впервые проведена ВВИГ-терапия 16 больным (11 женщинам и 5 мужчинам в возрасте от 12 до 70 лет) с различными формами миастении гравис I-Ш ст.т.: 11 больным -с генерализованной, 4-глазной и 1-со скелетно-мышечной. В зависимости от проводимого базисного лечения мы разделили больных МГ на 2 группы: 1-я - 10 больных на ацетилхолинэстеразных препаратах (АХЭП) и 2-я - 6 больных на АХЭП с глюкокортикостероидами. TNFa определяли методом твердофазного иммунофер-ментного анализа (ИФА) как описано Petyovka N. et al. (J.Immun. Methods, 1995, V.186., p.161-170). Содержание TNFa в плазме здоровых доноров составляет 15 пкг/мл.

В результате проведенных исследований было установлено, что у больных 1-ой группы до введения препарата концентрация TNFa составляла 34,2±8,4 пкг/мл, что в 2,3 раза превышало значения в контрольной группе. После первого введения ВВИГ содержание TNFa снизилось до 24,4±2,3 пкг/ мл и после окончания курса ВВИГ терапии осталось практически на этом же уровне (23,0±3,0 пкг/мл). Во 2-й группе больных, находящихся на лечении глюкокортикостероидами достоверно высокое (р<0,05) содержание TNFa отмечалось у 33,3% больных с генерализованной формой П и Ш ст.т. (92±12 пкг/мл). Наиболее высокое значение TNFa было у больной с генерализованной формой МГ Ш ст.т., злокачественным течением, частыми кризами, плохой компенсацией на прием АХЭП (109 пкг/мл). У 66,7% больных этой группы TNFa составляло 20,3±1,4 пкг/мл. Первое введение препарата не вызвало значительных изменений у больных в содержании данного цитокина. После проведенного курса ВВИГ терапии у больных с повышенным до лечения уровнем TNFa концентрация его снизилась в 4,1 раза и составила 23±1,5 пкг/мл.

Таким образом, иммуномодулирующая терапия низкими дозами ВВИГ снижает содержание TNFa у больных МГ.

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ ЭФФЕКТЫ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ГАСТРИТОМ НА ФОНЕ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА

Пискун Т. А., Тарасова Е.Е.*, Сукало A.B.

Минский государственный медицинский институт, *НИИ Охраны материнства и детства М3 РБ, Минск, Беларусь

Как при гломерулонефрите (ГН), так и при хроническом гастрите (ХГ) выявляются существенные изменения иммунного статуса, коррекция которых важна для лечения и исхода заболевания. В традиционной терапии не всегда учитываются иммунологические особенности этих болезней, особенно при их сочетании и, как следствие, медикаментозное лечение не всегда оказывается эффективным.

Цель работы. Оценка иммуномоделирующего эффекта лазеротерапии (JIT) при лечении ХГ на фоне ГН.

Материалы и методы. Курс ЛТ (12 детей) проводили по предложенной нами методике: чрезкожное облучение в проекции печени, поджелудочной железы и селезенки матричным (10 излучателей) полупроводниковым лазером (АЛТ “Муравей”) с длиной волны 890 нм, частотой 80 Гц и мощностью в импульсе 50 Вт в течение 1 минут на одну зону. Дополнительно воздействовали на точки акупунк-

туры GI4, Е36, МС6, RP6 и VC12 лазерным излучением с длиной волны 1300 нм и мощностью 0.6 мВт (АЛТ “Мо-тылек-Р1”) в течение 20 секунд на точку. Курс ЛТ составлял 7-10 сеансов. Время одного сеанса 10 -12 минут. Кроме того, все дети получали медикаментозную терапию ХГ и ХН (патогенетическую или симптоматическую). Контрольную группу составили 8 детей с различными вариантами ХГ и ГН, получавшие только медикаментозную терапию.

Иммунный статус оценивали до и после лечения количественными и функциональными методами: Т-лимфоциты (CD3 ) и субпопуляции (CD4 , CD8 ), В-лимфоциты (CD22 ), уровни IgG, IgA и IgM, активность системы комплемента и фагоцитарная активность нейтрофилов.

Результаты п их обсуждение. Показатели клеточного и гуморального иммунитета у детей до начала лечения достоверно не отличались в обеих группах. После завершения курса ЛТ у детей выявлено достоверное повышение относительного содержания Т-лимфоцитов (39,83±5,08% и 51,78±2,7%, р<0,05). В то же время медикаментозная терапия приводила к снижению этого показателя (46,17±3,7% и 29,8±3,5%, р<0,05). Курс ЛТ приводил к повышению абсолютного и относительного количества лимфоцитов как CD4 (33,83±3,72% и 44,6±1,78%, р<0,05) так и CD8 (19,5± 1,59% и 30,77±2,7%, р<0,05). Следует отметить, что содержание субпопуляций Т-лимфоцитов после курса ЛТ значительно выше аналогичных показателей после проведения традиционной терапии (CD4 клеток - 44,66±1,78%, р<0,05 и 29±4,1%; CD8 клеток -30,77±2,7% и 18,5±2,86%, р<0,05).

Как лазерная, так и медикаментозная терапия не оказали существенного влияния на показатели поглотительной способности нейтрофилов. Однако, после курса ЛТ повысилась их переваривающая активность (индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) - 0,94±0,11 и 1,19±0,01, р<0,05).

Уровень IgG после ЛТ достоверно выше по сравнению с таковым показателем после медикаментозной терапии (15,48±1,12 г/л и 11,65±0,81 г/л; р<0,05). Активация системы комплемента по классическому пути после ЛТ свидетельствует о том, что ИК -лазерное излучение стимулирует защитные реакции организма.

Вывод. Включение ИК-лазерной терапии в комплекс лечения детей с ХГ на фоне ГН оказывает существенное влияние на показатели системы иммунитета, что благоприятно сказывается на клинической картине и сроках выздоровления.

РЕПАРАТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ “ВИЛОНА” НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ МОРФОЛОГИЮ ТИМУСА И ДРУГИХ ОРГАНОВ ПОСЛЕ ОБЩЕГО уОБЛУЧЕНИЯ

Полякова В.О., Южаков В.В., Попучиев В.В., Коновалов С.С.

Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Медицинский радиологический научный центр РАМН,

Обнинск, Россия

Целью работы явилось изучение влияния синтетического пептида вилочковой железы “Вилона” на клеточную репарацию слизистой оболочки кишечника и функциональную морфологию органов иммунитета после радиационного воздействия в дозе, вызывающей "синдром кишечной гибели”.

Работа выполнена на 42 самцах белых крыс линии Вистар в возрасте 2-х месяцев, с массой тела 90-100 гр. Исследова-

ния проводились на 4 группах животных: контроль, введение вилона, гамма-облучение, гамма облучение и Вилон. Доза общего однократного облучения составляла 6 Гр. Препарат вводили внутрибрюшинно через 24 часа после облучения в течение пяти дней. Изучение действия Вилона и гамма-излу-чения выполнено на проксимальном отделе двенадцатиперстной кишки, тимусе и селезенке. Образцы органов брали на

8 сутки после облучения. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином-эозином и проводили иммуногистохими-ческие реакции. Морфометрический анализ выполнен с помощью системы компьютерного анализа микроскопических изображений IMSTAR.

Проведенные исследования показали, что Вилон, существенно не влияя на биосинтетические процессы в цитоплазме клеток, достоверно усиливает пролиферативную активность выживших после гамма-облучения стволовых клеток костного мозга, являющихся предшественниками как масто-цитов, так и лимфоцитов, увеличивает их миграционную способность. Вилон ускоряет дифференцировку предшественников Т-клеток в зрелые Т-лимфоциты. Вилон также стимулирует пострадиационное восстановление тимуса, селезенки и способствует морфо-функциональной регенерации слизистой оболочки кишечника после однократного гамма-облучения в дозе 6 Гр. Результаты проведенных исследований свидетельствует об актуальности дальнейшего изучения Вилона, как препарата, стабилизирующего общий гомеостаз и оказывающего стимулирующее действие на пролиферативные и реге-нераторно-адаптационные процессы, что может найти широкое применение в геронтологии и коррекции десинхрозов различной этиологии и патогенеза.

АНТИАПОПТОТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 НА АКТИВИРОВАННЫЕ Т-ЛИМФОЦИТЫ

Потапнев М.П.

Республиканский научно-практический центр детской онкологии и гематологии М3 РБ,

Минск, Беларусь

Хорошо известно, что активация Т лимфоцитов под действием антигена, суперантигена, цитокинов и других поликлональных активаторов приводит к резкому повышению их чувствительности к апоптотической гибели. Ниже проанализированы механизмы антиапоптотического действия интерлейкина-2 (IL-2).

Покоящиеся CD3 Т клетки для своего поддержания требуют преимущественно контакта с комплексом молекулы HLA и пептид аутоантигена, а также IL-6. После активации с вовлечением Т-клеточного рецептора Т клетки приобретают чувствительность к апоптоз-зависимой гибели через Fas/CD95 и рецепторы kTNF-oc. Активация под действием IL-2 вызывает повышение чувствительности Т клеток к апоптозу за счет усиленного образования DISC-комплекса и подавления образования ингибитора апоптоза c-FLIP, а также индукции синтеза FasL и TNF-a. Гибель клеток значительно снижается при вовлечении в активацию молекулы CD28 на поверхности Т клеток или в присутствии избытка IL-2, IL-4 и IL-7. В высоких концентрациях IL-2 наиболее активен в обеспечении жизнеспособности активированных CD8 Т клеток-киллеров, а в комбинации с ТРФ-(3 - и CD4 Т хелперов 2 и 1 типов. Анти-апоптотическое действие IL-2 после связывания со специфическим рецептором определяется активацией транскрипционных факторов Stat5 и далее - генов c-myc, BcL-X, Bcl-2. Име-

ются также данные об активации под действием 1Ь-2 киназы РВК/АкГ, подавляющей активацию каспаз путем блокирующего взаимодействия с АРАР-1 и активации ингибиторов апоп-гоза (Х1АР). Интересно, что для пролиферации Т лимфоцита необходимо вовлечение Язя-зависимого пути передачи сигнала с поверхностного рецептора к 11.-2.

В практике медицины гораздо чаще встречается другой тип апоптотической гибели Т-лимфоцитов, связанный с избытком антигена и недостатком костимулирующих ростовых факторов. При этом страдают активированные Т лимфоциты и Т-клетки “памяти“, экспрессирующие на своей поверхности много Раз/С,095. Экзогенный 11.-2 в таких случаях обеспечивает не только преодоление ареактивности антиген-специ-фического клона Т-клеток-эффекторов, но и выживаемость других Т клеток у больных с онкологической патологией, тяжелыми инфекционными процессами, сепсисом.

ОПОСРЕДОВАННАЯ ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ЧЕРЕЗ ГРУДНОЕ МОЛОКО В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Ризопулу А.П., Арипова Т.У., Гариб Ф.Ю*., Каххаров Б.А*, Хакимова Г.Б.

Институт иммунологии АН РУз,

НИИ вакцин и сывороток*,

Ташкент, Узбекистан

Целью исследования явилось доказательство принципиальной возможности проведения иммунокоррекции у крыс-сосунков опосредованно через грудное молоко.

В эксперименте были использованы лактирущие крысы и их потомство. Подопытной группе самок инъецировали По-лиоксидоний (ООО “Иммафарма”, Москва) на физрастворе №С1, п/к, через день, 7 раз, из расчета 75 мкг/ кг массы; самки контрольной группы получали инъекции физраствора по вышеприведенной схеме. Через 3 недели по окончании подсосного периода, изучали активность антителогенеза, фенотип основных субпопуляций лимфоцитов крови, определяли массу тела, селезенки и печени, тимуса, клеточность селезенки, содержание лейкоцитов и эритроцитов в крови.

