Совершенствование лиофилизации коллекционных штаммов патогенных бактерий Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

2012, Т. 2, № 1-2

Современное лабораторное обеспечение.

формирующих биопленку на чашке, значительно превышают ОП лактобацилл на стекле. Колебания оптической плотности лактобацилл на чашке составляют от 0,037 до 0,449, на стекле — от 0 до 0,076.

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ЛИОФИЛИЗАЦИИ КОЛЛЕКЦИОННЫХ ШТАММОВ ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ

H.С. Червякова, Т.В. Валова, А.В. Осин

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов

Одной из задач коллекционных центров является совершенствование методов консервации культур микроорганизмов с сохранением их первоначальных свойств. К одному из таких методов относится лиофилизация, технология применения которой устарела, и требует внедрения новых аппаратных комплексов, способных упростить и автоматизировать данный процесс.

В качестве объекта исследования выбрано восемь тест-штаммов видов: Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Shigella flexneri, S. sonnei, Escherichia coli. Определена оптимальная программа сублимации на камерной сушке Martin Christ Epsilon 2—6D, при использовании которой полный цикл высушивания препарата осуществляется за 7 часов в полностью автоматическом режиме. Проведено изучение выживаемости лиофилизированных культур и оценка времени их хранения. Установлено, что во всех случаях значительная часть клеток микроорганизмов сохраняется живыми. Показатель выживаемости клеток составил от 75 до 50%, что соответствует средним значениям, характерным для каждого из использованных видов бактерий, при их лиофи-лизации. Для определения возможных сроков хранения полученных препаратов микроорганизмов при температуре 4°C использовали ускоренный тест прогнозирования выживаемости лиофилизирован-ных культур. Показано, что выживаемость сублимированных клеток резко падает с увеличением температуры их хранения. Обработка экспериментальных данных позволила определить динамику выживаемости высушенных клеток от времени хранения при разных температурах. Полученные сведения были однотипны, что свидетельствует о наличии единой закономерности, которой подчиняется отмирание клеток лиофилизированных штаммов. Данные о падении жизнеспособности высушенных бактерий при повышенных температурах позволили оценить время 50% снижения количества жизнеспособных бактерий в высушенных образцах (t50). Установлено, что t50 для изучаемых штаммов шигелл составляет

I,5 года, кишечной палочки — 2,2 года, E. fecalis — 3,4 года, а золотистого стафилококка — 9,5 лет.

Таким образом, нами разработан методический подходлиофилизацииколлекционныхтест-штаммов патогенных бактерий III-IV группы патогенности с помощью камерной сушки Martin Christ Epsilon

2—6D. Определены высокая жизнеспособность клеток в полученных лиофилизированных препаратах ПБА и прогнозируемый срок хранения — не менее

3-х лет в зависимости от видовой принадлежности. Все вышеизложенное указывает на высокую эффективность предлагаемого подхода к совершенствованию лиофилизации коллекционных штаммов патогенных бактерий и на перспективность его внедрения в работу коллекционных центров.

К ВОПРОСУ О ЗНАЧЕНИИ МОНИТОРИНГА ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ДЕТСКИХ ИНФЕКЦИОННЫХ СТАЦИОНАРАХ

Л.В. Черкасова, Г.А. Петрушанская, А.Н. Карташева, Р.А. Бурханов

Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве» в САО города Москвы, Москва

Значение мониторинга цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) определяется широким распространением и тяжестью клинической картины этого инфекционного заболевания. У детей, особенно в раннем возрасте, ЦМВИ может протекать с полиорганным поражением и сопровождаться симптомами пневмонии, гепатита, менингита, что затрудняет постановку диагноза и оказание своевременной этиотропной терапии. Кроме того ЦМВИ осложняет течение основного заболевания. Все это обуславливает целесообразность мониторинга ЦМВИ при пребывании пациента в стационаре. Чаще всего это сводится к определению антител в иммуноферментном анализе (ИФА). Вместе с тем, информацию о наличии или отсутствии антител необходимо дополнить индикацией самого вируса, а по возможности и показателями уровня его репликации в организме. Нами с помощью наборов производства фирмы «ИзоГен» исследовались мазки из зева на предмет обнаружения ДНК цито-мегаловируса у 47 детей (от 1,5 до 5лет) с диагнозом бронхпневмония в отделении раннего возраста детской инфекционной больницы САО г.Москвы. У 16 пациентов (34%)обнаружена ДНК цитомегаловиру-са при поступлении в стационар и у 13 из них после проведения курса лечения, что свидетельствует о стойкой циркуляции вируса. Известно, что ци-томегаловирус способен реплицироваться в клетках эпителия слюнных желез. Это обстоятельство обуславливает наибольшую частоту обнаружения цитомегаловируса в слюне по сравнению с другими биологическими пробами.

Нам представляется, что забор мазков из зева и слизистой полости рта, являясь неинвазивной процедурой, способствует более широкому применению молекулярно-генетических исследований для оценки персистенции цитомегаловируса в организме таких пациентов.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИСЕПТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИКРОБИОТЫ ЗУБНОЙ БЛЯШКИ У ДЕТЕЙ С ЗУБОЧЕЛЮСТНЫМИ АНОМАЛИЯМИ

В.А. Чесноков1, М.Г. Чеснокова1, В.Г. Сунцов1, А.Ю. Миронов2

1ГБОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России», г. Омск; 2ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Росздрава, Москва

В эксперименте проводили оценку действия антисептиков (мирамистина 0,01%, хлоргексидина 0,05%, хлоргексидина 0,1%) по отношению к тестируемым микроорганизмам, выделенным от детей находившихся на ортодонтическом лечении. Изучено 48 культур грибов рода Candida, идентифицированных до вида C. albicans, а также 63 культуры сопутствующих бактериальных ассоциантов. Определение чувствительности бактерий к антисептикам осущест-