Известно, что интегральным показателем здоровья новорожденных является динамика массы тела. Через 3 недели от начала проведения опосредованной иммунокоррекции Поли-оксидонием отмечен 4-х кратный прирост массы тела в основной группе, а в контроле - 3-х кратный прирост. Разница между группами сравнения продолжала увеличиваться и через 6 недель от начала эксперимента, несмотря на то, что иммунокоррекция была завершена 3 недели назад (Р< 0,05).

Масса печени и селезенки в опыте также были достоверно выше в сравнении с данными контроля. Так, через 3 недели от начала эксперимента масса печени в основной группе составляла 847±67 мг против 707±64 мг в контроле, через 6 недель масса печени отличалась в 1,3 раза 1783±144 мг против 1327± 125 мг соответственно (Р<0,05). Масса селезенки в основной группе через 3 недели после рождения была 71,4±6,2 мг в контроле, против 123± 10,5 мг в основной группе и различалась в 1,7 раза (Р<0,05). Через 6 недель от начала исследования разница с контролем была двухкратной в пользу основной группы (111± 10,5 мг против 230,7±25 мг соответственно; Р<0,001). Больший прирост массы селезенки в нашем эксперименте, может быть связан с иммунотропным действием Полиоксидония. В 1,4 раза возросла и масса тимуса у крыс-сосунков под влиянием опосредованной иммунокоррекции и через 6 недель она составила 111 ±9,2 мг против 81,4±6,1 мг в контроле (Р<0,05).

Результаты определения количества CD3, CD4 , CD8 , CD21 , CD 16 клеток через 3 недели показали достоверные различия данных опыта с контролем, которые проявились в увеличении под влиянием Полиоксидония числа Т-лимфоци-тов и Т-хелперов. Одновременно возросло количество натуральных киллеров (CD16 ). Результаты свидетельствуют об умеренном стимулирующем влиянии опосредованной иммунокоррекции на сосунков.

Под влиянием Полиоксидония увеличивается число ядросодержащих клеток в селезенке (ЯСКС) в 1,5 раза и составляет 220±21 млн. против 145±13 млн. в контроле (Р<0,05). Из них, количество антителообразующих клеток (АОК) составляет 8971±485 в опыте против 4407±429 - в контроле, т.е. число антителопродуцентов возрастает в 2 раза (Р<0,001). Увеличивается и удельная антителообразующая активность селезенки - число АОК/селезенку возрастает в 1,4 раза. Не отмечено достоверных изменений показателей гемопоэза под влиянием опосредованной иммунокоррекции Полиоксидони-ем у сосунков, поскольку число эритроцитов и лейкоцитов не отличается от значений контроля.

Полученные результаты, очевидно, свидетельствуют о том, что опосредованно полученный Полиоксидоний способствует становлению и созреванию иммунной системы новорожденных, усиливая экспрессию дифференцировочных рецепторов, активность иммунорегуляторных факторов иммунитета и повышению эффективности межклеточных взаимодействий при реализации иммунного ответа. Результаты исследования обосновывают принципиальную возможность воздействия на иммунную систему крыс-сосунков путем введения иммуно-тропного препарата лактирующим самкам.

Не вызывает сомнения, что происходит усиление иммунобиологических свойств молока, что, по-видимому, связано не только с прямым переходом Полиоксидония через молоко, но и с активацией основных звеньев иммунной системы матери, с последующим переносом новорожденным активированных клеточных и гуморальных факторов, которые не разрушаются в желудочно-кишечном тракте новорожденного, а всасываются в кровь.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОМОДУЛИНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ЕСТЕСТВЕННЫХ КИЛЛЕРОВ В СИСТЕМЕ IN VITRO

Ризопулу А.П., Гариб Ф.Ю.*, Арипова Т.У.

Институт иммунологии АН Республики Узбекистан, Ташкентский НИИ вакцин и сывороток при ГАК Узфармпром*,

Ташкент, Узбекистан

Известно, что в кооперативные межклеточные взаимодействия вовлекаются и факторы неспецифической защиты. Ослабление иммунореактивности естественных клеток-килле-ров in vivo приводит к снижению их способности отвечать на первичные и вторичные антигенные воздействия и негативно отражается на их способности активироваться in vitro. Различные патологические состояния могут значительно влиять на их функциональную активность in vitro.

Цель работы. Изучить влияние иммуномодулина (И.) на функциональную активность естественных клеток-киллеров по их способности поражать клетки-мишени К-562 в системе in vitro.

Иммуномодулин (производства ТашНИИВС) получен из фетальных тимусов овец, состоит из комплекса высокоочи-щенных пептидов с М.м. 6-10 кДа и разрешен к медицинскому применению в Узбекистане и Казахстане.

Материалы и методы. Исследовалась кровь 30 человек, в том числе 10 - здоровых доноров, 10 - больных туберкулезом, 10- больных раком толстой кишки. Мембранотоксическую активность естественных клеток-киллеров определяли по способности эффекторных клеток (ЭК) поражать клетки-ми-шени (КМ) с использованием Н'-уридина (Фукс, 1982).

Влияние И. на ЕКК изучали, используя 2 варианта инкубации. 1) И. вносили в планшеты после раскапывания ЭК и КМ (опыт), в контрольные пробы препарат не вносили. 2) ЭК (1 млн/ мл) инкубировали с И. (опыт), в контроле 1 - клетки инкубировали в питательной среде (негативный контроль), в контроле 2 -ЭК инкубировали с 1L-2 (позитивный контроль). После чего к ЭК добавляли КМ, меченные Н’-уридином. Показатель активности ЕКК выражали индексом цитотоксичности (ИЦ).

Результаты. В ходе экспериментов с преинкубацией ЭК и КМ с И. было показано отсутствие достоверных отличий между опытом и контролем. Так, у здоровых людей ИЦ составлял 52,0±2,1 в контроле и 51,8± 1,9% в опыте. У больных туберкулезом отмечен сниженный ИЦ, который составляет 41,7±0,7% в контроле против 41,5±0,8% в опыте. В 2 раза ниже значений здоровых доноров ИЦ ЕК обнаружен у больных раком толстой кишки. Инкубация с И. не повлияла на эффекторную активность ЕК и составила в опыте 23,4±0,8% против 24,2±0,9% в контроле.

Анализ результатов эксперимента, когда предварительная инкубация ЭК. с И. была проведена без КМ показал достоверную разницу с контролем во всех изученных группах.

Так, у здоровых доноров ИЦ ЕК составлял 51,2±1.9%, пре-инкубация с И. активирует до 58,3±1,7%, инкубация с 1L-2 повышает эти значения до 65,7±1,6%. Разница значений опыта с контролями достоверна (Р< 0,001, Р<0,001 соответственно).

У больных туберкулезом в контроле ИЦ составлял 41,5±0,8%, под влиянием преинкубации с И. возрос до

48,1 ±0,9% (Р<0,05 к негативному контролю), под влиянием 1L-2 он повышается до 53,3±1,1%.

У больных раком толстого кишечника обнаружено глубокое снижение ИЦ ЕК, которое составляло 23,8±1,5. Инкубация ЭК с И. способствует повышению ИЦ до 29,3±1,5% (Р<0,05 по отношению к контролю 1), под влиянием IL-2 ИЦ ЕК составляет 34,3±1,3%.

Выводы. Предварительная совместная инкубация И. с ЭК и КМ не оказывала достоверного воздействия на функциональную активность ЕК. Возможно, И. в равной степени активирует и КМ и естественные клетки-киллеры.

Высказанное предположение подтверждают результаты 2 эксперимента, в котором И. усиливал мембранотоксическую функцию ЕК в результате предварительной инкубации с ЭК. Достоверное повышение естественной киллерной цитотоксичности под влиянием инкубации ill vitro эффекторных лимфоцитов с И. отмечено во всех изученных группах. Следовательно, преинкубация ЕК с И. способствует активации цпто-токсической функции естественных клеток-киллеров.

ВЛИЯНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-Iß (БЕТАЛЕЙКИН) НА ОСНОВНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С В ФАЗЕ РЕПЛИКАЦИИ

ГНЦ ГосНИИ особочистых биопрепаратов, Санкт-Петербург

Романова Е.С., Симбирцев A.C., Кузнецов Н.И., Кабанова В.И.

В развитии и прогрессировании патологического процесса при вирусном гепатите С определяющее значение отводит-

ся иммунной системе. Неблагоприятное течение и исход этой патологии связаны со снижением количественных и функциональных показателей клеточного звена иммунитета. Применение иммуномодулирующих препаратов и, в частности, рекомбинантного интерлейкина-1(3 человека (Беталейкин) в лечении больных хроническим вирусным гепатитом С представляется актуальным и перспективным.

Целью нашего исследования было определить количественные показатели клеточного звена иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С (ХГС) на фоне применения рекомбинантного интерлейкина-113 человека (Беталейкин).

Для определения состояния иммунитета при ХГС исследовались абсолютное и относительное количество субпопуляций лимфоцитов (CD3 ,CD4 ,CD8 ,CD16 , CD20 hCD25 клеток) в периферической крови больных с использованием моноклональных антител (Медбиоспектр, Москва)

При исследовании мы выявили снижение абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов до проведения терапии Бета-лейкином.

После окончания курса лечения больных ХГС мы обнаружили следующие изменения количественных показателей: количество Т-хелперов (CD4 лимфоцитов) увеличилось (685,0±58,0х Ю’/мм3, 1101,0±76,0 х 103/мм-’, до и после лечения, соответственно). Абсолютное количество цитотоксичес-ких Т-лимфоцитов (CD8 клеток) после проведенной терапии также увеличивалось (569,0±56,0 х 103/мм\ 907,0±61,0 х 103/ мм1 до и после лечения, соответственно). Помимо Т-клеточ-ного звена иммунитета мы исследовали абсолютное количество В-лимфоцитов и отмечали его увеличение после проведенной терапии Беталейкином.

У всех обследованных больных до начала терапии в сыворотке крови выявляли РНК вируса гепатита С, определяемую в полимеразной цепной реакции. После курса Беталейкином в сыворотке крови обследованных больных ХГС не выявлялась РНК вируса гепатита С.

Таким образом, применение препарата Беталейкин приводит к стимуляции клеточного звена иммунитета и к прекращению активности вируса гепатита С.

Э03ИН0ФИЛИЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ КАК ОТВЕТ НА ЛЕЧЕНИЕ ГРАНУЛОЦИТАРНО-МАКРОФАГАЛЬНЫМ КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩИМ ФАКТОРОМ

Саванович И.И.

Международный экологический университет им. АД. Сахарова, кафедра иммунологии,

Минск, Беларусь

Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), являясь мультилинейным фактором роста и дифференцировки, с успехом используется в клинике для коррекции тяжелых нейтропений у пациентов онкогематологичес-кого профиля. Однако эти препараты не лишены ряда побочных эффектов, среди которых одним из серьезных являются легочный тромбоз и развитие некардиогенного отека легких с наличием или без эозинофилии периферической крови.

Нами было оценено влияние GM-CSF на уровень эозинофи-лов периферической крови у 11 пациентов с апластическими анемиями (7 детей с тяжелыми и сверхтяжелыми приобретенными апластическими анемия и 4 детей с анемией Фанкони), получавших подкожно коммерческий препарат рекомбинантного человеческого GM-CSF-Leucomax в дозе от 5 до 10 ng/кг сутки. Длительность применения составила от 27 до 90 дней.

У всех пациентов наряду с ростом нейтрофилов на 10-15 день лечения отмечался рост уровня эозинофилов. Максимальные уровни были различны и приходились на разные сроки лечения (от 0,82 х Ю1' /л до 4,307 х Ю’/л). Эозинофилия была дозозависимой и снижалась при редукции дозы или отмене препарата. У четырех пациентов на фоне лечения наступил летальный исход заболевания, при этом в легких и других органах у одного из них отмечались эозинофильные инфильтраты, подтвержденные рентгенологически и последующим патоморфологическим исследованием. Накануне смерти уровень эозинофилии у него составил 2,66 х 10ч/л, СРБ-32 mg/1.

Данные эффекты колониестимулирующих факторов изучаются с целью прогнозирования побочных влияний на клетки, органы и организм в целом.

Как известно, функции эозинофилов регулируются целым рядом цитокинов, среди которых IL-5,1L-3, GM-CSF. При этом IL-3 и GM- CSF в пикомолярных концентрациях могут модулировать хемотаксис эозинофилов, при наномолярных концентрациях эти цитокины могут действовать как хемоаттрак-танты для эозинофилов. Данные наблюдения позволяют выдвинуть предположение о GM-CSF - опосредованном хемотаксисе эозинофилов в легкие с последующим формированием там инфильтратов. Кроме того, под воздействием GM-CSF усиливается экспрессия адгезивных молекул, что также усиливает сродство эозинофилов к эндотелию легочных сосудов.

ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ НОВЫХ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ В ЛЕЧЕНИИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Сизякина Л.П., Кузина Т.Н., Терновой М.В., Денисенко В.Б.

Ростовский государственный медицинский университет. Ростовский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД,

Ростов-на-Дону, Россия

Быстрый рост заболеваемости ВИЧ-инфекцией диктует необходимость разработки новых подходов к лечению. Успешное подавление репликации ВИЧ с помощью мощной проти-. вовирусной терапии позволяет сосредоточить усилия на восстановлении функции иммунной системы путем включения в схемы препаратов с иммуномодулирующей активностью. Одним из перспективных современных иммуномодуляторов является полиоксидоний, улучшающий кооперацию Т- и В-лимфоцитов, “замещая” тем самым нарушенную функцию CD8 лимфоцитов, повышающий функциональную активность макрофагов и нейтрофилов, оказывающий детоксицирующее действие (ПокровскийВ.В., 1998; Tomes H., 1999).

Под наблюдением находились 20 ВИЧ-инфицированных в возрасте от 19 до 29 лет в стадии 111 А и ШБ (В.И.Покровский, 1989), находившихся на стационарном лечении по поводу неосложненных форм пневмоний. Все пациенты получали базисную терапию: антиретровирусные препараты, антибактериальные и противогрибковые средства, дезинтоксикаци-онную терапию, витамины, гепатопротекторы и энтеросорбенты. В комплексное лечение был включен полиоксидоний в дозе 6 мг 1 раз в три дня (курс 10 инъекций).

Обследование пациентов проводилось до начала лечения и после его окончания. Исследование иммунного статуса показало существенное увеличение количества CD4 клеток (до 40,5±2,8%) и снижение содержания ЦИК (до 58,7±5,6 у.е). Кроме того, повышалась метаболическая активность МФ (108+2,5 у.е) и сс адаптационные возможности (1,6±0,1) а так-

же экспрессия рецепторов к Fc-фрагменту IgG (30,3±1,8%) и СЗЬ-компоненту комплемента (40,5±1,1%) на мембране этих клеток. На фоне лечения полиоксидонием отмечалось увеличение метаболической активности НФ (130,2±2,2 ед.), ее резервных возможностей (1,6±1,1%) и повышение числа НФ, экспрессирующих FcyR (92±1,1%) и C3bR (94,3±1,3%). Необходимо отметить, что включение полиоксидония в комплексную терапию заболевания приводило к снижению провирус-ной нагрузки крови с 2,8±0,1 lg/Ю7 кл. до 2,4±0,05 lg/Ю7 кл. (р<0,05).

Установлено, что включение полиоксидония в комплексное лечение больных ВИЧ-инфекцией приводило к более быстрому, в течение 8-10 дней, исчезновению симптомов интоксикации и местных проявлений бактериальных инфекций. Полное купирование пневмоний наступало к моменту окончания лечения полиоксидонием, что подтверждалось данными рентгенологического исследования.

ОТЕЧЕСТВЕННОЕ ПИРИМИДИНОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ КСИМЕДОН В БАЗИСНОЙ ТЕРАПИИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ, ОСЛОЖНЕННОЙ РЕСПИРАТОРНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Скороходкина О.В.

Казанский Государственный медицинский университет, Казань, Россия

В настоящее время общепризнано, что обострение бронхиальной астмы нередко связано с воздействием различных триггеров. Среди них особо следует отметить роль респираторной инфекции, которая усиливает воспаление в дыхательных путях и провоцирует острый бронхоспазм. Ухудшение клинической симптоматики диктует необходимость назначения более высоких доз ингаляционных глюкокортикостероидов, а в ряде случаев перехода на прием их per os или парентерально. Это в свою очередь приводит к увеличению количества побочных эффектов и ухудшению качества жизни больных. Под наблюдением находилось 19 больных с диагнозом бронхиальная астма среднетяжелого течения, осложненная респираторной инфекцией, которым с целью профилактики обострения заболевания в базисную терапию беклоджетом (суточная доза 750 мкг) включался ксимедон в дозе 1,5 г в сутки per os. Противовоспалительная и иммунотропная активность отечественного пиримидинового производного ксимедон подтверждена ранее многими авторами. Контроль состояния осуществлялся по динамике клинической симптоматики, показателям функции внешнего дыхания (ФВД), уровню 1L4 и гамма-интерферона сыворотки крови. Анализ полученных результатов показал, что 15 больных, получавших ксимедон, в период возникновения острой респираторной инфекции не отмечали учащения приступов удушья при применении дозы ингаляционных глюкокортикостероидов, используемой ранее. При этом показатели ФВД снижались незначительно и в среднем составляли 69% от должных величин. После курса ксимедона уровень гамма-интерферона существенно увеличивался у 14 больных (74%) и в среднем составил 782 пг/мл. При этом уровень IL4 у 17 больных (89%) достоверно не изменялся, только у 2 больных (11%) имел тенденцию к некоторому увеличению. Таким образом, включение ксимедона в базисную терапию бронхиальной астмы среднетяжелого течения приводило к значительному увеличению уровня гамма-интерферона сыворотки крови, позволяло предотвратить обострение, а также сохранить используемую дозу ингаляционных глюкокортикостероидов.

НОВЫЙ ПУТЬ В ПРОФИЛАКТИКЕ РАЗВИТИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕСА

Скроманис М.Я., Зейбаргс М., Пуле Э.А., Скутелис А.П., Пурвиньш И.В.

Латвийская медицинская академия (Рижский университет им. Страдиня),

Рига, Латвия

Системная энзимная терапия имеет широкое применение в комплексной терапии воспалительного процесса различной этиологии.

Цель работы. Изучение способности препарата системной энзимотерапии флогензима тормозить развитие воспалительного процесса вызванного большими дозами адреналина.

Материалы и методы. Животным (белым крысам) предварительно 14 дней (ежедневно) вводили внутрь флогензим в дозе 100 мг/кг. На 15-й день животным вводили адреналин в дозе 2,5 мг/кг. Через 48 часов животных декапитировали для морфологических исследований. Образцы из мышц и сосудов сердца окрашивали гемотоксилином и эозином.

Обсуждение результатов. Предварительное введение флогензима значительно уменьшило некротические и дистрофические изменения в кардиомиоцитах по сравнению с контрольной группой. Явления отека и лимфо - лейкоцитарной инфильтрации были 2-3 раза меньше выражены по сравнению с контрольной группой. Однако, венозное кровенаполнение осталось практически без изменений по сравнению с контрольной группой, а капилярное кровенаполнение было резко выражено.

Заключение. По нашим данным флогензим тормозит развитие воспалительного процесса после больших доз адреналина.

ВЛИЯНИЕ ГИПОКСЕНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ЛЕЙКОЦИТОВ

Смирнов B.C., Петленко С.В., Кузьмич М.К*.

Военно-медицинская академия, Санкт-Петербург, *Корпорация “Олифен ”, Москва

Исследовали функциональную активность лимфоцитов и нейтрофилов при воздействии на них гипоксена — натриевой соли [поли-(2,5-дигидрооксифенилен)]-4-тиосульфокис-лоты in vitro.

О действии гипоксена на лимфоциты судили по экспрессии дифференцировочных рецепторов CD3, CD4, CD8, CD 19, CD56 и активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ). Влияние

препарата на функциональное состояние нейтрофилов оценивали по тесту восстановления нитросинего тетразодия (НСТ). Кроме того, исследовали влияние гипоксена на активность лейкоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). Исследования проведены на пробах крови, полученных от 14 практически здоровых мужчин-спортсменов в возрасте от 19 до 29 лет.

Лимфоциты выделяли из периферической крови по стандартной методике. Мембранные рецепторы удаляли в результате инкубации лимфоцитов в 0,1% растворе трипсина в течение 10 мин при 37°С. Сразу же после обработки трипсином лимфоциты отмывали средой RPMI-1640, а затем инкубировали в RPMI-1640, содержавшей 50 мкг/мл гипоксена в течение 30 мин при 37°С. Дифференцировочные рецепторы определяли методом иммунолюминесценции до, после трипси-низации и после инкубации в присутствии гипоксена (опыт) или физраствора (контроль) Активность СДГ определяли цитохимически по методу Р.П. Нарциссова до и после инкубации лимфоцитов в RPMI-1640 с гипоксеном.

НСТ выполняли по стандартной методике, в которой в качестве стимулятора применяли суспензию зимозана. В опытные пробы вносили гипоксен в конечной концентрации 50 мкг/ мл, в контрольные - физиологический раствор.

РТМЛ проводили по стандартной методике в 5-канальных плоскопараллельных капиллярах. В качестве индуктора торможения миграции применяли Кон А, в опытные пробы вносили гипоксен в концентрации 50 мкг/мл, в контрольные аликвотное количество физиологического раствора.

Результаты исследований показали, что гипоксен достоверно активировал процессы экспрессии дифференцировочных рецепторов. Наиболее интенсивно репопулировали рецепторы CD3 и CD56 (см. табл.)

На активность СДГ лимфоцитов гипоксен достоверного влияния не оказывал (опыт - 21,03±4,72 гранул/ клетку; контроль - 23,28±4,21 гранул/ клетку, Р>0,05).

Препарат не изменял показатели НСТ, что свидетельствует об отсутствии влияния гипоксена на процессы выработки активных форм кислорода (базальный уровень: опыт -0,07±0,01 отн. ед.; контроль - 0,08±0,01 отн. ед; стимулированный уровень: опыт - 1,20±0,11 отн.ед.; контроль - 1,17±0,12 отн. ед).

Не выявлено достоверного действия гипоксена на цито-киновую активность лейкоцитов в РТМЛ (опыт - 85,9±3,22%; контроль - 86,6±2,96%).

Полученные данные указывают на то, что наблюдаемые при применении гипоксена иммунологические и антиоксидан-тные эффекты, скорее всего, реализуются путем активации

ТАБЛИЦА ВЛИЯНИЕ ГИПОКСЕНА НА ЭКСПРЕССИЮ ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫХ РЕЦЕПТОРОВ ЛИМФОЦИТОВ IN VITRO (%)

Рецептор Исходно (до трипсинизации) После трипсинизации После инкубации

с гипоксеном с физраствором

CD3 48,41+2,75 3,55+1,02* 16,25+2,49*** 10,5+2,56**

CD4 29,61 ±2,10 2,73+1,41* 4,75+1,49** 3,01+1,12*

CD8 19,08+0,78 2,41+0,60* 4,60±1,11** 2,94±0,95*

CD19 18,07±1,71 1,23+0,62* 4,47+0,85** 3,18+1,14*

CD56 10,84±1,49 2,25+0,80* 5,16+0,82*** 3,15+0,69*

Примечание. Одной звездочкой отмечены достоверные различия по сравнению с исходными значениями, двумя - различия с данными после трипсинизации, тремя - различия с данными после инкубации с физраствором

2001, Т. 3, №2

Имя tyn о /про пн ая т ерапия

рецепторных механизмов регуляции функциональной активности клеток-мишеней. По-видимому, именно этими механизмами можно объяснить низкую токсичность и широкий терапевтический потенциал гипоксена при его применении для лечения широкого круга заболеваний, в основе патогенеза которых лежит нарушение регуляции физиологических процессов. С этих позиции гипоксен можно с достаточным на то основанием отнести к группе средств с биорегулирующим механизмом фармакологического эффекта.

ВЛИЯНИЕ ИНТЕРФЕРОНОТЕРАПИИ НА ФЕНОТИП ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК

Смирнов H.A., Лагаш В.Г., Кузнецов С.И.

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И.Мечникова, Научно-исследовательский институт гриппа РАМН, Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования,

Россия

Влияние системы интерферона (IFN) на иммунную систему нельзя оценить однозначно. Эффект воздействия зависит от дозы и времени введения 1FN, его типа, фазы развития иммунного ответа и других факторов. Показано, что IFN активирует макрофаги и усиливает фагоцитоз, активирует ЕК клетки, усиливает экспрессию антигенов ГКС, усиливает ци-тотоксический эффект сенсибилизированных лимфоцитов, усиливает или ингибирует синтез иммуноглобулинов, угнетает развитие анафилактического шока, подавляет реакцию ГЗТ, воспалительный процесс, активность системы комплемента и т.д. Поэтому при разработке конкретных схем лечения необходимо учитывать тип и количество вводимого IFN, частоту и способ его введения, суммарную дозу для каждой нозологической формы заболевания. Цель данного исследования - оценить влияние, оказываемое экзогенным IFN (а и у) на экспрессию CD-марксров на мембране лимфоидных клеток у больных с различными заболеваниями.

Было обследовано 16 человек, страдающих различными заболеваниями вирусной и неинфекционной природы, которым до и после проведения IFN-терапии определяли фенотип лимфоцитов в венозной крови. У 9 больных курс I FN-терапии включал препараты рекомбинантного IFN-a (Реаферон, Россия) и рекомбинантного IFN-y (Имукин, ФРГ), которые вводили ежедневно в/м в течение 2-3 недель. Остальные больные получали монотерапию (IFN-a) по той же схеме. Идентификацию CD-маркеров на лимфоидных клетках проводили с помощью непрямой иммунофлюорссценции общепринятым методом. Определяли следующие маркеры: CD3, CD4, CD8, CD20, CD25,

C.D56, расчитывали соотношение CD4 /CD8 . Количество лимфоцитов оценивали в относительных и абсолютных величинах. Статистическую обработку результатов проводили в общей группе больных до и после лечения, а также в двух подгруппах, на которые разделили больных в зависимости от вида IFN-терапии (IFN-a и IFN-a совместно с IFN-y).

Состояние фенотипа клеток лимфоидной популяции до начала IFN-терапии в общей группе больных по исследованным CD-маркерам выглядело следующим образом. Если сравнивать с контрольной группой, то наблюдали некоторое снижение CD3 , CD56 , CD20T, CD25 клеток и повышение CD4 и CD8 клеток. Соотношение CD4 /CD8 почти соответствовало норме (1,55±0,16). После проведения IFN-терапии относительные и абсолютные количества лимфоцитов с маркерами CD3, CD4, CD8, CD56 имели тенденцию к снижению, в то

время как CD20 и CD25 клетки - тенденцию к повышению. Соотношение CD4 /CD8 также повысилось (1,71 ±0,14). Однако, после лечения сохранился фенотипический дисбаланс внутри клеток лимфоидной системы. Анализ фенотипа лимфоидных клеток в подгруппах дает возможность выяснить, какой вклад в экспрессию тех или иных маркеров вносит конкретный тип введенного больным IFN. После разделения больных на подгруппы выяснили, что при монотерапии (только IFN-a) все исследованные показатели имели тенденцию к снижению по сравнению с аналогичными показателями до начала лечения. Исключение составило незначительное повышение процента CD3 клеток, при этом абсолютное число CD3 лимфоцитов несколько снизилось, и соотношение CD4 /CD8 превысило 2 (2,03±0,22). Следует отметить, что снижение натуральных киллеров (CD56 ) было достоверным. При анализе данных в другой подгруппе (лечение IFN-a + IFN-y) установлено, что все стимулирующие эффекты, которые обнаружены в общей группе больных, можно отнести за счет действия экзогенного IFN-y. В данной подгруппе по сравнению с показателями до лечения обнаружено также снижение CD3 , CD8 и процента CD4 клеток. Все остальные показатели имели тенденцию к повышению. CD20 в процентном выражении повышался достоверно. Индекс соотношения CD4 /CD8 практически не изменился.

Таким образом, введение человеческого рекомбинантного IFN влияло на фенотип лимфоидных клеток у больных с различными заболеваниями как в сторону повышения, так и понижения отдельных популяций и субпопуляций. Конкретные изменения зависели от состояния иммунной системы до начала лечения и типа вводимого IFN. Оптимальные схемы IFN-терапии необходимо разрабатывать с учетом и под контролем иммунного статуса больных в каждом индивидуальном случае.

РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ЗАТЯЖНЫМИ И РЕЦИДИВИРУЮЩИМИ ФОРМАМИ ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗА

Стебунова Т.К., Калинина Н.М., Тимченко В.Н., Бабаченко И.В., Давыдова Н.И., Смирнов М.Н, Лушнова И.В.

Кафедра инфекционных болезней у детей, Санкт-Петербургская Государственная Педиатрическая Медицинская Академия;

НИЛ клеточного и гуморального иммунитета, Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины МЧС России

Введение. До настоящего времени сохраняется ряд проблем в терапии пациентов, больных псевдотуберкулезом с затяжным и рецидивирующим течением. Все большее внимание исследователей привлекает изучение иммунологических сдвигов в организме ребенка, способствующих хронизации процесса. Это необходимо для рационального подбора имму-нокоррегирующих средств.

Цель работы. Изучение эффективности применения рон-колейкина - рекомбинантного интерлейкина - 2 человека (Россия) в комплексной терапии детей, больных затяжными и рецидивирующими формами псевдотуберкулеза.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 29 детей в возрасте от 2-х до 15 лет. Проводилось иммунологическое (содержание CD3 , CD4 , CD8 , CD16 , CD20 , CD25 , CD95 лимфоцитов в периферической крови методом проточ-

ной цитофлюориметрии, уровень IL2, 1L4, IFNa, IFNy), биохимическое (уровень СРВ, сиаловых кислот, протеинограм-ма) обследования, а также исследовался клинический анализ крови до и после применения ронколейкина.

Ронколейкин вводили внутривенно, два раза, через день, в дозе 250.000 ЕД детям до 5лет, 500.000 ЕД детям до 14 лет, 1 млн. ЕД детям старше 14 лет. Контролем (п-30) были пациенты, получавшие антибактериальную и симптоматическую терапию.

Результаты. У детей, поступающих в период обострения или рецидива заболевания, выявлено увеличение сиаловых кислот и СРВ, гипоальбуминемия, гиперглобулинемия.

В иммунограмме выявлены признаки вторичного Т-клеточ-ного иммунодефицита: снижено содержание CD3 лимфоцитов в 95% случаев, CD4 лимфоцитов в 78,9%, СВ8 лимфоцитов в 89,4%, CD20 лимфоцитов в 73,6% случаев, уровень 1L2 был снижен у 58,6% пациентов. Это явилось основанием для назначения в комплексной терапии псевдотуберкулеза ронколейкина.

Развития побочных эффектов после введения ронколейкина не отмечалось. Только у 2 детей в конце введения было зарегистрировано кратковременное повышение температуры тела на 0,5 градуса при хорошем самочувствии.

В течение первых суток после первой инфузии ронколейкина уменьшалась интенсивность проявления основных синдромов заболевания, по сравнению с контрольной группой значительно сокращалась длительность лихорадочного периода, симптомов общеинфекционной интоксикации, синдрома экзантемы, узловатой эритемы, синдрома гепатомегалии, гастроэнтерита. Существенных различий в длительности синдрома мезаденита не обнаружено в обеих группах.

Повторное иммунологическое обследование проводилось через 10 дней после окончания курса ронколейкина. Отмечалась положительная динамика следующих показателей: числа CD3 клеток в 77,4%, CD4 клеток в 92,8%, CD8 клеток в 81,2% случаев. Причем полная нормализация содержания клеток наблюдалась CD3 в 68,7%, CD4*b71 ,4%, CD8" в 62,5%, CD20’ в71,4%.

В течение 6 месяцев после перенесенного заболевания дети находились на диспансерном наблюдении (проходили клиниколабораторное обследование ежемесячно). Повторных рецидивов заболевания, в отличие от группы контроля, не было выявлено.

Выводы. 1) Выявлены уменьшение длительности клинических симптомов болезни, быстрая нормализация состояния ребенка после терапии ронколейкином, которые в большинстве случаев сопровождались нормализацией показателей иммунитета. 2) Иммунокоррегирующая терапия значительно уменьшала вероятность развития повторных рецидивов и хронизации процесса. 3) Данные исследования показали хорошую переносимость ронколейкина всеми пациентами, отсутствие аллергических реакций на введение препарата. 4) В связи с полученными клинико-лабораторными данными можно рекомендовать применение ронколейкина в комплексной терапии затяжных и рецидивирующих форм псевдотуберкулеза у детей.

РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ МАГНИТОТЕРАПИИ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ИММУНО-ЭНДОКРИННЫХ СДВИГОВ У ДЕТЕЙ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ НА ФОНЕ ТИМОМЕГАЛИИ

Сукало A.B., Прилуцкая В.А., Тарасова Е.Е.*

Государственный мединститут, *НИИ охраны материнства и детства М3 РБ, Минск, Беларусь

Одним из методов неспецифического иммуномодулирующего лечения является воздействие на организм низкочастотным магнитным полем (НЧМП).

Цель работы. Оценка эффективности использования НЧМП в комплексном лечении острых бронхолегочных заболеваний у детей раннего возраста с тимомегалией (ТМ), уточнение возможности коррекции иммуно-гормональных сдвигов с помощью НЧМП.

Материалы и методы. В основную (15 человек) группу вошли пациенты с острыми заболеваниями органов дыхания на фоне ТМ, в комплекс лечения которых была включена маг-нитотерапия (МТ). Процедуры МТ проводили аппаратом “АУМАТ” (НТК ПРИЗ, РБ) путем установления магнитоин-дуктора на область проекции IV-VI грудных позвонков, величина магнитной индукции 30±3 мТл, время воздействия 3-5 минут один раз в день утром, на курс 5-7 процедур. Контрольную группу составили 18 детей с острыми бронхолегочными заболеваниями на фоне ТМ, получавшие традиционную медикаментозную терапию. Обе группы были сопоставимы по возрасту, полу, продолжительности и характеру течения заболевания на момент начала МТ. Оценку эффективности лечения проводили с учетом динамики клинико-лабораторных данных. Иммунный статус оценивали количественными и функциональными методами: Т-лимфоциты (CD3 ) и субпопуляции (CD4 , CD8 ), В-лимфоциты (CD22 ), уровни IgG, IgA и IgM, активность системы комплемента и фагоцитарная активность нейтрофилов. Исследование гормонального статуса включало определение уровней кортизола, трийодтиро-нина, тироксина, тиреотропного гормона.

Результаты и их обсуждение. Включение в схему лечения острых бронхолегочных заболеваний воздействия НЧМП привело к положительному клиническому эффекту. В среднем на 1,5 койко-дня сократились сроки стационарного лечения. Под влиянием МТ достоверно быстрее исчезали физи-кальные изменения в легких, купировался бронхообструктив-ный синдром, предотвращалось развитие респираторной суперинфекции, сокращался расход лекарственных средств. Побочных действий и осложнений от проведения МТ не выявлено.

Сравнительный анализ иммунного статуса показал преимущество комплексного лечения с использованием МТ. У детей основной группы к концу терапии достоверно снижалось исходно повышенное содержание палочкоядерных нейтрофилов (7,5±1,12% и 3,5±0,82%; Р<0,05), что свидетельствовало об уменьшении процесса воспаления. У детей контрольной группы - отмечалась лишь тенденция к их снижению (Р<0,1). Применение НЧМП привело к нормализации исходных изменений содержания субпопуляций Т-лимфоцитов, что не наблюдалось после завершения традиционного комплексного лечения. В тоже время исходно сниженное относительное количество Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3 оставалось без изменения к концу терапии в обеих группах. НЧМП оказывало благоприятное влияние на показатели неспецифической защиты организма: нормализовалась функциональная активность нейтрофилов - поглотительная способность и их переваривающая функции. МТ способствовала более активному включению системы комплемента в процесс противоинфекционной защиты, о чем свидетельствовало достоверное повышение исходно сниженного содержания С4-компонента, факторов В и D, а также общей альтернативной активности сыворотки крови к концу лечения. При обоих методах лечения наблюдалась положительная динамика в содержании исследуемых гормонов, однако уровень кортизола нормализовался только в группе детей с МТ (480±44 нмоль/л; Р<0,01), что свидетельствует об уменьшении процесса воспаления и инфекционно-токсического стресса. Использование МТ способствовало вос-

становлению корреляционных взаимосвязей между показателями системы иммунитета и гормонами адаптации. Комплексное лечение с применением НЧМП оказывало положительное влияние на стабилизацию иммуногормональ-ной системы и способствовало снижению заболеваемости (в 1,5 раза) детей с ТМ в отдаленные сроки (через б месяцев).

Выводы. Использование НЧМП в комплексном лечении детей с ГМ, страдающих острыми заболеваниями органов дыхания, является эффективным методом коррекции имму-но-гормональных сдвигов и может быть включено в схемы терапии этой категории больных.

ИММУНОКОРРИГИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ВИФЕРОНА У НОВОРОЖДЕННЫХ ОТ ВИРУСИФИЦИРОВАННЫХ МАТЕРЕЙ В РАННЕМ ПЕРИОДЕ АДАПТАЦИИ

Сускова B.C., Малиновская В.В.*, Абаева З.Р.*, Емец В.И.,Федорова М.В.**, Антипова И.И.**

Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов М3 РФ, Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, РАМН*, Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии М3 РФ**, Москва, Россия

Среди этиологических факторов перинатальной патологии одно из ведущих мест занимают вирусные инфекции, вызываемые вирусами семейства Herpesviridae, в частности вирусом цитомегалии (ЦМВ) и вирусом простого герпеса (ВПГ). Угроза внутриутробного инфицирования плода у женщин с ЦМВ и ВПГ привела к разработке методов ранней коррекции иммунного дисбаланса у вирусинфицированных беременных Вифероном - единственным препаратом из группы рекомбинантных интерферонов, разрешенным к применению у беременных и новорожденных в качестве иммунокорректора. Выявление иммунокорригирующего эффекта Вифе-рона у новорожденных в раннем периоде адаптации позволило бы иммунологически обосновать целесообразность назначения виферонотерапии в неонатальном периоде для профилактики и лечения герпесвирусной инфекции, что явилось целыо настоящего исследования.

У 56 новорожденных от вирусинфицированных матерей проведено комплексное вирусологическое и иммунологическое обследование, а также определение интерферонового статуса стандартными методами. Иммунологическое обследование включало определение показателей клеточного и гуморального иммунитета, фагоцитарной активности нейтрофи-лов, цитокинового звена. При иммунофенотииировании субпопуляций лимфоцитов методом проточной цитофлюоромет-рии наряду с определением основных маркеров (CD3, CD4, CD8, CD 16, CD20, CD25, CD38, CD71, HLA DR) определяли коэкспрессию фенотипических маркеров (CD4 /CD8 , CD8 / HLA-DR , CD8 /CD 16 ), которые служили тестами углубленной оценки фенотипа лимфоцитов. Преобладание Th 1 или Th2 ответа определяли по продукции IL2,1L4, IFNy методом ИФА ("Цитокин”. “РгоСоп”, Санкт-Петербург).

В результате проведенных исследований у новорожденных от вирусинфицированных матерей при рождении выявлен дефицит Т- и В- систем иммунитета с угнетением фагоцитарной функции нейтрофилов и нарушение продукции 1FN. При этом отмечалось повышение числа ранних предшественников Т- и В-лимфоцитов CD38 - 60,2±8,6%, CD71 - 16.9±7,5%, а также

увеличение числа клеток с фенотипом CD4 /CD8+ в периферическом кровотоке; нарушение иммунорегуляции со снижением CD4 клеток (33,2±3,4% при 41,0± 1,8% в контроле) и снижением числа клеток-продуцентов IL2, определяемых по наличию внутриклеточной продукции IL2 (CD3 IL2 /CD3 кл. -12,0±2,7% при 29,6±5% в контроле), что приводило к недостаточности Thl-иммунного ответа и усугублялось недостаточной продукцией IFNy. Снижение уровня зрелых В лимфоцитов. (CD20 - 3,7±0,4% при 15,0±6,3% в контроле) сопряжено со сниженным уровнем 1L4, IL6. Повышение уровней IgM и IgA в сыворотке крови большинства обследованных новорожденных могло быть связанно с внутриутробным инфицированием, о чем свидетельствовали данные вирусологического обследования (ЦМВ у 57,8%, ВПГ у 62,2%). Сывороточные уровни 1L1 (3 и IL8 были повышены.

Снижение фагоцитарной функции нейтрофилов было обусловлено как общей незрелостью иммунной системы, так и недостаточной выработкой IFNy. При оценке показателей противовирусного иммунитета отмечалось снижение цитоток-сических Т лимфоцитов с фенотипом CD8 , а также клеток с фенотипом CD8 /HLA-DR и CD8 /CD 16 , сопряженных с высоким цитотоксическим потенциалом. Повышенный уровень NK расценивался как активация противовирусного иммунитета при внутриутробном инфицировании.

С целью коррекции выявленных нарушений у всех обследованных новорожденных с первых суток жизни был применен Виферон в дозе 150 ME - 1 свеча 2 раза в сутки в течение 5 дней. При обследовании после курса виферонотерапии отмечалось усиление дифференцировки иммуноком-петентных клеток, восстановление балланса иммунорегуляции по Thl-типу иммунного ответа (> IL2 и IFNy). Нормализация клеточного звена иммунитета приводила к повышению Т-клеточной цитотоксичности и экспрессии HLA-DR, что отражает активацию антигенспецифического противовирусного иммунитета.

Таким образом, полученные нами данные подтверждают иммунокорригирующий эффект Виферона и служат иммунологическим обоснованием целесообразности его применения у новорожденных в раннем периоде адаптации для профилактики и лечения вирусных инфекций.

ВРЕМЕННЫЕ ЭФФЕКТЫ КОРРЕКЦИИ ПОСТРАДИАЦИОННЫХ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ МАКРОФАГОВ КРЫС НИЗКОИНТЕНСИВНЫМ ЛАЗЕРНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ

Тарасова Е.Е., Кузовкова Н.А.*,.Кириллова И.А*

НИИ Охраны материнства и детства М3 РБ,

*НИИ эпидемиологии и микробиологии М3 РБ,

Минск, Беларусь

Введение. В условиях повышения радиационного фона в окружающей среде чрезвычайно важным и актуальным является поиск эффективных средств и методов противолучевой защиты, т.е. изыскание эффективных как радиоиммунопро-текторных, так и корригирующих пострадиационные нарушения иммунитета, систем. В настоящее время на роль таких систем претендует пизкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ), как немедикаментозный фактор, обладающий потен-циирующим действием и влияющий на организм на всех уровнях организации последнег о.

Цель работы. Выясненить иммуномодулирующие эффекты НИЛИ при нарушениях в системе иммунитета, вызван-

ных воздействием малых доз ионизирующего излучения в зависимости от сроков его применения по отношению ко времени воздействия повреждающего фактора.

На крыс стадного разведения однократно воздействовали у-излучением на установке “ИГУР1” (l37Cs, мощность дозы 5,4 сГр/мин, суммарная доза 1 Гр.). На этих же животных в различной временной последовательности многократно чрез-кожно (10 сеансов) воздействовали ИК-излучением длиной волны 822 нм, мощностью 20 мВт в проекции двух точек на животе в течение 4 минут: на животных 1-ой группы до воздействия ионизирующим излучением, на крыс 2-ой группы через 3 дня, а 3-ей группы - через 30 дней после завершения у-облучения. Крысы 4-ой группы подвергались воздействию только у-облучения. В динамике эксперимента была изучена функциональная активность макрофагов бронхоальвеолярного смыва (БАС) крыс в реакции спонтанного и активированного зимозаном НСТ-теста.

Результаты и обсуждение. Под воздействием ионизирующего излучения in vivo на 3-и сутки достоверно снижается общее количество клеток в БАС по сравнению с их содержанием у интактных животных (0,67±0,09 и 1,52±0,12 х 105/в БАС). К концу эксперимента (на 52-е сутки) их количество остается достоверно сниженным.

Показатель спонтанного НСТ-теста на 3-и сутки после у-облучения в 3,5 раза был выше такового у интактных животных, в то время как показатель активированного зимозаном НСТ-теста повышался только в 1,7 раза. В результате этого коэффициент стимуляции снижался в 2,0 раза (3,63±0,42 и 1,83±0,50, Р<0,05). Через месяц наблюдалось некоторое снижение как спонтанного, так и активированного показателей НСТ-теста, хотя их значения и остаются достоверно выше таковых у интактных животных. При этом коэффициент стимуляции достоверно не увеличивался. Эти закономерности сохраняются до конца эксперимента. Этот факт свидетельствует о снижении резервных возможностей макрофагов в ответ на внедрение бактериальной или вирусной инфекции.

Предварительное 10-кратное воздействие НИЛИ на животных 1-ой группы оказывает радиопротекторное действие на метаболическую активность макрофагов БАС. Несмотря на то, что показатели спонтанной и активированной активности макрофагов через месяц после у-облучения достоверно превышают таковые у интактных животных (в 1,6 и 1,4 раза), коэффициент стимуляции достоверно не отличается от контрольного значения (3,63±0,42 и 2,89±0,53).

Многократное воздействие НИЛИ, поведенное сразу после завершения у-облучения к концу эксперимента полностью восстанавливает все нарушения метаболической активности макрофагов БАС у крыс 2-ой группы.

Коррекция отдаленных пострадиационных нарушений функциональной активности макрофагов лазерным излучением не приводит к явно выраженным позитивным результатам. После 10 сеансов НИЛИ у крыс 3-ей группы не выявлено достоверных изменений показателей метаболической активности макрофагов БАС по сравнению с животными 4-ой группы, хотя тенденция к их нормализации наблюдается.

Вывод. НИЛИ с различной степенью выраженности корригируют пострадиационные нарушения функциональной активности макрофагов БАС у животных. Степень выраженности нормализации показателей зависит от глубины их исходных нарушений, вызванных длительностью периода после воздействия у-излучением. Предварительное воздействие НИЛИ на животных, в последствии подвергшихся у-облуче-нию, оказывает определенное радиопротекторное действие на состояние метаболической активности макрофагов.

ЭКСПРЕССИЯ МОЛЕКУЛ АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ В ПРИСУТСТВИИ IL-1ra В КУЛЬТУРАХ МНПК ПРИ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К НПВП

Титова Л.Д., Романова О.В., Симбирцев A.C.

Институт иммунологии Минздрава РФ,

Москва,

Государственный научный центр особо чистых биопрепаратов,

Санкт-Петербург, Россия

Ведущие ученые в области исследования механизмов лекарственной аллергии выявили определяющую роль Т-лим-фоцитов в развитии аллергических реакций на терапевтическую дозу медикамента как при IgE опосредованном ответе в фазе индукции, за счет ThO или Th2 зависимого иммунного механизма. С другой стороны при антителонезависимом, в большей степени задействованы Th 1 лимфоциты, как в фазе индукции, и в эффекторной фазе, хотя Th2 лимфоциты потенциально могут выполнять функции киллеров при определенных иммунных реакциях на лекарства.

При непереносимости нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) патогенез реакций на лекарства до конца не выяснен. На сегодняшний день основная роль отводится продуктам метаболизма арахидоновой кислоты - лей-котриенам и IL-1, которые способствуют блокаде циклоокси-геназ (СОХ1 и СОХ2) и, при определенных условиях, могут инициировать реакцию гиперчувствительности. Однако, в литературе описаны случаи истинных аллергических реакций на НПВП, когда в крови пациентов обнаруживались антитела к аспирину.

Нами проводятся исследования активация лимфоцитов лекарственными веществами в культуре мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК) цитофлуориметрическим методом с использованием моноклональных антител к мембранным молекулам активации лимфоцитов.

Обследовались пациенты с диагнозом лекарственная гиперчувствительность к нестероидным противовоспалительным препаратам (НПВП), а также группа студентов медицинского института и пациенты без лекарственной непереносимости, которые составили контрольные группы. Экспрессия молекул активации лимфоцитов (CD69 и CD25) при добавлении в культуру клеток причинных медикаментов у пациентов с гиперчувствительностью к аспирину и/или анальгину была на уровне показателей ФГА стимуляции. При внесении в культуры клеток пациентов с гиперчувствительностью к НПВП

1 -2 мкг/мл рецепторного антагониста 1L-1 (IL-1 га) отмечалось снижение экспрессии молекул CD69 в 2-3 раза при повышенном ответе на анальгин , аспирин и вольтарен.

Полученные предварительные результаты могут подтверждать участие IL-1 в активации лимфоцитов при гиперчувствительности к НПВП.

ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСА ПЕПТИДНЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ НА ИММУННЫЙ СТАТУС ПАЦИЕНТОВ С ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИЕЙ

Трофимова С.В., Максименко Л.Н.

Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Россия

Немалая роль в патогенезе развития диабетической ретинопатии отводится нарушению иммунного статуса.

Целью настоящей работы явилось изучение влияния пептидных биорегуляторов, выделенных из сетчатки (ретиланамин),

эпифиза (эпнталамин), коры головного мозга (кортексин) на иммунологический статус больших диабетической ретинопатией. Клинические исследования были проведены с участием 46 человек, которым проводилось иммунологическое обследование. С целью оценки содержания иммунокомпетентных клеток (клеточного и гуморального иммунитета) определяли CD3 (Т-клетки), CD4 (Т-хелперы, моноциты), CD8 (цитотоксическиеТ-клет-ки), CD20 (В-клетки), CD56 (ЕК-клетки), CD14 (моноциты), HLA DR (В-клетки, моноциты, активированные Т-клетки), фагоцитарную активность моноцитов (фагоцитарный показатель, фагоцитарный индекс), фагоцитарную активность нейтрофилов (фагоцитарный показатель, фагоцитарный индекс). Проведенное иммунологическое исследование выявило умеренную лимфопе-нию, уменьшение числа лимфоцитов CD4 и CD8 при преобладающем дефиците последних, снижение фагоцитарного показателя и индекса моноцитов, нейтрофилов. Проведенное лечение способствовало нормализации иммунного статуса. Нами отмечено достоверное увеличение количества Т-клеток с фенотипом CD3 с 51,3±0,5% до 65,3±0,1%, индекса CD4 /CD8 до 1,86±0,04 за счёт увеличения CD8 с 16,9±0,8% до 21,3±0,5%, фагоцитарного показателя моноцитов с 43,0±3,7% до 57,5±4,1%, фагоцитарного показателя нейтрофилов с 50,7±3,7% до 61,0±4,1%.

Сопоставляя клинические результаты и данные иммунограммы после курса пептидных биоргуляторов, можно предположить, что повышение фагоцитарной активности моноцитов и нейтрофилов способствовало более быстрому рассасыванию кровоизлияний и экссудаций на глазном дне и, следовательно, повышению зрительных функций.

ИММУНОТРОПНОЕ ДЕЙСТВИЕ ВИЛЬПРАФЕНА НА ФАГОЦИТЫ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГЕНИТАЛЬНОГО ХЛАМИДИОЗА

Тюкавкин В.В., Большаков С.Б., Тюкавкина В.H., Николаева Н.Б.

Научно-медицинский центр "Иммуномед ", Красноярск, Россия

Введение. В настоящее время предпочтение при лечении хламидийной инфекции гениталий отдается антибиотикам из семейства макролидов. Вильпрафен по своим физико-хими-ческим и биологическим свойствам существенно отличается от других макролидов.

Цель и задачи. Принимая во внимание высокую способность макролидов кумулироваться в фагоцитарных клетках, в которых могут находиться Chlamydia trachomatis, представ-

ляется логичным проведение контроля за эффективностью антибиотикотерапии с помощью высокоинформативных методов оценки функциональной активности фагоцитов.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 56 мужчин в возрасте от 20 до 45 лет, страдающих первичным острым монохламидийным уретритом (без простатита). Диагноз формировался на основании клинической картины и данных лабораторных исследований. Пациенты получали Вильпрафен и базисную терапию. Для объективной оценки показателей, характеризующих функциональную активность фагоцитов периферической крови (ФИ,ФЧ и HCT-тест) была сформирована контрольная группа (практически здоровые люди) в количестве 21 человека.

Результаты. До лечения у больных показатели значений ФИ и ФЧ существенно ниже, чем в контрольной группе (Р<0,05). Однако доля НСТ - позитивных нейтрофилов и моноцитов в этой группе пациентов достоверно выше, чем у лиц контрольной группы (табл. 1).

Показатели значений ФИ и ФЧ после окончания терапии увеличились, что достоверно отличается от результатов исследований пациентов до лечения. Уровень функциональной активности (ФИ; ФЧ) нейтрофилов и моноцитов был несколько выше, хотя и приближался к показателям контрольной группы. Удельный вес НСТ - положительных клеток, свидетельствующий о повышении внутриклеточных метаболических процессов окисления в фагоцитах, у пациентов после лечения был достоверно выше, чем у лиц контрольной группы (Р<0,01).

Обсуждение. Можно предположить, что в основе более высокой фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов пациентов, получавших Вильпрафен лежит увеличение доли активных фагоцитов и пролонгирование периода их активности. Сохранение высокого уровня поглотительной способности, выражающейся в количественных показателях фагоцитарного числа и доли НСТ - активных фагоцитов после терапии Вильпрафеном может свидетельствовать о пролонгировании стимулирующего эффекта раздражителя. Одним из следствий такой метаболической активности, проявляющейся в том, что фагоцит постоянно находится в состоянии “респираторного взрыва”, может быть истощение антиоксидант-ных систем, защищающих мембраны от токсического действия активных форм кислорода и разрушение клетки. Как известно, хламидии способны длительное время находиться в фагоцитирующих клетках, сохраняя вирулентность и инвазивность. Вероятно, саморазрушение фагоцитов, обусловленное активацией свободнорадикальных процессов на фоне Вильпрафе-на, может рассматриваться как адаптационный механизм в противоинфекционной защите организма.

ТАБЛИЦА 1. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ В КОНТРОЛЬНОЙ ГРУППЕ И У ПАЦИЕНТОВ С МОНОХЛАМИДИЙНЫМ УРЕТРИТОМ ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ ВИЛЬПРАФЕНОМ.

Группы Фагоцитарный индекс (ФИ) Фагоцитарное число (ФЧ) НСТ-тест (% положительных клеток)

Нейтрофилы Моноциты Нейтрофилы Моноциты

30 мин. 120 мин. 30 мин. 120 мин. 30 мин. 120 мин. 30 мин. 120 мин. Нейтрофилы Моноциты

До лечения После лечения Контроль 83,6+1,8%Д 94,4±3,4% 90,2+2,3% 81,8±2,0%Д 91,3+2,9% 88,2+1,6% 76,2±3,2%Д 89,8+1,6% 87,0±2,9% 65,8+3,0%Д 76,6+2,3%Д 86,0±2,9% 7,6+1,4Д 13,4+1,1 10,8+1,0 6,0±1,0Д 10,5+1,7 9,4+0,9 5,2±0,8Д 9,8+1,0 7,6+1,2% 3,7±0,6Д 7,6+1,4 6,2+1,1 33,8±3,1 %Д 29,6+3,0°/сД 11,6+1,3% 36,3±3,1%Д 31,8+3,6%Ц 12,2± 1,8%

Примечание: Д - различия достоверны (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой.

Выводы. Показано, что Вильпрафен стимулирует функциональную активность фагоцитов, резко повышая их поглотительную и переваривающую функции, что ведет к санации организма от хламидийной инфекции.

ПРЕДПОСЫЛКИ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ КЛАРИТРОМИЦИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА

Урустенова A.C., Рыбкина В.Л.

Дерматологический научно-исследовательский институт,

Алмаата, Казахстан

Исследованиями последних лет установлено, что антибиотик макролидного ряда кларитромицин является ингибитором выработки провоспалительных цитокинов. Поскольку псориаз является заболеванием, сопровождающимся повышенной выработкой провоспалительных цитокинов хелпера-ми 1 типа, для исследования возможностей применения этого препарата была предпринята попытка исследовать его влияние на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов, а также на функциональную активность лимфоцитов больных псориазом in vitro.

Полученные результаты позволяют сделать вывод, что пролиферативная и метаболическая активность кератиноцитов снижались, а степень дифференцировки увеличивалась под действием кларитромицина. Однако, очевидно, что эти эффекты были опосредованным, поскольку в чистых культурах кератиноцитов не проявлялись, а сказывались только в смешанных культурах с Т-лимфоцитами и, в особенности, с хелпера-ми. Механизм влияния кларитромицина на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов, вероятнее всего, связан с подавлением синтеза цитокинов лимфоидными клетками, что подтверждается исследованиями ряда авторов.

Кроме того, в проведенных нами исследованиях установлено, что кларитромицин способствует снижению пролиферативной активности лимфоцитов, снижению экспрессии рецепторов к IL-2 на лимфоцитах, снижению синтеза фактора угнетающего миграцию лейкоцитов у больных псориазом и клинически здоровых людей in vitro.

Поскольку кларитромицин оказывает положительное влияние на основные патогенетические звенья псориаза: снижает синтез цитокинов CD4 -клетками, что способствует нормализации процессов пролиферации и дифференцировки и затуханию воспалительных явлений, этот препарат может быть включен в схему лечения псориаза.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ОКТАГАМА У БОЛЬНЫХ С ИММУНОДЕФИЦИТАМИ

Хакимова Р.Ф., Скороходкина О.В.

Казанский Государственный медицинский университет,

Казань, Россия

Целью исследования явилось изучение эффективности внутривенного иммуноглобулинового препарата IV поколения Октагам в терапии больных с иммунологической недостаточностью. Под наблюдением находилось две группы больных в возрасте от 12 до 48 лет: I группа (4 пациента) с первичным иммунодефицитом (агаммаглобулинемия, селективный дефицит IgG); II группа (3 пациента) с вторичной иммунологической недостаточностью, развившейся на фоне тяжелой гнойной инфекции. Препарат вводился в дозе 250-400 мг/кг в

сутки внутривенно в течение 3-5 дней. Двум больным ввиду тяжести состояния проводился повторный курс препарата через 3 недели. Клинико-иммунологический контроль осуществлялся с использованием общепринятых методов оценки иммунного статуса. Анализ полученных результатов свидетельствует о высокой эффективности препарата, что подтверждалось как клинически, так и лабораторно. У больных с первичным иммунодефицитом отмечалась длительная ремиссия очагов инфекции. Титр 1§0 корригировался по окончании курса лечения до нормальных величин и составлял в среднем 9,3 мг/мл. Достигнутый уровень сохранялся в течение 2,5 месяцев. У больных со вторичной иммунологической недостаточностью введение препарата приводило к положительной динамике клинической картины заболевания: снижению температуры, уменьшению симптомов интоксикации, улучшению показателей периферической крови, уменьшению длительности курса антибиотикотерапии. Кроме того, следует отметить, что Октагам оказался эффективен в случае резистентности бактериальной флоры ко многим антибактериальным препаратам. При проведении инфузии Октагама побочных реакций не зарегистрировано ни в одном случае. Препарат выпускается готовым к применению, не требует жестких условий хранения. Таким образом, Октагам является высокоэффективным и безопасным внутривенным иммуноглобулиновым препаратом, который может быть использован как для профилактики гнойных осложнений, так и с лечебной целью.

ВЛИЯНИЕ БЕТАЛЕЙКИНА НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТУБЕРКУЛЁЗНОГО УВЕИТА

Хоккаиен В.М., Соловьёва М.В., Белова О Ю, Ионова О.Г., Варюшииа Е .А.

Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии М3 РФ, ГНЦ ГосНИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт- Петербург

Туберкулез глаз (ТГ) как проявление туберкулезной инфекции может вызывать определенные сдвиги в общей иммунной системе организма. В связи с этим, поиск и внедрение новых иммунокоррегирующих препаратов для применения в комплексном лечении больных ТГ является актуальным.

Целыо исследования явилось изучение эффективности применения препарата интерлейкина-1 - Беталейкина в комплексном лечении туберкулезного хориоретинита у экспериментальных животных при различных способах введения.

Проведены опыты на 19 кроликах породы шиншилла (29 глаз) с использованием модели туберкулезного хориоретинита (Песчанская И.Н.,1972). Все животные были разделены на группы в зависимости от способа введения Беталейкина: 1 группа - Беталейкин парабульбарно на фоне антибактериальной терапии (АБТ), 2 группа - Беталейкин парабульбарно и внутримышечно на фоне АБТ, 3 группа - Беталейкин парабульбарно и внутримышечно без АБТ, 4 группа - Беталейкин внутримышечно на фоне АБТ. Срок лечения - 5 дней. Использовались стандартные клинические методы оценки: поведение, аппетит, изменения в весе, проводилось офтальмологическое обследование (Хокканен В.М.,1990).

Во всех группах при использовании Беталейкина в комплексе с АБТ отмечалось уменьшение промененции очага и снижение экссудативных явлений в конце наблюдений. Причем, наилучшие результаты отмечались при сочетании местного и общего введения препарата. В группе, где лечение проводилось только беталейкином (общее и местное) без применения АБТ, в течении всего наблюдения наблюдалось нарастание признаков воспаления.

На основании полученных экспериментальных данных установлено, что введение Беталейкина только в комплексе с АБТ дает возможность приостановить увеличение туберкулезных очагов в размере, уменьшить их промененцию в среднем в 1,5-

2 раза, снизить экссудативные явления в 2 раза. Устранение или уменьшение основных проявлений туберкулезного увеита пре дупреждает распространение воспалительного процесса на окружающие ткани и возникновение осложнений.

ИММУНОКОРРИГИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ МЕДИЦИНСКИХ ПРЕПАРАТОВ гЫЯМ-а И г^-р В ТЕРАПИИ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА

Чекнёв С.Б.

НИИ эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН,

Москва, Россия

В последние годы в иммунокорригирующей терапии рассеянного склероза (РС) нашли применение препараты гЫРЫ-Р, тормозящие прогрессирование заболевания, снижающие кумуляцию патологических изменений в головном мозге и оказывающие противовоспалительное действие. По мнению ряда специалистов, они призваны заменить традиционно используемые в клинике РС препараты 1БЫ-а. Последние тоже снижают частоту обострений патологического процесса, ослабляют проявления неврологического дефицита, способствуют стабилизации состояния больных и обусловливают в ходе иммунотерапии РС положительную динамику некоторых иммунологических показателей, но оказываются эффективными лишь у части обследованных. При этом механизм действия обеих групп препаратов связывают с ингибированием выработки цитокинов, играющих пропатогенную роль в развитии демиелинизации при РС, в первую очередь - 1РЫу и ТОТ-сс.

Сотрудниками отдела интерферонов НИИ эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи совместно со специалистами кафедры неврологии и нейрохирургии с курсом лабораторной и функциональной диагностики Российского государственного медицинского университета проведено длительное исследование состояния системы 1РИ у больных РС на фоне иммунотерапии препаратами гЬЮТ-Р и гЬШР-а. Ежедекадное обследование включало тестирование выработки клетками крови пациентов 1Г~Ы-а и 1ГМ-у, а также осуществляемую с использованием прайминга продукции собственного оценку клеточной отвечаемостн на 1БЫ-Р и 1ПМ-а в ходе применения соответствующих препаратов.

Обобщая полученные результаты, следует отметить, что клиническая эффективность препаратов в выборке больных, ответивших положительной неврологической динамикой на их применение, оказалась сопоставимой: тяжесть заболевания снижалась на 1 балл по шкале ЕОЗЗ. На фоне стабилизации или улучшения под влиянием лечения как гЫ№-Р, так и гЬШР-ОС клинического состояния пациентов наблюдали повышение исходно сниженных показателей выработки 1ПМ-а и ШМ-1/ пх клетками крови. Выраженность указанных сдвигов в ходе гИШБ-Р-терапии превышала таковую в динамике применения гЬШР-а. Однако, отвсчаемость клеток крови на используемый 1ГЫ снижалась у больных, получавших гЫЫР-Р, и возрастала у пациентов в ходе лечения гЬШР-а.

Представленные материалы свидетельствуют, что общность механизмов патогенетического действия гЫЫР-Р и гЬШР -а определяет сходство их клинико-иммунологических эффектов в условиях демиелинизирующего процесса. Они также демонстрируют возможность непрерывной курсовой гЫЫР-а-

терапии, в то время как динамика клеточной отвечаемое™ на 1РЫ в ходе лечения гЬШР-Р характеризуется наличием периодов гипореактивности.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ДОКАЗАТЕЛЬСТВА ИММУНОПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЛЕЙКИНФЕРОНА У ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА

Шабашова Н.В., Фролова Е.В., Бобровская М.В., Учеваткина А.Е.

Научно-исследовательский институт медицинской микологии им. П.Н.Кашкина Медицинской Академии Последипломного образования, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Изменения иммунореактивности у лиц пожилого возраста в литературных источниках носят термин “иммунного старения” или возрастного иммунодефицита. Именно он является патогенетической основой частых простудных, острых и хронических воспалительных и онкологических заболеваний, а также аллергии и аутоиммунных процессов.

Цель и задачи. Целью нашей работы явилось изучение особенностей иммунного и интерферонового статуса у лиц пожилого возраста и определение эффективности Лейкинфе-рона как средства их иммунореабилитации.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находятся 25 человек в возрасте от 50 до 74 лет (в среднем 62,3 + 11,6 лет). Все они дважды в год в осенний и весенний периоды получали по 5 инъекций лейкинферона (ЛФ) внутримышечно через 48 часов. До и после курса препарата проводилось иммунологическое обследование. Полученные данные сопоставляли с динамикой заболеваемости обследованных лиц после первого введения ЛФ в течение зимнего периода: регистрировалась частота ОРВИ и гриппа, их течение, обострение хронических бронхитов и пневмоний, общее самочувствие и работоспособность. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови изучали двойным иммунофлюоресцентным окрашиванием с моноклональными антителами (НПО “Мед-БиоСпектр”). Функциональную активность нейтрофилов учитывали в НСТ-тесте, естественных киллеров (ЕК) - по цито-токсическому действию на клетки-мишени К-562. Интерферо-новый статус оценивали по задержке цитопатического действия вируса энцефаломиокардита мышей на культуру клеток Ь-41. Результаты исследований обработаны статистически по методу Стъюдента.

Результаты. Все обследованные были разделены на две группы в зависимости от динамики иммунологических показателей по результатам двух курсов иммунопрофилактики. В

1 группу вошли лица, у которых в третий раз до введения ЛФ была установлена положительная динамика (п=18), а во II группу (п=7) те, у которых аналогичной динамики не отмечалось. Оценка исходных показателей выявила, что во II группе по сравнению с I группой абсолютное содержание Т-хелпе-ров было на нижней границе нормы (0,680±0,230 против 0,840±0,161). Достоверно ниже по сравнению с нормативными показателями была исходная способность клеток к продукции 1Р1М-СХ и -у, причем во II группе уровень 1Р1Ч-у был достоверно ниже, чем в I (64,0±16,ОМЕ/мл против 160,6±32,6 МЕ/мл). Также ниже была функциональная активность ЕК и во II группе - функциональная активность нейтрофилов. Сравнение иммунных показателей после двух курсов иммунопрофилактики с исходными в I группе показало достоверное увеличение продукции 1РЫ-а и -у, причем полученные цифры достигали нормативных показателей, повышалась функцио-

нальная активность нейтрофилов. Во II группе способность клеток к выработке интерферонов не достигала нормы, причем эти показатели были достоверно ниже по сравнению с I группой. Во II группе обнаружено только усиление спонтанной активности нейтрофилов. Клиническое наблюдение за больными выявило, что больные I группы реже болели ОРВИ и гриппом (в среднем 3,1 раза в год) по сравнению со II группой (4,4 раза в год) в зимний период до профилактического введения ЛФ. После одного курса ЛФ установлено существенное снижение заболеваемости в I группе - до 0,7 раз в год, не было обострений герпетической инфекции, которая наблюдалась ранее у 23% процентов обследованных, хронического бронхита и пневмоний, отмечавшихся ранее у 15%, коньюк-тивита, имевшегося ранее у 7,5%. В 75% случаев зарегистрировано улучшение самочувствия и качества жизни. Во II группе также выявлено снижение заболеваемости, только в меньшей степени по сравнению с I группой (2,4 раза в год) и в 60% улучшение самочувствия и работоспособности, однако три человека перенесли грипп, но в более легкой форме и с менее выраженной интоксикацией по сравнению с предыдущим зимним сезоном.

Заключение: Наиболее выраженные эффекты от введения ЛФ наблюдаются у лиц, ранее реже болевших ОРВИ, что свидетельствует о необходимости дифференцированного подхода и проведения иммунологического мониторинга для установления длительности профилактики ЛФ.

ГЕМОПЕРФУЗИЯ НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА

Эйсмонт Ю.А., Буркова Н.В., Янковский О.Ю., Кузнецов С.И.

Медицинская академия последипломного образования,

Санкт-Петербург, Россия

Церулоплазмин (ЦП) медьсодержащий белок, обнаруженный в а, - глобулиновой фракции плазмы крови. ЦП является гликопротеином с единственной полипептидной цепью, с молекулярной массой 132 кДа, содержит 6 атомов меди. Церулоплазмин наряду с альбумином можно рассматривать как транспортный белок атомов меди. Кроме того, благодаря его Ре-оксидазной активности он рассматривается как основной фактор поддержания редокс-уровня внеклеточного железа (Ре^/Те2") и ключевой фактор утилизации организмом железа, поступающего с пищей. Так же ЦП можно рассматривать как регулятор концентрации биогенных аминов эпинефрина и серотонина и один из многих факторов антиоксидантной защиты организма.

Цель исследования состояла в проверке возможности использования ЦП в качестве антиоксиданта при гемоперфузии.

На морских свинках массой тела 300-350 г., под нембута-ловым наркозом (30-40 мг/кг массы тела) после гепариниза-ции к системе кровообращения подключали экстракорпоральный контур с сорбентом (агароза 4Б) по схеме артерия>вена. Гемоперфузию осуществляли со скоростью 15 мл/час. Время сорбции - 60 мин. На протяжении всей процедуры сорбции в кровоток вводили ЦП (300 мг/кг). Кровь для исследований забирали до начала гемоперфузии, на 30-й и 60-й минутах сорбции, а также через 1 и 2 ч после окончания процедуры. Забор проб проводили до прохождения крови через сорбент и сразу после колонки с сорбентом. В пробах подсчитывали общее количество лейкоцитов и процент нейтрофильных клеток, а также люминолзависимую хемилюминисценцию (ХЛ).

Контролем служила группа животных, которым проводили гемосорбцию без введения ЦП в кровоток.

В проведенных ранее исследованиях было показано, что по сравнению с другими сорбентами агароза 4Б является наиболее реактогенным препаратом по способности генерировать активные формы кислорода (АФК). Поэтому агароза была выбрана в качестве гемоконтактного препарата для оценки эффективности применения ЦП в качестве антиоксидантного средства. При гемоперфузии через агарозу уровень спонтанной ХЛ возрастали в 5 - 7 раз в общем кровотоке и 18 - 20 раз в пробах крови, взятых сразу после колонки. Индуцированная ХЛ незначительно отличалась от спонтанной. Через час после гемосорбции наблюдали снижение спонтанной и индуцированной ХЛ до уровня, который не превышал исходные значения до начала процедуры. На фоне церулоплазмина, который вводили сразу после колонки на всем протяжении гемоперфузии, получено существенное снижение показателей ХЛ. Через 30 минут после начала гемосорбции спонтанная и индуцированная ХЛ в общем кровотоке не изменилась, зато достоверно снизилась ХЛ а пробах после колонки относительно аналогичных показателей после гемоперфузии через агарозу 4Б. На 60 минуте процедуры спонтанная и индуцированная ХЛ в общем кровотоке уменьшилась в 2 раза по сравнению с 30 минутными пробами, но в 2,5 раза превышала исходный уровень. Показатели ХЛ в пробах после колонки не изменились и также оставались достоверно ниже аналогичных проб полученных после гемоперфузии через агарозу 4Б.

Таким образом, подтверждены антиоксидантные свойства церулоплазмина. При гиперпродукции АФК, которая возникает в результате гемоконтактной процедуры с некоторыми сорбентами, в качестве ингибитора АФК может быть использован ЦП, обеспечивающий существенное снижение ХЛ лейкоцитов крови при его постоянной инфузии во время гемо-сорбционной процедуры.

О ВЛИЯНИИ ПЕПТИДОВ Т-КЛЕТОЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА ВОСПАЛЕНИЕ

Юшков В.В., Юшкова Т.А.

Фармацевтическая государственная академия,

Пермь, Россия

Введение. Исследования последних лет показали, что пептиды Т-клеточного происхождения являются перспективными фармакологическими регуляторами вторичных иммуноде-фицитных состояний (Мац А.Н. с соавт.,1998; Юшкова Т.А., Юшков В.В.,1998). В настоящее время в клиническую практику внедрен один препарат - аффинолейкин, показанием для его применения является патология глаз, в генезе которой ведущую роль играет воспаление.

Цель. Исследовать влияние пептидов Т-клеточного происхождения на воспаление.

Задачи. Изучить характер и направленность влияния пептидов Т-клеточного происхождения с лабораторным шифром ТФ-1, ТФ-2, ТФ-3, ТФ-4 на экссудативную фазу каррагенинового воспаления, оценить их взаимодействие с медиаторами воспалительной реакции, исследовать влияние изучаемых пептидов на иммунное воспаление - адъювантный артрит.

Материалы и методы. Опыты проведены на мышах и крысах. Выявление противовоспалительного эффекта у пептидов осуществлено на модели каррагенинового воспаления. Анализ механизма противовоспалительной активности осу-

ТАБЛИЦА. ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ Т-КЛЕГОЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА КАРРАГЕНИНОВОЕ ВОСПАЛЕНИЕ

Пептиды % торможения воспаления Дозы, мг/кг

2,0 0,2 0,02 0,002

ТФ-1 68,5*** 52,1*** 29,2*** 31,0***

ТФ-2 53,3*** 51,8*** 36,6*** 45,0***

ТФ-3 50,1*** 49,3*** 44,2*** 48,9***

ТФ-4 36,7*** 41,8*** 40,5*** 24,2*

10,0 1,0

Ортофен 50,5*** 25,9*

Примечание: *** - Р < 0,001; * - Р < 0,05

ществлен на моделях гиетаминового и серотонинового воспаления. Препараты применяли внутрибрюшинно за I час до моделирования экссудативной воспалительной реакции в дозах: 0,002; 0,02; 0,2 и 2,0 мг/кг. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество изотонического раствора хлорида натрия. Адъювантный артрит моделировали субплан-тарным введением 0,1 мл 5% взвеси БЦЖ. Пептиды с лечебной целью вводили внутрибрюшинно в дозе 2 или 0,002 мг/кг в течение 7 дней на пике развившегося воспалительного процесса.

Основные результаты. Установлено, что пептиды с лабораторным шифром ТФ-1, ТФ-2, ТФ-3 и ТФ-4 оказали противовоспалительное действие. Оно проявилось торможением каррагенинового отека, о чем свидетельствует уменьшение прироста объема воспаленных лап (см. табл.). По выраженности противовоспалительного эффекта пептиды Т-клеточного присхождения превосходили препарат - эталон (ортофен).

При анализе механизма противовоспалительного действия пептидов Т-клеточного происхождения установлено, что он, возможно, связан с блокадой медиаторов воспаления. Об этом свидетельствуют данные изучения влияния пептидов (ТФ-2, ТФ-3) на серотониновос воспаление. Процент торможения воспаления, вызванного серотонином, препаратом ТФ-2 был, соответственно, равен 44,2***(0,002 мг/кг) и 58,8***(2,0 мг/ кг). Сравнительный анализ показал, что ТФ-2 обладает большей, чем ТФ-3, антнееротониновой активностью. Изучение влияния ТФ-2 на гистаминовое воспаление показало, что указанный пептид во всех испытанных дозах препятствовал развитию воспалительного отека, вызванного гистамином. Установлено, что пептиды Т-клеточного происхождения (на примере ТФ-2) способны изменять течения иммунного воспаления. Это проявилось уменьшением количества пораженных суставов лап и хвоста, достоверным торможением воспалительного отека, нормализацией массы тимуса, восстановлением количества Т- и В-лимфоцитов, устранением депрессии фагоцитоза.

Заключение. Проведенные исследования показали, что пептидам Т-клеточного происхождения присуще самостоятельное противовоспалительное действие, механизм которого включает антагонизм с медиаторами воспаления - серотонином и гистамином и устранение дисбаланса иммунной системы. Необходимо углубленное изучение противовоспалительных свойств данного класса пептидов, что позволит расширить представления об иммунологической регуляции воспаления.

СОСТОЯНИЕ КЛЕТОК МАКРОФАГАЛЬНО-ФАГОЦИ-ТАРНОГО ЗВЕНА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГНОЙНЫМ РИНОСИНУСИТОМ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ЛЕЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫМ IL-1ß (БЕТАПЕЙКИНОМ)

Азнабаева Л.Ф., Арефьева H.A.*, Кильсенбаева Ф.А., Симбирцев A.C.**, Шарипов P.A.

Республиканская клиническая больница им. Г.Г.Куватова, г. Уфа,

*Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа,

**ГосНИИ особо чистых биопрепаратов, г. Санкт-Петербург, Россия

Одним из факторов, способствующих развитию хронических воспалительных процессов в слизистой оболочке носа, выступает функциональная несостоятельность клеток макрофагально-фагоцитарного звена, которая чаще всего является интегральным показателем нарушения функционирования иммунной системы в целом, в том числе и на местном уровне. В основе деятельности иммунной системы лежит межклеточная кооперация, регулируемая цитокинами. К важнейшим из них относится интерлейкин-1 (IL-1), действие которого направлено прежде всего на активацию клеток в области внедрения патогенов.

Цель работы: оценить влияние рекомбинантного IL-1 ß (беталейкина) на состояние клеток макрофагально-фагоцитарного ряда у больных хроническим гнойным риносину-ситом (ХГРС) и течение заболевания при различных способах введения препарата.

Задача исследования: изучить функциональную активность клеток макрофагально-фагоцитарного ряда, полученных из сосудистого русла у практически здоровых лиц (ПЗЛ) и больных ХГРС и из очага воспаления больных до и после лечения беталейкином.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 54 ПЗЛ и 55 больных ХГРС, из них 15 человек получали традиционные методы терапии с использованием антибиотиков,

20 пациентам ежедневно вводили беталейкин непосредственно в воспаленную пазуху в концентрации 20 нг/мл в количестве 5 мл, 20 больным беталейкин вводили по схеме: в первый день - внутривенно, разведенным в 500 мл физ. раствора из расчета 5 нг/кг веса больного, в последующие дни -местно в пазуху. Иммунологические исследования включали в себя изучение в динамике адгезивной (прилипание

к стеклу), фагоцитарной (с частицами латекса) и метаболической активности (НСТ-тест) моноцитов и нейтрофилов, выделенных из крови и промывной жидкости воспаленной пазухи. Результаты лечения оценивались по четырехбальной системе: отличный, хороший, удовлетворительный и неудовлетворительный.

Результаты исследования. Исходные показатели состояния клеток макрофагально-фагоцитарного звена, полученных из сосудистого русла у больных ХГРС, в сравнении с данными практически здоровых лиц свидетельствовали о тенденции к повышению у них способности моноцитов к фагоцитированию и перевариванию на фоне снижения функциональных свойств у нейтрофилов (фагоцитарной, р>0,05 и метаболической, р<0,01).

При традиционных методах терапии функциональные показатели моноцитов и нейтрофилов в динамике либо не менялись, либо имели тенденцию к снижению. Клинически: отличный результат лечения не был выставлен ни одному пациенту, хороший - наблюдался у 5 больных (33,3%), удовлетворительный - у 7 (46,7%), неудовлетворительный-у 3 (20%).

При лечении больных ХГРС путем введения беталейки-на непосредственно в пораженную пазуху на 2-3 сутки отмечалась активация функциональных свойств нейтрофилов в очаге воспаления (р<0,01), показатели которых после лечения снижались, оставаясь на более высоком уровне, чем до лечения (р>0,05). Исследование клеток, полученных из сосудистого русла, показало активацию моноцитов и отсут-

ствие реакции нейтрофилов на проведенное лечение. Клинически на лечение ответили положительной динамикой все больные: с отличным результатом было 6 человек (30%), с хорошим - 9 (45 %), с удовлетворительным - 5 (25%).

При лечении больных ХГРС сочетанным путем введения беталейкина (однократное введение внутривенно и в последующие дни - непосредственно в пораженную пазуху) на 2-3 сутки отмечалось повышение функциональных показателей нейтрофилов как в очаге воспаления (р<0,01), таки в сосудистом русле (р<0,05), которые после лечения возвращались к исходному уровню. Показатели состояния моноцитов имели тенденцию к снижению. Клинически 19 больных из 20 ответили на лечение положительной клинической динамикой: отличный результат лечения наблюдался у 9 человек (45%), хороший - у 7 (35 %), удовлетворительный - у

3 (15%). У одного больного не было реакции на проведенное лечение.

Таким образом, применение рекомбинантного 1Г-1(3 (беталейкина) для лечения больных ХГРС способствовало повышению эффективности лечения заболевания через активацию исходно низких функциональных свойств нейтрофилов. Сочетанное введение беталейкина сопровождалось активацией нейтрофилов, расположенных не только в очаге воспаления, но и в сосудистом русле, снижая при этом функциональную напряженность моноцитов. Наиболее высокие клинические показатели эффективности результата лечения больных ХГРС отмечались при сочетанном способе введения беталейкина.